目前，为了提高动物生产性能和预防相关疾病，饲料行业及畜牧养殖业积极寻找抗生素的替代品。主要的抗生素替代品包括微生态制剂类、植物提取物类、抗菌肽类、有机酸类等。其中，植物提取物具有来源广泛、安全、高效、绿色、无残留等优点[1-2]，其活性成分（多糖、多酚、生物碱、有机酸等）及营养成分（维生素、氨基酸、矿物质元素等）不仅可以为动物机体提供营养物质，还能够增强机体的抗应激、抗病力[3-4]。因此，植物提取物可作为替抗产品应用于动物生产。知母有滋阴降火、润燥滑肠功效，属于清热下火药，知母主治温热病、高热烦渴、咳嗽气喘等[5]；黄芪味甘，性微温，具补气固表、利尿、强心、降压、抗菌、加强毛细血管抵抗力、脾虚泄泻、浮肿及痈疽等功效[6-8]。在动物养殖生产中，对动物使用黄芪提取物可以提高动物机体的免疫力及抗病力，增强机体的抗应激能力，促进机体代谢，改善肠道健康，提高生产性能等[9-11]。而知母提取物在动物生产中应用研究较少。因此，本试验研究知母黄芪粗提物对伊莎褐蛋鸡产蛋性能、蛋品质及机体抗氧化功能的影响，为蛋鸡的健康无抗养殖提供参考。1材料与方法1.1试验材料知母黄芪粗提物由郑州福源动物药业有限公司提供，其多糖有效含量大于12%。1.2试验分组与养殖管理选择体重相近、无病的1 200只72周龄的伊莎褐蛋鸡，随机分成4组，每组3个重复，每个重复100只蛋鸡。各组蛋鸡饲喂相同的日粮，在试验组饮水中分别添加1.0、1.5、2.0 mL/kg的知母黄芪粗提物，在照组饮水中不添加知母黄芪粗提物。预试期1 w，正式试验期4 w。试验结束检测各组伊莎褐蛋鸡的产蛋性能、蛋品质及机体抗氧化指标。本研究伊莎褐蛋鸡的基础日粮配方参考《鸡饲养标准》（NY/Ｔ 33—2004）进行配制，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.18.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.20代谢能(MJ/kg)12.03豆粕19.50粗蛋白/%17.53菜粕3.00钙/%3.59石粉8.00磷/%0.61豆油1.20蛋氨酸/%0.33磷酸氢钙1.05赖氨酸/%0.82食盐0.20赖氨酸0.85预混料4.00注：1.预混料由盛泰牧业饲料有限公司提供。2.营养水平中代谢能、蛋氨酸、赖氨酸为计算值，其余均为实测值。试验中的伊莎褐蛋鸡采用三层阶梯笼养，每日光照16 h，自然通风；每日共饲喂2次，自由饮水；免疫程序按照养殖场日常管理进行，每日养殖管理员仔细观察伊莎褐蛋鸡的健康及精神状态，发现问题及时处理；每日8：00左右收集鸡蛋。1.3测定指标及方法1.3.1产蛋性能试验养殖期间，每日以重复为单位，记录产蛋数、破损蛋数、蛋鸡死淘数，准确称量蛋重，统计每个重复蛋鸡的采食量，用于计算分析产蛋率、料蛋比。平均日采食量=总采食量/(试验时间×鸡数量)(1)产蛋率=产蛋数/(试验时间×鸡数量)(2)料蛋比=平均日采食量/(鸡蛋重×产蛋率)(3)破损率=鸡蛋破损总数/总产蛋数(4)死淘率=死亡淘汰鸡数量/试验鸡总数(5)1.3.2蛋品质试验第28 d，每组挑选蛋重相近的鸡蛋30枚，检测蛋品质。使用DET-6000高精度数码测蛋仪（NABEL Co., Ltd.）测定蛋重、蛋壳强度、蛋白高度、哈夫单位和蛋黄颜色。使用OMST-150C型螺旋测微器（日本三丰）测定蛋壳前端、终端、后端的厚度，并取平均值作为蛋壳厚度。使用电子天平测定蛋黄、蛋清重量，用于分析蛋黄相对重和蛋清相对重。1.3.3血清抗氧化指标在试验第28 d、蛋鸡晨饲之前，从每组中选择10只蛋鸡在其翅下静脉采血约5 mL，静置2~3 h后，离心取上层血清，并将血清-20 ℃冷冻保存，用于检测抗氧化指标。主要检测的指标为丙二醛、总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶及超氧化物歧化酶。检测方法参考试剂盒说明书，检测试剂盒购自北京百奥莱博科技有限公司。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 26软件进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较。