精氨酸（Arg）是体内合成一氧化氮（NO）和多胺的前体。NO和多胺作为调控胚胎发育、血管生成及胎盘和胎儿间营养物质输送的重要活性物质，对保证胎儿的健康发育至关重要。妊娠后期胎儿的快速增长需要更多养分供应，NO和多胺的协同作用可共同促进胎儿的生长发育。但在日粮中直接添加Arg会与其他氨基酸产生拮抗作用，还会被反刍动物瘤胃快速降解。N-氨甲酰谷氨酸（NCG）能够促进动物Arg的内源合成，且不会与其他氨基酸产生拮抗作用，不能被瘤胃大量降解，即使低剂量的NCG也在增加Arg内源合成中具有高敏感性，是替代Arg的优质绿色添加剂。NCG对改善动物体况、缓解肠道应激、提高动物繁殖性能方面具有重要作用[1-2]。研究表明，日粮中添加NCG可改善奶牛泌乳性能，提高乳脂率、乳蛋白及乳糖水平[3-4]。在妊娠母猪日粮中添加NCG能够显著降低胚胎死亡率，改善产仔性能，显著增加窝产活仔数及窝重[5]。日粮中补充精氨酸能够促进早期断奶仔猪肠道发育，提高仔猪平均日增重[6]。研究表明，NCG可通过精氨酸酶及NO两个代谢通路，调控机体免疫功能[7]，显著降低血浆中尿素氮含量，提高体内NO含量及部分抗体水平，增强动物机体免疫功能[8]。因此，NCG作为Arg的前体对提高动物繁殖性能，改善动物免疫功能具有重要作用。本试验研究妊娠后期安格斯母牛日粮中添加NCG对犊牛生长性能、血清生化指标及免疫指标的影响，为NCG在繁殖母牛及犊牛生产中的研究应用提供参考。1材料与方法1.1试验设计选用60头3~4胎、体重600~650 kg、预产期接近的妊娠后期安格斯母牛，随机分为4组，每组15头。试验从母牛产前4周开始至犊牛90日龄结束，预试期10 d，正式试验期120 d。对照组母牛饲喂基础日粮，试验组在基础日粮中分别添加10、20、30 g/(头·d)的NCG（林州亚太兴牧科技有限公司，含量≥90.0%）。1.2试验日粮与饲养管理试验牛按照分组分圈舍饲，养殖场内设运动场。各组母牛按试验设计饲喂对应日粮，饲喂前将NCG与精料预混合，以全混合日粮（TMR）形式饲喂，每天饲喂2次，自由采食及饮水。日粮根据NRC（2016）肉牛饲养标准配制，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.001.T001表1基础日粮组成及营养水平（干物质基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米12.25综合净能/(MJ/kg)4.85豆粕3.19粗蛋白质/%11.29棉籽粕2.25中性洗涤纤维/%42.25菜籽粕3.87酸性洗涤纤维/%29.85麦麸5.07钙/%0.72碳酸氢钠0.30磷/%0.35食盐0.27预混料1.70全株青贮玉米51.72小麦秸19.38注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 80 kIU、VD 8 kIU、VE 300 IU、Fe 500 mg、Mn 750 mg、Zn 750 mg、Cu 200 mg。2.营养水平均为计算值。犊牛出生后确保及时足量采食初乳，5~90日龄补饲全价配合颗粒饲料及苜蓿干草，自由采食。犊牛配合饲料产品营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.001.T002表2犊牛配合饲料产品营养水平项目粗蛋白质粗纤维粗灰分钙总磷氯化钠水分赖氨酸含量≥20≤8.0≤10.00.5~1.5≥0.4≥0.3~1.5≤13.0≥1.0%1.3测定指标及方法1.3.1生长性能分别于犊牛出生时及试验结束前对犊牛空腹称重，记录初生重及试验末重，计算犊牛平均日增重，统计母牛产犊牛数，计算犊牛存活率。平均日增重=(试验末重-初生重)/试验天数(1)1.3.2血清生化及免疫指标分别于犊牛出生后及犊牛日龄90 d颈静脉采血2次，3 000 r/min离心15 min，使用移液管抽取上层血清1.5 mL分装于冻存管中，-80 ℃冰箱冷冻保存，用于血清生化及免疫指标的测定。血清样品制备后送北京华英生物技术研究所进行检测。使用迈瑞BS-420全自动生化仪检测血清中的总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）含量；血清中的精氨酸（Arg）、一氧化氮（NO）使用精氨酸测定试剂盒及一氧化氮检测试剂盒测定；免疫球蛋白G（IgG）免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）使用试剂盒测定。