坏死性肠炎是由产气荚膜梭菌感染引起的一种禽类肠道疾病，可引起肠道绒毛损伤，肠黏膜出血、水肿，破坏紧密连接，从而增加肠道通透性[1]。近年来，产气荚膜梭菌引起的坏死性肠炎发病率逐渐上升[2]。益生菌可以降低病原菌在肠道的定植率，改善肠道健康[3]。乳酸杆菌和芽孢杆菌是肉鸡肠道的主要有益菌，已在家禽生产中广泛使用。乳酸杆菌产生的乳酸和短链脂肪酸可以促进肠道上皮细胞和免疫细胞增殖，保护机体肠道屏障功能。研究发现，日粮中添加乳酸菌可以降低坏死性肠炎肉鸡的死亡率[4-5]。芽孢杆菌通过产生抗菌肽，在体外具有抑制产气荚膜梭菌的作用[6]。枯草芽孢杆菌能够改善产气荚膜梭菌感染肉鸡的生长性能[7]。但单一的益生菌作用有限，将2种或2种以上不具有拮抗作用的有益菌混合制成复合益生菌制剂，可实现各菌株在功能上的协同互补，其作用效果优于单一菌株[8]。本试验在饲粮中添加以乳酸杆菌为主的复合益生菌，探究其对产气荚膜梭菌感染肉鸡的生长性能、肠道屏障和免疫功能的影响，为防控肉鸡坏死性肠炎提供参考。1材料与方法1.1试验材料丁酸梭菌（CICC10390，1×109 CFU/g）、屎肠球菌（CICC20420，1×109 CFU/g）、枯草芽孢杆菌（CICC25064，1×109 CFU/g）、植物乳杆菌（CICC22209，1×109 CFU/g）购自湖北省工业微生物菌种保藏与研究中心。玉米乳杆菌（1×109 CFU/g）由加拿大圭尔夫农业与食品研究与发展中心提供，副干酪乳杆菌（1×109 CFU/g）由华中农业大学农业微生物学国家重点实验室提供。A型产气荚膜梭菌（CVCC2030，1×108 CFU/mL）购自中国兽医微生物菌种保藏管理中心。复合益生菌1中丁酸梭菌∶屎肠球菌∶枯草芽孢杆菌∶玉米乳杆菌∶植物乳杆菌的比例为1∶1∶1∶3.5∶3.5。复合益生菌2中丁酸梭菌∶屎肠球菌∶枯草芽孢杆菌∶副干酪乳杆菌的比例为1∶1∶1∶7。1.2试验设计采用单因素试验设计，240只1日龄科宝肉鸡随机分成4组，对照组、1%复合益生菌1（1×1010 CFU/kg）+感染组、1%复合益生菌2（1×1010 CFU/kg）+感染组、感染组，每组5个重复，每个重复12只鸡，公、母各半。基础饲粮组成及营养水平见表1。试验期42 d，14~20 d进行感染试验。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.006.T001表1基础饲粮成及营养水平 （风干基础）原料组成/%0~21 d22~42 d营养水平0~21 d22~42 d合计100.00100.00玉米51.7357.68代谢能/(MJ/kg)12.3513.19豆粕40.7335.15粗蛋白质/%21.5019.50大豆油3.363.66钙/%1.000.90磷酸氢钙1.921.33有效磷/%0.450.35石粉1.161.26赖氨酸/%1.171.04食盐0.350.35蛋胱氨酸/%0.900.72DL-蛋氨酸0.260.13苏氨酸/%0.820.74氯化胆碱0.250.20预混料0.240.24注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 12 500 IU、VD3 2 500 IU、VE 30 IU、VK3 2.65 mg、VB1 2 mg、VB2 6 mg、VB12 0.025 mg、叶酸1.25 mg、生物素0.032 5 mg、烟酸12 mg、锰100 mg、锌75 mg、铁80 mg、铜8 mg、碘0.35 mg、硒0.30 mg。2.营养水平均为计算值。1.3产气荚膜梭菌感染试验将产气荚膜梭菌在37 ℃的胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂上厌氧培养18 h，无菌接种于肉汤培养基中，37 ℃厌氧培养过夜。所有感染肉鸡在14~20 d每天经口灌服1 mL产气荚膜梭菌新鲜菌液（浓度为1×108 CFU/mL）。1.4饲养管理肉鸡在同一鸡舍内饲养，采用网上平养方式，自由采食和饮水，24 h光照。开始试验的第一周温度控制在35 ℃，逐渐降至25 ℃。舍内通风良好，按照常规免疫程序免疫。1.5测定指标及方法1.5.1样品采集于试验21、28 d，每组取10只肉鸡（每个重复取2只鸡）颈部脱臼致死，屠宰。取小肠（十二指肠、空肠和回肠）中部约1 cm用于制作肠道切片；取脾脏、胸腺、法氏囊称重，计算免疫器官指数；取空肠中段约10 cm，液氮速冻后至-80 ℃冰箱保存。