研究表明，超过28 ℃会使蛋鸡产生热应激，损害动物福利，在一定程度上影响动物的生产性能，从而造成经济损失[1]。蛋鸡没有汗腺，散热能力较差，温度较高时易出现热应激反应。蛋鸡产蛋后期体内的脂肪过多，抗体水平逐渐下降，会造成脂质氧化还原失调，从而对热应激较敏感。郝二英等[2]研究表明，产蛋后期蛋鸡性能下降主要是由于卵巢中卵泡数量减少及卵泡细胞质量下降造成。硒缺乏会导致动物卵巢功能障碍，适当增加硒水平可清除体内自由基，提高抗氧化功能[3]。机体产生热应激时，体内的抗氧化酶系统被破坏，使机体的抗氧化能力减弱，血液皮质醇含量升高，从而导致组织损伤，影响蛋鸡健康。硒是蛋鸡生长必需的微量元素之一，能够调节机体新陈代谢，参与机体的抗氧化系统，对过氧化物的分解、自由基清除和机体免疫力的调节中起重要作用[4]。酵母硒是以酵母作为载体，比无机硒更安全，更易于机体消化吸收，具有较强的抗氧化活性，在猪、羊、肉鸡饲养过程中作为抗热应激添加剂广泛应用。Wu等[5]研究发现，与无机硒相比，日粮中添加0.5 mg/kg酵母硒可显著提高蛋鸡的生产性能和蛋品质。Qiu等[6]研究发现，日粮中添加2 mg/kg酵母硒可显著提高蛋鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，提高蛋鸡抗氧化能力。Lu等[7]研究发现，日粮中添加3 mg/kg酵母硒对蛋鸡的卵巢发育、蛋硒沉积具有显著影响。目前，缺少关于酵母硒对产蛋后期蛋鸡的生产性能、蛋品质、血常规及抗氧化功能影响的研究。本试验研究日粮中添加酵母硒对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质、血常规及抗氧化状态的影响，为生产实际中应用酵母硒提升夏季蛋鸡抗氧化能力提供参考。1材料与方法1.1试验材料海兰褐蛋鸡由凤阳双喜养殖场提供。酵母硒含硒670 mg/kg，其中有机硒占95%以上，购自合肥市东升牧业有限公司。1.2试验设计选取420日龄海兰褐蛋鸡360只，随机分4组，每组3个重复，每个重复30只蛋鸡。我国蛋鸡饲养标准推荐日粮中硒含量为0~10 mg/kg，本试验日粮中硒含量为0.3 mg/kg。对照组蛋鸡饲喂基础日粮，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.1%、0.2%、0.3%的酵母硒。基础日粮组成及营养水平见表1。预试期7 d，正式试验期60 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.007.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米63.00代谢能/(MJ/kg)11.57豆粕15.00粗蛋白质/%16.35麸皮7.00钙/%3.96鱼粉7.00总磷/%0.83贝壳粉4.50赖氨酸/%0.85磷酸氢钙1.00蛋氨酸/%0.38小苏打0.70食盐0.30预混料1.50注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 4 000 IU、VD3 1 600 IU、VK3 1.5 mg、VB1 1.0 mg、VB2 3.0 mg、VB6 3.0 mg、VB12 0.005 mg、泛酸8.0 mg、叶酸20 mg、烟酸20 mg、胆碱500 mg、Zn 50 mg、Fe 25 mg、Mn 60 mg、I 0.35 mg、Cu 8 mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理蛋鸡采用笼叠式饲养，饲养密度为每笼3只蛋鸡。试验期间最高温度35 ℃，平均湿度为50.4%。蛋鸡自由采食、饮水，光照16 h，按常规程序进行免疫和消毒。1.4测定指标及方法1.4.1样品采集试验结束时，每组随机选取20只鸡，翅下静脉采血20 mL，分别置于抗凝管与非抗凝管中，3 500 r/min离心10 min，-20 ℃保存。1.4.2生产性能每日记录每重复蛋鸡的产蛋数、总蛋重，每周结料，统计耗料量，计算平均蛋重、产蛋率、料蛋比及平均日采食量。平均蛋重=总蛋重/(试验鸡数×试验天数)(1)产蛋率=产蛋总数/(试验鸡数×试验天数)×100%(2)料蛋比=总耗料重/总蛋重(3)平均日采食量=总耗料重/(试验鸡数×试验天数)(4)1.4.3蛋品质试验结束时，各重复随机选取10枚鸡蛋，测定蛋品质。