据报道，我国每年制药提取后产生的药渣等固体废弃物约3 000万t[1]，处理不当可能带来严重的环境和资源负担[2]。此外，受加工目的、生产方法和工艺条件等因素影响，中药成分提取不彻底，药渣内仍含有多种活性成分和营养物质[3-5]，如纤维素、半纤维素、粗蛋白质、粗脂肪、多糖和生物碱等。如何科学有效利用中药渣，使其无害化和资源化，已成为当前亟须解决的问题。研究表明，生物发酵技术可有效破坏细胞壁，降低纤维素含量[6-7]，改善营养价值及适口性[8]，提升药渣的饲料利用效率[9-10]。赵圣振[11]研究表明，利用植物乳杆菌及粪肠球菌发酵黄芪12 d后，黄芪内活性成分含量显著提高，疗效增强。宋玉卓等[12]表明，复方中草药饲料添加剂（由苍术、白术、黄檗、板蓝根、甘草、山楂等组成）的最佳发酵时间为3 d。武洪志等[13]发现，枯草芽孢杆菌发酵复方中草药的最佳发酵时间为2.7 d且发酵后复方中草药多糖含量提高了55.75%。朱晓峰等[14]研究表明，发酵时间为48 h时，纤维降解酶可促进乳酸菌发酵提高菜籽粕（RSM）的体外营养价值。但关于不同生物发酵剂处理中药渣后最适发酵天数的相关研究报道较少。因此，本试验旨在探究不同发酵天数及不同生物发酵剂互作对6种常见中药渣发酵后营养成分含量变化的影响规律，以期为中药渣饲料化利用提供参考。1材料与方法1.1中药渣、生物发酵剂来源感冒清颗粒等6种中成药药渣由吉林通化修正药业有限公司提供，其基本组成见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.019.T001表1中药渣基本组成名称药渣组成感冒清颗粒荆芥穗、薄荷、防风、柴胡、紫苏叶、葛根、桔梗、苦杏仁、白芷、苦地丁、芦根益母草颗粒益母草、当归、川芎、木香五加参归芪精刺五加、当归、黄芪通窍鼻炎片炒苍耳子、防风、薄荷、辛夷、炒白术、黄芪清凉含片薄荷、紫苏叶、葛根、乌梅肉参茸补肾片白芍、牡丹皮、红参、海马、狗肾、驴肾、茯苓、九节菖蒲、山药、当归、六神曲、麦芽、煅阳起石、干姜、砂仁、附子、大青盐、豆蔻、锁阳、川芎、鹿茸、小茴香、山楂、枸杞子、泽泻、黄芪、酸枣仁、槟榔、党参、五味子、韭菜子、牛膝、莱菔子、肉苁蓉、天冬、麦冬、甘草、覆盆子、山茱萸、化橘红、仙茅、白术、远志、枳壳、杜仲、补骨脂、肉桂、厚朴生物发酵剂（复合菌粉及酶粉发酵剂）由北京大北农集团饲用微生物国家重点实验室提供。复合菌剂主要由植物乳酸杆菌（活菌数≥5×108 CFU/mL）、枯草芽孢杆菌（活菌数≥3×108 CFU/mL）、短杆芽孢杆菌（活菌数≥2×108 CFU/mL）等组成。复合酶粉发酵剂主要由纤维素酶（20 000 U/g）、蛋白酶（2 000 U/g）及淀粉酶（40 000 U/g）等组成。1.2发酵中药渣制备与试验设计各种中成药有效成分提取后剩余的湿药渣经过脱水、烘干和粉碎后制备成各种干渣，便于贮存和运输，且保证性质稳定。每种干药渣经65 ℃干燥后粉碎，过60目筛制成药渣粉，用于实验室分析检测。试验以中成药药渣粉为发酵底料，喷浆玉米皮、豆粕、玉米面为发酵辅料，设定初始含水量为50%。采用4×4双因素试验设计，设置4个处理组，分别为空白对照组（CON，不添加任何生物发酵剂）、复合酶粉发酵组（CM，复合酶粉添加量为0.05%）、复合菌粉发酵组（CJ，复合菌粉添加量为0.01%）及复合酶粉+复合菌粉混合发酵组（CM+CJ，复合酶粉添加量为0.05%+复合菌粉添加量为0.01%），设置4个发酵天数水平（3、6、9、12 d），每个样品3个重复。待样品搅拌均匀后装入密封发酵袋中，置于35 ℃培养箱中连续发酵。待达到发酵预定时间，取出发酵药渣混匀后检测常规营养成分含量。1.3测定指标及方法饲料中干物质（DM）含量参照GB/T 6435—2006，采用恒温烘干法测定；粗蛋白质（CP）含量参照GB/T 6432—1994的方法，采用凯氏定氮法测定；粗脂肪（EE）含量参照GB/T 6433—1994的方法，采用索氏抽提法测定；粗纤维（CF）含量参照GB/T 6434—2006的方法；中性洗涤纤维（NDF）含量参照GB/T 20806—2006的方法，酸性洗涤纤维（ADF）含量参照NY/T 1459—2007方法，均采用滤袋法测定；粗灰分（Ash）含量参照GB/T 6438—1992的方法，采用550 ℃灼烧法测定。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel 2019软件进行整理，SAS 9.4软件的GLM程序进行统计分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.01表示差异极显著，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后DM含量变化的影响（见表2）由表2可知，不同发酵剂处理对发酵后6种中药渣DM含量均存在极显著或显著影响（P0.01或P0.05）。感冒清颗粒和参茸补肾片CM+CJ组DM含量极显著低于CON组（P0.01），益母草颗粒CM组与CJ组DM含量极显著低于CON组（P0.01）；五加参归芪精CJ组DM含量极显著低于CON组（P0.01）；通窍鼻炎片CM组DM含量显著高于CON组（P0.05）。不同发酵天数对发酵后6种药渣DM含量均有极显著影响（P0.01）。感冒清颗粒药渣发酵3 d后DM含量极显著高于其他天数（P0.01）；益母草颗粒药渣发酵6 d后DM含量极显著高于其他天数（P0.01）；五加参归芪精、通窍鼻炎片、清凉含片、参茸补肾片等4种药渣发酵3、6 d后DM含量均极显著高于发酵9、12 d（P0.01）。不同发酵剂处理和不同发酵天数对发酵后6种中药渣DM含量均具有极显著交互作用（P0.01）。