近年来，我国畜牧业正向标准化、规模化发展，反刍动物舍饲、半舍饲的集约型饲养模式逐步取代传统的放牧模式[1]。但优质粗饲料存在资源短缺、成本高等缺点[2-3]。因此，多渠道开发饲料资源对畜牧业发展具有重要意义[4]。发酵型全混合日粮（FTMR）融合了青贮技术与TMR技术，能够有效地保存TMR中的营养成分，扩大饲料来源，弥补冬季饲草短缺问题[5-6]。因此，推广FTMR技术已成为畜牧业的发展方向。紫花苜蓿（Medicago. sativa L.）的营养价值高，但紫花苜蓿缓冲值及含水量高、含糖量低、不易发酵。燕麦（Avena sativa L.）含糖量高、适口性好、消化率高[7-8]。因此，将紫花苜蓿和燕麦混合制作FTMR有利于提高日粮的饲用价值。本研究将紫花苜蓿、燕麦、玉米秸秆、天然牧草、精料混合制备FTMR，旨在为促进我国畜牧业的可持续发展提供参考。1材料与方法1.1试验材料苜蓿、燕麦、玉米秸秆、精料（玉米、麸皮、玉米白皮、磷酸氢钙、食盐、苏打）由内蒙古超越饲料有限公司提供。天然牧草于2019年8月15日在内蒙古赤峰市巴林左旗查干哈达苏木试验区收获，天然牧草主要由针茅（Ltipa capillata）、羊草（Leymu chinensis）等组成。粗饲料营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.016.T001表1粗饲料营养水平项目粗蛋白质/%DM干物质/%FW中性洗涤纤维/%DM酸性洗涤纤维/%DM苜蓿干草13.2391.9249.7032.23燕麦干草13.4391.1264.2339.04玉米秸秆3.8490.2974.4042.84天然牧草9.3190.2566.4835.21注：FW为鲜重，DM为干重；下表同。1.2试验设计试验采用完全随机设计，共设5组，FTMR1组、FTMR2组、FTMR3组、FTMR4组、FTMR5组的苜蓿∶燕麦∶玉米秸秆∶天然牧草∶精料的比例分别为29∶35∶7∶4∶25、30∶30∶10∶4∶26、34∶29∶7∶4∶26、35∶26∶9∶4∶26、39∶25∶6∶4∶26。FTMR组成及营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.016.T002表2FTMR组成及营养水平（干物质基础）项目FTMR1组FTMR2组FTMR3组FTMR4组FTMR5组原料组成/%苜蓿干草29.030.034.035.039.0燕麦干草35.030.029.026.025.0天然牧草7.010.07.09.06.0玉米秸秆4.04.04.04.04.0麸皮6.06.06.06.06.0玉米白皮3.04.04.04.04.0玉米13.013.013.013.013.0磷酸氢钙1.31.31.31.31.3食盐0.20.20.20.20.2小苏打0.50.50.50.50.5预混料1.01.01.01.01.0合计100.0100.0100.0100.0100.0营养水平消化能/(MJ/kg)12.8012.5912.6012.4612.48干物质/%50.7850.8550.7351.3650.92粗蛋白/%12.2612.2211.9411.3011.75中性洗涤纤维/%50.1352.8550.7453.7452.38酸性洗涤纤维/%26.4428.3327.8730.2332.48可溶性碳水化合物/%4.894.154.384.744.31注：1.预混料购自内蒙古超越饲料有限公司。2.营养水平均为实测值。1.3FTMR制备将紫花苜蓿、燕麦、玉米秸秆、天然牧草切至1~2 cm，与精料混匀，配制含水量为35%的TMR，调整水分含量至50%。装入青贮袋（28 cm×48 cm）中，每袋约500 g，重复4袋，真空密封贮藏，常温发酵60 d。1.4测定指标及方法1.4.1营养成分将发酵前FTMR原料、发酵60 d后FTMR均放入档案袋内，105 ℃杀青15 min，65 ℃烘干至恒重，采用烘干恒重法[9]测定干物质（DM）含量。将烘干后样品粉碎过40目筛，装入自封袋，采用凯氏定氮法[10]测定粗蛋白质（CP）含量，采用Van Soest等[11]方法测定酸性洗涤纤维（ADF）、中性洗涤纤维（NDF）含量，采用蒽酮-硫酸比色法[12]测定可溶性碳水化合物（WSC）含量。