水产动物对饲料蛋白质水平要求较高，部分蛋白质作为鱼体的能量供给，其代谢产物会以氨氮的形式直接排入水中，从而造成蛋白质资源浪费并污染环境。研究表明，适当增加鱼饲料中脂肪含量可发挥脂肪的“蛋白质节约效应”[1]，降低蛋白质供能比例，减少高密度、投饵式水产养殖方式的氮排放，具有重要的生态价值[2]。但饲料中脂肪含量过高会引起鱼类肌肉和肝脏脂肪沉积[3]，从而影响鱼类健康和肌肉品质。胆汁酸是胆汁的重要组成部分，在肝脏中由胆固醇合成的一类两性甾醇类化合物[4]。胆汁酸具有促进脂肪乳化、调控脂肪代谢等作用[5-6]，可抑制动物肠道有害菌增殖，提高动物免疫力，减少疾病发生[7]，提高肠道蛋白酶活性，促进动物体内营养物质的消化吸收[8]。有研究表明，在高脂（12%）饲料中添加150~300 mg/kg胆汁酸能够改善齐口裂腹鱼的生长性能[5]。于漫涵等[9]在含10%脂肪水平的花鲈饲料中添加0.5%胆汁酸，发现鱼体脂肪肝得到有效缓解。Li等[10]研究表明，在含8%脂肪饲料中添加300~900 mg/kg胆汁酸对半滑舌鳎生长性能和机体免疫具有积极影响。异育银鲫“中科3号”是中国科学院水生生物研究所培育的异育银鲫第三代新品种，属于典型的杂食性鱼类，肉味鲜美，营养价值丰富，在我国淡水养殖中占有重要地位。但目前鲜见关于异育银鲫高脂饲料中胆汁酸适宜添加量的研究。本试验研究高脂饲料中添加不同水平的胆汁酸对异育银鲫生长性能和肌肉脂肪酸组成的影响，旨在探索高脂饲料中胆汁酸的适宜添加量，为开发低成本、高效、绿色环保型配合饲料提供参考。1材料与方法1.1试验动物与地点异育银鲫“中科3号”购自江苏省连云港市欢墩渔场。饲养试验在江苏海洋大学水产养殖实验室进行。1.2试验设计试验开始前暂养2周，投喂基础饲料，驯化至异育银鲫上浮抢食。正式试验开始前停食24 h，挑选450尾健康无病、初始体重为（32.37±0.13）g的鲫鱼，随机分成5组，每组3个重复，每个重复30尾鱼。在含12%豆油的基础饲料中分别添加200（BA200）、400（BA400）、600（BA600）和800 mg/kg（BA800）的胆汁酸（山东龙昌动物保健品有限公司），配制5组等氮（35%）、等脂（12%）的饲料。试验饲料组成及营养水平见表1。试验期8周。原料粉碎过筛，根据配方称重并混合10 min。每千克混合原料加入500 mL水，搅拌15 min，用TK-12小型绞肉机（丰瑞吉食品机械有限公司）制成直径为3 mm颗粒，置于55~60 ℃的烘箱中烘干至水分为10%~12%，取出饲料冷却，装袋编号，置于4 ℃冰箱保存10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.009.T001表1试验饲料组成及营养水平（干物质基础）项目BA0BA200BA400BA600BA800原料组成进口鱼粉15.0015.0015.0015.0015.00豆粕23.0023.0023.0023.0023.00棉粕18.0018.0018.0018.0018.00菜粕11.8011.8011.8011.8011.80面粉17.0016.9816.9616.9416.92磷酸二氢钙1.801.801.801.801.80赖氨酸0.150.150.150.150.15蛋氨酸0.050.050.050.050.05胆碱0.300.300.300.300.30胆汁酸00.020.040.060.08豆油12.0012.0012.0012.0012.00多维874A0.400.400.400.400.40多矿874B0.500.500.500.500.50合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平粗蛋白质37.5737.3437.8037.7537.98粗脂肪12.5012.3712.2012.2912.37粗灰分7.997.978.008.078.15水分10.4810.2810.0610.3110.70注：1.多维、多矿预混料为每千克饲料提供：VA 5 000 IU、VD 2 000 IU、VE 50 mg、VC 180 mg、VB1 8 mg、VK 5 mg、VB2 10 mg、VB12 0.03 mg、VB6 8 mg、叶酸3 mg、泛酸30 mg、烟酸30 mg、生物素0.4 mg、铜4 mg、铁170 mg、锌150 mg、锰22 mg、碘1 mg、钴0.25 mg、硒0.4 mg、肌醇100 mg、镁300 mg。2.营养水平均为实测值。%1.3饲养管理每天投喂异育银鲫4次（8：00、11：00、14：00、17：00），投喂总量为鱼体重的2%，并根据鱼体重量和摄食情况每周调整一次。