除益母草颗粒外，其他5种药渣均以CJ-3处理组最好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.019.T002表2发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后DM含量变化的影响项目感冒清颗粒益母草颗粒五加参归芪精通窍鼻炎片清凉含片参茸补肾片CON-353.98±0.02Bb53.11±0.02Ce52.53±0.06Bbc51.75±0.32BCbc52.06±0.17Dd53.27±0.13BbCON-652.68±0.13De54.81±0.07Aa52.44±0.04BCbc50.32±1.07EFe53.19±0.01Bb53.57±0.15ABaCON-947.12±0.08Hi48.31±0.10Fh48.20±0.05De48.92±0.04GHgh46.97±0.04Gg47.49±0.14HijCON-1246.76±0.11Ig47.12±0.09Hk48.01±0.07De48.77±0.15Hgh48.55±0.01Ee47.64±0.13GHhiCM-352.39±0.11Ef51.99±0.22Eg51.79±0.02Cd50.66±0.15DEde52.64±0.05Cc51.75±0.05EeCM-652.09±0.09Fg52.71±0.01Df52.28±0.28BCcd51.93±0.85ABCb52.10±0.06Dd51.86±0.01DEdeCM-948.28±0.02Gh47.55±0.03Gj47.86±0.29De49.68±0.17FGf46.52±0.04Hh47.87±0.06GghCM-1248.23±0.13Gh47.09±0.11Hk47.90±0.01De49.15±0.06GHfg47.33±0.08Ff49.37±0.09FfCJ-354.45±0.32Aa53.25±0.08Cde53.28±0.10Aa52.73±0.11Aa53.71±0.48Aa53.56±0.06ABaCJ-654.04±0.07Bb53.97±0.03Bc53.42±0.92Aa52.30±0.08ABab53.63±0.04Aa53.67±0.43AaCJ-946.35±0.01JKkj45.82±0.02Jm46.59±0.15EFf47.70±0.14IJi46.07±0.14Ii46.74±0.06IkCJ-1246.22±0.14Kj46.47±0.08Il46.02±0.09Fg47.15±0.16Ji46.14±0.08Ii46.49±0.10IlCM+CJ-353.08±0.07Cd54.25±0.42Bb53.26±0.09Aa52.25±0.10ABab53.16±0.12Bb52.70±0.01CcCM+CJ-653.33±0.12Cc53.41±0.03Cd52.96±0.60ABab51.23±0.31CDcd52.76±0.03Cc52.09±0.19DdCM+CJ-946.48±0.03JKk47.55±0.04Gj46.67±0.14EFf48.50±0.04HIgh47.10±0.05FGfg47.38±0.14HjCM+CJ-1246.51±0.11IJk47.84±0.09Gi47.10±0.08Ef48.46±0.15HIh46.99±0.01Gg47.97±0.07Gg生物发酵剂CON50.13±3.37Ab50.84±3.35Aa50.30±2.29Aa49.94±1.35b50.19±2.64Aa50.50±3.06AaCM50.24±2.08Aa49.88±2.65Bb49.96±2.18ABb50.36±1.17a49.65±2.87Cc50.21±1.75BbCJ50.26±4.16Aa49.84±3.92Bb49.83±3.71Bb49.97±2.67b49.89±3.96Bb50.12±3.66BCbcCM+CJ49.85±3.51Bc50.76±3.23Aa50.00±3.27ABb50.11±1.75ab50.00±3.09Bb50.04±2.49Cc发酵天数/d353.47±0.84Aa53.15±0.86Bb52.72±0.64Aa51.85±0.82Aa52.89±0.68Aa52.82±0.73Aa653.04±0.76Bb53.73±0.81Aa52.78±0.67Aa51.45±0.99Ab52.92±0.59Aa52.80±0.89Aa947.06±0.80Cc47.31±0.95Cc47.33±0.76Bb48.71±0.75Bc46.67±0.43Cc47.37±0.43Cc1246.93±0.82Cd47.13±0.51Dd47.26±0.83Bb48.39±0.79Bd47.25±0.90Bb47.87±1.08BbP值生物发酵剂0.000 10.000 10.004 90.040 40.000 10.000 1发酵天数0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 1生物发酵剂×发酵天数0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 1注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。%2.2发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后CP含量变化的影响（见表3）由表3可知，不同发酵剂处理对五加参归芪精、通窍鼻炎片、参茸补肾片发酵后粗蛋白质（CP）含量有极显著影响（P0.01）。五加参归芪精CM组CP含量极显著高于CJ组、CM+CJ组（P0.01）；通窍鼻炎片CM组CP含量极显著高于其余3组（P0.01）；参茸补肾片CM组CP含量极显著高于CON组和CJ组（P0.01）。不同发酵天数对6种发酵后药渣CP含量有极显著影响（P0.01）；6种药渣发酵6 d后CP含量极显著低于发酵其他天数（P0.01）；感冒清颗粒、参茸补肾片药渣发酵12 d后CP含量极显著高于发酵9 d（P0.01）。不同发酵剂处理和不同发酵天数对发酵后感冒清颗粒、五加参归芪精、参茸补肾片等3种药渣CP含量有极显著交互作用（P0.01），且3种药渣发酵处理效果较好的组为CM+CJ-12组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.019.T003表3发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后CP含量变化项目感冒清颗粒益母草颗粒五加参归芪精通窍鼻炎片清凉含片参茸补肾片CON-313.38±0.38DEde10.71±0.328.46±0.21BCbc13.78±0.1411.61±0.4515.86±0.12DEdeCON-610.32±0.17Ff7.59±0.025.40±0.22DEde10.43±0.388.27±0.3813.58±0.49FGfgCON-914.53±0.01BCbc10.28±0.298.73±0.25ABCbc13.63±0.9511.61±0.1315.79±0.10DEdeCON-1214.97±0.02ABb10.63±1.638.64±0.25ABCbc13.43±0.5012.82±0.2416.89±0.22BCbCM-313.24±0.31Ede10.20±0.109.00±0.08ABab14