1.5.2生长性能在试验21、42 d以空腹称量每个重复肉鸡体重（禁食12 h，提供饮水），记录各阶段采食量，分别计算1~21、22~42、1~42 d的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。ADG=(末重-初重)/(试验天数×试验鸡数)(1)ADFI=饲料消耗总量/(试验天数×试验鸡数)(2)F/G=ADFI/ADG(3)1.5.3肠道形态肠道固定样品进行石蜡包埋，切片，使用苏木精-伊红（HE）染色。用OLYMPSBX-41TF型光学显微镜观察肠道组织切片，每张切片选择8个走向平直且完整的绒毛，绒毛高度取绒毛顶端到隐窝开口距离，隐窝深度取隐窝开口到基地部距离，取平均值，计算绒毛高度和隐窝深度比值。1.5.4免疫器官指数屠宰后分别取肉鸡脾脏、胸腺、法氏囊，剔除周边组织及脂肪，滤纸擦干后称重。免疫器官指数(g/kg)=器官重(g)/活体重(kg)(4)1.5.5空肠屏障和免疫基因表达取空肠样品0.1 g于液氮研磨，按TRIzol试剂盒提取样本总RNA，使用Nanodrop微量分光光度计测定样品在260、280 nm处吸光度，测定RNA的纯度和浓度。RNA反转录严格按照试剂盒说明书进行（Takara，大连）。以cDNA为模板，使用实时荧光定量PCR仪（ABI 7500，ThermoFisher Scientific，美国）上进行荧光定量PCR。每个样品3个重复，以β-肌动蛋白（β-actin）为内参基因，基因的相对表达量采用2-∆∆Ct法计算。基因引物序列见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.006.T002表2基因引物序列基因序列号上游引物（5'→3'）下游引物（5'→3'）长度/bpβ-actinNM_205518.2GATATTGCTGCGCTCGTTGTTACCAACCATCACACCCTGAT152闭合连接蛋白-1（ZO-1）XM_030016322.2CTTCAGGTGTTTCTCTTCCTCCTCCTGTGGTTTCATGGCTGGATC131闭合蛋白（occludin）D21837.1ACGGCAGCACCTACCTCAGGGCGAAGAAGCAGATGA123连接蛋白-1（claudin-1）NM_001013611.2CATACTCCTGGGTCTGGTTGGTGACAGCCATCCGCATCTTCT100黏蛋白-2（mucin-2）XM_421035TTCATGATGCCTGCTCTTGTCCTGAGCCTTGGTACATTCTTG93白细胞介素-8（IL-8）DQ393272.2GGCTTGCTAGGGGAAATGAAGCTGACTCTGACTAGGAAACTGT233白细胞介素-13（IL-13）AJ621735CCAGGGCATCCAGAAGCAGTGCCGGCAAGAAGT256肿瘤坏死因子-α（TNF-α）NM_204267GAGCGTTGACTTGGCTGTAAGCAACAACCAGCTATGCA64转化生长因子-β（TGF-β）M31160CAGCAAGATCGGGTATGGCATAGCTGCTGCGGTTGTAGAC258诱导型一氧化氮合酶（iNOS）U46504CAGCTGATTGGGTGTGGATTTCTTTGGCCTACGGGT1581.6数据统计与分析试验数据采用SPSS 21.0统计软件进行单因素方差分析，当组间差异显著时，采用Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡生长性能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，感染组、复合益生菌1+感染组、复合益生菌2+感染组肉鸡21 d的体重和平均日增重均显著降低（P0.05）。在42 d，与对照组相比，感染组肉鸡的体重降低14.1%（P0.05）；与感染组相比，复合益生菌2+感染组肉鸡的体重有增加的趋势（P0.05）。在22~42 d，与对照组相比，感染组肉鸡的平均日增重降低了19.5%（P0.05），平均日采食量降低了13.5%（P0.05）；与感染组相比，复合益生菌1+感染组和复合益生菌2+感染组肉鸡平均日增重分别提高了14.1%和17.7%，平均日采食量分别提高了5.1%和7.0%（P0.05）。