试验期间每天处理残饵，换水1次，换水量为25%。养殖水温20~25 ℃，溶氧大于5 mg/L，pH值为7~8。1.4测定指标及方法1.4.1样品采集养殖试验结束，鱼禁食24 h，对每缸鱼进行计数，称重。在每缸随机取9尾鱼用20 mg/L MS-222麻醉，选取其中3尾鱼测体重、体长，解剖，取内脏和肝胰脏称重，用于计算脏体比和肝体比；6尾鱼取侧线以上，背鳍以下的肌肉捣碎，每组混匀置于离心管中，置于-40 ℃冰箱保存，用于分析肌肉中常规营养成分和脂肪酸组成。1.4.2生长性能试验结束统计鱼的初重、末重、体长以及饲料消耗量等数据，计算鱼的生长性能。饲料系数(FCR)=m3/(m2-m1)(1)成活率(SR)=n2/n1×100%(2)增重率(WGR)=(m2-m1)/m1×100%(3)脏体比(VSI)=m4/m2×100%(4)肝体比(HSI)=m5/m2×100%(5)肥满度(CF)=m2/L3 (6)式中：m1、m2分别为试验鱼的初重（IBW）和末重（FBW）（g）；m3为饲料消耗量（g）；n1、n2分别为试验开始和结束时试验鱼的数量；L为体长（cm）；m4、m5分别为试验鱼的内脏重和肝胰脏重（g）。1.4.3肌肉常规营养成分及脂肪酸组成水分根据GB 5009.3—2016采用直接干燥法测定，粗脂肪含量使用SoxtecTM-8000 Extraction Unit索式抽提仪（丹麦福斯集团公司）测定，粗蛋白质含量使用Kjeltec TM-8400凯氏定氮仪（丹麦福斯集团公司）测定，粗灰分根据GB 5009.4—2016采用550 ℃灼烧称量测定。采用氯仿-甲醇法提取组织样品中总脂，参照GB 5009.168—2016中方法使脂肪酸甲酯化，甲酯化后用GC-MS2010 SE气相色谱质谱联用仪（日本岛津公司）采用面积归-化法测定脂肪酸组成。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 23软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫生长性能的影响（见表2）由表2可知，BA400和BA600异育银鲫的FBW显著高于BA0（P0.05）；BA600异育银鲫的WGR显著高于BA0和BA800（P0.05），BA200、BA400和BA600异育银鲫的FCR显著低于BA0和BA800（P0.05）。当饲料中胆汁酸添加量为600 mg/kg时异育银鲫WGR最高，比BA0提高了20.95%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.009.T002表2高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫生长性能的影响组别IBW/(g/尾)FBW/(g/尾)WGR/%SR/%FCRBA032.38±0.1671.93±4.44b149.31±14.42b100.00±0.001.76±0.11aBA20032.03±0.0482.37±4.23ab161.13±6.65ab100.00±0.001.43±0.09bBA40032.12±0.0384.22±3.80a172.71±12.79ab100.00±0.001.32±0.09bBA60032.65±0.1886.09±2.46a180.59±4.46a100.00±0.001.31±0.06bBA80032.67±0.2277.42±3.25ab157.22±12.66b98.89±1.571.69±0.04a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表3、表4与此同。2.2高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫形体指标的影响（见表3）由表3可知，BA600异育银鲫的VSI显著低于BA0和BA200（P0.05），各试验组异育银鲫HSI均显著低于BA0（P0.05），BA800的CF显著高于BA0（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.009.T003表3高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫形体指标的影响组别VSI/%HSI/%CF/(g/cm3)BA07.65±0.22a2.56±0.31a1.53±0.04bBA2006.99±0.15ab1.87±0.20b1.60±0.05abBA4006.26±0.35bc1.68±0.12b1.62±0.03abBA6006.24±0.12c1.64±0.08b1.62±0.04abBA8006.88±0.19bc1.74±0.08b1.70±0.02a2.3高脂饲料中胆汁酸水平对异育银鲫肌肉常规营养成分的影响（见表4）由表4可知，试验组鱼肌肉粗脂肪含量显著低于BA0（P0.05）；BA400和BA600鱼肌肉粗蛋白质含量显著高于BA0和BA200（P0.05）；BA600和BA800鱼肌肉粗灰分的含量显著低于BA0（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.009.T004表4高脂饲料中胆汁酸水平对异育银鲫肌肉常规营养成分的影响组别水分/%粗脂肪/%DM粗蛋白/%DM粗灰分/%DMBA074.74±0.7913.83±0.34a81.30±0.17c5.62±0.04aBA20074.36±0.8811.69±0.36b82.31±0.38c5.43±0.07abBA40074.29±0.9510.85±0.19c83.81±0.40a5.37±0.20abBA60074.84±0.6510.26±0.14c83.38±0.40ab5.15±0.02bBA80073.18±0.5810.34±0.09c82.43±0.13bc5.22±0.02b2.4高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫肌肉脂肪酸组成的影响（见表5）由表5可知，BA200和BA400异育银鲫肌肉中SFA含量显著低于BA600（P0.05）；各试验组中异育银鲫肌肉中MUFA含量均显著高于BA0（P0.05）；BA600异育银鲫肌肉PUFA占比最低，显著低于BA0、BA200和BA400（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.009.T005表5高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫肌肉脂肪酸组成的影响项目BA0BA200BA400BA600BA800C12∶00.04±0.000.03±0.000.04±0.000.04±0.000.04±0.00C14∶01.39±0.031.43±0.061.51±0.031.50±0.051.49±0.06C16∶029.32±0.30b29.01±0.03b29.09±0.51b30.76±0.27a29.74±0.36abC16∶10.82±0.020.90±0.060.96±0.051.00±0.050.97±0.07C18∶09.36±0.158.87±0.398.44±0.109.06±0.168.98±0.46C18∶1n-9c17.65±0.10b18.43±0.40ab18.98±0.20a18.44±0.24ab18.87±0.65abC18∶1n-9t1.84±0.03b1.91±0.03ab1.90±0.03ab1.86±0.02b1.99±0.07aC18∶2n-632.09±0.13ab31.85±0.11ab32.37±0.69a29.87±0.40c30.97±0.19bcC18∶3n-33.04±0.02ab3.01±0.01b3.12±0.05a2.84±0.03c2.84±0.03cC20∶1n-90.56±0.160.80±0.010.74±0.080.81±0.010.78±0.03C20∶4n-61.18±0.04a1.21±0.04a0.88±0.02b1.20±0.04a1.10±0.03aC20∶3n-30.08±0.010.06±0.020.03±0.020.03±0.010.03±0.01C20∶5n-30.59±0.00a0.55±0.02b0.51±0.01c0.55±0.01b0.49±0.01cC22∶6n-32.04±0.06a1.92±0.14ab1.42±0.03c2.04±0.04a1.70±0.12b饱和脂肪酸（SFA）40.11±0.17ab39.35±0.30b39.08±0.50b41.36±0.16a40.26±0.67ab不饱和脂肪酸（UFA）59.89±0.17ab60.65±0.31a60.92±0.50a58.64±0.20b59.74±0.67ab单不饱和脂肪酸（MUFA）20.88±0.04b22.04±0.49a22.59±0.24a22.11±0.30a22.61±0.77a多不饱和脂肪酸（PUFA）39.01±0.15a38.61±0.20a38.33±0.74ab36.53±0.45c37.14±0.18bc注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）%3讨论3.1高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫生长性能的影响胆汁酸是胆汁的主要活性成分，在肝肠循环中，胆汁酸乳化脂肪并与脂肪酸结合，形成脂肪酸-胆汁酸复合物，使脂肪得以透膜吸收。