试剂盒均购自北京华英生物技术研究所。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 27.0软件中的单因素方差分析显著性，LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1母牛日粮中添加NCG对犊牛生长性能的影响（见表3）由表3可知，试验3组犊牛初生重显著高于对照组（P0.05）；各试验组犊牛90 d日龄体重及平均日增重均高于对照组（P0.05）；试验1组母牛产犊牛数低于对照组、试验2组和试验3组；试验2组和试验3组犊牛成活率高于对照组和试验1组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.001.T003表3母牛日粮中添加NCG对犊牛生长性能的影响组别初生重/(kg/头)90 d体重/(kg/头)平均日增重/[kg/(头·d)]母牛产犊牛数/头犊牛成活率/%对照组31.17±2.16b103.80±7.630.80±0.081586.67试验1组32.75±2.35ab108.31±8.890.84±0.091386.67试验2组33.07±2.32ab110.24±9.380.86±0.111593.33试验3组34.91±2.70a112.56±11.660.87±0.121593.33注：同列数据不同字母表示差异显著（P0.05），无字母或相同小写字母表示差异不显著（P0.05）。2.2母牛日粮中添加NCG对犊牛血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验3组1日龄犊牛血清TP、ALB、NO含量显著升高（P0.05）。犊牛90日龄时，各组犊牛各项血清指标差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.001.T004表4母牛日粮中添加NCG对犊牛血清生化指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组1日龄犊牛TP/(g/L)60.73±6.27b65.39±10.80ab68.15±4.56ab74.27±6.49aALB/(g/L)20.35±1.65b23.29±2.35ab21.76±1.04ab25.29±4.81aTC/(mmol/L)1.58±0.711.63±0.631.69±0.531.66±0.36TG/(mmol/L)0.72±0.200.61±0.140.79±0.120.70±0.11BUN/(mmol/L)2.64±0.262.44±0.452.98±0.082.47±0.25GLU/(mmol/L)3.87±0.823.90±0.573.68±0.623.72±0.73Arg/(μmol/L)31.75±3.7432.37±2.0732.38±5.3133.38±4.56NO/(μmol/L)36.63±8.41b46.52±7.15b46.77±5.26b66.12±7.46a90日龄犊牛TP/(g/L)66.92±2.1865.30±2.8166.11±3.8765.07±2.40ALB/(g/L)25.96±3.4527.83±3.5728.02±5.0527.37±3.82TC/(mmol/L)3.79±0.874.62±0.785.00±0.554.60±0.77TG/(mmol/L)0.47±0.080.49±0.050.45±0.070.45±0.02BUN/(mmol/L)2.03±0.401.93±0.291.86±0.372.04±0.42GLU/(mmol/L)4.81±0.714.92±0.934.38±0.344.83±0.79Arg/(μmol/L)31.17±2.1829.15±1.3330.40±1.3628.62±0.75NO/(μmol/L)51.85±8.1950.69±±9.5254.09±3.3550.89±7.07注：同行数据不同字母表示差异显著（P0.05），无字母或相同字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.3母牛日粮中添加NCG对犊牛血清免疫指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