生长期是肉牛养殖过程中的关键时期，此阶段肉牛的机体健康及生长性能会影响养殖周期的经济效益及生产效益。因此，在此阶段内不仅要保证肉牛生长所需的各种营养物质，还要保证机体的免疫力及抗应激能力，才能够保证畜产品的品质[1]。酵母培养物是一种由酵母菌在特定培养基中发酵后形成的微生态产品，含有丰富的寡糖、有机酸、消化酶、代谢产物、维生素（尤其是B族维生素、维生素E）及蛋白质等营养物质和活性物质[2-4]。研究发现，酵母培养物可改善日粮的适口性，提高日粮的利用率[5]。动物养殖生产中应用酵母培养物，可通过调节动物肠道菌群结构改善肠道健康，增强机体免疫力及抗氧化能力，提高生产性能及饲料转化率，还能够预防疾病的发生[6-8]。目前，酵母培养物在动物生产中的应用研究逐渐增多，但缺乏在肉牛生产中的应用研究，尤其是肉牛机体免疫力方面的研究。本试验探究全混合日粮中添加不同剂量的酵母培养物对西门塔尔肉牛生长性能、瘤胃发酵参数、免疫力及养分表观消化率的影响，为酵母培养物在肉牛生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1酵母培养物酵母培养物购自河北纽崔特生物科技有限公司，其中粗蛋白含量18%，粗脂肪含量0.5%，粗纤维含量30%，粗灰分含量10%，水分含量10%。1.2试验设计试验选择60头体重相近、无病健康的肉牛，按照单因素试验设计均分为4组，每组15头肉牛，每组15个重复，每个重复1头牛。各组肉牛分别饲喂含有0（对照组）、20（1组）、40（2组）、80 g/(头·d)（3组）酵母培养物的全混合日粮，试验期60 d。全混合日粮参考我国《肉牛饲养标准》（NY/T 815—2004）配制，精粗比为5∶5，其原料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.004.T001表1全混合日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00全株玉米青贮35.00净能/(MJ/kg)6.15秸秆15.00粗蛋白/%12.37玉米26.67干物质/%88.74豆粕10.00粗灰分/%8.52麦麸5.00中性洗涤纤维/%35.84菜籽粕4.00酸性洗涤纤维/%19.47糖蜜1.50钙/%0.72磷酸氢钙0.18磷/%0.52小苏打0.35食盐0.30预混料2.00注：1.预混料由农标普瑞纳（廊坊）饲料有限公司提供。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验开始前对养殖场所和养殖设备进行消毒。试验肉牛饲养在同一养殖舍内，分栏拴养。每日7：30、17：30饲喂，肉牛自由采食和饮水。免疫及驱虫按照日常规范进行，每日打扫牛舍卫生。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始及结束，肉牛晨饲前空腹称重，统计各组肉牛试验期间的采食量，计算平均日增重、平均日采食量、料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验时间(1)平均日采食量=总采食量/(试验时间×试验牛头数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2瘤胃发酵参数试验最后1 d，通过口腔采集肉牛的瘤胃液，检测瘤胃发酵参数。pH值采用pH计测定；参考文献[9]测定氨态氮（NH3-N）含量；参考文献[10]测定微生物蛋白（MCP）含量；参考文献[11]测定总挥发性脂肪酸（VFA）、乙酸（AA）、丙酸（BA）、丁酸（PA）含量，计算乙丙比（AA/BA）。1.4.3免疫指标试验最后1 d晨饲前，尾静脉采集肉牛血液，静置3~4 h后，4 000 r/min离心6 min，取上层血清用于检测免疫球蛋白及细胞因子指标。免疫球蛋白及细胞因子指标主要包括免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等，检测试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，检测操作按照试剂盒说明书进行。