.06±0.2011.17±1.7215.99±0.23DEcdCM-610.78±0.14Ff7.58±0.385.86±0.18Dd11.16±0.508.84±0.1613.75±0.32FfCM-914.58±0.22BCbc11.26±0.088.98±0.42ABab14.63±0.4211.70±0.8116.22±0.49DcdCM-1214.39±0.08BCDbc11.40±0.038.70±0.07ABCbc15.19±0.6812.82±0.3917.93±0.20AaCJ-312.97±0.36Ee10.12±0.268.26±0.02BCc13.33±0.1011.33±0.4115.93±0.12DEdeCJ-610.63±0.59Ff7.65±0.195.02±0.21Ee10.37±0.198.55±0.5812.98±0.18GhCJ-913.56±0.49CDEde10.60±0.448.17±0.22Cc13.31±0.2713.24±1.1215.44±0.06EeCJ-1215.71±0.39Aa10.71±0.619.29±0.85Aa13.57±0.3111.91±0.2315.99±0.16DEcdCM+CJ-313.96±0.03BCDEcd10.51±0.468.38±0.15BCc13.72±0.2511.15±0.4016.05±0.37DEcdCM+CJ-610.34±0.23Ff7.37±0.215.26±0.44DEe10.38±0.398.62±0.0413.12±0.10FGghCM+CJ-913.64±0.39CDEde10.69±0.258.50±0.07BCbc13.62±0.0911.23±1.0716.46±0.16CDbcCM+CJ-1215.83±1.18Aa11.64±0.838.58±0.06ABCbc14.46±0.1012.63±0.2517.48±0.51ABa生物发酵剂CON13.30±1.909.81±1.527.81±1.47ABb12.82±1.53Bbc11.08±1.7915.53±1.28BbCM13.25±1.5910.11±1.618.14±1.39Aa13.76±1.67Aa11.13±1.7315.97±1.58AaCJ13.22±1.939.77±1.357.69±1.72Bb12.65±1.39Bc11.26±1.8815.09±1.29CcCM+CJ13.44±2.1310.05±1.737.68±1.47Bb13.05±1.65Bb10.91±1.5915.78±1.71ABa发酵天数/d313.38±0.46Cc10.39±0.36Bb8.52±0.32Ab13.72±0.31Ab11.32±0.82Bc15.96±0.21Bb610.52±0.35Dd7.55±0.23Cc5.38±0.40Bc10.59±0.47Bc8.57±0.37Cd13.36±0.42Cc914.08±0.57Bb10.71±0.45ABab8.59±0.39Aab13.80±0.69Ab11.94±1.09ABb15.98±0.47Bb1215.23±0.81Aa11.10±0.94Aa8.80±0.48Aa14.16±0.84Aa12.55±0.46Aa17.07±0.80AaP值生物发酵剂0.560 30.317 00.002 30.000 10.652 70.000 1发酵天数0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 1生物发酵剂×发酵天数0.000 20.259 80.009 90.129 80.053 00.000 1%2.3发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后EE含量变化的影响（见表4）由表4可知，不同发酵剂处理对发酵后6种药渣EE含量存在极显著或显著影响（P0.01或P0.05）。感冒清颗粒CJ组EE含量极显著低于CON组、CM组（P0.01）；通窍鼻炎片CM组EE含量显著高于CON组、CJ组（P0.05）；参茸补肾片CM组EE含量极显著高于其余组（P0.01）；五加参归芪精CM组、CJ组EE含量极显著低于CM+CJ组（P0.01）；清凉含片CJ组EE含量极显著低于CON组、CM组（P0.01）。不同发酵天数对发酵后6种药渣EE含量具有极显著或显著影响（P0.01或P0.05）。感冒清颗粒、益母草颗粒发酵12 d后EE含量极显著高于发酵3 d（P0.01）；通窍鼻炎片发酵3 d后EE含量显著高于其余发酵天数（P0.05）；清凉含片发酵6 d后EE含量极显著低于其余发酵天数（P0.01）；五加参归芪精、参茸补肾片发酵9、12 d后EE含量均极显著低于发酵3、6 d（P0.01）。不同发酵剂处理及不同发酵天数对发酵后6种中药渣EE含量有极显著交互作用（P0.01），其中五加参归芪精发酵、通窍鼻炎片参茸补肾片发酵处理效果较好的组为CM+CJ-3组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.019.T004表4发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后EE含量变化项目感冒清颗粒益母草颗粒五加参归芪精通窍鼻炎片清凉含片参茸补肾片CON-38.49±0.11ABCDbcde1.79±0.25CDEde1.54±0.02ABCDbcde8.34±0.03ABCDabcdef2.06±0.16Bbc8.95±0.14DEFdeCON-68.29±0.26CDEcdef1.72±0.12CDEde1.85±0.02Aa8.71±0.01ABabc2.17±0.10ABbc9.35±0.36BCDbcCON-98.20±0.04CDEdefg1.99±0.10BCDcd1.27±0.02DEgh8.10±0.00BCDdefg2.01±0.05Bc8.59±0.01EFGfghCON-128.83±0.28ABab2.29±0.15ABab1.51±0.02BCDcdef7.85±0.07CDfg2.14±0.07ABbc8.99±0.01CDEcdeCM-38.19±0.09CDEdefg1.50±0.25Ee1.76±0.03ABab8.81±0.53ABab2.13±0.20ABbc9.55±0.27ABbCM-68.65±0.15ABCabc1.78±0.20CDEde1.41±0.20CDEdefg8.53±0.14ABCabcde1.97±0.03Bc9.23±0.04BCDbcdCM