随着畜牧养殖业的规模化快速发展，玉米、豆粕等蛋白饲料短缺，成为制约畜牧行业发展的问题，因此开发非常规饲料资源具有重要意义。我国桑叶资源丰富，桑叶中粗蛋白含量高达20%，并且含有丰富的微量元素、维生素、氨基酸，可以替代玉米、豆粕等常规原料[1-2]。研究发现，桑叶中含有多糖、多酚、生物碱等生物活性物质，这些活性成分具有调节动物机体的免疫力、抗氧化能力、降血脂、抗应激等作用，在动物生产中具有广泛的应用前景[3-5]。但桑叶中也含有一些抗营养因子，如单宁、植物凝集素等，这些物质具有苦涩味，会影响动物的采食量，从而影响机体对其他饲料养分的消化吸收利用，限制桑叶在畜禽养殖中的添加剂量[6-7]。桑叶经过微生物发酵处理可以降低其中的抗营养因子水平，提高蛋白质含量，提高桑叶的饲用价值[8-9]。因此，本试验研究发酵桑叶对育肥猪生长性能、养分表观消化率、胴体性状及肉品质的影响，为非常规饲料资源的开发与利用提供参考。1材料与方法1.1发酵桑叶的制备将桑叶及茎切成约2 cm的小段，与10%麦麸混匀，添加2%的乳杆菌进行发酵，发酵7 d。乳杆菌活菌数为5×108 CFU/g，由河南世纪天缘生态科技有限公司提供。发酵桑叶的营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.004.T001表1发酵桑叶营养水平项目粗蛋白粗脂肪粗纤维粗灰分钙磷含量28.763.0413.0511.843.040.66%1.2试验设计选择体重约50 kg、健康的育肥猪120头，随机分为4组，每组3个重复，每个重复10头猪。对照组育肥猪饲喂基础日粮，各试验组育肥猪分别饲喂含有5%、10%和15%发酵桑叶的日粮。试验期60 d。基础日粮组成及营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.004.T002表2基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米68.40消化能/(MJ/kg)13.65豆粕15.00粗蛋白/%15.04麸皮8.00钙/%0.65豆油2.00磷/%0.41磷酸氢钙1.05赖氨酸/%0.68石粉1.23DDGS2.00食盐0.32预混料2.00注：1.预混料购自沧州硕泰饲料有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验开始前对猪舍消毒处理，通风1 w，进行7 d的预试验，期间育肥猪饲喂基础日粮。正式试验开始各组育肥猪分别饲喂对应的试验日粮。育肥猪自由采食和饮水。按照养殖场常规管理进行免疫和驱虫。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验第1 d和最后1 d，育肥猪晨饲前，空腹称重，统计各重复育肥猪试验期间的采食量，计算平均日增重、平均日采食量、料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/(试验天数×试验动物数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2养分表观消化率试验结束前3 d，每天早、中、晚3次采集育肥猪粪便，使用10%的硫酸固氮，将3 d的粪样混匀，烘干，粉碎，用于分析养分消化率。根据《饲料分析及饲料质量检测技术》[10]测定饲料和粪便中的总能（GE）、干物质（DM）、粗蛋白质（CP）、粗脂肪（EE）、粗纤维（CF）、粗灰分（Ash）、总钙（Ca）及总磷（P）。养分表观消化率=100%-(待测饲料中铬含量×粪中该养分含量)/(粪中铬含量×待测饲料中该养分含量)×100%(4)1.4.3血清生化指标试验最后1 d称重结束后，每头猪采集10 mL血液，4 ℃冰箱静置3~4 h，4 000 r/min离心6 min，收集血清，用于检测总蛋白、尿素氮、白蛋白、血糖、谷草转氨酶、谷丙转氨酶等指标。检测方法参考试剂盒（中生北控生物科技股份有限公司）说明书，使用迈瑞全自动生化分析仪（BS-200型）检测各血清生化指标。1.4.4胴体性状及肉品质试验结束时，每组随机选择12头试验猪，禁食24 h屠宰。