结果用“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1知母黄芪粗提物对伊莎褐蛋鸡产蛋性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验2组和试验3组伊莎褐蛋鸡的产蛋率、平均蛋重显著提高（P0.05）；所有添加知母黄芪粗提物组的蛋鸡的死淘率均显著降低（P0.05）；试验2组和试验3组伊莎褐蛋鸡的料蛋比、鸡蛋破损率显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.18.006.T002表2知母黄芪粗提物对伊莎褐蛋鸡产蛋性能的影响项目产蛋率/%料蛋比平均蛋重/(g/枚)破损率/%死淘率/%平均日采食量/[g/(只·d)]P值0.0450.0270.0390.0330.0420.746对照组78.02±2.48b2.05±0.13a58.87±1.05b0.35±0.12a2.52±0.12a94.16±4.85试验1组80.64±3.19b1.95±0.15ab60.37±1.84ab0.28±0.10ab1.84±0.09b94.93±5.08试验2组83.09±3.74a1.92±0.11b63.98±2.07a0.20±0.07b1.20±0.13c102.07±5.83试验3组83.93±4.05a1.89±0.10b65.21±3.04a0.15±0.05b1.05±0.06c103.44±6.81注：同列数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。研究表明，在伊莎褐蛋鸡饮水中添加1.5~2.0 mL/kg的知母黄芪粗提物可以有效提高产蛋性能。2.2知母黄芪粗提物对伊莎褐蛋鸡蛋品质的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验2组和试验3组鸡蛋的哈夫单位显著提高（P0.05），所有知母黄芪粗提物组鸡蛋的蛋壳强度和厚度得到改善（P0.05），试验2组和试验3组鸡蛋的蛋重和蛋清重显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.18.006.T003表3知母黄芪粗提物对伊莎褐蛋鸡蛋品质的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组P值蛋黄颜色6.50±0.316.68±0.276.83±0.416.90±0.430.184哈夫单位76.43±3.17b77.31±4.02ab78.93±3.31a80.04±4.73a0.035蛋壳强度/(kg/m2)3.75±0.21b4.21±0.35a4.32±0.40a4.40±0.36a0.043蛋壳厚度/mm0.35±0.05b0.42±0.07a0.43±0.04a0.45±0.08a0.019蛋形指数1.32±0.121.33±0.111.31±0.151.32±0.100.635蛋黄相对重/%26.04±1.7326.63±1.6427.02±2.0727.36±2.820.638蛋清相对重/%58.04±3.0858.40±3.5158.52±4.0158.89±3.390.742蛋黄重/g15.48±1.4716.26±1.3917.34±2.0317.92±2.410.085蛋清重/g34.49±2.75b35.66±2.90ab37.56±3.16a38.57±3.48a0.048蛋重/g59.43±2.04b61.06±3.17ab64.18±4.05a65.50±3.84a0.041注：同行数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。研究表明，在伊莎褐蛋鸡饮水中添加知母黄芪粗提物可以改善蛋壳和蛋清质量，提高蛋重。2.3知母黄芪粗提物对伊莎褐蛋鸡血清抗氧化功能的影响（见表4）由表4可知，试验2组和试验3组的伊莎褐蛋鸡血清中丙二醛含量显著下降（P0.05），伊莎褐蛋鸡血清总抗氧化能力显著增强（P0.05），过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活性显著增强（P0.05），而过氧化氢含量显著降低（P0.05），知母黄芪粗提物对谷胱甘肽含量和谷胱甘肽巯基转移酶活性未产生显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.18.006.T004表4知母黄芪粗提物对伊莎褐蛋鸡血清抗氧化功能的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组P值丙二醛/(μmol/L)6.76±0.31a5.74±0.22b5.21±0.27b5.01±0.18b0.029总抗氧化能力/(U/mL)7.02±0.43b7.69±0.5ab8.36±0.48a8.73±0.47a0.041过氧化氢酶/(U/mL)3.29±0.11b3.64±0.13ab3.92±0.18a4.38±0.23a0.047过氧化氢(U/mL)4.42±0.26a4.05±0.21ab3.64±0.17b3.33±0.19b0.038超氧化物歧化酶/(U/mL)184.04±10.31b204.17±12.48ab252.10±14.27a268.52±15.29a0.036谷胱甘肽过氧化物酶/(U/mL)1 045.38±43.28b1 274.29±36.49ab1 638.03±40.41a1 829.04±43.10a0.044谷胱甘肽/(mmol/L)6.03±0.376.69±0.267.03±0387.31±0.430.218谷胱甘肽巯基转移酶/(U/mL)47.30±2.1049.38±3.1849.83±2.9450.41±4.280.193研究表明，在伊莎褐蛋鸡养殖中使用适量的知母黄芪粗提物可以有效增强其机体抗氧化性能。