在集约化、规模化养殖模式下，蛋鸡笼养密度增加、生产中应激因素增多等问题可造成机体抗氧化能力和器官功能损伤，机体内稳态失衡，导致肝脏脂质代谢紊乱，后续易引发脂肪肝出血综合征（FLHS）等代谢疾病[1]，严重影响蛋鸡生产性能和生理健康。α-GML的代谢产物月桂酸在体内的代谢速度与葡萄糖相当，但其化学能是葡萄糖的两倍。因此机体利用月桂酸使能量消耗提升，会反馈给中枢神经，提高交感神经系统活性，增强与脂质代谢相关酶的表达水平，进而提高机体脂质的代谢速度[2]。PQQ·Na2具有出色的抗氧化功能和清除自由基的能力[3-5]，还能够增加线粒体数量，改善线粒体功能[6-8]；同时具备保护肝脏的作用[9-11]，能够减少肝脏受到氧化应激和脂质过氧化的伤害，维持肝脏的正常功能，缓解肝脏脂质代谢紊乱。本课题组前期研究发现，饲粮中添加200~800 mg/kg的α-GML均能够降低蛋鸡脂质沉积，且呈剂量效应[12]。赵芹[13]研究发现，添加0.08、0.16 mg/kg的PQQ·Na2能够改善蛋鸡线粒体功能，增强蛋鸡抗氧化能力，且0.16 mg/kg添加量效果更佳。基于上述研究，本试验探究α-GML、PQQ·Na2及两者复配对产蛋后期海兰褐蛋鸡生产性能、肝脏脂质代谢的影响，为蛋鸡的健康养殖提供参考。1材料与方法1.1试验材料α-GML由嘉兴市沪东日用助剂有限公司提供，纯度为91.1%。PQQ·Na2由昆山晟安生物科技有限公司提供，纯度99%。PQQ·Na2使用时用玉米淀粉将其稀释为0.1%的预混剂，以便均匀混入饲料。1.2试验设计及试验饲粮试验选取384只产蛋率相近的52周龄海兰褐蛋鸡，随机分为4组，每组4个重复，每个重复24只蛋鸡。对照组蛋鸡喂基础饲粮；GML组、PQQ组、GML+PQQ组分别在基础饲粮中添加800 mg/kg的α-GML、0.16 mg/kg的PQQ·Na2以及800 mg/kg的α-GML+0.16 mg/kg的PQQ·Na2（α-GML实际添加量为878.2 mg/kg，PQQ·Na2实际添加量为0.164 mg/kg）。预试期2 w，正式试验期8 w。试验使用的基础饲粮参照美国NRC（2012）蛋鸡饲养标准，结合海兰褐蛋鸡的饲养手册配制。基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.T001表1基础饲粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.00代谢能/(MJ/kg)12.24豆粕（43%）26.00粗蛋白质/%16.29石粉9.00钙/%3.51预混料3.00总磷/%0.33蛋氨酸/%0.35蛋氨酸+胱氨酸/%0.66赖氨酸/%0.93注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 29 950 IU、VD 12 300 IU、VE 400.0 IU、VK3 103.0 mg、VB1 68.0 mg、VB2 229.0 mg、VB6 91.0 mg、VB12 0.68 mg、烟酸1 040.0 mg；泛酸359.0 mg、叶酸33.0 mg、生物素7.8 mg、植酸酶10 000 IU、铁4 200 mg、铜350 mg、锰3 700 mg、锌3 250 mg、硒11.3 mg、碘23.5 mg。2.营养水平中粗蛋白质为实测值，其余均为计算值。1.3饲养管理本试验在浙江省桐乡市宏盛禽业有限公司进行。蛋鸡饲喂于四层直立式金属笼，每个重复4笼，每笼6只蛋鸡。每日7：00和15：00定量喂料105 g/(只·d)，每日定时拣蛋（16：00—17：00），自由饮水。每天光照16 h。试验期间观察鸡的健康状况、采食情况，每日拣蛋时记录每个重复的总产蛋数、次品蛋数、死淘数和总蛋重等。1.4测定指标及方法1.4.1生产性能正式试验期以每个重复为单位，统计每周的产蛋率、次品蛋率、平均蛋重、采食量、料蛋比。产蛋率=当日总鸡蛋数/当日总鸡数×100%(1)次品蛋率=当日次品蛋数/当日总鸡蛋数×100%(2)平均蛋重=当日鸡蛋总重量/当日总鸡蛋数(3)料蛋比=当日消耗饲料总重量/当日鸡蛋总重量(4)1.4.2蛋品质饲养试验的最后1 d从每组中随机抽取30个新鲜鸡蛋，使用DET-6000全自动蛋品质测定仪（日本NABEL公司）测定蛋重、蛋壳强度、蛋白高度、哈夫单位、蛋黄颜色和蛋壳厚度。