1~42 d，与对照组相比，感染组肉鸡的平均日增重与平均日采食量显著降低（P0.05）；与感染组相比，复合益生菌2+感染组肉鸡的平均日增重显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.006.T003表3复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡生长性能的影响项目对照组感染组复合益生菌1+感染组复合益生菌2+感染组1~21 d初重/(g/只)38.62±0.4738.23±0.3738.86±0.5438.62±0.4821 d体重/(g/只)761.18±27.70a693.47±31.53b690.63±52.47b690.03±18.54b平均日增重/[g/(只·d)]36.13±1.38a32.74±1.58b32.60±2.62b32.57±0.93b平均日采食量/[g/(只·d)]49.92±2.0347.12±2.3546.85±3.1347.08±3.65料重比1.38±0.021.44±0.011.44±0.031.45±0.1522~42 d42 d体重/(g/只)2 046.10±105.991 756.33±168.841 853.41±202.712 043.12±220.09平均日增重/[g/(只·d)]58.21±10.8846.85±4.7753.47±8.0655.14±6.77平均日采食量/[g/(只·d)]103.24±13.4489.30±6.1293.87±7.1295.58±5.31料重比1.79±0.091.91±0.131.78±0.191.75±0.121~42 d平均日增重/[g/(只·d)]47.80±2.52a40.90±4.02b43.61±5.28ab49.04±5.45a平均日采食量/[g/(只·d)]79.48±7.52a68.23±6.29b67.2±7.58b75.72±5.29ab料重比1.66±0.091.67±0.061.55±0.141.55±0.10注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4、表5与此同。2.2复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡肠道组织形态的影响（见表4、表5）由表4可知，在21 d，与对照组相比，感染组肉鸡十二指肠绒毛高度具有降低趋势（P0.05），回肠绒毛高度显著降低（P0.05）。与感染组相比，复合益生菌1+感染组肉鸡空肠隐窝深度具有降低趋势（P0.05），空肠绒毛高度与隐窝深度的比值显著增加（P0.05），复合益生菌2+感染组肉鸡回肠绒毛高度与隐窝深度比值具有增加趋势（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.006.T004表4复合益生菌对产气荚膜梭菌感染21日龄肉鸡肠道组织形态的影响项目对照组感染组复合益生菌1+感染组复合益生菌2+感染组十二指肠绒毛高度/µm1 364.74±145.901 162.13±118.831 209.6±120.521 190.52±151.81隐窝深度/µm120.04±18.87139.27±47.81106.46±24.87110.33±26.09绒毛高度/隐窝深度11.49±1.449.41±3.7211.84±2.7011.16±2.14空肠绒毛高度/µm739.60±210.06757.25±105.42824.93±166.12837.90±160.80隐窝深度/µm99.71±14.20118.85±32.3381.41±20.0999.70±32.44绒毛高度/隐窝深度7.43±1.88b6.98±1.97b10.30±1.43a8.95±2.51ab回肠绒毛高度/µm701.89±56.60a487.31±66.30b490.62±133.24b615.11±224.38ab隐窝深度/µm104.96±3.1495.14±13.7189.45±13.7787.38±13.94绒毛高度/隐窝深度6.91±0.235.22±1.075.35±0.907.26±3.16由表5可知，28 d，与对照组和感染组相比，复合益生菌2+感染组肉鸡空肠绒毛高度显著增加（P0.05）。