胴体性状（胴体重、屠宰率、眼肌面积、背膘厚度及瘦肉率）按照《瘦肉型猪胴体性状测定技术规范》（NY/T 825—2004）进行检测。肉品质（pH值、剪切力、滴水损失、肉色、大理石纹评分）按照《猪肌肉品质测定技术规范》（NY/T 821—2004）测定。1.5数据统计与分析采用SPSS 28软件进行单因素方差分析，LSD法进行组间多重比较。结果以平均值和标准误（SEM）表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1发酵桑叶对育肥猪生长性能的影响（见表3）由表3可知，5%发酵桑叶组和10%发酵桑叶组育肥猪的末重、平均日增重、料重比与对照组差异不显著（P0.05）。15%发酵桑叶显著降低了育肥猪的试验末重、平均日增重（P0.05），显著提高了料重比（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.004.T003表3发酵桑叶对育肥猪生长性能的影响项目初重/(kg/头)末重/(kg/头)平均日增重/[kg(头·d)]平均日采食量/[kg(头·d)]料重比对照组52.04103.04a0.85a2.442.87b5%发酵桑叶组51.87101.67a0.83a2.412.90b10%发酵桑叶组52.13100.13a0.80ab2.342.92b15%发酵桑叶组51.6496.64b0.75b2.273.03aSEM1.053.180.050.130.19P值0.8420.0390.0460.0840.028注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4、表6、表7与此同。2.2发酵桑叶育肥猪养分表观消化率的影响（见表4）由表4可知，5%发酵桑叶组和10%发酵桑叶组育肥猪的总能、干物质、粗脂肪、钙及磷的表观消化率与对照组相比差异不显著（P0.05），15%发酵桑叶组育肥猪的粗蛋白、粗纤维的表观消化率显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.004.T004表4发酵桑叶育肥猪养分表观消化率的影响项目总能干物质粗蛋白粗脂肪粗纤维钙磷对照组83.0782.7579.61a80.6544.76a80.5656.865%发酵桑叶组82.7982.5378.97a79.6343.68a79.9456.1410%发酵桑叶组82.1881.8677.31ab79.2142.55ab79.4355.7515%发酵桑叶组81.7581.4175.08b78.7540.76b78.7055.03SEM6.145.083.854.061.163.082.14P值0.7180.9630.0470.6190.0420.6490.962%2.3发酵桑叶对育肥猪血清生化指标的影响（见表5）由表5可知，10%发酵桑叶组育肥猪血清尿素氮、尿酸、肌酐含量、乳酸脱氢酶活性显著低于对照组（P0.05）。5%、10%、15%发酵桑叶组育肥猪血清中胆固醇及甘油三酯含量显著低于对照组（P0.05）。研究表明，添加10%发酵桑叶可以改善育肥猪血脂代谢及尿酸代谢功能。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.004.T005表5发酵桑叶对育肥猪血清生化指标的影响项目对照组5%发酵桑叶组10%发酵桑叶组15%发酵桑叶组SEMP值总蛋白/(g/L)72.5372.0771.6971.065.080.318白蛋白/(g/L)30.8729.7529.0828.601.090.297尿素氮/(mmol/L)3.87a3.31ab2.74b3.50a0.180.035葡萄糖/(mmol/L)5.395.305.345.280.320.852尿酸/(mmol/L)26.98a24.42ab18.76b22.96ab1.740.028肌酐/(mmol/L)210.76a186.80ab162.88b198.08ab13.060.041胆固醇/(mmol/L)2.32a1.86b1.75b1.66b0.120.036甘油三酯/(mmol/L)1.27a0.86b0.75bc0.53c0.080.033谷草转氨酶/(U/L)45.8744.6644.0843.752.