1.4.4养分表观消化率试验第57~59 d进行肉牛的消化试验，采用酸不溶灰分（AIA）法测定养分表观消化率。连续采集3 d的饲料样品及肉牛样品，饲料样品每次采集200 g；每组选择5头肉牛采集其粪便，每次采集100 g，将3 d对应的粪便混匀，加入10 mL稀硫酸进行固氮，于4 ℃冰箱保存。根据张丽英[12]的试验方法检测饲料和粪便中的干物质、粗蛋白、粗脂肪、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、钙、磷等养分的消化率。某营养物质表观消化率＝100－100×(日粮中AIA含量/粪样中AIA含量)×(粪样中该营养物质含量/日粮中该营养物质含量)(4)1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 28进行单因素方差分析，LSD法进行组间多重比较，结果以平均值和总标准误（SEM）表示，P0.05表示数据差异显著。2结果与分析2.1全混合日粮添加酵母培养物对肉牛生长性能的影响（见表2）由表2可知，2组和3组肉牛的平均日增重比对照组显著提高了20.93%、25.58%（P0.05）；料重比比对照组降低了10.45%、11.85%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.004.T002表2全混合日粮添加酵母培养物对肉牛生长性能的影响项目初重/(kg/头)末重/(kg/头)平均日增重/[kg/(头·d)]平均日采食量/[kg/(头·d)]料重比对照组105.50134.300.43b3.387.85a1组106.12137.320.47ab3.487.41ab2组105.15139.950.52a3.667.03b3组106.06142.060.54a3.746.92bSEM3.194.010.070.250.41P值0.8290.0930.0430.6280.032注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2全混合日粮添加酵母培养物对肉牛瘤胃发酵参数的影响（见表3）由表3可知，2组和3组肉牛瘤胃MCP含量比对照组显著提高了56.92%、42.31%（P0.05）；2组和3组肉牛瘤胃NH3-N含量比对照组减少了11.29%、9.83%（P0.05）；2组和3组肉牛瘤胃BA含量比对照组显著提高了18.58%、19.07%（P0.05）；2组和3组肉牛瘤胃AA/BA比对照组降低了13.08%、13.08%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.004.T003表3全混合日粮添加酵母培养物对肉牛瘤胃发酵参数的影响项目pH值MCP/(g/L)NH3-N/(mg/L)AA/(mmol/L)BA/(mmol/L)PA/(mmol/L)VFA/(mmol/L)AA/BA对照组6.481.30b75.30a45.6512.43b6.9565.033.67a1组6.451.57ab70.40ab46.2713.55ab6.7566.573.41a2组6.502.04a66.80b46.9614.74a6.6068.33.19b3组6.461.85a67.90ab47.3114.80a6.6268.733.19bSEM0.370.190.412.061.050.314.080.11P值0.6180.0290.0410.0840.0240.4170.0940.0462.3全混合日粮添加酵母培养物对肉牛免疫指标的影响2.3.1全混合日粮添加酵母培养物对肉牛免疫球蛋白含量的影响（见表4）由表4可知，2组和3组肉牛血清IgA含量比对照组提高了39.19%、31.08%（P0.05）；IgG含量比对照组显著提高了16.69%、15.18%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.004.T004表4全混合日粮添加酵母培养物对肉牛免疫指标的影响项目IgAIgMIgG对照组0.74b2.187.31b1组0.89ab2.457.92ab2组1.03a2.628.53a3组0.97a2.