白术多糖源于植物白术根茎[1],呈棕黄色粉末状,水溶性强,无特殊气味[2-3]。白术中的多糖含量约为15%~30%,随产地和采收工艺的不同而变化[4]。研究表明,白术多糖具有促进消化功能[5],可以提高抗氧化和免疫能力[6-7],调节糖[8]、脂质代谢[9],具有抗菌[10]等生物学功能。师调调等[11]研究表明,添加200 mg/kg白术多糖可以提高免疫马立克氏病疫苗后的麻黄鸡免疫器官指数,改善组织形态,降低鸡体内炎症反应水平。文贵辉[12]研究表明,在日粮中添加5.0%白术粗多糖可以显著提高蛋鸡产蛋率、采食量,提高蛋品质。在禁抗养殖背景下,开发新型饲料添加剂是保障肉鸡生产与健康的重要内容之一。因此,本试验研究不同水平的白术多糖对肉鸡生长性能、血清生化指标及肠道形态指标的影响,为肉鸡无抗养殖及白术多糖在家禽养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验动物与材料1日龄的817肉鸡购自信阳富山养鸡专业合作社。试验场地为本校动物养殖试验基地。白术多糖购自兰州沃特莱斯生物科技有限公司,有效物质含量为50%。1.2试验设计选取240只肉鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10只鸡。对照组肉鸡饲喂基础日粮。试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别在基础日粮中添加200、400、800 mg/kg白术多糖。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.010.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成/%1~21 d22~42 d营养水平1~21 d22~42 d合计100.00100.00玉米58.4262.45代谢能/(MJ/kg)12.5312.14豆粕24.9720.81粗蛋白质/%20.1319.33鱼粉1.391.24钙/%0.960.90DDGS2.462.68有效磷/%0.470.45椰子油粉2.252.47赖氨酸/%1.321.25麸皮8.378.25蛋氨酸+半胱氨酸/%0.980.95石粉0.210.21食盐0.340.34L-赖氨酸盐酸盐0.280.27DL-蛋氨酸0.310.28预混料1.001.00注:1.预混料为每千克日粮提供:VD3 2 200 IU、VA 2 450 IU、VK3 1.57 mg、VE 25 IU、泛酸13.48 mg、生物素0.25 mg、VB1 3.86 mg、VB2 4.21 mg、Cu 6.55 mg、Fe 78.24 mg、Zn 40.37mg、Mn 32.58 mg、I 0.30g、Se 0.10 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理各组试验鸡隔离饲养,使用笼养方式进行饲养,2只/笼。试验期间,保证鸡自由采食、饮水。每日定期清扫排泄物,保证环境卫生,及时观察试验鸡状态,每日记录采食情况。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能以重复为单位,分别在肉鸡1、21、42日龄进行称重,统计肉鸡1~21、22~42、1~42 d的采食量,计算3个阶段的平均日增重、平均日采食量、料重比。ADG=(末重-初重)/(试验天数×肉鸡数量)(1)ADFI=总采食量/(试验天数×肉鸡数量)(2)F/G=ADFI/ADG(3)1.4.2血清生化指标各重复随机选择2只肉鸡,以翅静脉采血方式获取5 mL血液,静置10 min,在2 500 r/min条件下离心8 min,获取上清液,-20 ℃保存。1.4.3抗氧化指标使用ELISA试剂盒(赛默飞世尔科技(中国)有限公司)测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量以及总抗氧化能力(T-AOC)。1.4.4血清免疫指标使用ELISA试剂盒(赛默飞世尔科技(中国)有限公司)测定肉鸡血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)含量。1.4.5肠道的形态将采血后的试验鸡屠宰,解剖,剪取十二指肠、空肠及回肠约2.5 cm,将肠道中内容物全部清除后使用多聚甲醛(4%)进行固定,持续24 h。通过图像分析软件(Nikon,Japan)测定隐窝深度(CD)和肠绒毛高度(VH),计算V/C值。1.5数据统计与分析使用Excel软件进行初步整理,在SPSS软件中使用单因素方差分析对数据进行显著性检验,LSD法进行多重比较。数据以“平均值±标准差“表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1白术多糖对肉鸡生长性能的影响(见表2)由表2可知,试验Ⅱ组和Ⅲ组肉鸡21 d体重显著高于对照组(P0.05),试验Ⅲ组肉鸡42 d体重显著高于对照组(P0.05)。试验Ⅱ组和Ⅲ组肉鸡22~42 d和1~42 d ADG显著高于对照组(P0.05)。试验Ⅲ组肉鸡22~42 d ADFI显著高于对照组(P0.05)。