-98.57±0.13ABCDabcd1.75±0.16CDEde1.30±0.13DEfgh8.65±0.16ABabcd2.13±0.04ABbc9.24±0.06BCDbcdCM-128.94±0.47Aa2.40±0.17Aa1.17±0.16Eh8.28±0.32ABCDbcdef2.47±0.04Aa9.45±0.17BCbCJ-38.15±0.18CDEefg1.80±0.01CDEde1.67±0.02ABCabc8.58±0.10ABCabcde2.12±0.45ABbc8.71±0.07EFGefgCJ-68.08±0.17DEfg1.75±0.16CDEde1.69±0.01ABCabc8.20±0.26ABCDcdefg1.50±0.20Dd8.91±0.19DEFdefCJ-98.25±0.13CDEdef1.76±0.21CDEde1.30±0.06DEfgh9.02±0.03BCDefg1.95±0.02BCc8.49±0.03FGghCJ-128.03±0.07DEfg2.11±0.19ABCabc1.23±0.04DEgh8.18±0.14ABCDcdefg1.97±0.03Bc8.26±0.14GhCM+CJ-37.82±0.35Eg1.68±0.01DEe1.81±0.38ABa8.83±0.30ABab2.23±0.10ABabc9.93±0.52AaCM+CJ-68.36±0.28BCDEcdef2.28±0.03ABabc1.39±0.03CDEefgh7.63±0.88Dg1.61±0.00CDd9.02±0.12CDEcdeCM+CJ-98.42±0.04ABCDcdef2.10±0.11ABCbc1.66±0.13ABCabc8.56±0.30ABCabcde2.32±0.06ABab9.04±0.03CDEcdeCM+CJ-128.36±0.02BCDEcdef2.24±0.16ABabc1.62±0.03ABCabcd8.92±0.25Aa1.94±0.12BCc8.57±0.05EFGfgh生物发酵剂CON8.45±0.30ABa1.95±0.27ABab1.54±0.22ABab8.25±0.33b2.09±0.11Aab8.97±0.32BcCM8.59±0.35Aa1.86±0.39Bb1.41±0.26Bc8.57±0.34a2.18±0.20Aa9.37±0.20AaCJ8.13±0.15Cb1.86±0.21Bb1.47±0.22Bc8.24±0.25b1.89±0.32Bc8.59±0.27CdCM+CJ8.24±0.32BCb2.07±0.26Aa1.62±0.23Aa8.49±0.69ab2.03±0.30ABb9.14±0.56Bb发酵天数/d38.16±0.30Bc1.69±0.20Cc1.70±0.19Aa8.64±0.33a2.13±0.23Aa9.29±0.57Aa68.34±0.28ABb1.88±0.27Bb1.58±0.22Ab8.27±0.58b1.82±0.30Bb9.13±0.25Aa98.36±0.17ABb1.90±0.20Bb1.38±0.19Bc8.33±0.32b2.10±0.15Aa8.84±0.33Bb128.54±0.45Aa2.26±0.18Aa1.38±0.21Bc8.31±0.45b2.13±0.23Aa8.82±0.47BbP值生物发酵剂0.000 10.005 60.001 60.029 10.000 30.000 1发酵天数0.001 50.000 10.000 10.022 20.000 10.000 1生物发酵剂×发酵天数0.002 30.003 40.000 10.000 40.000 10.000 1%2.4发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后CF含量变化（见表5）由表5可知，不同发酵剂处理对发酵后益母草颗粒、五加参归芪精、参茸补肾片3种药渣CF含量具有极显著影响（P0.01）。益母草颗粒CM组、CM+CJ组CF含量均极显著高于CON组（P0.01）；五加参归芪精CJ组CF含量极显著低于CON组和CM组（P0.01）；参茸补肾片CM+CJ组CF含量极显著低于CON组和CM组（P0.01）。除益母草颗粒外，不同发酵天数对其余5种药渣CF含量有极显著或显著影响（P0.01或P0.05）。五加参归芪精、通窍鼻炎片、参茸补肾片药渣发酵6 d后CF含量均极显著高于其余发酵天数（P0.01）；感冒清颗粒发酵6 d，清凉含片发酵6、12 d时，CF含量均极显著或显著高于发酵3、9 d（P0.01或P0.05）。除通窍鼻炎片外，不同发酵剂处理及不同发酵天数对发酵后剩余5种中药渣CF含量有极显著交互作用（P0.01），但未呈规律性互作效果。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.019.T005表5发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后CF含量变化项目感冒清颗粒益母草颗粒五加参归芪精通窍鼻炎片清凉含片参茸补肾片CON-342.06±2.31ABbcde39.91±1.90Ce55.73±2.99ABab39.68±1.3044.88±1.47ABCbcde35.57±1.92cdCON-643.55±0.50ABabcd47.38±1.64ABabc55.42±1.45ABab47.58±2.6445.59±0.20ABCabcde45.48±1.68aCON-936.92±1.51Cf45.83±2.35ABCabcd53.11±0.22ABCDbcd39.70±0.5244.67±1.35ABCbcde37.27±1.73cdCON-1244.48±3.05ABab43.15±0.43BCcde53.05±0.34ABCDbcd41.87±5.2746.64±1.41ABCabcd36.11±0.11cdeCM-342.20±2.47ABbcde43.00±2.74BCcde54.35±1.49ABCabc39.46±0.6443.75±1.08ABCcde35.07±0.82defCM-646.18±3.02Aa50.00±0.06Aab55.83±0.68ABab48.86±0.4949.78±1.47Aa41.95±1.26bCM-944.50±2.14ABab47.95±5.59ABabc55.36±1.27ABab38.59±0.1043.57±3.03BCcde36.72±1.08cdeCM-1240.97±0.76BCbcde47.66±2.18ABabc51.13±2.31CDde40.79±2.3245.26±0.54ABCbcde37.09±1.41cdCJ-341.97±1.84ABbcde45.42±1.55ABCbcd49.80±0.08De38.00±2.0144.58±0.09ABCbcde35.93±3.59cdefCJ-643.25±0.38ABabcde43.10±1.65BCcde56.31±0.02Aa45.88±0.0843.97±2.77ABCcde39.10±4.01bcCJ-940.51±1.24BCcde42.00±2.86BCde50..05±0.64De39.78±0.6841.55±3.37Ce33.24±0.44efCJ-1240.07±0.20BCdef47.33±5.36ABabc50.76±1.56CDde41.73±2.5848.84±3.04ABab34.77±2.58defCM+CJ-340.05±0.99BCdef50.88±0.87Aa50.01±0.07De40.19±0.3443.04±2.98BCde32.27±0.49fCM+CJ-643.94±2.69ABabc47.58±2.50ABabc55.81±1.61ABab48.77±2.3247.99±4.95ABabc35.55±1.65cdefCM+CJ-939.67±0.93BCef45.35±1.05ABCbcd54.08±1.29ABCabc37.23±0.6848.91±0.07ABab34.33±2.50defCM+CJ-1243.77±2.92ABabcd47.01±2.50ABabcd52.13±3.59BCDcde36.94±0.1146.31±2.80ABCabcd34.83±1.23def生物发酵剂CON41.75±3.5244.07±3.31Cb54.33±1.93Aa42.21±4.2545.45±1.3239.11±4.10AaCM43.46±2.8547.15±3.88ABa54.17±2.32Aa41.93±4.3945.59±3.0337.71±2.85ABaCJ41.45±1.6244.46±3.50BCb51.73±2.87Bb41.35±3.3844.73±3.5635.76±3.40BCbCM+CJ41.86±2.7547.70±2.65Aa53.01±2.87ABab40.78±5.1046.56±3.6034.24±1.89Cb发酵天数/d341.57±1.93Bbc44.80±4.4952.48±3.08Bb39.33±1.36Bb44.06±1.67b35.21±2.68Bb644.23±2.12Aa47.01±2.9855.84±1.02Aa47.77±1.97Aa46.83±3.41a40.52±4.33Aa940.40±3.12Bc45.28±3.6553.15±2.20Bb38.83±1.18Bb44.67±3.46b35.39±2.22Bb1242.32±2.66ABb46.29±3.3051.77±2.15Bb40.33±3.41Bb46.76±2.32a35.70±1.69BbP值生物发酵剂0.068 30.002 60.001 10.294 60.314 70.000 1发酵天数0.000 30.186 90.000 10.000 10.010 40.000 1生物发酵剂×发酵天数0.002 90.002 30.002 50.055 80.009 10.031 0%2.5发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后NDF含量变化（见表6）由表6可知，不同发酵剂处理对发酵后6种药渣NDF含量具有极显著影响（P0.01）。除感冒清颗粒、清凉含片外，其余4种药渣CM组、CJ组和CM+CJ组NDF含量极显著低于CON组（P0.01）；感冒清颗粒CM+CJ组NDF含量极显著低于CON组（P0.01）；清凉含片CM+CJ组NDF含量极显著低于CON组和CJ组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.019.T006表6发酵天数和发酵添加剂互作对中药渣发酵后NDF含量变化项目感冒清颗粒益母草颗粒五加参归芪精通窍鼻炎片清凉含片参茸补肾片CON-369.34±2.6471.25±2.46ABCabc78.03±1.02ABb66.88±0.06ABa75.11±1.21a71.29±1.32AaCON-659.30±4.3169.21±0.06BCDEFcde75.36±0.12DEFde59.75±2.86DEFGefg58.79±0.13e59.87±3.14DEFeCON-968.30±0.0172.91±0.40Aa77.54±0.04BCb68.45±0.13Aa73.46±1.19a64.62±1.00BCbcCON-1265.15±1.2767.88±0.57CDEFGHdefg77.52±0.83BCb61.77±2.38CDEbcdef71.40±4.29abc62.96±0.22CDEcdCM-366.10±0.0768.23±3.11CDEFGdef74.87±1.85EFdef63.96±0.37BCb72.84±1.78ab63.40±0.85CDcdCM-659.61±2.3264.42±0.77HIhi74.18±0.21EFef57.04±1.16FGHgh60.26±0.63e56.85±0.69FGfCM-964.11±1.2865.22±0.52GHIghi76.06±0.22CDEcd60.89±1.68CDEcdef66.27±1.57d60.57±0.70DEdeCM-1264.44±2.0066.28±1.06FGHfgh74.73±0.56EFdef62.76±0.38CDEbcd68.87±0.20bcd59.50±0.54EFeCJ-366.63±1.8870.17±0.60ABCDEbcd75.38±0.81DEFde62.59±3.32CDEbcde74.12±0.24a67.20±1.35BbCJ-660.32±3.6862.59±0.58Ii72.20±0.77Ggh54.62±0.88Hh62.28±3.97e53.46±0.41GgCJ-965.96±2.3472.56±2.52ABab79.74±0.16Aa63.54±0.49BCDbc69.07±4.60bcd64.62±2.85BCbcCJ-1262.00±2.4866.77±0.20EFGHefgh78.03±0.79ABb63.69±0.83BCDbc71