1.4.3肝脏组织HE染色和油红O染色切片肝脏组织HE染色切片和油红O染色切片均由武汉赛维尔生物科技有限公司制作完成，切片置于光学显微镜下进行镜检观察（显微镜型号：NIKON Eclipse ci，成像系统：NIKON digital sight DS-FI2），并于40倍物镜下拍摄照片。1.4.4肝脂率、腹脂率及肝脏指数试验结束后每组选择12只鸡，称取肝脏和腹脂重量，计算腹脂率和肝脏指数。肝脏指数=肝重/鸡活体重(5)腹脂率＝腹脂重/鸡活体重×100%(6)采用索氏提取法（基于姚虹[14]的方法加以改进）测定肝脏脂肪含量，计算肝脂率。肝脂率＝(脱脂前样包重－脱脂后样包重)/(脱脂前样包重－绝干滤纸重)×100%(7)1.4.5血清生化指标试验结束后每组选择12只鸡采血，使用真空促凝采血管翅下静脉采血，4 ℃、3 000 r/min离心15 min，分离血清送至杭州市第二人民医院，使用全AU5400自动生化分析仪（BECKMAN COULTER）测定血清生化指标。检测项目包括高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰转肽酶（GGT）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）。1.4.6肝脏脂质代谢相关指标肝中TG和TC的含量分别采用磷酸甘油氧化酶法试剂盒和胆固醇氧化酶法试剂盒进行测定。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.4.7肝脏脂代谢相关基因的表达水平采用试剂盒法提取肝脏组织的总RNA，试剂盒购自艾科瑞生物科技有限公司。使用超微量核酸测定仪和琼脂糖凝胶电泳的方法对RNA浓度、纯度和完整性进行测定；采用试剂盒法进行反转录，合成模板cDNA（试剂盒购自南京诺唯赞生物科技有限公司）；采用ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix试剂盒配制qPCR体系，试剂盒购自南京诺唯赞生物科技有限公司。随后使用荧光定量PCR仪进行相关基因表达水平的检测与分析。实时荧光定量的结果采用2-∆∆Ct法处理。以对照组样品为校准样品：∆Ct校准样=CT对照组样品目的基因-CT对照组样品内参基因 (8)∆Ct待测样=CT试验组样品目的基因-CT试验组样品内参基因 (9)∆∆Ct=∆Ct待测样-∆Ct校准样 (10)2-∆∆C=目的基因mRNA相对表达量(11)引物委托上海生工生物工程有限公司设计合成，其中β-Actin为内参基因。引物信息见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.T002表2引物信息基因引物序列（5'→3'）序列号长度/bpPPARαF：GATGCTGCGTGAAGTGAAATGXM_025150258.1124R：CTGGTGAAAGGGTGTCTGTTATPPARγF：GTGCAATCAAAATGGAGCCNM_001001460.1106R：CTTACAACCTTCACATGCATSREBP-1cF：GCCATCGAGTACATCCGCTTNM_204126.292R：GGTCCTTGAGGGACTTGCTCCPT1F：GAGAAGAGTGCAGTGAGAAGAGXM_015286798.2152R：CCAGCCACAGAAGTAGAGTAAGFASNF：CCTGGAGATGTGGAGTATGTTGNM_205155.3110R：TCAAGGAGCCATCGTGTAAAGACCF：TACAGAGGTACCGGAGTGGTNM_205505.1225R：TCTTCCCGAAGGGCAAAGACSCD1F：CCTTGCGATACGTCTGGAGGXM_005025224.1276R：CGAAACACAGAACGGCCCAAMPKα1F：ATCTGTCTCGCCCTCATCCTNM_001039603136R：CCACTTCGCTCTTCTTACACCTTHMGRF：CTGGGTTTGGTTCTTGTTCANM_204485.2306R：ATTCGGTCTCTGCTTGTTCAβ-ActinF：TCCCTGGAGAAGAGCTATGAANM_205518.184R：CAGGACTCCATACCCAAGAAAG1.5数据统计与分析试验数据采用Excel 2015软件进行整理，SPSS 26.0软进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较。