利用游标卡尺测定鸡蛋的长径与短径，计算蛋形指数，利用多功能蛋品质测定仪测定蛋黄系数和哈夫单位，利用蛋壳厚度测定仪测定蛋壳厚度。蛋形指数=蛋的纵径长度/蛋的横径长度(5)蛋黄系数=蛋黄高度/蛋黄直径(6)哈夫单位=100×lg(H-1.7×W 0.37+7.57)(7)式中：H为蛋白高度（mm）；W为鸡蛋质量（g）。1.4.4血常规指标取乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝全血，使用BC-3000 Plus型全自动血液分析仪检测血常规指标，包括白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞比容（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞分布宽度变异系数（RDW）、血小板（PLT）指标。1.4.5血清抗氧化指标取离心后血清，利用试剂盒（南京建成生物工程研究所）检测血清总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、维生素E（VE）、维生素C（VC）、过氧化氢（H2O2）、羟基自由基（·OH）、丙二醛（MDA）等指标。1.5数据统计与分析利用SPSS 26.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1日粮中添加酵母硒对蛋鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组蛋鸡产蛋率、料蛋比、平均日采食量和平均蛋重差异不显著（P0.05），平均蛋重和产蛋率随着酵母硒添加量增加而呈现上升趋势，料蛋比有下降的趋势。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.007.T002表 2日粮中添加酵母硒对蛋鸡生产性能的影响组别平均蛋重/(g/枚)产蛋率/%料蛋比平均日采食量/[g/(只·d)]对照组57.89±3.1078.86±3.752.38±0.11117.40±6.30试验Ⅰ组58.80±2.7579.15±3.552.37±0.13117.82±5.82试验Ⅱ组59.03±2.4380.61±3.552.36±0.11117.62±5.85试验Ⅲ组59.29±2.8780.68±4.162.35±0.09117.34±6.302.2日粮中添加酵母硒对蛋品质的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组蛋壳厚度分别降低了9.16%、12.38%、8.42%（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.007.T003表3日粮中添加酵母硒对蛋品质的影响组别蛋壳厚度/mm蛋形指数蛋黄系数哈夫单位对照组0.404±0.066Aa1.303±0.4910.424±0.33085.528±9.801试验Ⅰ组0.367±0.030Bb1.319±0.7000.415±0.04284.136±9.535试验Ⅱ组0.354±0.316Bb1.304±0.3330.413±0.03983.148±11.889试验Ⅲ组0.370±0.047Bb1.314±0.0480.411±0.04582.763±10.793注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.3日粮中添加酵母硒对蛋鸡血常规的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验Ⅱ组蛋鸡全血中WBC数量降低了8.61％（P0.01），试验Ⅰ组、Ⅱ组蛋鸡全血中MCV分别提高了3.12%、3.33%（P0.05），试验Ⅱ组、Ⅲ组蛋鸡全血中MCHC分别降低了4.64%和5.42%（P0.01），试验Ⅱ组蛋鸡全血中PLT数量降低了26.69%（P0.05），试验Ⅲ组蛋鸡全血中MCH降低了4.24%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.007.T004表4