与感染组相比，复合益生菌1+感染组和复合益生菌2+感染组肉鸡空肠绒毛高度与隐窝深度的比值显著增加（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.006.T005表5复合益生菌对产气荚膜梭菌感染28日龄肉鸡肠道组织形态的影响项目对照组感染组复合益生菌1+感染组复合益生菌2+感染组十二指肠绒毛高度/µm1 236.19±172.921 108.87±168.981 202.92±151.021 150.1±177.72隐窝深度/µm112.77±28.95117.12±16.39103.20±39.07109.24±34.64绒毛高度/隐窝深度11.64±3.279.57±1.6312.79±3.7611.2±2.94空肠绒毛高度/µm889.21±119.63b759.98±87.17b872.45±148.78b1 018.8±173.50a隐窝深度/µm102.28±14.91102.31±16.5295.82±29.3197.11±19.80绒毛高度/隐窝深度8.58±1.15bc7.51±0.92c9.58±2.40ab10.61±1.27a回肠绒毛高度/µm677.45±163.56658.72±85.03691.21±157.12720.93±222.42隐窝深度/µm89.51±19.1192.52±15.2590.92±12.8288.32±18.78绒毛高度/隐窝深度7.45±1.837.35±1.376.98±0.838.41±3.152.3复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡空肠屏障相关基因相对表达量的影响（见表6）由表6可知，在21 d，与对照组相比，复合益生菌2+感染组肉鸡claudin-1的基因表达显著下调（P0.05）。与感染组相比，复合益生菌2+感染组肉鸡空肠ZO-1的基因表达显著上调（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.006.T006表6复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡空肠屏障相关基因相对表达量的影响项目ZO-1occludinclaudin-1mucin-221 d对照组1.01±0.12b1.06±0.361.05±0.35a1.04±0.29感染组0.67±0.33b0.73±0.240.79±0.23ab0.88±0.37复合益生菌1+感染组0.29±0.08c0.84±0.250.97±0.26a0.75±0.18复合益生菌2+感染组1.40±0.71a0.96±0.230.67±0.22b0.93±0.2028 d对照组1.02±0.211.06±0.331.04±0.31a1.04±0.53感染组0.82±0.360.78±0.310.78±0.23ab0.61±0.29复合益生菌1+感染组0.88±0.580.98±0.400.64±0.31b0.68±0.33复合益生菌2+感染组1.08±0.420.89±0.240.85±0.25ab0.81±0.43注：同列数据同一日龄肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表7、表8与此同。在28 d，与对照组相比，复合益生菌1+感染组肉鸡claudin-1的基因表达显著下调（P0.05）。2.4复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡免疫器官指数的影响（见表7）由表7可知，在21 d，与对照组相比，感染组肉鸡的脾脏指数显著增加（P0.05）。与感染组相比，复合益生菌1+感染组肉鸡脾脏指数显著降低（P0.05）。在28 d，各处理组之间免疫器官指数差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.006.T007表7复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡免疫器官指数的影响项目脾脏指数法氏囊指数胸腺指数21 d对照组0.70±0.30c1.99±0.811.56±0.59感染组1.33±0.54a1.53±0.441.74±0.53复合益生菌1+感染组0.90±0.39bc1.64±0.211.72±0.36复合益生菌2+感染组1.11±0.33ab1.74±0.401.83±0.5528 d对照组1.13±0.361.52±0.521.44±0.49感染组1.51±0.571.63±0.531.60±0.56复合益生菌1+感染组1.13±0.811.77±0.461.90±0.45复合益生菌2+感染组1.43±1.021.65±0.451.74±0.51g/kg2.5复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡空肠免疫相关基因相对表达量的影响（见表8）由表8可知，在21 d，与感染组相比，复合益生菌2+感染组肉鸡空肠TNF-α、TGF-β和iNOS的基因相对表达量显著增加（P0.05），IL-8的基因相对表达量显著降低（P0.05）。