.66±1.69abc62.31±1.11CDEcdeCM+CJ-363.50±0.1970.57±0.35ABCDabcd73.47±0.11FGfg59.03±1.77EFGfg68.07±0.34cd61.65±1.13CDEdeCM+CJ-658.61±0.4165.22±1.27GHIghi72.02±1.21Gh56.12±0.81GHh61.48±3.01e53.61±0.52GgCM+CJ-966.57±0.2367.16±2.66DEFGHefgh77.11±0.78BCDbc63.42±1.83BCDbcd69.03±2.48bcd61.26±2.38CDEdeCM+CJ-1259.19±0.0764.86±0.40GHJhi73.60±0.11FGf60.48±1.22CDEFdef66.77±0.22d60.01±1.92DEFe生物发酵剂CON65.52±4.65Aa70.32±2.28Aa77.11±1.22Aa64.21±4.05Aa69.69±6.99Aa64.69±4.62AaCM63.57±2.88ABb66.04±2.08Cc74.96±1.10Bc61.16±2.88Bb67.06±4.88ABb60.08±2.52CcCJ63.73±3.58ABb68.02±4.08Bb76.34±3.03Ab61.11±4.22Bb69.28±5.34Aa61.90±5.59BbCM+CJ61.97±3.41Bb66.95±2.68BCbc74.05±2.05Cd59.76±3.02Bc66.34±3.47Bb59.13±3.67Cc发酵天数/d366.39±2.57Aa70.05±2.08Aa75.44±1.98Bb63.11±3.36ABab72.53±2.97Aa65.89±4.00Aa659.46±2.69Cc65.36±2.62Bb73.44±1.58Cc56.88±2.41Cc60.70±2.54Cc55.95±3.09Cd966.24±1.93Aa69.46±3.84Aa77.62±1.44Aa64.07±3.06Aa69.46±3.59Bb62.77±2.57Bb1262.70±2.85Bb66.45±1.26Bb75.97±2.01Bb62.18±1.73Bb69.67±2.87Bb61.20±1.82BcP值生物发酵剂0.002 20.000 10.000 10.000 10.001 80.000 1发酵天数0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 1生物发酵剂×发酵天数0.084 60.000 10.000 10.000 20.010 70.000 4%不同发酵天数对发酵后感冒清颗粒等6种药渣NDF含量具有极显著影响（P0.01）。除益母草颗粒外，其他5种药渣发酵6 d后，NDF含量均极显著低于其余发酵天数（P0.01），益母草颗粒发酵6、12 d后NDF含量极显著低于3 d和9 d（P0.01）。除感冒清颗粒外，不同发酵剂处理及不同发酵天数对发酵后其余5种药渣NDF含量有极显著或显著交互作用（P0.01或P0.05）。除清凉含片外，其余药渣发酵效果最好的处理组均为CJ-6组。2.6发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后ADF含量变化（见表7）由表7可知，除清凉含片外，不同发酵剂处理对发酵后其余5种ADF含量有极显著影响（P0.01）。感冒清颗粒、通窍鼻炎片药渣CM组ADF含量极显著高于其余3组（P0.01），益母草颗粒和五加参归芪精CJ组、CM+CJ组ADF含量极显著低于CON组和CM组（P0.01）。不同发酵时间处理对6种药渣发酵后ADF含量具有极显著影响（P0.01）。感冒清颗粒、五加参归芪精、清凉含片、参茸补肾片发酵6 d后ADF含量极显著低于发酵其余发酵天数（P0.01）；益母草颗粒发酵6、12 d后ADF含量极显著低于发酵3、9 d（P0.01）；通窍鼻炎片发酵9 d后极显著高于发酵其余发酵天数（P0.01）。不同发酵剂与不同发酵天数互作处理对发酵后6种种药渣ADF含量具有极显著或显著交互作用（P0.01或P0.05）。益母草颗粒、五加参归芪精和参茸补肾片药渣发酵效果最优组为CJ-6组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.019.T007表7发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后ADF含量变化项目感冒清颗粒益母草颗粒五加参归芪精通窍鼻炎片清凉含片参茸补肾片CON-341.63±0.48bc46.74±0.88BCDbcde53.89±0.55Bbc38.17±0.85DEdefg50.19±1.05ab37.16±1.32defCON-637.67±1.32f46.34±0.34BCDdef51.59±0.08Ed37.76±0.06DEefg42.15±0.27f34.27±0.38hCON-941.57±0.15bc48.63±0.58Aa58.35±0.02Aa45.57±0.53Aa51.13±0.45a41.77±0.31bCON-1241.05±0.24bcd45.47±0.11CDdefg53.45±1.05BCDc38.31±1.22DEdefg49.47±1.70abc36.78±0.84efgCM-343.31±0.32a48.00±1.88ABab54.01±1.39Bbc39.98±1.59CDd51.12±1.00a38.62±1.21cdCM-641.58±1.09bc45.29±0.21CDEefg53.61±0.48BCbc38.97±0.65DEde45.07±0.08de37.34±0.18cdefCM-943.76±1.12a46.88±0.34ABCbcd58.66±0.09Aa44.83±1.14Aab49.36±0.75abc42.56±0.80abCM-1243.23±1.39a46.59±0.35BCDbcdef54.63±0.33Bb43.03±0.57ABbc48.95±0.67abc38.12±0.65cdeCJ-339.78±0.89de46.05±0.18BCDdefg51.67±0.36Ed36.49±0.87Eg48.97±0.28abc37.25±1.34cdefCJ-638.91±0.87ef43.57±0.80Eh49.82±0.75Fe37.48±0.83DEefg44.80±1.14e31.71±0.25iCJ-940.27±1.03cde47.95