使用Excel 2015软件和GraphPad prism8.0软件进行图表制作。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1α-GML和PQQ·Na2对蛋鸡生产性能的影响（见表3）由表3可知，3个试验组蛋鸡产蛋率均极显著高于Con组（P0.01），GML+PQQ组蛋鸡产蛋率极显著高于GML组和PQQ组（P0.01）。GML+PQQ组平均蛋重极显著高于其他3组（P0.01），GML+PQQ组料蛋比极显著低于其他3组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.T003表3α-GML和PQQ·Na2对蛋鸡产蛋性能的影响项目产蛋率/%次品蛋率/%平均蛋重/(g/枚)料蛋比P值0.010.410.010.01Con组73.05±3.11C2.28±1.4959.59±1.47B2.36±0.06AGML组76.92±3.28B1.92±1.2259.33±1.26B2.29±0.06APQQ组75.76±2.95B2.06±1.0059.22±1.23B2.27±0.07AGML+PQ组80.94±4.00A1.84±1.5361.64±1.55A2.11±0.16B注：同列数据肩标不同大写字母表示差异极显著（P0.01），不同小写字母表示差异显著（P0.05），无字母或相同字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2α-GML和PQQ·Na2对蛋鸡蛋品质的影响（见表4）由表4可知，与Con组相比，GML组、PQQ组、GML+PQ组蛋黄颜色分别提高7.40%、5.36%、6.69%（P0.01）；各试验组蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度和哈夫单位差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.T004表4α-GML和PQQ·Na2对蛋鸡蛋品质的影响项目蛋壳强度/Pa蛋壳厚度/mm蛋白高度/mm哈夫单位蛋黄颜色P值0.930.310.990.890.03Con组4.02±0.630.36±0.047.27±1.9083.31±13.279.87±0.74BcGML组4.08±0.620.37±0.047.28±1.6083.61±14.3110.60±0.63AaPQQ组4.18±0.820.34±0.027.47±1.4685.99±8.4310.40±0.74ABbGML+PQ组4.06±0.770.36±0.037.25±1.5682.70±12.7610.53±0.74ABb2.3α-GML和PQQ·Na2对蛋鸡肝脏指数、肝脂率和腹脂率的影响（见表5）由表5可知，与Con组相比，PQQ组蛋鸡肝脏指数极显著降低（P0.01），3个试验组肝脂率均极显著降低（P0.01），分别降低20.17%、19.74%和26.20%；与Con组相比，GML组和GML+PQQ组腹脂率分别降低57.01%、48.09%（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.T005表5α-GML和PQQ·Na2对蛋鸡肝脏指数、肝脂率和腹脂率的影响项目肝脏指数/(g/kg)肝脂率/%腹脂率/%P值0.010.010.01Con组19.24±2.30A18.59±1.86A3.14±1.46AGML组18.55±2.29A14.84±1.63B1.35±0.67BPQQ组16.53±2.25B14.92±1.81B1.93±0.47ABGML+PQ组19.86±2.86A13.72±1.99B1.63±0.91B2.4α-GML和PQQ·Na2对血清生化指标的影响2.4.1α-GML和PQQ·Na2对肝功能指标的影响（见表6）由表6可知，与Con组相比，各试验组血清ALP和GGT活性均有下降趋势，但差异不显著（P0.05）；各试验组血清ALT活性分别降低39.29%、31.29%和33.41%（P0.05），AST活性分别降低8.94%、9.92%和10.30%（