070.071谷丙转氨酶/(U/L)62.8761.6961.8562.594.510.752乳酸脱氢酶/(U/L)504.65a486.77a437.08b457.06ab20.760.029碱性磷酸酶/(U/L)106.54106.89107.54108.315.620.626注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.4发酵桑叶对生长育肥猪胴体性状的影响（见表6）由表6可知，15%发酵桑叶组育肥猪的宰前活重和胴体重显著低于对照组（P0.05），10%、15%发酵桑叶组育肥猪的背膘厚度显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.004.T006表6发酵桑叶对生长育肥猪胴体性状的影响项目宰前活重/kg胴体重/kg屠宰率/%瘦肉率/%眼肌面积/m2背膘厚度/cm对照组104.06a78.72a75.6563.3736.332.84a5%发酵桑叶组101.76a76.23a74.9563.0135.982.47ab10%发酵桑叶组100.86a74.45ab73.8262.5935.052.03b15%发酵桑叶组97.18b70.98b73.0462.1934.631.86bSEM3.853.565.084.191.940.05P值0.0470.0430.3310.5950.7360.0392.5发酵桑叶对育肥猪肉品质的影响（见表7）由表7可知，日粮中添加发酵桑叶对猪肉的pH值、肉色、剪切力、滴水损失、肉色及大理石纹评分均无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.004.T007表7发酵桑叶对育肥猪肉品质的影响项目pH值剪切力/N滴水损失/%亮度L*红度a*黄度b*大理石纹评分对照组6.4037.462.5640.659.955.762.885%发酵桑叶组6.3837.692.6340.9510.045.802.9010%发酵桑叶组6.3438.042.5241.0810.275.862.8515%发酵桑叶组6.3538.122.741.4310.405.712.65SEM0.251.850.143.271.020.310.10P值0.2150.5730.4160.6840.4180.5190.7423讨论3.1发酵桑叶对育肥猪生长性能的影响发酵桑叶作为非常规新型饲料资源已在畜禽养殖生产中逐渐应用推广。有研究发现，在育肥猪养殖中使用6%桑叶粉可以提高其平均日增重[11]。在保育猪生产中使用5%的桑叶粉可以提高其生长性能及抗腹泻的能力[12]。本研究中，育肥猪生产中添加15%发酵桑叶可以显著降低育肥猪的末重、平均日增重，提高料重比，而发酵桑叶添加量为5%和10%时，未影响生长育肥猪的生长性能，表明在生长育肥猪生产中使用低于10%的发酵桑叶可行。叶添梅等[13]研究发现，使用4%~6%发酵桑叶对生长猪生长性能未产生负面影响，且显著提高了血清中超氧化物歧化酶水平，显著降低了丙二醛水平。崔艺燕等[14]研究发现，在基础日粮中添加10%发酵桑叶对育肥猪的生长性能无显著影响，但显著改善了育肥猪机体的免疫力。本研究中，发酵桑叶组的育肥猪的采食量有略微下降的趋势，可能是因为桑叶中的单宁等抗营养因子影响了适口性，导致采食降低[15]。因此，在实际养殖生产中，应该额外注意发酵桑叶的添加比例，不宜过高，避免妨碍动物机体对饲料中其他营养物质消化吸收。3.2发酵桑叶对育肥猪养分表观消化率的影响动物机体对饲料中养分的消化吸收利用程度可以用养分表观消化率表示，各营养物质的表观消化率越高，代表机体对各营养物质利用度越高。本研究中，使用发酵桑叶对育肥猪总能、干物质、粗脂肪、钙及磷等表观消化率无显著影响；当添加15%发酵桑叶显著降低了育肥猪对粗蛋白及粗纤维的消化吸收，表明使用低于10%发酵桑叶饲喂育肥猪对养分表观消化率无负面影响。目前，对于发酵桑叶对养殖动物养分表观消化率的试验研究结果较少。唐佳希等[16]研究发现，使用0.05%、0.10%、0.15%的桑叶提取物可以显著提高生长育肥猪对干物质、粗脂肪、粗纤维及干物质的消化率。