试验Ⅲ组肉鸡3个阶段的F/G均显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.010.T002表2白术多糖对肉鸡生长性能的影响项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组体重/(g/只)1 d35.28±0.2035.13±0.1135.37±0.1435.41±0.1621 d342.13±8.43b353.29±9.87ab358.74±7.53a364.85±10.18a42 d1 018.45±28.36b1 047.68±32.48ab1 079.52±35.67ab1 112.47±38.31aADG/[g/(只·d)]1~21 d14.61±0.4215.15±0.4415.40±0.3615.69±0.5822~42 d32.21±0.61b33.07±0.49b34.32±0.73a35.60±0.65a1~42 d23.41±0.50c24.11±0.46bc24.86±0.43ab25.64±0.57aADFI/[g/(只·d)]1~21 d24.84±0.9825.45±0.9625.56±1.2325.88±1.4722~42 d73.43±1.32b74.07±1.76ab75.85±1.67ab77.97±2.01a1~42 d49.13±1.1849.76±1.3450.71±1.4551.93±1.62F/G1~21 d1.70±0.03a1.68±0.02ab1.66±0.02ab1.65±0.01b22~42 d2.28±0.05a2.24±0.04ab2.21±0.03ab2.19±0.02b1~42 d2.10±0.04a2.06±0.02a2.04±0.03ab2.02±0.01b注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表5与此同。2.2白术多糖对肉鸡血清抗氧化指标的影响(见表3)由表3可知,试验Ⅲ组肉鸡血清SOD、GSH-Px活性和T-AOC显著高于对照组(P0.05)。试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡血清MDA含量显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.010.T003表3白术多糖对肉鸡血清抗氧化指标的影响组别SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)T-AOC/(U/mL)对照组89.35±8.10b221.70±18.68b6.71±0.54a2.25±0.18b试验Ⅰ组96.48±8.56ab245.76±25.08ab3.85±0.26b2.47±0.23b试验Ⅱ组103.27±10.29ab262.43±28.27ab3.63±0.34b2.98±0.34ab试验Ⅲ组114.57±13.72a280.05±34.79a3.54±0.17b3.27±0.28a注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表4与此同。2.3白术多糖对肉鸡血清免疫指标的影响(见表4)由表4可知,试验Ⅲ组肉鸡血清中IgG含量显著高于对照组(P0.05)。试验Ⅱ组和试验Ⅲ组肉鸡血清中TNF-α和IL-6含量均显著低于对照组(P0.05)。各试验组肉鸡血清中IL-10含量均显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.010.T004表4白术多糖对肉鸡血清免疫指标的影响组别IgA/(g/L)IgM/(g/L)IgG/(g/L)TNF-α/(ng/L)IL-6/(ng/L)IL-10/(ng/L)对照组0.89±0.110.73±0.061.27±0.24b58.43±8.81a9.73±0.91a5.67±0.42b试验Ⅰ组0.92±0.060.76±0.081.55±0.18ab46.57±7.07ab8.43±0.64ab6.93±0.58a试验Ⅱ组0.88±0.070.74±0.051.73±0.30ab42.38±4.13b7.81±0.77b7.24±0.78a试验Ⅲ组0.91±0.090.72±0.042.01±0.36a36.41±6.20b7.36±0.50b7.56±0.63a2.4白术多糖对肉鸡肠道形态指标的影响(见表5)由表5可知,试验Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡十二指肠VH显著高于对照组(P0.05)。Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡空肠VH显著高于对照组(P0.05),各试验组肉鸡空肠V/C均显著高于对照组(P0.05)。