538.42aSEM0.080.140.46P值0.0390.4720.048g/L2.3.2全混合日粮添加酵母培养物对肉牛免疫细胞因子含量的影响（见表5）由表5可知，2组和3组肉牛的血清IL-1含量显著降低了23.76%、14.59%（P0.05）；2组肉牛血清IL-4含量比对照组提高了34.69%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.004.T005表5全混合日粮添加酵母培养物对肉牛免疫细胞因子含量的影响项目IL-1IL-2IL-4IL-6IL-10TNF-α对照组135.32a118.3446.32b83.18164.28326.451组125.06ab125.0450.58ab81.76175.14318.742组103.17b131.3662.39a80.58186.09314.053组116.58b127.5253.37ab79.94176.59306.82SEM5.064.422.954.056.9414.39P值0.0410.1530.0380.1830.0880.418ng/L2.4全混合日粮添加酵母培养物对肉牛养分表观消化率的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，2组和3组肉牛对干物质的消化率显著提高7.51%、8.22%（P0.05）；所有酵母培养物组粗蛋白的消化率显著提高5.01%、6.21%、9.51%（P0.05）；2组和3组肉牛对中性洗涤纤维的消化率提高了5.93%、7.38%（P0.05）；2组和3组肉牛对酸性洗涤纤维的消化率提高了9.58%、8.53%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.004.T006表6全混合日粮添加酵母培养物对肉牛养分表观消化率的影响项目干物质粗蛋白粗脂肪中性洗涤纤维酸性洗涤纤维钙磷对照组64.87b56.65b72.3152.32b50.53b48.4755.321组67.63ab59.49a72.8353.85ab52.05ab49.0556.072组69.74a60.17a73.5255.42a55.37a49.6256.373组70.20a62.04a74.2756.18a54.84a50.4156.21SEM4.133.845.053.581.953.044.05P值0.0180.0140.2410.0460.0280.5270.419%3讨论3.1全混合日粮添加酵母培养物对肉牛生长性能的影响生长育肥阶段的饲养管理对肉牛的生产效益及养殖经济效益尤为重要，此阶段需要保证肉牛的营养水平及机体健康。本研究结果显示，在肉牛全混合日粮中添加40、80 g/(头·d)的酵母培养物，可使肉牛的平均日增重显著提高20.93%、25.58%，料重比显著降低10.45%、11.85%，表明酵母培养物改善了肉牛机体对日粮营养物质的消化吸收利用能力，提高了饲料报酬。潘锋等[13]发现，添加30 g/d的酵母培养提高了肉牛机体对干物质、中性洗涤纤维及酸性洗涤纤维的消化率，改变了肠道中微生物菌群的组成，提高了对日粮中纤维降解的能力，进而提高了采食量。刘镜等[14]研究发现，在日粮中添加4%的酵母培养物提高了关岭犊牛的平均日增重、体斜长、胸围等生长性能数据，并降低了犊牛的腹泻率。李俊朋等[15]发现，添加150 g/(头·d)的酵母培养物可使红牛平均日增重显著提高，料重比显著降低，并改善了屠宰性及肉品质。上述研究结果均表明，适量的酵母培养物可改善肉牛的生长性能，主要是由于酵母培养物中富含大量的蛋白质、维生素、氨基酸等营养物质利于机体的消化吸收，且酵母培养物中的有机酸、消化酶等活性物质可调节肠道菌群，促进纤维降解，刺激消化酶分解营养物质并促进机体吸收，进而提高反刍动物的生长性能[16-17]。3.2全混合日粮添加酵母培养物对肉牛瘤胃发酵参数的影响反刍动物瘤胃的内环境稳态对于生长期的机体健康至关重要，其中瘤胃pH值、NH3-N、MCP及VFA含量是主要的评价瘤胃健康的指标。正常瘤胃内环境的pH值在5.5~7.5，本试验中各组肉牛瘤胃内环境pH值在6.5左右[18]，均在正常值范围内，表明酵母培养物对肉牛瘤胃pH值无负面影响。