1.4.2发酵品质青贮60 d后取出全部FTMR，将同一组FTMR混匀，称取20 g样品，加入90 mL蒸馏水，放入15 cm×10 cm的真空拍打袋中，使用匀质仪拍打3 min（10 次/min），过滤，提取FTMR浸提液，置于-20 ℃冰箱保藏，使用GC8A型高效液相色谱仪测定乳酸（LA）、乙酸（AA）、丙酸（PA）、丁酸（BA）含量，采用苯酚-次氯酸比色法[13]测定氨态氮（NH3-N）含量，使用雷磁-25型酸度计测定pH值。1.4.3饲用价值评价采用袁翠林等[14]方法预测体外干物质消化率（IVDMD）。IVDMD=86.703-0.211×CP-0.138×ADF-0.531×NDF(1)可消化干物质(DMI)=120/NDF(2)粗饲料干物质随意采食量(DDM)=88.9-0.779×ADF(3)相对饲喂价值(RFV)[15]=DMI×DDM/1.29(4)粗饲料相对质量(RFQ)[16]=TDN×DMI/1.23(5)总可消化养分(TDN)[17]=-1.291×ADF+101.35(6)1.5数据统计与分析采用Excel 2016软件对数据进行整理，SPSS 17.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1苜蓿与燕麦混合比例对饲草型发酵全混合日粮营养成分的影响（见表3）由表3可知，FTMR1组日粮CP含量显著高于FTMR5组（P0.05）。FTMR1组日粮ADF、NDF含量均显著高于FTMR3组、FTMR4组（P0.05）。FTMR1组日粮WSC含量显著高于其他组（P0.05），FTMR5组WSC含量显著低于其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.016.T003表3苜蓿与燕麦混合比例对饲草型发酵全混合日粮营养成分的影响（干物质基础）组别CPDMNDFADFWSCFTMR1组13.73±0.38a45.30±0.9642.04±3.10a22.63±1.70a2.98±0.08aFTMR2组13.28±0.89ab46.03±0.8841.05±0.93ab20.98±0.79ab2.26±0.05bFTMR3组13.15±0.44ab45.38±0.9338.89±1.80b19.77±0.56b2.29±0.06bFTMR4组13.08±0.61ab45.25±0.9038.35±1.04b19.98±1.64b2.28±0.03bFTMR5组12.50±0.39b45.53±0.9039.22±1.17ab21.21±0.91ab2.07±0.09c注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。%2.2苜蓿与燕麦混合比例对饲草型发酵全混合日粮发酵品质的影响（见表4）由表4可知，FTMR1组、FTMR2组、FTMR3组日粮的pH值均显著低于FTMR4组、FTMR5组（P0.05）。FTMR3组日粮NH3-N含量显著高于其他组（P0.05）。FTMR3组日粮LA含量显著高于FTMR4组（P0.05）。FTMR3组日粮BA含量显著高于FTMR2组、FTMR4组（P0.05）。FTMR2组、FTMR4组日粮AA/PA值显著高于FTMR3组（P0.05）。各组FTMR中的AA含量差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.016.T004表4苜蓿与燕麦混合比例对饲草型发酵全混合日粮发酵品质的影响组别LA/(g/kg)AA/(g/kg)PA/(g/kg)BA/(g/kg)AA/PApH值NH3-N/(g/kg)FTMR1组31.50±0.58ab5.70±0.223.20±0.14a1.85±0.06ab1.79±0.07ab4.61±0.02b1.35±0.06bFTMR2组31.50±3.11ab6.13±0.573.10±0.29a1.73±0.17b1.99±0.05a4.64±0.06b1.30±0.08bFTMR3组32.25±2.36a5.23±0.393.20±0.29a2.10±0.22a1.65±0.09b4.63±0.02b1.45±0.06aFTMR4组26.75±3.95b5.48±1.162.75±0.47a1.73±0.29b1.97±0.11a4.75±0.10a1.25±0.06bFTMR5组28.50±3.87ab5.50±0.693.05±0.39a1.88±0.26ab1.80±0.06ab4.76±0.03a1.35±0.06b2.3饲草型发酵全混合日粮的饲用价值评价（见表5）由表5可知，FTMR1组日粮的IVDMD最低，显著低于FTMR3组、FTMR4组、