宋敏等[17]在仔猪生产中使用1 000 g/t的桑叶提取物，发现仔猪机体对粗脂肪的消化率显著提高，干物质消化率也具有提高的趋势，但未达到显著水平，可能是因为桑叶提取物提高了仔猪小肠的脂肪酶活性，进而提高了机体对粗脂肪的消化吸收。而本研究中，发酵桑叶并未显著提高生长育肥猪对饲料养分的消化率，可能因为发酵桑叶中的活性成分未完全释放出来，未能促进机体消化酶的分泌，过高含量的发酵桑叶甚至降低了部分营养物质的消化吸收，还可能是因为桑叶中抗营养因子抑制了采食量，进而影响机体内消化酶的分泌。3.3发酵桑叶对育肥猪血清生化指标的影响血清生化指标可以反映动物机体的健康状态。研究发现，桑叶具有调节血脂代谢作用[18-19]。本研究中，添加发酵桑叶组的生长育肥猪血清中的甘油三酯及胆固醇含量均显著降低，表明发酵桑叶调节了血脂代谢，促进育肥猪机体健康。叶添梅等[13]研究发现，在生长猪养殖中使用4%~6%的发酵桑叶可以显著降低生长猪血清中胆固醇及甘油三酯含量。而崔艺燕等[14]研究发现，饲料中添加10%发酵桑叶显著降低了育肥猪血清中甘油三酯含量，对胆固醇含量未产生显著影响。发酵桑叶降低了血清甘油三酯及胆固醇含量主要是由于桑叶中含有多酚、１-脱氧野尻霉素，这些活性成分具有降血脂的作用[20]，且桑叶中的膳食纤维可以抑制胆固醇的吸收及促进胆汁酸排泄改善血液脂质分布[21]。血清中的肌酐、尿酸、尿素氮含量可以反映机体肾功能[22-23]。相关研究发现，桑叶粉可以显著降低生长猪血清中尿酸及尿素氮含量[24]，显著降低生长育肥猪血清中肌酐及尿酸含量[14]。本研究中，在添加10%发酵桑叶可以显著降低育肥猪血清尿素氮、尿酸、肌酐含量，表明发酵桑叶显著改善了生长育肥猪的肾代谢功能。桑叶中的活性成分及营养成分（芦丁、槲皮素、桑黄素、桑椹苷Ａ、多糖、维生素Ｃ等）可以保护肾脏，抑制氮代谢物的产生[25]；桑叶中的膳食纤维通过抑制膳食腺嘌呤的吸收而降低尿酸和尿素氮含量[26]；发酵桑叶中的微生物可以抑制血液中肌酐的产生[27]。本试验中，发酵桑叶对育肥猪血清中的谷草转氨酶及谷丙转氨酶活性未产生显著影响，表明发酵桑叶对生长育肥猪肝功能未产生负面影响；发酵桑叶也未显著影响总蛋白及白蛋白水平，但显著降低了尿素氮含量，表明发酵桑叶促进了生长育肥猪机体对氮的代谢，提高了蛋白质的合成代谢，抑制蛋白质的分解代谢，进而促进蛋白质的沉积[28]。3.4发酵桑叶对育肥猪胴体性状的影响胴体性状主要包括屠宰率、眼肌面积、背膘厚度等指标，可以反映动物产肉率，对经济效益至关重要。本研究表明，15%发酵桑叶组育肥猪的宰前活重和胴体重显著低于对照组，10%和15%发酵桑叶育肥猪的背膘厚度显著低于对照组，表明当发酵桑叶添加量低于10%时，对产肉率无显著性影响，且还可以改善背膘厚度，改善肉品质。樊路杰[29]研究表明，育肥猪生产中使用适量的桑叶可以改善育肥猪的背膘厚度。张娜娜等[30]研究发现，发酵桑叶粉可以降低育肥猪背膘厚度，与本研究结果类似。桑叶降低育肥猪胴体背膘厚度可能是因为桑叶中含有的生物碱和黄酮类化合物调节了机体脂质代谢，通过调控细胞外蛋白激酶/过氧化物酶体增殖剂激活受体γ通路，抑制脂肪细胞分化，降低脂质积累[31]。目前，发酵桑叶在育肥猪屠宰性能方面的研究比较少，其具体作用机制有待进一步研究。3.5发酵桑叶对育肥猪肉品质的影响肉品质指标可以影响消费者的购买意愿，主要包括肌肉的pH值、肉色、大理石纹、滴水损失、剪切力等。肉色是消费者购买时最直观的感官指标，代表肉质的新鲜程度；pH值可以反映肌肉的抗氧化水平；剪切力反映肌肉的嫩度；滴水损失可以反映肉质的保水程度。本研究果表明，添加低于15%的发酵桑叶对育肥猪背最长肌的肉品质未产生显著影响，表明发酵桑叶未改善肉品质，可能是因为发酵桑叶的添加量过低，其中生物活性成分对肉品质未达到改变的程度。呼红梅等[32]研究发现，发酵桑叶对育肥猪的肉品质未产生显著性影响。权群学等[33]研究发现，在育肥猪生产中使用9%桑叶粉可以显著提高肌肉中必需氨基酸水平，有提高肌内蛋白含量的趋势，但未达到显著水平。何亮宏[34]研究发现，在育肥猪生产中添加3%~9%桑叶粉可以提高肌肉中醛类、醇类、酯类及酮类等改善肉质风味的化合物含量，改善了肌肉风味。4结论本试验发现，在育肥猪生产中使用10%发酵桑叶替代基础日粮不会对其生长性能及养分消化率产生负面影响，可以改善血脂代谢功能。