试验Ⅲ组肉鸡回肠VH显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.010.T005表5白术多糖对肉鸡肠道形态指标的影响项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组十二指肠VH/μm865.34±26.15c894.16±32.74bc948.05±42.67ab987.26±35.76aCD/μm106.44±9.63106.19±7.56110.75±8.12112.32±10.38V/C8.13±0.858.42±0.438.56±0.568.79±0.71空肠VH/μm923.48±41.80c1 083.25±46.27bc1 148.63±61.25ab1 185.10±55.62aCD/μm111.43±11.65113.89±9.23116.49±12.18122.05±7.34V/C8.27±0.47b9.53±0.68a9.86±1.03a9.71±0.82a回肠VH/μm873.24±34.65b886.82±28.17ab897.31±36.25ab931.65±30.17aCD/μm106.75±8.09108.55±9.47107.72±6.22107.83±8.48V/C8.18±0.358.17±0.418.33±0.388.64±0.423讨论3.1白术多糖对肉鸡生长性能的影响白术多糖具有提高畜禽生产性能的作用[3,13-15]。曹楠等[16]在岭南黄鸡日粮中分别添加100、400、800 mg/kg的白术多糖,结果表明,与对照组相比,白术多糖具有提高试验鸡ADG和总增重的趋势,且400 mg/kg白术多糖可以显著降低F/G。文贵辉等[17]在湘黄鸡日粮中分别添加0.2%、0.4%和0.6%的白术多糖,以含抗生素的基础日粮作为阳性对照,结果显示,0.6%组肉鸡1~14日龄阶段ADG、ADFI和饲料转化率显著高于其他各组;15~28日龄阶段,所有添加白术多糖的肉鸡ADFI和饲料转化率显著高于对照组;试验全期,0.2%组肉鸡ADFI最高,但0.6%组肉鸡ADG和饲料转化率为各组最优。本研究结果表明,日粮中添加白术多糖可以提高817肉鸡ADG、ADFI,降低F/G,与上述研究结果一致,说明白术多糖可以促进肉鸡生长,提升饲料效率。3.2白术多糖对肉鸡机体抗氧化能力的影响代谢过程中产生的过氧离子、羟基自由基等会造成细胞损伤,动物机体抗氧化能力越强可以更有效地避免因氧化反应而对机体产生的负面作用[18]。T-AOC、SOD及GSH-Px等指标可直观反映机体抗氧化能力和机体健康水平[19]。白术多糖可以提高SOD、GSH-Px等相关基因的表达,激活Nrf2信号通路以增强机体抗氧化能力[20]。Miao等[9]使用高能量、低蛋白日粮饲喂蛋鸡,并在试验组蛋鸡日粮中分别添加200、400 mg/kg白术多糖。结果表明,与对照组相比,试验组蛋鸡脂肪酸β-氧化基因表达下调,降低血清中MDA含量。陈浩祥等[18]利用环磷酰胺构造岭南黄鸡氧化应激模型,在基础日粮中添加400 mg/kg白术多糖。结果表明,日粮中添加400 mg/kg白术多糖可以显著提高岭南黄鸡体内SOD和GSH-Px等抗氧化酶的活性,降低体内MDA含量。本研究结果显示,日粮中添加800 mg/kg水平白术多糖可提高肉鸡血清T-AOC、GSH-Px和SOD活性,并降低MDA含量,与上述研究结果基本一致,说明白术多糖可以显著提高家禽机体抗氧化能力。3.3白术多糖对肉鸡免疫机能的影响血清免疫球蛋白含量可以反映机体主动免疫能力,细胞因子如TNF-α、IL-6等与体内炎症反应有关[21-22],可反映动物机体免疫水平。研究认为,白术多糖可以通过CD28/IP3R/PLCγ-1/AP-1/NFAT信号通路或者引起miRNA差异表达刺激T淋巴细胞,影响Th1/Th2的平衡,加快T淋巴细胞增殖、分化,影响细胞因子IL-6等基因表达调控体内炎症发生[23-24]。李婉雁[25]在岭南黄鸡日粮中分别添加0、100、200、400、600 mg/kg白术多糖,结果表明,与对照组相比,试验组岭南黄鸡脾脏、胸腺及法氏囊中TNF-α、IL-4及IL-2表达显著上升。陈家雪[26]在海南麻黄鸡接种新城疫苗后补充200 mg/kg白术多糖,结果表明,日粮中添加白术多糖可以显著提高鸡免疫器官指数,且TNF-α、IL-2等细胞因子水平与对照组差异显著。白术多糖对肉鸡血清免疫球蛋白含量的影响报道偏少。李丽立等[27]研究发现,在断奶仔猪日粮中添加0.3%白术纯多糖可以显著提高IgG和IgM含量。本研究结果显示,日粮中添加白术多糖可以提高肉鸡血清中IgG含量和IL-10含量,降低血清中TNF-α和IL-6含量,与上述研究结果不完全一致,可能与试验设计和动物种类有关。3.4白术多糖对肉鸡肠道形态的影响肠道形态与肠道健康和功能有密切关联[28]。王琳[29]考察白术多糖、枯草芽孢杆菌对海兰褐鸡育成期生长性能和肠道生理的影响,采用4×3双因素设计,白术多糖添加量分别为0、0.2%、0.4%和0.6%,枯草芽孢杆菌添加量分别为0、250和500 mg/kg。结果表明,日粮中添加白术多糖可显著提高海兰褐鸡空肠VH和V/C,白术多糖和枯草芽孢杆菌相互作用可以显著提高海兰褐鸡十二指肠CD和V/C,对肠道形态有明显的改善作用。白术多糖对家禽肠道形态的报道偏少,但在猪的研究中较多。例如,柴艳等[30]研究表明,0.1%水平白术多糖可以显著提高断奶仔猪十二指肠、空肠的VH,提高空肠的V/C。本研究结果显示,日粮中添加800 mg/kg白术多糖可以提高肉鸡十二指肠、空肠、回肠的VH,并提高空肠V/C,与上述研究结果类似,说明日粮中添加白术多糖可以显著改善肠道形态,强化肠道功能。4结论本研究发现,日粮中添加白术多糖可以提高肉鸡生长性能,强化机体抗氧化和免疫能力,对肠道形态有显著的改善作用,在肉鸡日粮中添加800 mg/kg白术多糖较为适宜。

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