日粮中添加酵母硒对蛋鸡血常规的影响项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组WBC/(109/L)214.55±15.36Aa208.80±10.04ABab196.07±13.07Bb209.84±8.22ABaRBC/(1012/L)2.20±0.212.07±0.211.98±0.252.22±0.20HGB/(g/L)101.75±10.01103.29±8.7995.50±10.45104.13±7.12HCT/%27.73±2.6728.86±2.9127.30±3.1530.01±2.38MCV/fL134.08±5.15b138.26±2.59a138.54±3.82a135.40±2.44abMCH/pg49.01±1.22a49.43±2.13a48.40±2.50ab46.93±1.60bMCHC/(g/L)366.63±14.78Aa358.00±10.34ABab349.63±12.08Bb346.75±7.63BbRDW/％8.44±0.928.04±0.618.31±0.678.45±0.61PLT/(109/L)14.50±2.78a11.43±2.76ab10.63±3.50b11.88±4.39ab注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.4日粮中添加酵母硒对蛋鸡血清抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验Ⅰ组蛋鸡血清T-SOD活性升高了7.83%（P0.01）；试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组蛋鸡血清GSH-Px活性分别升高了20.49%、40.02%、20.15%（P0.01）；试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组蛋鸡血清H2O2含量分别降低了17.56%、18.46%、17.78%（P0.05）；试验Ⅰ组蛋鸡血清·OH含量升高了19.65%（P0.01），MDA含量降低17.51%（P0.05）。与试验Ⅰ组相比，试验Ⅲ组蛋鸡血清T-AOC降低了14.11%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.007.T005表5日粮中添加酵母硒对蛋鸡血清抗氧化指标的影响项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组T-AOC/(U/mL)9.29±0.84ab10.35±1.52a9.61±1.00ab8.89±1.62bT-SOD/(U/mL)110.78±2.82Bb119.45±7.25Aa108.06±2.76Bb109.90±6.10BbGSH/(mg/L)0.02±0.010.02±0.010.03±0.020.04±0.04GSH-Px/(U/mL)220.50±14.89Cc265.69±20.79Bb308.74±11.94Aa264.93±20.40BbVE/(mg/L)6.92±1.016.23±0.397.10±1.217.24±1.22VC/(mg/L)9.93±2.169.35±2.2010.12±2.249.07±2.27H2O2/(mol/L)202.60±44.56a167.03±5.90b165.20±9.20b166.57±9.03b·OH/(U/mL)304.33±37.78Bb364.12±27.49Aa289.35±40.33Bb314.65±36.40ABbMDA/(μmol/L)16.90±1.89a13.94±1.47b17.03±1.90a16.57±2.47a3讨论3.1日粮中添加酵母硒对蛋鸡生产性能的影响随着日龄增加，蛋鸡进入产蛋后期时产蛋量和蛋品质明显下降，410日龄以后，产蛋率急剧下降[8]。酵母硒能够促进动物机体内的硒代谢，增加性腺激素分泌，进而提高蛋产量。李晓丽等[9]研究发现，添加酵母硒能够显著提升蛋鸡产蛋率，添加0.3 mg/kg酵母硒可以使蛋鸡的料蛋比降低9.50%。本试验中，各试验组蛋鸡产蛋的平均蛋重、产蛋率和料蛋比均无显著变化，与上述研究结果不同。