在饲料中添加抗生素会导致畜产品中药物残留、动物产生耐药性。2020年以来,全面禁止抗生素在饲料中应用。因此,寻求有效替代抗生素的饲料添加剂迫在眉睫[1-3]。近年来,植物精油成为替抗研究热点。植物精油是应用多种方法从植物中提取出来具有挥发性、芳香味的油状液体[4],主要成分为酚类和醛类物质。在畜禽养殖中应用较为广泛活性物质包括百里香酚、肉桂醛、香芹酚等[5]。植物精油具有抗氧化、抑菌、调节机体免疫等生物学功能[6-7]。在动物养殖生产中,植物精油可以提高动物的生长性能、改善肠道健康、提高机体免疫力和抗氧化功能等作用[8]。不同种类的植物精油对不同物种的动物的研究结果存在一定的差异,故仍需对植物精油在动物养殖生产中的应用进行深入的探讨。本试验以南宁良凤肉仔鸡为研究对象,研究复合植物精油对其生长性能、免疫及抗氧化功能的影响,以期为植物精油更好地应用于肉鸡养殖生产中提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验所用植物精油由肉桂醛、百里香酚和香芹酚组成,购自四川君正生物饲料有限公司。1.2试验动物与试验设计试验选用2 000羽1日龄南宁良凤肉仔鸡按单因素试验设计随机分成5组,每组10重复,每重复40羽。对照组饲喂基础日粮,EO组饲喂依次在基础日粮中添加100、200、300和400 mg/kg的EO日粮。试验周期分为两阶段进行,周期共9周(63 d)。整个试验期间自由采食和饮水。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.05.012.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成/%1~31日龄32~63日龄营养水平1~31日龄32~63日龄合计100.00100.00玉米59.1762.45代谢能/(MJ/kg)12.0512.58豆粕28.5027.50粗蛋白/%20.8819.75豆油3.504.00钙/%1.020.88玉米蛋白粉4.502.00总磷/%0.690.57L-赖氨酸0.800.75有效磷/%0.50038DL-蛋氨酸0.280.25赖氨酸/%1.461.38磷酸氢钙1.501.35蛋氨酸+半胱氨酸/%0.950.87氯化胆碱0.100.10石粉0.850.80食盐0.300.30预混料0.500.50注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 12 000 IU、VD3 3 200 IU、VE 20 IU、VK3 1.4 mg、VB1 0.5 mg、VB12 15 mg、叶酸0.2 mg、烟酰胺32 mg、泛酸10 mg、Fe 85 mg、Cu 12 mg、Mn 100 mg、Zn 120 mg、Se 0.4 mg、I 0.8 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验在庆城县丰仓养殖农民专业合作社和寿君养殖农民专业合作社进行。试验开始前将鸡舍、鸡笼、水槽、料槽等清洗干净,用2∶1的福尔马林与高锰酸钾的混合溶液进行消毒。消毒后鸡舍内无刺鼻性气味后,通风3 d开始试验。试验按照肉鸡营养标准分为两阶段进行,试验期内肉仔鸡自由采食和饮水,按照常规免疫程序进行免疫,并观察鸡群健康状况。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始对肉仔鸡分组时,以重复为单位进行称重,试验结束63日龄时禁食,以重复为单位称量体质量,并统计试验各阶段的采食量。根据以上数据统计肉仔鸡平均日增重、平均日采食量、料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2免疫指标试验63日龄时,各组每个重复选取与该组平均体重相近的10羽肉仔鸡称量提质量进行屠宰后,取其免疫器官(脾脏、胸腺、法氏囊)称量质量,计算免疫器官指数。免疫器官指数=(免疫器官质量/活体质量)×100%(4)试验63日龄时,各组每个重复选取与该组平均体重相近的10羽肉仔鸡翅下静脉采血10 mL,3 500 r/min离心8 min,取上清血浆于Ep管中,-20 ℃保存用于测定血清中的免疫球蛋白A(IgA)、M(IgM)、G(IgG)。