酵母培养物（YC）是以特定的培养基为底物，接种酵母菌进行固体或液体发酵、浓缩和干燥后所生产的一种微生态饲料添加剂[1]，主要包含酵母细胞外代谢产物、微生物菌体蛋白及发酵后变性的培养基。YC代谢产物丰富，富含多种有机酸、矿物质、消化酶、维生素、氨基酸、寡糖及其他一些未知功能性免疫因子[2]。研究表明，酵母培养物可改善反刍动物日粮的适口性，为瘤胃微生物发酵提供丰富的营养底物，提高瘤胃微生物的数量，从而提高奶牛在热应激条件下对饲料的消化率，增加产奶量[3-4]。米曲霉（Aspergillus oryzae）是曲霉属真菌中的一种好氧性菌种，可以产生多种消化酶，其可作为微生态制剂在动物生产中广泛使用。米曲霉可以有效调节反刍动物瘤胃生理功能，稳定瘤胃pH值，增强瘤胃的发酵功能[5]。张海等[6]研究表明，在日粮中添加米曲霉能够显著提高泌乳期奶牛干物质消化率，提高奶牛的采食量和产奶量。Gomez-Alarcon等[7]研究表明，添加米曲霉可促进瘤胃微生物对纤维的降解与消化。丁洪涛等[8]报道，添加不同活性的米曲霉发酵提取物提高了奶牛对饲料干物质、粗蛋白、粗纤维的消化率，结果呈现剂量效应。本研究在泌乳期奶牛的基础日粮中添加不同种类的真菌培养物（酵母培养物和米曲霉培养物），探究真菌培养物对泌乳期奶牛生产性能和营养物质消化率的影响，为真菌培养物在奶牛生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验时间与地点试验于2022年8月1日至8月31日于新疆昌吉天缘朗润奶牛繁育基地进行。试验期30 d。1.2试验材料酵母培养物为益康XPC，该产品是以谷物型原料作为主要发酵底物，接种特定筛选的酿酒酵母菌进行固液两级发酵、浓缩和干燥所生产的微生态产品。米曲霉培养物是以糖蜜、麦麸、豆粕等作为发酵底物，接种米曲霉菌进行深度发酵所生产的产品。1.3试验设计选取120头生产胎次、泌乳天数、初始体重、产奶量接近、体况较好的泌乳期荷斯坦奶牛，随机分为3组，每组40头，每组4个重复，每个重复10头牛。对照组奶牛饲喂基础日粮，试验1组奶牛补饲100 g/(头·d)的酵母培养物，试验2组奶牛补饲100 g/(头·d)的米曲霉培养物。参考NRC（2001）标准配制日粮，基础日粮组成和营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.004.T001表1基础日粮组成及营养水平（干物质基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00精补料27.50粗蛋白质/%14.74苜蓿干草10.50中性洗涤纤维/%42.75玉米青贮51.25酸性洗涤纤维/%26.92全棉籽4.50钙/%0.93甜菜颗粒粕6.00磷/%0.45小苏打0.25产奶净能/(MJ/kg)6.86注：1.精补料为新疆天康饲料有限公司生产的682H。2.营养水平均为计算值。1.4饲养管理各组试验牛均为独立舍饲饲养，由试验专员负责饲养管理，每日4：30—6：00和17：30—19：00分别投喂TMR日粮1次，每日17：30—19：00投料时添加真菌培养物，投料方式为将真菌培养物均匀撒至TMR日粮表面。试验期间泌乳牛自由饮水、运动，各组其他饲养管理方式保持一致，参考养殖场常规饲养模式进行。1.5测定指标及方法1.5.1采食量及温湿指数根据每日TMR日粮投喂量，测定各组每头牛的平均采食量。在牛舍的前、中、后位置选取3个点安装干湿球温度计，每隔1 h收集1次圈舍温度和相对湿度，计算日平均温湿指数（THI）。当THI72为无热应激；73THI77为轻度热应激；78THI89为中度热应激；THI90为重度热应激[9]。THI=0.8×温度+相对湿度×(温度-14.4)+46.4(1)1.5.2产奶性能试验期间奶牛每日产奶量数据从以色列阿菲金牧场管理系统导出，分别计算试验全期平均产奶量、试验开始与试验结束前7 d产奶量。1.5.3粪筛数据根据奶牛样本数大于10头、采集全部粪便类型的原则，采集各组牛新鲜粪便约2 L，使用嘉吉粪便分离筛，使用清水反复冲淋粪便，记录分析粪便分离筛上层、中层、下层筛上物的体积占比。