反刍动物瘤胃内的NH3-N和MCP含量可以反映机体对氮的利用程度，瘤胃内的微生物可将氨态氮转化合成菌体蛋白，供反刍动物机体利用[19]。本试验中，在肉牛全混合日粮中添加40、80 g/(头·d)的酵母培养物，瘤胃MCP含量比对照组显著提高了56.92%、42.31%，NH3-N含量比对照组减少11.29%、9.83%，表明酵母培养物可促进肉牛机体对瘤胃内NH3-N的利用率，促进氮的代谢。在奶牛生产中使用活性干酵母可提高瘤胃内MCP浓度及VFA浓度[20]；在湖羊生产中使用适量酵母培养物也能够显著改善瘤胃内环境，促进瘤胃健康[21]。反刍动物瘤胃内的挥发性脂肪酸可为机体提供70%的能量和碳源[22-23]。本研究中，40、80 g/(头·d)的酵母培养物使肉牛瘤胃PA含量比对照组显著提高了18.58%、19.07%，AA/PA比对照组降低13.08%、13.08%，表明酵母培养物改变了肉牛瘤胃发酵类型，促进了瘤胃健康。穆天龙等[24]发现，添加酵母培养物提高了肉牛瘤胃中的AA含量。本研究结果中肉牛瘤胃也出现了AA浓度提高的趋势。蔡大亮等[5]研究发现，在湖羊生产中添加10 g/(头·d)的酵母培养物提高了瘤胃内VFA浓度。上述研究均表明，适量的酵母培养物可改善反刍动物瘤胃内环境，可能是因为酵母培养物中富含大量的有益菌，动物采食后可改善胃肠道内的菌群结构，使有益菌大量定植，抑制有害菌的繁殖，促进胃肠道健康。3.3全混合日粮添加酵母培养物对肉牛免疫功能的影响动物机体内的免疫球蛋白及细胞因子含量可反映机体的免疫能力，当机体处于应激状态或炎症状态，会刺激机体分泌免疫球蛋白及抗炎因子，抵抗病原微生物对机体的危害。本研究中，添加40、80 g/(头·d)的酵母培养物使肉牛血清中IgA含量比对照组提高39.19%、31.08%；IgG含量比对照组显著提高16.69%、15.18%；血清IL-1含量显著降低了23.76%、14.59%；40g/(头·d)的酵母培养物使肉牛血清IL-4含量比对照组提高了34.69%，表明适量的酵母培养物可提高肉牛机体的细胞免疫功能及体液免疫功能。陈作栋等[25]研究发现，在生长期锦江黄牛生产中添加30 g/(d·头)酵母培养物可显著提高血清中IgA含量，且IgM和IgG含量也有提高的趋势。李海滨等[26]研究表明，在崂山奶山羊日粮中添加10、25、40 g/(只·d)酵母培养物可以显著提高血清IgM含量，也提高了血清超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活性。任健存等[27]研究发现，在关山奶山羊生产中使用15 g/(d·头)的酵母培养物可有效提高血清IgA和IgM的含量。上述研究结果与本研究结果类似，表明酵母培养物提高反刍动物机体的免疫力主要是由于其可为瘤胃内的菌群提供营养底物，改变瘤胃内环境，促进瘤胃健康，提高乳酸菌及双歧杆菌等有益菌的增殖，增强机体的抗病力及抗应激能力[28]。3.4全混合日粮添加酵母培养物对肉牛养分表观消化率的影响动物对日粮中营养成分的消化率可反映机体对日粮的利用率及生长性能。本试验中，40、80 g/(头·d)酵母培养物组肉牛对干物质的消化率显著提高了7.51%、8.22%，中性洗涤纤维的消化率提高了5.93%、7.38%，酸性洗涤纤维的消化率提高了9.58%、8.53%；所有酵母培养物组肉牛对粗蛋白的消化率显著提高5.01%、6.21%、9.51%，表明适量的酵母培养物可以提高肉牛机体对日粮养分的消化吸收能力。Paryad等[29]在绵羊生产中使用酵母培养物也得到类似效果。穆天龙等[24]研究发现，适量的酵母培养物可提高肉牛对日粮中粗蛋白、纤维的消化率，且酵母培养物适宜添加量为150 g/(头·d)。肉牛的瘤胃内含有大量微生物，当肉牛采食酵母培养物后，可为瘤胃内的微生物提供营养，并消耗瘤胃的氧气，提高瘤胃内消化酶活性，促进瘤胃内微生物对纤维的降解，提高机体对纤维的消化率[30-31]。4结论本试验结果表明，在肉牛生产中使用适量的酵母培养物可提高肉牛的生长性能，改善瘤胃发酵功能，增强机体的免疫力，提高机体对养分的消化率。综合养殖成本考虑，酵母培养物的最适添加水平为40g/(头·d)。