使用酶标仪按照试剂盒说明书进行测定,试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.4.3抗氧化指标测定肉仔鸡血清中总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量,使用紫外分光光度计按照试剂盒说明书进行测定,以上指标试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 20.0进行单因素方差分析,利用Duncan氏法进行组间数据的多重比较,数据结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同水平的植物精油对肉仔鸡生长性能的影响(见表2)由表2可知,200 mg/kg EO组和300 mg/kg EO组的肉仔鸡的末重显著高于对照组(P0.05),分别提高8.51%和7.23%。200 mg/kg EO组和300 mg/kg EO组肉仔鸡的平均日增重显著高于对照组(P0.05),分别提高8.68%和7.93%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.05.012.T002表2不同水平的植物精油对肉仔鸡生长性能的影响项目对照组100 mg/kg EO组200 mg/kg EO组300 mg/kg EO组400 mg/kg EO组初重/g45.80±0.9445.83±0.8446.00±0.8745.60±1.0245.86±1.11末重/kg2.35±0.24b2.43±0.21ab2.55±0.20a2.52±0.27a2.45±0.19ab平均日增重/g54.86±1.27b56.77±1.03ab59.62±1.06a58.91±0.97a57.24±0.94ab平均日采食量/g98.76±2.40100.48±2.61103.74±2.37103.09±2.98101.88±2.35料重比1.80±0.051.77±0.041.74±0.071.75±0.051.78±0.04注:同行数据肩标字母不同表示差异显著(P0.05),字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2不同水平的植物精油对肉仔鸡免疫功能的影响2.2.1不同水平的植物精油对肉仔鸡免疫器官指数的影响(见表3)由表3可知,200 mg/kg EO组、300 mg/kg EO组和400 mg/kg EO肉仔鸡胸腺指数显著高于对照组(P0.05),分别提高33.33%、30.56%和25.00%。200 mg/kg EO组肉仔鸡脾脏指数显著高于对照组和100 mg/kg EO组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.05.012.T003表3不同水平的植物精油对肉仔鸡免疫器官指数的影响项目对照组100 mg/kg EO组200 mg/kg EO组300 mg/kg EO组400 mg/kg EO组胸腺指数0.36±0.04b0.38±0.05b0.48±0.07a0.47±0.08a0.45±0.05a法氏囊指数0.09±0.020.10±0.020.12±0.030.11±0.020.11±0.02脾脏指数0.15±0.04b0.15±0.04b0.21±0.05a0.18±0.03ab0.18±0.02ab%2.2.2不同水平的植物精油对肉仔鸡免疫球蛋白的影响(见表4)由表4可知,EO组肉仔鸡血清IgM含量显著高于对照组(P0.05),分别提高14.29%、42.86%、39.05%和32.38%。EO组肉仔鸡血清IgG含量显著高于对照组(P0.05),分别提高16.92%、26.37%、21.89%和18.91%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.05.012.T004表4不同水平的植物精油对肉仔鸡免疫球蛋白的影响项目对照组100 mg/kg EO组200 mg/kg EO组300 mg/kg EO组400 mg/kg EO组IgA2.35±0.222.40±0.262.50±0.302.47±0.262.31±0.35IgM1.05±0.06c1.20±0.07b1.50±0.12a1.46±0.16a1.39±0.13abIgG2.01±0.15c2.35±0.17b2.54±0.23a2.45±0.27a2.39±0.18bg/L2.3不同水平的植物精油对肉仔鸡抗氧化指标的影响(见表5)由表5可知,200 mg/kg EO组和300 mg/kg EO组肉仔鸡血清总抗氧化能力显著高于对照组19.44%和16.67%(P0.05)。