试验共进行3次粪筛分离试验，分别在试验前期、中期和后期各进行1次，粪筛各层筛上物占比参考标准为上层体积占比10%（高产牛20%），中层体积占比20%，下层体积占比50%。1.6数据统计与分析原始数据使用Excel软件进行预处理，SPSS 25数据分析软件进行单因素方差分析，以试验结束前7 d产奶量为自变量，试验初始前7 d产奶量为协变量进行协方差处理。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同真菌培养物对奶牛采食量及牛舍THI变化的影响（见表2、图1、图2）由表2可知，试验1组和试验2组奶牛的平均日采食量分别比对照组提高了3.08%和2.31%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.004.T002表2不同真菌培养物对奶牛平均日采食量的影响项目对照组试验1组试验2组平均日采食量43.24±0.89a44.57±1.07b44.24±1.15b注：1.采食量均为湿重（50%左右的含水量）。2.同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。kg/（头·d）由图1可知，试验全期牛舍的温湿指数大于72，表明奶牛处于不同程度的热应激状态。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.004.F001图1试验期间温湿指数变化曲线由图2可知，试验开展前期，各组奶牛的采食量较为相近；随着试验的进行，试验1组和试验2组奶牛的采食量在第7、9 d呈现上升趋势，而对照组奶牛采食量无明显变化。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.004.F002图2试验期间各组奶牛采食量变化曲线由图1、图2可知，试验后期，随着温湿指数缓慢下降，各组奶牛采食量达到峰值。研究表明，酵母培养物提高热应激奶牛采食量的效果优于米曲霉培养物。2.2不同真菌培养物对奶牛产奶量的影响（见表3、表4）由表3可知，与初始平均产奶量相比，对照组奶牛结束平均产奶量降低了4.10 kg/头，试验1组与试验2组奶牛结束平均产奶量降低幅度较小，分别降低了1.22、1.42 kg/头，表明酵母培养物延缓奶牛产奶量降低的效果最好，其次是米曲霉培养物。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.004.T003表3不同真菌培养物对试验开始及结束奶牛产奶量的影响组别初始平均产奶量结束平均产奶量对照组34.57±1.5430.47±0.85试验1组34.40±0.9733.18±1.26试验2组30.72±0.9929.30±0.78kg/（头·d）由于试验开始前，各组奶牛初始产奶量不一致，因此以试验结束前7 d产奶量为自变量，试验初始前7 d产奶量为协变量进行协方差处理，结果见表4。由表4可知，试验1组和试验2组试验全期奶牛平均产奶量较为相近，分别比对照组提高了7.15%、5.91%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.004.T004表4不同真菌培养物对试验全期奶牛平均产奶量的影响项目对照组试验1组试验2组产奶量30.47±1.54a32.65±0.97b32.27±0.99bkg/（头·d）2.3不同真菌培养物对奶牛粪筛分离物的影响（见表5）由表5可知，试验前期，各组奶牛粪筛上层筛上物占比较为相近。试验中期，各组奶牛粪筛上层筛上物占比均呈现不同程度的上升，推测是泌乳奶牛处在严重热应激状态导致日粮消化率下降。与前期相比，试验后期对照组上层筛上物占比明显增加，试验1组和试验2组均有小幅度下降，表明试验2组泌乳奶牛饲料消化率优于试验1组，且两组均优于对照组。试验1组和试验2组试验后期粪筛底层筛上物比试验前期均有明显增长，对照组占比明显下降。