原因可能是蛋鸡的产蛋阶段、品种和养殖环境不同。贺淼等[10]研究发现，日粮中添加酵母硒蛋鸡的产蛋率和蛋重均有上升的趋势，料蛋比有下降的趋势，表明日粮中添加酵母硒可缓解蛋鸡产蛋性能下降，与本试验结果一致。3.2日粮中添加酵母硒对蛋品质的影响蛋壳厚度会影响蛋贮藏和运输；蛋形指数会影响鸡蛋的种用价值；哈夫单位是评价蛋白品质的重要指标，哈夫单位越高，表明鸡蛋的新鲜程度越高[11]。张浩等[12]研究发现，日粮中分别添加0.1、0.2、0.3、0.4 mg/kg酵母硒，鸡蛋的哈夫单位显著提高4.04%、5.02%、7.71%、5.01%，酵母硒对蛋壳厚度和蛋形指数无显著影响。李晓丽等[9]研究发现，日粮中添加0.3 mg/kg酵母硒时，鸡蛋的哈夫单位显著提高7.87%，对蛋形指数无显著影响。本试验表明，日粮中添加0.3%酵母硒时，蛋壳厚度显著降低12.38%，对哈夫单位和蛋形指数无显著影响，可能与高温环境、生产阶段和日粮硒添加水平等有关。魏佳钰等[13]在日粮中分别添加0.3 mg/kg亚硒酸钠，发现添加0.8、1.3 mg/kg酵母硒对鸡蛋的哈夫单位无显著影响，蛋壳厚度在试验121~170 d呈下降趋势，与本试验结果一致。3.3日粮中添加酵母硒对蛋鸡血常规指标的影响血常规指标是评价动物自身健康状态的重要指标，可反映机体代谢状况，但可能会受到多种因素影响，包括营养、环境和气候等[14]。当环境温度过高时，机体散热受阻，会通过减少产热量，增加热发散等反应，引起体内血液成分改变，以保持热平衡。WBC是免疫系统的重要组成部分[15]。Borzouie等[16]研究发现，夏季高温刺激可显著提高畜禽血液中WBC数量。本试验结果显示，对照组蛋鸡血液中WBC数量最高，可能是由于热应激状态下蛋鸡免疫能力下降，细菌进入机体，反复刺激导致WBC数量升高，与Lu等[7]研究结果一致。何纪垲等[17]研究表明，随着蛋鸡日龄增长，产蛋后期蛋鸡生殖系统衰老，长期持续产蛋导致生殖系统发生慢性病变，出现免疫力低下等状况，会刺激血液系统产生较多的WBC。本试验发现，日粮中添加酵母硒可降低机体WBC的数量，表明酵母硒可通过调节提高细胞免疫水平提高蛋鸡免疫力。RBC是血液中数量最多、输送氧气最主要的媒介。夏季高温环境会使蛋鸡产生热应激反应，呼吸速率加快，组织细胞耗氧量增加 ，体内脱水加速，血液浓度增加[18]。因此，MCH含量代偿性升高，相应MCV含量会下降。李晓丽等[9]研究发现，日粮中添加酵母硒能够降低蛋鸡血液中MCH含量，升高MCV含量。本试验中，试验Ⅰ组、Ⅱ组蛋鸡血液中MCV显著升高，试验Ⅲ组MCH显著降低，表明添加酵母硒可增强蛋鸡对高温的抵抗能力，减少因外界因素导致机体血流稳态改变。3.4日粮中添加酵母硒对蛋鸡血清抗氧化指标的影响血液抗氧化系统在动物健康和生产中具有关键功能。热应激可使蛋鸡体内氧化还原系统发生紊乱[19]。T-AOC可以反映动物机体抗氧化能力。Bakhshalinejad等[20]研究发现，日粮中添加酵母硒可提高蛋鸡血清T-AOC。本试验中，试验Ⅰ组蛋鸡血清T-AOC最高，表明日粮中添加0.1%酵母硒效果较好。T-SOD和GSH-Px是动物机体主要抗氧化酶。硒是维持动物机体健康不可或缺的微量元素，可支持细胞膜结构，也直接参与GSH-Px的合成。本试验中，各试验组蛋鸡血清中GSH-Px活性均显著升高，表明酵母硒可提高蛋鸡的抗氧化能力，与Sun等[21]研究结果一致。日粮中添加酵母硒有利于升高GSH-Px活性，提高动物抗氧化能力，间接增强SOD活性。本试验中，试验Ⅰ组蛋鸡血清T-SOD活性显著升高，表明动物机体氧化平衡中T-SOD与GSH-Px起协同作用，且日粮中添加0.1%的酵母硒效果较好。MDA可反映机体内脂质过氧化的程度。Muhammad等[22]研究发现，高温环境会使肉鸡血液MDA含量升高。本试验中，各试验组蛋鸡血清MDA含量均降低，表明酵母硒能降低机体自由基活性，减少氧化作用，减轻热应激引起的损伤，提高蛋鸡抗氧化功能。4结论本试验中，日粮中添加酵母硒有利于缓解夏季蛋鸡产蛋后期生产性能下降的趋势，有利于稳定鸡蛋的哈夫单位和蛋形指数；降低血液中白细胞数量，调节蛋鸡产蛋后期炎症反应；显著增强产蛋后期蛋鸡的血清抗氧化能力，减轻热应激对机体的损伤。因此，酵母硒可作为日粮添加剂减少夏季高温环境对蛋鸡的负面影响，酵母硒的适宜添加量为0.1%。