200 mg/kg EO组、300 mg/kg EO组和400 mg/kg EO组肉仔鸡血清超氧化物歧化酶活性显著高于对照组(P0.05),分别提高19.70%、30.98%和27.47%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.05.012.T005表5不同水平的植物精油对肉仔鸡抗氧化指标的影响项目对照组100 mg/kg EO组200 mg/kg EO组300 mg/kg EO组400 mg/kg EO组丙二醛/(μmol/L)2.65±0.462.37±0.422.26±0.392.20±0.312.24±0.28总抗氧化能力/(U/mL)1.08±0.17b1.16±0.27b1.29±0.30a1.26±0.31a1.18±0.13b谷胱甘肽过氧化物酶/(U/mL)520.37±46.78524.80±45.76536.90±46.01532.17±45.13537.93±46.05超氧化物歧化酶/(U/mL)125.92±20.91b130.46±21.03b150.72±23.07a164.93±24.61a160.50±22.05a过氧化氢酶/(U/mL)2.34±0.312.32±0.332.40±0.412.38±0.372.42±0.453讨论3.1不同水平的植物精油对肉仔鸡生长性能的影响本试验发现,在肉仔鸡日粮中添加不同水平的植物精油能够显著提高肉仔鸡体质量和平均日增重,但对肉仔鸡平均日采食量无影响,说明植物精油可以提高肉仔鸡的生长性能,这与周洪彬等[9]、张文静[10]、李晓东等[11]研究结果类似。植物精油中的萜、烯、芳香族等活性物质可以选择性地改变细菌细胞膜的渗透压和通透性,使细菌细胞内的内容物外泄或植物精油中的酚类进入细菌细胞内改变其酶系统,导致有害微生物的死亡[12-13]。植物精油可以选择性地杀害动物肠道内的有害菌,促进有益菌的繁殖,起到调节动物肠道菌群结构,改善肠道健康的作用;植物精油还可以提高十二指肠胰蛋白酶、淀粉酶的活性,进而增强动物对饲料中营养成分的消化;而且植物精油的抗氧化作用可以清除动物机体内多余的自由基,增强动物机体的抗应激能力,进而促进动物的生长发育[14-15]。3.2不同水平的植物精油对肉仔鸡免疫功能的影响家禽体内的胸腺、法氏囊、脾脏参与机体的体液和细胞免疫,免疫器官的重量决定着免疫功能的强弱[16]。本试验发现,在肉仔鸡日粮中添加植物精油可以显著提高胸腺和脾脏指数,与段瑞等[17]研究包被肉桂油在肉仔鸡的研究结果类似。研究说明植物精油对肉仔鸡的免疫器官具有促进发育的作用,可能是由于植物精油在机体内降解的营养成分随血液进入免疫器官,进而促进免疫器官细胞的发育[18]。血清中的免疫球蛋白的含量反映动物机体的免疫功能的高低。本试验发现,一定量的植物精油可以显著提高血清中IgM和IgG的含量,与王兰等[19]的研究结果类似。植物精油提高动物机体免疫力的原因可能是植物精油中的黄酮和萜烯类活性物质具有免疫功能,进而促进动物的免疫力。3.3不同水平的植物精油对肉仔鸡抗氧化指标的影响本试验发现,在肉仔鸡日粮中添加一定量的植物精油可以显著提高总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活性,有降低丙二醛含量和提高谷胱甘肽过氧化物酶活性的趋势。Hashemipour等[20]在肉仔鸡日粮中添加一定量的麝香草酚和香芹酚混合精油显著降低丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性。王兰等[19]在肉仔鸡日粮中添加百里香酚、肉桂醛、香芹酚的混合精油,显著提高超氧化物歧化酶的活性。说明植物精油能够很好地改善动物的抗氧化能力,是机体免受自由基的损害。植物精油中的酚类物质具有较高的抗氧化活性,能够有效地清除动物机体内多余的自由基,减少脂质氧化产物丙二醛的生成,进而提高动物机体的抗氧化功能。4结论在肉仔鸡日粮中添加一定量的植物精油能够提高肉仔鸡生长性能,调节机体免疫力,增强抗氧化能力。本试验条件下,在肉仔鸡日粮中添加200 mg/kg的植物精油较适宜。

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