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.16.004.T005表5不同真菌培养物对奶牛粪筛分离物的影响项目对照组试验1组试验2组试验前期上层23.7124.9624.56中层30.5226.1332.47底层45.7748.9142.97试验中期上层29.5632.5931.25中层34.2728.2636.60底层36.1739.1532.15试验后期上层31.6221.2519.78中层29.4520.5626.65底层38.9358.1953.57%综合分析结果表明，试验2组的奶牛消化性能最好，其次为试验1组，表明补饲真菌培养物均能改善奶牛对日粮的消化性能。3讨论3.1不同真菌培养物对奶牛平均日采食量的影响奶牛处于热应激状况下，会出现食欲减退、干物质采食量下降的情况，导致自身营养物质摄入量难以满足自身正常营养需要。因此，维持热应激条件下奶牛的采食量和消化率的稳定性对奶牛生产具有重要意义。真菌培养物在利用培养基进行深度发酵的过程中，可产生蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等多种消化酶以及诱食性物质和抗菌物质等益生因子，能够对奶牛采食量和营养物质消化吸收率起促进作用，进而提高奶牛的生产性能。周联高等[10]发现，补饲酵母培养物后奶牛采食量提高了2.90%，标准乳产量显著提高了3.70%。白永平等[11]研究发现，在基础日粮中分别添加150、300 g/(头·d)酿酒酵母培养物可显著提高泌乳早期奶牛干物质采食量和泌乳量，且结果呈现剂量依赖效应。刘旭日等[12]发现，给遭受热应激奶牛分别补饲100、200 g/(头·d)酵母培养物，可显著提高奶牛的干物质采食量和产奶量，改善营养物质消化率，且以添加量为200 g/(头·d)效果较好。邵丽玮等[13]发现，夏季高温环境中，在泌乳奶牛基础日粮中添加50 g/(头·d)酿酒酵母培养物，具有提高奶牛采食量的趋势。Zhu等[14]发现，给热应激荷斯坦奶牛每日添加120、240 g的啤酒酵母发酵产物可降低奶牛直肠温度，促进净能量平衡，降低乳中尿素氮含量，其中每日添加量为240 g时可获得最高的饲料效率。本试验结果表明，奶牛遭受热应激时，在日粮中添加酵母培养物和米曲霉培养物后，试验1组和试验2组奶牛的采食量分别在试验第7、9 d呈上升趋势，且酵母培养物的上升幅度略大于米曲霉培养物组，试验结果与刘旭日等[12]研究结果一致。但Julia等[15]研究发现，给处于热应激的泌乳后期奶牛日粮中添加15 g/d酵母培养物可降低奶牛干物质采食量和可消化有机干物质含量，与本试验结果相反，原因可能是奶牛采食量受泌乳阶段和添加剂量影响。本试验奶牛处于泌乳中期，添加剂量为100 g/(头·d)，而Julia等[15]研究中产奶阶段为泌乳后期，且添加量较低。3.2不同真菌培养物对奶牛产奶量的影响本试验结果发现，酵母培养物组奶牛的产奶量均显著高于对照组，与米曲霉培养物组较为接近，表明奶牛日粮中添加酵母培养物和米曲霉培养物均可明显缓解热应激对奶牛生产性能造成的负面影响，与Moallem等[16]的研究结果一致。原因可能是真菌培养物可调节瘤胃微生物平衡，通过增加纤维分解菌的数量和乳酸利用菌的数量，维持瘤胃稳态，提高瘤胃降解效率。3.3不同真菌培养物对奶牛粪筛分离物的影响本试验结果显示，与前期相比，酵母培养物组、米曲霉培养物组奶牛粪筛上层分离物占比呈下降趋势，下层分离物占比明显增长，综合结果表明在提高饲料消化率方面，米曲霉培养物组略优于酵母培养物组，且显著性均优于对照组。原因可能是米曲霉培养物在促进瘤胃细菌增殖的同时还能够促进真菌增殖，而酵母培养物只能促进瘤胃细菌的增殖。因此，在提高奶牛对饲料的利用率方面，米曲霉更具有优势[17]。研究表明，80 g/(头·d)复合酿酒酵母培养物组奶牛粪筛的综合评估结果略优于对照组[18]。王卫正[19]发现，在奶牛日粮中添加400 g酵母培养物可显著改善奶牛对日粮中干物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率，改善奶牛消化性能，与本试验结果一致。4结论本试验条件下，奶牛分别补饲100 g/(头·d)的酵母培养物和米曲霉培养物可提高热应激条件下泌乳奶牛的采食量和产奶量，提高营养物质的消化率，其中酵母培养物在提高奶牛采食量和产奶量方面试验效果更佳，米曲霉培养物在提高奶牛饲料利用率方面更有优势。