3讨论3.1知母黄芪粗提物对蛋鸡产蛋性能的影响本研究选择的试验动物伊莎褐蛋鸡为产蛋中后期，此阶段的产蛋性能会受到养殖管理、饲料、品质、应激等多种因素的影响[12]。本试验中，在饮水中添加1.5、2.0 mL/kg知母黄芪粗提物蛋鸡的产蛋率、平均蛋重显著提高，死淘率、料蛋比、鸡蛋破损率显著降低，表明在伊莎褐蛋鸡饮水中添加适量知母黄芪粗提物可有效提高产蛋性能。研究中使用的知母黄芪粗提物其主要成分为多糖，能够为蛋鸡机体提供营养物质，增强机体的抗应激能力，促进蛋鸡肠道对饲料中营养物质的消化吸收[13-14]。张尧等[15]在海兰褐蛋鸡日粮中添加一定比例的黄芪多糖可提高蛋鸡的采食量、产蛋率和乳酸菌及双歧杆菌等有益菌的数量，降低料蛋比和肠道中大肠杆菌及沙门氏菌等有害菌的数量，通过调节肠道菌群促进机体吸收饲料中的养分，且黄芪多糖的最适添加量为200 g/t。沈帆等[16]研究发现，饲料中添加知母、黄芪、益母草、陈皮、当归等植物能够有效提高蛋鸡的产蛋率。上述研究结果表明，在饲料或饮水中添加植物提取物均能够改善蛋鸡的产蛋性能，主要是由于植物提取物中的活性成分能够刺激肠道消化酶的分泌，调节肠道菌群，促进饲料中养分的消化吸收，提高饲料转化率，进而改善蛋鸡的生长性能[17]。3.2知母黄芪粗提物对蛋鸡蛋品质的影响本研究中的伊莎褐蛋鸡为产蛋后期，此阶段改善鸡蛋品质对养殖的生产效益及经济效益具有积极影响。蛋鸡的蛋品质主要从蛋壳质量、蛋的营养成分及蛋的理化性质方面进行评价，其中蛋壳厚度、蛋壳强度可以评价鸡蛋在运输过程中的抵抗力，从而减少破蛋率；蛋形指数能够反映鸡蛋的孵化性能；蛋清的哈夫单位能够反映鸡蛋的新鲜程度，蛋清高度越高，蛋的哈夫单位数值越大，表示鸡蛋越新鲜；蛋黄色泽则可以引起消费者购买欲望[18-19]。本研究中，试验2组和试验3组鸡蛋的哈夫单位显著提高，所有知母黄芪粗提物组鸡蛋的蛋壳强度和厚度得到改善，试验2组和试验3组鸡蛋的蛋重和蛋清重显著提高，表明在伊莎褐蛋鸡饮水中添加知母黄芪粗提物可改善蛋壳和蛋清质量，提高蛋重。靳淑委等[20]研究发现，随着黄芪提取物的添加剂量逐渐提高，蛋黄相对重也逐渐提高。李鹏升[21]研究发现，在蛋鸡养殖中使用0.2%的含有黄芪、知母的复方中草药制剂，可以使蛋壳强度、哈夫单位分别提高12.38%、9.84%，并改善了蛋壳的微观结构，如裂纹变少、裂隙较小、表面角质层较光滑。张尧等[15]研究发现，黄芪多糖可以提高海兰褐壳蛋鸡所产蛋的蛋清、蛋壳的相对重，改善哈夫单位，且黄芪多糖的最适添加比例为200 g/t。肖宇航等[22]研究发现，青蒿和黄芪的粗提物可以促进蛋鸡的卵泡发育，但对蛋品质无显著影响。本研究结果显示，知母黄芪粗提物能够提高蛋品质，可能是因为知母黄芪中有效成分，如多糖、单体皂苷、芒果苷、生物碱、多酚等提高了蛋鸡机体的抗炎反应，增强了机体的抗应激能力和免疫力，促进蛋鸡卵巢发育及功能完整，进而提高了蛋品质[23-24]。3.3知母黄芪粗提物对蛋鸡抗氧化功能的影响蛋鸡进入产蛋后期，机体机制逐渐退化、抗应激、抗氧化功能逐渐减弱，导致机体产生大量的自由基，损伤机体细胞膜、DNA、蛋白质等，对机体健康产生不利影响，进而影响蛋鸡的产蛋性能及蛋品质[25-26]。本研究中，添加知母黄芪粗提物组的伊莎褐蛋鸡血清中脂质氧化产物丙二醛含量显著下降，试验2组和试验3组的伊莎褐蛋鸡血清总抗氧化能力显著增强，过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活性显著增强，而过氧化氢含量显著降低，表明在伊莎褐蛋鸡养殖中使用适量的知母黄芪粗提物可有效增强其机体抗氧化性能，进而提高蛋鸡的生产性能和改善蛋品质。靳淑委等[20]在京粉1号蛋鸡生产中添加2 000 mg/kg的黄芪提取物可以提高肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性，增强机体清除羟自由基及氧自由基的能力。孟令楠等[27]研究发现，在蛋鸡生产中使用含有黄芪等植物的复合添加剂会显著提高海兰褐蛋鸡血清中谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性，降低丙二醛含量，且复合添加剂的最适添加量为0.3%。知母黄芪粗提物能够提高蛋鸡机体的抗氧化能力，主要是由于其活性成分中的多糖、多酚等具有较强的抗氧化功能，通过调节血清中抗氧化酶的活性，抑制脂质氧化，增强机体清除自由基的能力，进而提高蛋鸡机体的抗氧化功能及机体的代谢功能，提高产蛋率，改善蛋品质[28-29]。4结论本研究结果表明，知母黄芪粗提物可显著改善伊莎褐蛋鸡的产蛋性能、蛋壳及蛋清质量，增强机体的抗氧化性能。综合养殖成本考虑，可在伊莎褐蛋鸡饮水中添加1.5 mL/kg的知母黄芪粗提物。