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.T006表6α-GML和PQQ·Na2对肝功能指标的影响项目ALPGGTALTASTP值0.230.160.010.01Con组631.67±459.2614.17±8.524.25±1.81a237.75±16.83AGML组363.50±483.918.58±4.142.58±1.38b216.50±10.30BPQQ组471.75±450.769.08±6.332.92±0.67b214.17±9.15BGML+PQ组422.25±292.389.00±5.492.83±0.84b213.25±20.37BU/L2.4.2α-GML和PQQ·Na2对血清脂代谢指标的影响（见表7）由表7可知，与Con组相比，各试验组蛋鸡血清HDL-C和LDL-C含量差异均不显著（P0.05），血清TG含量分别降低了45.68%、34.53%和42.63%（P0.01）；GML组、PQQ组、GML+PQQ组血清TC含量分别降低了23.85%、22.31%和25.00%（P0.01或P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.T007表7α-GML和PQQ·Na2对血清脂代谢指标的影响项目HDL-CLDL-CTCTGP值0.230.210.01 0.01Con组0.71±0.111.05±0.222.60±0.29Aa9.50±3.26AGML组0.64±0.100.84±0.241.98±0.61Bc5.16±1.24BPQQ组0.64±0.170.91±0.242.02±0.56Ab6.22±1.95BGML+PQ组0.74±0.170.95±0.261.95±0.34Bc5.45±1.52Bmmol/L2.5α-GML和PQQ·Na2对肝脏脂代谢指标的影响（见图1）由图1可知，与Con组相比，各试验组肝脏TG含量分别降低46.78%、43.59%和46.41%（P0.01），TC含量分别降低34.65%、16.84%和34.59%（P0.01）。GML组和GML+PQQ组肝脏TC含量与PQQ组相比下降21.42%（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.F001图1α-GML和PQQ·Na2对肝脏脂代谢指标的影响注：“*”表示差异显著（P0.05），“**”表示差异极显著（P0.01）；下图同。2.6肝脏HE染色切片（见图2）由图2（a）可知，Con组大部分肝细胞肿大，肝细胞胞浆内可见许多圆形空泡，形成大量的脂肪滴，肝索紊乱，正常肝细胞数量减少，胞核位于中央或被挤到一侧，肝窦隙可见红细胞。由图2（b）可知，GML组未发现明显出血和炎症浸润，仅见少量胞浆内脂滴。由图2（c）可知，PQQ组肝细胞大小均匀，排列整齐，肝索结构清晰可见，相比Con组肝细胞中脂肪空泡数量显著减少，但空泡数比GML组和GML+PQQ组稍多，且肝细胞略有肿胀，局部肝窦隙可见少量红细胞。由图2（d）可知，GML+PQQ组肝细胞排列整齐，大小均匀，肝小叶、肝索结构明显存在，仅在极少数肝细胞胞浆内发现脂肪空泡，且空泡体积很小。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.F002图2肝脏HE染色切片2.7肝脏油红O染色切片（见图3）由图3（a）可知，Con组肝细胞呈现明显脂肪性病变，胞浆内存在大量脂滴堆积，细胞核被脂滴挤于细胞边缘。由图3（b）可知，GML组肝细胞浆内脂滴数量显著减少，仅有少量散在分布。由图3（c）可知，PQQ组肝细胞浆内脂滴数量显著减少，脂肪变性显著减轻，但仍有部分区域可见红染脂滴聚集。由图3（d）可知，GML+PQQ组肝小叶和肝索轮廓清晰，细胞核位于细胞中央，核大而圆，呈淡蓝染色；细胞浆内无明显红染脂滴，偶见少许红染脂滴，且脂滴体积很小。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.F003图3肝脏油红O染色切片2.8α-GML和PQQ·Na2对肝脏中脂质代谢相关基因表达的影响2.8.1α-GML和PQQ·Na2对肝脏内脂质合成相关基因mRNA相对表达量的影响（见图4）由图4（a）可知，与Con组相比，GML组肝脏中ACC的mRNA相对表达量极显著降低（P0.01），GML+PQQ组ACC的表达量显著降低（P0.05）；GML组和GML+PQQ组ACC的表达量显著低于PQQ组（P0.05）。