FTMR5组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.016.T005表5饲草型发酵全混合日粮饲用价值评价组别IVDMD/%TDN/(g/kg)DDM/%DMI/%RFVRFQFTMR1组58.37±1.94b72.13±2.19b71.27±1.32b2.87±0.21b158.51±14.45b168.36±17.31bFTMR2组59.21±0.52ab74.27±1.02ab72.56±0.62ab2.93±0.07ab164.48±3.70ab176.57±4.27abFTMR3组60.54±1.03a75.83±0.72a73.51±0.43a3.09±0.14a176.09±7.98a190.53±8.64aFTMR4组60.82±0.69a75.56±2.12a73.34±1.28a3.13±0.09a177.99±6.63a192.34±8.75aFTMR5组60.32±0.69a73.97±1.18ab72.38±0.72ab3.06±0.09ab171.81±6.10ab184.17±7.31abFTMR3组、FTMR4组TDN、DDM、DMI、RFV、RFQ值均显著高于FTMR1组（P0.05），FTMR3组、FTMR4组各指标差异不显著（P0.05）。3讨论3.1苜蓿与燕麦混合比例对饲草型发酵全混合日粮营养成分的影响干物质和可溶性碳水化合物含量可以反映发酵饲料营养价值。本试验中，各FTMR组的DM含量差异不明显；与青贮前相比，各FTMR组DM含量均不同程度下降。原因可能是发酵过程中有害微生物利用WSC与LA进行生长繁殖，造成DM损失[18-19]。本试验中，各FTMR组日粮WSC含量在发酵后明显降低，可能与厌氧环境下乳酸菌的生长繁殖有关，与姜俊芳等[20]、刘立山等[21]研究结果一致。本试验中，FTMR1组日粮的WSC含量显著高于其他组，可能与FTMR1组燕麦含量相对较高有关；与苜蓿相比，燕麦具有更高的WSC含量。本试验中，随苜蓿比例增加，燕麦比例减少，各FTMR组的CP含量逐渐下降。原因可能与苜蓿缓冲值高有关；苜蓿比例过高，发酵质量相对较低，有害微生物滋生，营养物质损失，蛋白含量降低。发酵后CP含量增加的原因可能是饲料经充分发酵后，pH值降低，可抑制蛋白酶活性及其他微生物的生长繁殖[22]，与代胜等[4]研究结果一致。ADF和NDF含量可反映饲草消化率及饲用价值[23-24]。本试验中，随燕麦比例增加，各FTMR组ADF和NDF含量逐渐增加。原因可能是燕麦本身粗纤维含量略高于苜蓿，燕麦比例过高，各组ADF、NDF含量相应增加[25]。本研究表明，发酵提高了饲料的适口性及消化率，与杜烨青[26]研究结论一致。3.2苜蓿与燕麦混合比例对饲草型发酵全混合日粮发酵品质的影响发酵饲料pH值与牧草的种类和化学成分等有关。在厌氧条件下进行，乳酸菌发酵产生乳酸和乙酸等有机酸，使发酵饲料pH值下降，进而延长饲料贮存期[27]。各有机酸占比可能影响青贮发酵品质。较高的乳酸和乙酸含量可提高发酵饲料品质，较高的丁酸含量会影响家畜对发酵饲料的采食量及机体健康[28-29]。本试验中，各FTMR组pH值在4.61~4.76，LA含量在26.75~32.25 g/kg，BA含量小于2 g/kg，NH3-N含量在1.25~1.45 g/kg。本研究表明，发酵可有效抑制饲料中有害微生物的生长繁殖，FTMR3组BA和NH3-N含量相对较高。原因可能是有害菌、植物蛋白酶和微生物蛋白酶的共同作用，导致蛋白质中的真蛋白向氨态氮转化，从而导致该组NH3-N和BA含量相对较高。本试验中，各FTMR组pH值均在4.2以下，可能与饲料中较高的干物质有关。相关研究表明，当饲料干物质含量较高时，pH值未达到4.2以下也可以抑制梭菌、大肠杆菌等其他有害微生物生长[30-32]。3.3饲草型发酵全混合日粮饲用价值评价相对饲用价值可以评定饲料质量。RFV值与粗饲料的营养价值呈正相关，其值越高表明粗饲料质量越好[33-34]。本试验中，各FTMR组RFV在158.51~177.99，表明FTMR具有较高的饲用价值。饲料中苜蓿、燕麦所占比例过高时，RFV、TDN、RFQ、DMI、DDM、IVDMD值均有不同程度的降低，表明适宜的发酵比例有助于饲料中可消化组分含量的提升，与任海伟等[35]研究结果一致。4结论本试验综合考虑营养成分、发酵品质及饲用价值，建议内蒙古地区采用苜蓿∶燕麦∶玉米秸秆∶天然牧草∶精料比例为35∶26∶9∶4∶26（FTMR4组）较为适宜。