验3组1日龄犊牛血清IgG、IgA和IgM的含量均显著升高（P0.05）；犊牛90日龄时，各组犊牛血清IgG、IgA和IgM的含量差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.001.T005表5母牛日粮中添加NCG对犊牛免疫指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组1日龄犊牛IgA1.39±0.30b1.48±0.23b1.55±0.32b2.15±0.40aIgG8.83±0.62b9.17±0.62b9.88±1.30b13.33±1.87aIgM0.97±0.20b1.07±0.30ab1.09±0.25ab1.38±0.43a90日龄犊牛IgA1.78±0.291.83±0.221.70±0.191.78±0.20IgG12.50±2.7112.26±2.1711.76±2.7212.22±1.14IgM1.50±0.311.60±0.191.43±0.321.57±0.09g/L3讨论3.1母牛日粮中添加NCG对犊牛生长性能的影响本研究结果表明，妊娠后期母牛日粮中添加30 g/(头·d) NCG可显著提高犊牛初生重。妊娠后期是胎儿发育最快的时期，对营养物质需求较大。研究发现，妊娠期补充NCG可促进Arg合成，增加动物子宫内营养供给，促进胚胎着床和胎盘发育，维持母体妊娠，提高繁殖性能[9]。孙玲伟[10]在妊娠期限饲湖羊日粮中添加5 g/(头·d)的NCG，发现湖羊的胎盘效率及胎儿体重显著提高。Lassala等[11]发现，给怀孕母羊注射精氨酸盐能够显著增加羔羊初生重，提高胎羔成活率，与本试验研究结果一致。这可能是妊娠后期日粮中添加NCG后能够改善子宫内环境和营养供给，进而提高犊牛初生重。但本试验中犊牛90日龄体重差异并不显著，可能是试验后期母乳在犊牛日粮采食中的占比降低所导致。3.2母牛日粮中添加NCG对犊牛血清生化指标的影响血清指标能够准确反映动物机体组织器官功能、生理状态以及营养物质在体内代谢的情况。TP和ALB的主要合成场所是肝脏，可直观地反映肝脏的功能和机体蛋白质的合成代谢情况[12]。营养状况良好时可促进蛋白质的合成，血清TP含量会升高。ALB是营养物质的载体，对维持血浆渗透压、提供机体蛋白质具有重要功能[13]。本试验结果显示，妊娠后期母牛日粮中添加30 g/(头·d)的NCG可显著提高犊牛出生时血清TP和ALB含量，表明NCG能够促进初生犊牛蛋白质合成，改善机体营养状况。Arg作为NCG的代谢产物，是多胺和NO的前体，具有促进动物胎盘内血管生成和发育、提高胎盘内血液流动、增加胎盘内营养供给的作用，可为胎儿的生长发育提供良好的子宫环境[11]。蔡元等[14]在妊娠母羊日粮中添加NCG，发现一氧化氮合酶活性显著提高，进而提高NO含量，增加母体与胎儿间血流量，促进胎盘发育。Wu等[15]研究发现，日粮中添加Arg能够提高血管NO含量，提高乳腺血流量及养分供给，促进乳蛋白合成代谢。本试验结果显示，妊娠后期母牛日粮中添加30 g/(头·d)的NCG显著提高了初生犊牛血清NO含量，这可能是犊牛初生重增加的原因之一。添加NCG对犊牛血清Arg含量影响不显著，可能是NCG及Arg在母牛肠道消化吸收转化的结果。3.3母牛日粮中添加NCG对犊牛血清免疫指标的影响抗体水平是反映动物免疫功能的重要指标，IgA、IgG和IgM共同负责机体抗菌、抗毒素、抗病毒等免疫功能[16]。动物体内的免疫球蛋白较高时，机体免疫系统将会处于较高水平[17]。IgG是免疫应答中持续时间最长的抗体，是唯一可由母体通过胎盘传递给胎儿的球蛋白[18]。研究发现，日粮中添加精氨酸或NCG均能够显著提高幼兔血清中IgG、IgA、IgM含量及空肠白细胞介素-2 mRNA水平[19]。张卫辉等[20]发现，日粮中添加500 mg/kg的NCG提高了母猪血清IgG和IgM含量，表明NCG具有提高血清免疫球蛋白含量、增强动物免疫力的功能[21]。本试验结果表明，妊娠后期母牛日粮中添加30 g/(头·d)的NCG显著增加了初生犊牛血清IgA、IgG、IgM含量，提高了初生犊牛免疫力，进而提高了犊牛成活率。4结论在本试验条件下，妊娠后期母牛日粮中添加30 g/(头·d)的NCG能够显著提高犊牛初生重，增加初生犊牛血清蛋白含量，提高免疫功能，但这种作用会在犊牛90日龄时消失。