在28 d，与对照组相比，感染组、复合益生菌1+感染组和复合益生菌2+感染组肉鸡空肠iNOS和IL-13的基因相对表达量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.14.006.T008表8复合益生菌对空肠免疫相关基因相对表达量的影响项目IL-8IL-13TNF-αTGF-βiNOS21 d对照组1.03±0.30ab1.05±0.321.00±0.11ab1.02±0.21b1.03±0.27ab感染组1.29±0.68a0.71±0.370.89±0.24b1.08±0.31b0.83±0.29b复合益生菌1+感染组0.81±0.38ab0.64±0.430.84±0.23b1.18±0.25b0.83±0.17b复合益生菌2+感染组0.65±0.38b0.69±0.391.12±0.25a1.38±0.35a1.10±0.20a28 d对照组1.08±0.401.09±0.44a1.02±0.221.06±0.351.03±0.30a感染组1.25±1.040.68±0.39b0.96±0.331.27±0.570.54±0.40b复合益生菌1+感染组1.05±0.410.63±0.35b1.18±0.311.20±0.360.61±0.33b复合益生菌2+感染组1.21±0.700.56±0.29b1.29±0.371.10±0.470.58±0.31b3讨论3.1复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡生长性能的影响生长性能是评价家禽生产是否具有经济效益的重要指标，肉鸡感染产气荚膜梭菌后会引起肠道黏膜损伤，影响肠道对饲料的消化吸收，从而降低生长性能。本试验中，产气荚膜梭菌感染降低了肉鸡的平均日增重和平均体重，与Zhao等[9]研究结果基本一致。原因可能是产气荚膜梭菌感染对肠道功能造成了损害，从而对肉鸡的生长有一定的负面影响。日粮中添加益生菌对肉鸡生长性能和疾病预防方面的影响与抗生素类似[10]。益生菌在感染和非感染条件下均有利于提高动物的生长性能，可能是由于益生菌分泌的化合物，如消化酶、抗菌物质或其他促生长因子。陈锁[11]研究表明，乳酸杆菌可以缓解产气荚膜梭菌感染造成的肠道通透性增加，从而有效改善肉鸡生长性能。李追[12]研究表明，乳杆菌对感染产气荚膜梭菌肉鸡的体重有提高作用。本研究表明，添加复合益生菌具有缓解感染后期（22~42 d）肉鸡平均日采食量和平均日增重下降的趋势，表明复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡的生长性能具有一定的积极作用。原因可能是益生菌在肠道中产生的外源酶等物质刺激了肠道蠕动，提高了饲料的利用率，从而改善了肉鸡生长性能。3.2复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡肠道组织形态的影响肠道形态是衡量肠道功能的重要指标[13]。当产气荚膜梭菌入侵家禽的胃肠道并定植后，会分泌黏附素和蛋白水解酶，破坏肠道黏膜，最终造成肠道损伤[12]。邓沛杰等[14]研究发现，产气荚膜梭菌和球虫混合攻毒能够显著降低28、35 d肉鸡回肠绒毛高度。刘阳等[15]研究表明，感染产气荚膜梭菌后降低了23 d肉鸡十二指肠绒毛高度。本试验中，产气荚膜梭菌感染后显著降低了肉鸡的回肠绒毛高度，十二指肠绒毛高度也有降低的趋势，表明产气荚膜梭菌感染引起了肠道形态损伤，这可能是导致肉鸡生长性能下降的主要原因之一。乳酸菌通常通过产生有机酸和活性物质对病原微生物发挥拮抗作用，调节家禽肠道菌群和形态来提高动物的生产性能[12]。李追[12]研究表明，嗜酸乳杆菌具有提高产气荚膜梭菌感染后肉鸡空肠绒毛高度的趋势。