由图4（b）可知，与Con组相比，GML组和PQQ组肝脏中FASN的mRNA相对表达量均极显著下降（P0.01），GML+PQQ组FASN的表达量显著下降（P0.05）。由图4（c）可知，与Con组相比，PQQ组肝脏中HMGR的表达量显著升高（P0.05）；PQQ组HMGR的表达量显著高于GML组（P0.05）。由图4（d）可知，与Con组相比，各试验组肝脏中SCD-1的mRNA相对表达量均极显著下降（P0.01）。图4α-GML和PQQ·Na2对肝脏内脂质合成相关基因mRNA相对表达量的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.F4a110.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.F4a22.8.2α-GML和PQQ·Na2对肝脏内脂质分解相关基因mRNA相对表达量的影响（见图5）由图5（a）可知，与Con组相比，GML组和GML+PQQ组肝脏中ATGL的mRNA相对表达量显著上升（P0.05）；与PQQ组相比，GML组和GML+PQQ组ATGL的表达量均显著上升（P0.05）。由图5（b）可知，与Con组相比，PQQ组肝脏中CPT-1的mRNA相对表达量显著降低（P0.05）；与PQQ组相比，GML组和GML+PQQ组CPT-1的表达量均极显著上升（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.F005图5α-GML和PQQ·Na2对肝脏内脂质分解相关基因mRNA相对表达量的影响2.8.3α-GML和PQQ·Na2对肝脏内脂质代谢转录因子mRNA相对表达量的影响（见图6）由图6（a）可知，与Con组相比，各试验组肝脏中PPARα的mRNA相对表达量差异均不显著（P0.05），但GML组和GML+PQQ组PPARα的表达量有上升趋势。由图6（b）可知，与Con组相比，GML+PQQ组肝脏中PPARγ的mRNA相对表达量极显著降低（P0.01）；与GML组相比，PQQ组PPARγ的表达量显著下降（P0.05），GML+PQQ组PPARγ的表达量极显著下降（P0.01）。由图6（c）可知，与Con组相比，GML组和GML+PQQ组肝脏中PPARα的mRNA相对表达量显著降低（P0.05）；与PQQ组相比，GML组和GML+PQQ组肝脏中SREBP-1c的表达量均极显著下降（P0.01）。由图6（d）可知，与Con组相比，GML组肝脏中AMPKα1的mRNA相对表达量显著上升（P0.05）；与GML组相比，PQQ组AMPKα1的表达量极显著降低（P0.01）。图6α-GML和PQQ·Na2对肝脏内脂质代谢转录因子mRNA相对表达量的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.F6a110.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.15.006.F6a23讨论不同于哺乳动物，禽类的脂肪代谢几乎均在肝脏进行。肝脏既是蛋鸡体内最大的消化腺，也是其体内物质能量代谢和物质转化最旺盛、功能最多样化的器官，在蛋鸡脂肪酸合成、分解和运输过程中发挥重要作用。目前，蛋鸡由于集约化养殖模式和自身生理特性，易引起机体脂质代谢紊乱，导致肝脏脂质蓄积，并可能进一步诱发FLHS，影响养殖效益[15]。因此，调节蛋鸡肝脏的脂质代谢、减少肝脏脂质沉积、维持肝脏的正常运转，在蛋鸡生产中具有重要意义。3.1α-GML和PQQ·Na2对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响本试验结果显示，饲粮中添加α-GML和PQQ·Na2以及两者复配，均能够显著提高蛋鸡产蛋率和蛋黄颜色，两者复配还能够增加平均蛋重，降低料蛋比，与刘梦芸等[16]和孙丽敏[17]的研究结果相似。刘梦芸等[16]研究发现，饲粮中添加α-GML能够提高海兰褐蛋鸡的产蛋率和平均蛋重，显著降低料蛋比。孙丽敏[17]研究发现，产蛋鸡饲粮中添加0.8 mg/kg的PQQ·Na2可提高23周龄京红1号蛋鸡的产蛋率。