±1.47ABabc59.11±0.20Aa41.92±0.45BCc47.17±2.31d40.94±2.12bCJ-1238.69±1.59ef44.83±0.37DEgh53.48±0.61BCDc38.16±0.35DEdefg49.06±1.35abc36.07±0.14fgCM+CJ-341.28±0.51bcd46.54±0.50BCDcdef52.16±0.14CDEf36.73±2.43Efg48.79±0.23abc39.02±0.49cCM+CJ-639.98±0.10cde45.87±0.16CDdefg51.55±0.83Ef37.86±0.42DEefg45.66±2.32de35.14±0.02ghCM+CJ-942.61±0.05ab45.61±1.15CDdefg58.18±0.59Aa45.55±2.09Aa50.29±1.81ab43.55±1.62aCM+CJ-1239.99±0.17cde45.20±0.07CDEfg52.03±0.55DEf38.72±0.45DEdef48.34±0.60bc38.82±0.57cd生物发酵剂CON40.48±1.81Bb46.80±1.30Aa54.32±2.64Bb39.96±3.46Bb48.23±3.8237.50±2.91BbCM42.97±1.25Aa46.69±1.31Aa55.23±2.20Aa41.70±2.61Aa48.62±2.3939.16±2.21AaCJ39.41±1.17Cc45.60±1.84Bb53.52±3.66Cc38.51±2.22Cc47.50±2.2036.49±3.61BcCM+CJ40.97±1.16Bb45.81±0.74Bb53.48±2.89Cc39.72±3.86BCb48.27±2.1639.13±3.21Aa发酵天数/d341.50±1.40ABa46.83±1.18Aa52.93±1.26Bb37.84±1.98Cc49.77±1.18Aa38.01±1.30Bb639.54±1.71Cc45.27±1.16Bb51.64±1.50Cc38.02±0.76Cc44.42±1.79Bb34.61±2.12Cc942.05±1.49Aa47.27±1.46Aa58.57±0.46Aa44.47±1.89Aa49.49±2.02Aa42.21±1.56Aa1240.74±1.96Bb45.52±0.72Bb53.40±1.12Bb39.55±2.20Bb48.96±1.09Aa37.45±1.24BbP值生物发酵剂0.000 10.000 70.000 10.000 10.168 00.000 1发酵天数0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 1生物发酵剂×发酵天数0.027 30.000 30.000 10.002 70.001 90.029 4%2.7发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后Ash含量变化（见表8）由表8可知，除参茸补肾片外，不同发酵剂处理对发酵后其余5种药渣Ash含量具有极显著或显著影响（P0.01或P0.05）。感冒清颗粒、益母草颗粒CJ组Ash含量极显著低于其余组（P0.01）；五加参归芪精CJ组、CM+CJ组Ash含量极显著低于CON组和CM组（P0.01）；通窍鼻炎片CM组Ash含量显著高于CON组（P0.05）；清凉含片CJ组Ash含量显著高于CON组（P0.05）。除参茸补肾片外，不同发酵天数对发酵后其余5种药渣Ash含量具有极显著影响（P0.01）。感冒清颗粒、五加参归芪精发酵3 d后Ash含量极显著低于发酵其他天数（P0.01）；益母草颗粒发酵3、12 d后Ash含量极显著低于发酵6 d（P0.01）；通窍鼻炎片发酵9 d后Ash含量极显著高于其他发酵天数（P0.01）；清凉含片发酵6、12 d后Ash含量极显著低于发酵3 d（P0.01）。不同发酵剂处理及不同发酵天数互作处理对发酵后6种药渣Ash含量有极显著或显著交互作用（P0.01或P0.05）通窍鼻炎片、益母草颗粒、清凉含片药渣发酵后效果最优组为CJ-12组；参茸补肾片药渣发酵后效果最优组为CM+CJ-6组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.019.T008表8发酵天数和发酵剂互作对中药渣发酵后Ash含量变化项目感冒清颗粒益母草颗粒五加参归芪精通窍鼻炎片清凉含片参茸补肾片CON-38.72±0.07BCDcde7.05±0.11bc5.39±0.02ABCcde5.00±0.04BCbcd5.43±0.09Bc6.59±0.50cCON-68.81±0.04BCDcd7.40±0.03a5.84±0.01Aab4.98±0.01BCbcd5.69±0.04Bbc7.23±0.01bcCON-99.03±0.12Bbc7.26±0.10ab5.49±0.15ABCbcd4.78±0.41BCcd5.83±0.10Bbc7.08±0.01bcCON-128.93±0.20BCbc7.28±0.21ab5.74±0.24ABabc4.66±0.53Cd5.78±0.12Bbc6.96±0.02bcCM-38.71±0.02BCDcde6.99±0.05bc5.24±0.06BCDde4.86±0.01BCbcd5.41±0.11Bc7.46±0.54bcCM-68.97±0.01BCbc7.19±0.17ab5.43±0.16ABCcde4.76±0.35BCd5.72±0.06Bbc7.34±0.03bcCM-98.86±0.44BCDbc7.28±0.04ab5.72±0.07ABabc5.76±0.39Aa5.61±0.22Bbc7.28±0.17bcCM-129.28±0.05Bb7.07±0.28bc5.90±0.17Aa5.21±0.02BCbc5.78±0.12Bbc7.15±0.25bcCJ-38.30±0.03DEef6.50±0.01e4.78±0.02Df4.75±0.02BCd5.56±1.16Aa8.43±1.61aCJ-67.99±0.38Ef6.86±0.03cd5.08±0.06CDef4.91±0.02BCbcd5.47±0.00Bc7.14±0.29bcCJ-98.69±0.03BCDcde6.62±0.26de4.83±0.47Df5.28±0.02ABb5.70±0.07Bbc7.06±0.12bcCJ-128.91±0.02BCDbc6.21±0.37f5.49±0.09ABCbcd4.68