齐雅[16]研究表明，副干酪乳杆菌对19 d肉鸡空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度有明显提高作用。本试验中，添加以乳酸杆菌为主的复合益生菌能够显著提高空肠绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度的比值，有降低空肠隐窝深度的趋势，表明复合益生菌可改善肠道形态结构，有助于机体吸收和利用肠道消化的养分，从而缓解产气荚膜梭菌感染造成的生长性能下降。3.3复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡空肠屏障相关基因相对表达量的影响细胞间的紧密连接结构是肠道屏障的重要结构基础，以保护肠道免受管腔内有害物质侵害[17-18]，涉及肠上皮和黏膜层、紧密连接蛋白的相互作用，紧密连接蛋白能够调节肠上皮细胞的通透性，可以反映肠道的完整性。产气荚膜梭菌定植后会产生各种毒素、细菌素和胶原酶[13]。这些活性物质通过改变肠道细胞的跨膜孔和细胞外基质，影响紧密连接及其成分，导致固有层的完整性受损。Song等[19]研究表明，患坏死性肠炎的肉鸡空肠屏障基因的表达显著下调。本试验中，产气荚膜梭菌感染有下调肉鸡空肠occludin的mRNA表达量的趋势，但对claudin-1、ZO-1、mucin-2的mRNA表达量无显著影响，这些研究结果不一致可能是由于饲养环境、动物种类、攻毒剂量或操作程序造成。在本研究中，饲粮添加以乳酸杆菌为主的复合益生菌显著提高了感染产气荚膜梭菌后肉鸡空肠ZO-1的mRNA表达量，与Al-Sadi等[20]的研究结果相似。Liu等[21]研究表明，饲粮中添加枯草芽孢杆菌能不同程度地增加产气荚膜梭菌感染肉鸡ZO-1的mRNA表达量，表明饲粮中添加复合益生菌可能通过上调肠道ZO-1表达，缓解产气荚膜梭菌感染对肠道的损伤，增强了肠道屏障功能，恢复了受损肠道的生理功能。本试验中，复合益生菌组均下调了肉鸡空肠claudin-1的mRNA表达量，可能是由于添加复合益生菌后降低了产气荚膜梭菌数量，改善了肠道情况，从而使claudin-1的表达降低。3.4复合益生菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡免疫功能的影响胸腺、脾脏和法氏囊是家禽重要的免疫器官，参与调控机体的免疫机能[22]。宫秀燕等[23]研究结果显示，受产气荚膜梭菌感染的肉鸡的胸腺指数和法氏囊指数均显著下降，而添加凝结芽孢杆菌可缓解器官指数下降的情况。曾繁源等[24]研究发现，饲粮中添加复合益生菌对东兰乌鸡脾脏指数有明显的促进作用。本试验中，感染产气荚膜梭菌后肉鸡脾脏指数显著增加，可能是因为产气荚膜梭菌感染后，刺激免疫细胞分泌促炎细胞因子，导致脾脏指数增加，与上述研究结果不同。本试验中添加的复合益生菌降低了肉鸡脾脏指数，可能是由于复合益生菌制剂提高机体免疫应答能力，缓解了脾脏炎症反应，进而降低脾脏指数。空肠主要起消化吸收功能，空肠相关基因的表达可以反映肉鸡的炎症情况。产气荚膜梭菌感染可以破坏肠道屏障的完整性，上述改变伴随着黏膜免疫反应的激活，许多促炎因子被分泌。有研究表明，产气荚膜梭菌感染显著提高了肉鸡肠道IFN-γ、IL-1β、IL-4和IL-10的基因表达量[25-26]。本试验中，产气荚膜梭菌感染后21 d肉鸡炎性因子表达量无显著变化，可能是由于促炎细胞因子通过免疫细胞的分化和增殖、细胞凋亡来调节宿主对多种病原体的免疫，从而使肉鸡的免疫稳态系统缓解了产气荚膜梭菌引起的促炎因子过度表达。益生菌可以通过免疫调节、抗菌分子的分泌和增强机体的抗氧化能力发挥其促增长的作用。本试验结果显示，添加以副干酪乳杆菌为主的益生菌下调了感染肉鸡空肠IL-8基因表达量，IL-8出现在机体炎症的中早期，对机体的组织炎症起促进作用，表明复合益生菌可以缓解产气荚膜梭菌感染后引起的炎症反应。本试验中，在28 d，所有感染组肉鸡空肠iNOS和IL-13基因表达量显著下降。夏亿等[27]研究表明，在28 d，与对照组相比，感染组肉鸡产气荚膜梭菌数量显著下降，可能是由于灌喂的产气荚膜梭菌已经排出体外，其诱导的炎症反应也有所减弱。4结论本试验结果表明，日粮中添加以乳酸杆菌为主的复合益生菌可改善产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠道健康问题，以副干酪乳杆菌为主的复合益生菌可缓解产气荚膜梭菌对肉鸡生产性能的负面影响。