饲料中添加适量胆汁酸能够提高脂肪吸收率，促进能量转化，提高饲料转化率，减少氮排放，提高动物的免疫力[11-12]。研究发现，在大黄花鱼高脂（6.5%）饲料中添加300 mg/kg的胆汁酸，鱼体的末重和增重率显著增加，添加量为150~450 mg/kg时FCR显著降低[13]。Peng等[14]研究发现，在低蛋白高脂（6%）饲料中添加160 mg/kg的胆汁酸，草鱼的WGR、特定生长率、采食量和饲料效率显著升高。研究发现，在14%脂肪水平的饲料中添加150 mg/kg的胆汁酸，齐口裂腹鱼增重率和特定生长率分别为263.52%和1.84%/d，显著高于对照组，且FCR显著降低[5]。本研究发现，BA600中鱼的WGR显著高于BA0，与上述研究基本一致，表明异育银鲫高脂饲料中添加胆汁酸可改善鱼体的生长性能。饲料中添加胆汁酸还能够减少脂肪沉积，提高肥满度，改善肝脏健康。在脂肪含量为4.5%的加州鲈饲料中添加150 mg/kg的胆汁酸，鱼体肥满度显著升高，脏体比、肝体比和脂肪沉积率显著降低[15]。在含70 g/kg脂肪的基础饲料中添加600 mg/kg胆汁酸，草鱼肝胰脏和肌肉中脂肪水平显著低于对照组[16]。杂交石斑鱼在喂食高脂（15.32%）饲料后，鱼体脂质沉积显著增加，但添加900 mg/kg的胆汁酸后鱼体肝胰脏中的脂质积累减少[17]。在含4%豆油饲料中添加60 mg/kg的胆汁酸，鲤鱼的脏体比从4.40显著降至3.42[18]。本试验中，当高脂饲料中添加400、600 mg/kg的胆汁酸时，异育银鲫的VSI和HSI显著降低，表明在含12%豆油饲料中添加400~600 mg/kg胆汁酸对鱼体肝脏健康具有积极的影响。3.2高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫肌肉中营养成分的影响饲料中适量添加脂肪可有效地节约蛋白质的消耗，从而降低经济成本，减少氮排放，但脂肪添加过量会导致养殖鱼类肝脏和肌肉脂肪沉积，引发一系列疾病，影响食用价值。有研究表明，在草鱼饲料中添加胆汁酸后，鱼体肌肉中粗蛋白质的含量显著升高，粗脂肪含量显著降低[19-20]。孙建珍等[6]发现，在10%和18%脂肪水平的饲料中添加1.5%的胆汁酸能够显著降低大菱鲆肌肉中粗脂肪的含量，提高粗蛋白质含量。Yin等[4]在大口黑鲈高脂（18.08%）饲料中添加600 mg/kg胆汁酸，发现鱼体肌肉中粗脂肪的含量显著低于对照组。本研究中，各试验组异育银鲫肌肉中粗脂肪的含量均显著低于BA0，且BA400和BA600组中粗蛋白质的含量显著高于BA0，与上述研究类似，表明在高脂饲料中添加胆汁酸可促进鱼体对脂肪的分解和供能，降低肌肉中粗脂肪含量，提高粗蛋白质含量。3.3高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫肌肉中脂肪酸组成的影响脂肪酸是脂类重要组成部分，可决定肌肉硬度和氧化稳定性，进而影响肉质[21]，其中主要以饱和脂肪酸（SFA）和单不饱和脂肪酸（MUFA）为主[22]。多不饱和脂肪酸（PUFA）是动物生长发育所需的必需脂肪酸，同时也会影响肉的香味[23]。研究表明，在高脂（7%）饲料中添加60 mg/kg胆汁酸草鱼肌肉中SFA含量显著低于高脂组，而MUFA含量显著高于高脂组[20]。孙建珍等[6]在含10%和18%脂肪水平的饲料中添加1.5%胆汁酸，发现大菱鲆幼鱼肌肉中PUFA含量显著降低，SFA和MUFA含量显著增加。王恒[24]在罗氏沼虾的饲料中添加胆汁酸后，发现肌肉SFA和MUFA的含量显著高于对照组，PUFA的含量低于对照组。本试验结果显示，各试验组鱼体肌肉中MUFA含量均显著升高，且BA600的PUFA含量低于BA0，表明饲料中添加胆汁酸能够较好地促进PUFA在异育银鲫体内的吸收和利用[6]，可在一定程度上改善异育银鲫肌肉的肉质和风味。4结论本研究结果表明，高脂饲料中添加胆汁酸对异育银鲫具有较好的促生长效果，能够提高鱼体的WGR和肌肉粗蛋白质含量，降低FCR、VSI、HSI及肌肉中粗脂肪含量。建议异育银鲫高脂饲料中添加400~600 mg/kg胆汁酸。