±0.26Cd5.36±0.28Bc7.11±0.02bcCM+CJ-38.36±0.08CDEdef7.25±0.08ab4.79±0.01Df4.78±0.02BCcd6.29±0.79Bb7.01±0.02bcCM+CJ-68.67±0.08BCDcde7.28±0.07ab5.21±0.01BCDde4.85±0.16BCbcd5.74±0.07Bbc6.69±0.43cCM+CJ-99.00±0.08Bbc7.24±0.00ab5.22±0.01BCDde5.07±0.11BCbcd5.99±0.02Bbc7.79±0.43abCM+CJ-129.84±0.71Aa7.01±0.05bc4.82±0.59Df5.21±0.01BCbc5.57±0.04Bbc7.16±0.03bc生物发酵剂CON8.87±0.16Aa7.25±0.17Aa5.61±0.23Aa4.86±0.32b5.68±0.18b6.96±0.33CM8.96±0.29Aa7.13±0.18Aa5.57±0.29Aa5.15±0.47a5.63±0.19b7.31±0.29CJ8.47±0.41Bb6.54±0.31Bb5.05±0.36Bb4.90±0.27b6.02±1.06a7.44±0.92CM+CJ8.97±0.65Aa7.20±0.12Aa5.01±0.33Bb4.98±0.20ab5.90±0.44ab7.16±0.49发酵天数3 d8.52±0.21Dd6.95±0.30BCb5.05±0.28Bb4.85±0.10Bb6.17±1.09Aa7.37±1.046 d8.61±0.42Cc7.18±0.23Aa5.39±0.31Aa4.87±0.18Bb5.66±0.12Bb7.10±0.349 d8.89±0.24Bb7.10±0.31ABa5.31±0.40Aa5.22±0.45Aa5.78±0.18ABb7.30±0.3712 d9.24±0.50Aa6.89±0.48Cb5.49±0.51Aa4.94±0.38Bb5.63±0.23Bb7.10±0.13P值生物发酵剂0.000 10.000 10.000 10.019 40.044 30.113 0发酵天数0.000 10.000 20.000 10.001 00.003 20.388 8生物发酵剂×发酵天数0.001 70.041 50.005 20.001 00.000 10.012 7%3讨论3.1发酵剂和发酵天数互作对中药渣DM含量的影响水分是发酵成功与否的关键因素，决定了发酵品质[15]。本试验中，药渣发酵后含水量在50%左右，与孙合美等[16]、董改香等[17]和兰时乐等[18]研究结果一致，说明发酵环境适宜，发酵效果可信。4组发酵剂处理间具有明显差异，添加生物发酵剂后DM含量均显著低于CON组，说明复合酶、菌粉添加后发酵效果更优，药渣的发酵品质和营养价值得到提升。微生物对发酵底物的分解利用和微生物代谢活动均会影响试验结果。发酵天数对结果具有明显影响。发酵3 d后DM含量略高于其他3组发酵时间，表明较短的发酵时间能更好地保存药渣内残留的营养价值，时间越长微生物消耗底物中的营养物质越多，与尹丽等[19]研究结果一致。3.2发酵剂和发酵天数互作对中药渣CP含量的影响粗蛋白质是饲料中重要的营养物质。发酵处理可提高发酵底物中粗蛋白质含量[4]。本试验中，6种药渣采用不同发酵剂发酵后CP含量高低变化为CM组CM+CJ组CON组CJ组，发酵12 d时CP含量高于其他发酵天数，与王涛等[20]和李英英等[21]研究结果一致，表明采用酶制剂或酶菌复合制剂发酵药渣，适当延长发酵时间有利于发酵剂与发酵底物的充分作用，释放出的酶类物质会将大分子物质降解为小分子，为微生物菌群活动提供糖原，加快菌体蛋白形成，进而提高饲料中的蛋白含量。3.3发酵剂和发酵天数互作对中药渣EE含量的影响不同生物处理条件下感冒清颗粒、清凉含片、参茸补肾片的CJ组EE含量远低于CON组，益母草颗粒、五加参归芪精药渣的CM组、CJ组EE含量最低，与Rizal等[22]的结果相符合。原因可能是微生物发酵过程中产生脂肪酶所致，利用脂肪提供细胞生长的能量。生物发酵剂可使发酵底料中游离脂肪酸大量增加[23]，提高了脂肪含量。随发酵天数延长，感冒清颗粒、益母草颗粒药渣的EE含量明显增加；但五加参归芪精、通窍鼻炎片、清凉含片药渣的EE含量呈下降趋势，可能与药渣组成、微生物对发酵底物的分解利用不充分有关系。3.4发酵剂和发酵天数互作对中药渣纤维含量的影响生物发酵可直接或间接通过物理或化学的作用破坏饲料原料结构[24-25]，降低饲料中纤维和抗营养因子含量[26-27]，改善药渣的适口性，提升药渣营养价值及利用效率。不同发酵处理下，益母草颗粒CM组、CJ组、CM+CJ组，五加参归芪精CJ组，参茸补肾片CJ组、CM+CJ组的CF含量分别低于各自CON组；感冒清颗粒、参茸补肾片的ADF含量由高到低为CM组≥CM+CJ组≥CON组≥CJ组，原因可能与药渣组成、生物发酵剂等具有直接关系。随着发酵天数延长，除益母草颗粒外，其余5种药渣的CF含量呈先降低后升高的趋势，12 d时达到发酵3 d时的水平；6种药渣的NDF含量呈先降低后回升或逐渐降低的趋势，但均在发酵6 d时达到含量最低；6种药渣的ADF含量呈波动式下降变化，但均具有在发酵6 d时达到最低值的相似点。因此，综合考量能耗等经济成本及药渣营养价值变化，对于CF来说6种药渣发酵3 d时的发酵效果最优；6种药渣发酵6 d时NDF和ADF的发酵效果最优。3.5发酵剂和发酵天数互作对中药渣Ash含量的影响不同发酵处理下，感冒清颗粒、益母草颗粒、通窍鼻炎片、清凉含片药渣CM组、CM+CJ组Ash含量与CON组无差异；五加参归芪精CM组Ash含量与CON组无差异，与岳彩娟等[28]报道结果一致，表明添加酶制剂对药渣在Ash方面的饲用价值无明显改善。邱余杨等[29]研究发现，菌草饲料添加菌群后Ash含量显著降低。本试验中，6种药渣CJ组的Ash含量均显著低于CON组和其他生物发酵处理组，与上述报道一致，说明使用微生物发酵可优化药渣的成分且对药渣质量的提升具有显著作用。随着发酵天数延长，感冒清颗粒、五加参归芪精药渣的Ash含量逐渐升高，可能是由于发酵过程中部分有机物被微生物生长所利用而造成干物质损失，使其含量提高，与Chi等[30]和付亭亭[31]的研究结果一致。益母草颗粒、通窍鼻炎片药渣的Ash含量呈先降低后升高的趋势，在12 d时达到3 d时的水平，综合考量认为6种药渣发酵3 d时的效果最优。4结论本试验条件下，适宜的发酵剂选择为复合酶粉与复合菌粉菌混合组（CM+CJ），适宜的发酵时间为3 d，此时发酵后药渣的营养价值得到优化。