蛋鸡发生脂肪肝会导致产蛋率下降和料蛋比上升，而本试验中3个试验组蛋鸡的生产性能和蛋品质均高于对照组，这也在一定程度上表明了α-GML和PQQ·Na2以及两者复配对蛋鸡脂肪肝具有缓解作用。3.2α-GML和PQQ·Na2对血清及肝脏脂代谢相关指标的影响本试验结果表明，α-GML和PQQ·Na2以及两者复配均能够显著或极显著降低蛋鸡血清AST、ALT活性，血清TC、TG含量，肝脏TC、TG含量以及肝脂率、腹脂率，与赵芹[13]和孔繁刚[18]的研究结果类似。赵芹[13]研究表明，饲粮中添加0.16 mg/kg的PQQ·Na2能够改善蛋鸡生产性能和蛋品质，显著降低血清和肝脏的TG含量，显著降低肝脂率，减少肝组织脂肪空泡。孔繁刚[18]试验发现，饲粮添加300 mg/kg的α-GML能够延缓蛋鸡产蛋后期产蛋率的下降，提高蛋品质，降低血清和肝脏的TG含量。临床中，AST和ALT通常可反映肝脏的损伤情况，血液和肝脏中TC、TG的含量及肝脂率能够反映肝脏脂质的堆积情况，腹脂率能够在一定程度上反映机体脂质沉积的情况，肝脏脂质蓄积增加往伴随着腹脂率的上升。上述结果表明，饲粮中添加α-GML和PQQ·Na2以及两者复配能够显著降低蛋鸡肝脏脂质沉积，维持肝脏正常运转。肝脏病理切片结果也呼应了上述结果。与对照组相比，3个试验组肝脏形态结构正常，肝细胞中脂滴大幅减少，原因可能是机体利用月桂酸时能量消耗提升，会反馈给中枢神经，提高交感神经系统活性，增强与脂质代谢相关酶的表达水平，进而提高机体脂质的代谢速度。PQQ·Na2能够调节线粒体合成相关基因表达，增加线粒体合成并改善线粒体酶活[13]，增强肝脏中脂肪酸的氧化分解。此外，α-GML和PQQ·Na2均能够提高机体抗氧化能力，降低肝脏脂质过氧化程度[3,16]，减少脂质堆积对肝脏造成的损伤，维持肝脏正常的生理功能。α-GML和PQQ·Na2还能够增强肠道屏障功能[19]，维持正常完整的肠道屏障，减少肠内的有害物质穿过肠道损害肝脏，维护肝脏和肠道之间的运转平衡。同时，病理切片中GML+PQQ组肝细胞脂滴数最少，肝脏病理变化最小，肝脂率也最低，表明α-GML和PQQ·Na2复配使用在降低蛋鸡肝脏脂质沉积方面效果更加显著。3.3α-GML和PQQ·Na2对肝脏脂代谢相关基因表达的影响实时荧光定量PCR结果显示，α-GML能够显著上调蛋鸡肝脏ATGL、AMPKα1的mRNA表达量，显著下调ACC、FASN、SCD-1和SREBP-1c的表达量；PQQ·Na2能够显著下调肝脏FASN和SCD-1的表达量；α-GML和PQQ·Na2复配能够显著上调肝脏ATGL的表达量，显著下调ACC、FASN、SCD-1、SREBP-1c和PPARγ的表达量。乙酰辅酶A羧化酶（ACC）是内源性脂肪酸合成的关键限速酶，脂肪酸合成酶（FASN）是棕榈酸合成的限速酶，硬脂酰辅酶A去饱和酶1（SCD1）是催化饱和脂肪酸生成单不饱和脂肪酸的限速酶。脂肪甘油三酯脂酶（ATGL）是催化水解甘油三酯为甘油二酯关键限速酶，肉毒碱棕榈酰转移酶-1（CPT1）是脂肪酸氧化的关键限速酶；过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）可促进脂肪细胞的分化，是脂肪生成和脂肪组织发育的关键调控因子[20]。胆固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）可通过上调下游基因ACC和FASN的mRNA表达增加机体脂质合成[21]；腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）作为生物能量代谢调节的关键分子，活化后能够促进能量生成途径（如脂肪酸β-氧化），抑制能量消耗途径（如脂肪酸的从头合成和糖异生）[22]。FASN、SCD-1、CPT-1、SREBP-1c和PPARγ的表达量上调能够促进肝脏脂质的合成，ATGL和AMPKα1的表达量上调能够促进肝脏脂质的分解。上述结果表明，α-GML和PQQ·Na2及两者复配能够通过上调促进肝脏脂质分解相关基因的表达水平，下调促进肝脏脂质合成相关基因的表达水平，调节蛋鸡肝脏的脂质代谢。4结论本研究结果表明，饲粮中添加α-GML、PQQ·Na2以及两者复配能够提高蛋鸡生产性能和蛋品质，调节蛋鸡肝脏脂质代谢，减少肝脏脂质沉积，并且两种添加剂复配使用在降低蛋鸡肝脏脂质沉积方面效果更显著。