近年来，随着畜牧业快速发展，我国蛋白饲料短缺，因此开发非常规饲料迫在眉睫[1-2]。我国非常规蛋白饲料资源丰富，营养价值较高，挖掘、开发新型稳定的非常规蛋白饲料是缓解蛋白饲料资源紧缺的有效措施。辣木（Moringa oleifera）属辣木科辣木属，是非常规蛋白饲料资源之一，适应性较强，广泛分布于世界各地。云南辣木种植主要分布在怒江、红河、金沙江、澜沧江流域的干热河谷区域及北热带亚热带季风气候区。辣木的粗蛋白含量较高，纤维含量较低，富含多种维生素、氨基酸、黄酮及多酚类生物活性物质，具有开发为优质蛋白饲料的潜力[3-6]。研究表明，在日粮中添加适当比例的辣木可以提高麻鸡、山羊、母猪的生产性能，改善机体的健康状况[7-9]。目前，关于辣木的研究主要集中在生物量、营养成分以及饲喂辣木叶对家禽、反刍动物生长性能、毒理效果的影响，但关于辣木枝叶青贮效果研究较少。对不同生长时间刈割辣木枝叶青贮发酵效果方面的报道更为少见。因此，本试验以辣木枝叶为研究对象，探讨不同生长时间对辣木枝叶青贮发酵品质的影响，旨在筛选出辣木叶青贮适宜的生长时间。1材料与方法1.1试验地概况辣木枝叶青贮试验于云南省元谋县热区生态农业研究所（101°52'18″E，25°41'15″N）进行，元谋县平均海拔高度为1 250 m，年平均气温21.9 ℃，年降水量613.8 mm，降水主要集中在5—10月，年蒸发量3 911.2 mm，属热带、亚热带干热季风气候，土质为红壤。1.2试验材料辣木原材料为印度传统种多油辣木。2021年3月，种子播种于云南省元谋县热区生态农业研究所，在自然条件下生长，所有辣木生长环境及管理方法一致。秸秆降解剂（含乳酸菌、纤维素酶、蔗糖），其中乳酸菌含量≥1×1010 CFU/g、纤维素酶活≥5×104 U/g，购自河南郑州益富源生物科技有限公司。1.3主要仪器设备WTM.noLab-pH7310 pH计（北京宏信恒测科技有限公司）、安捷伦1260液相色谱仪（上海善福电子科技有限公司）、凯氏定氮仪（美国FOSS公司）、HF-2型快速连续灰分测定仪（壁市冶金机械设备有限公司）、JY精密电子天平（厦门莱斯德科学仪器有限公司）、HWS-12电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）、721G可见分光光度计（上海仪电分析仪器有限公司）、QL-902涡旋振荡仪（海门市其林贝尔仪器制造有限公司）、DPX-9162B-1恒温培养箱（上海福玛实验设备有限公司）、F800纤维测定仪（海能未来技术集团股份有限公司）、精密恒温烘箱（广东立一科技有限公司）。1.4试验设计试验设置3个处理，即辣木枝叶生长60、105、120 d刈割，青贮，分别在辣木枝叶中添加秸秆降解剂，具体用量为1 mL 降解剂∶30 mL水∶1 000 g辣木枝叶原材料，每个样品设6个平行。1.5青贮制作分别在辣木生长60、105、120 d时，留茬30 cm刈割，为同年刈割第2次，使用切割机粉碎至1~2 cm，置于阴凉处晾至4 h，待水分含量在70%左右，与秸秆降解剂混匀，装入聚乙烯青贮发酵袋中真空包装封口，阴凉避光处发酵50 d。1.6测定指标及方法1.6.1感官评价辣木枝叶青贮50 d后开包，参照德国农业协会青贮饲料感官评定标准对青贮辣木枝叶包进行感官评定。组织5名技术人员分别对3个不同生长时间的青贮辣木枝叶样品的6个平行样进行感官评定打分（气味、结构、色泽），气味0~2 分，分为3个等级；结构0~4分，分为4个等级；色泽0~14分，分为3个等级。16~20分是优质辣木枝叶青贮饲料；10~15分是尚好辣木枝叶青贮饲料；5~9分是中等辣木枝叶青贮饲料；0~4分是腐败的辣木枝叶青贮饲料，总分20分[10]。1.6.2营养成分取3个试验组辣木枝叶青贮样品200 g置于105 ℃高温炉中杀青8 h后，置于65 ℃烘箱烘干72 h至恒重，粉碎，过2遍2 mm筛，保存。采用蒽酮-硫酸比色法测定辣木枝叶青贮的水溶性碳水化合物（WSC），使用张丽英[11]及范式（Van Soest）[12]方法测定粗蛋白（CP）、干物质（DM）、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）、粗灰分（CA）含量。相对饲喂价值（RFV）计算公式如下：RFV=(88.9-0.779×ADF)×(120/NDF)/1.29(1)1.6.3发酵品质取3个试验组辣木枝叶青贮样品各30 g，加入270 mL蒸馏水，使用玻璃棒均匀搅拌3 min，封口后静置24 h，采用4层纱布滤去辣木枝叶渣，再用定性滤纸过滤，得到辣木枝叶青贮浸出液。采用WTM.noLab-pH7310 pH计测定辣木枝叶青贮pH值，采用苯酚-次氯酸钠比色法测定氨态氮（NH3-N）含量[13]，采用安捷伦1260液相色谱仪测定有机酸含量[乳酸（LA）、乙酸（AA）、丙酸（PA）、丁酸（BA）]。色谱条件为SB-AQC18色谱柱（4.6 mm × 250 mm × 0.2 μm），pH值2.70，进样量20 μL，流速1 mL/min，检测波长210 nm，柱温25 ℃。1.7数据统计与分析数据采用Excel 2016软件进行整理归纳，SPSS 20.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同生长时间对辣木枝叶营养成分的影响（见表1）由表1可知，不同生长时间辣木枝叶CP、NDF、ADF、CA含量差异不显著（P0.05），生长105、120 d的辣木枝叶DM、WSC含量显著高于60 d（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.019.T001表1不同生长时间对辣木枝叶营养成分的影响（干物质基础）生长时间/dDMCPNDFADFCAWSC6017.87±0.19b12.05±0.0347.23±0.0520.15±0.088.99±0.081.38±0.05b10521.98±0.20a13.05±0.0347.12±0.0326.35±0.058.51±0.121.62±0.03a12022.08±0.19a12.45±0.0047.56±0.0227.05±0.009.42±0.151.43±0.01a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。%2.2不同生长时间对辣木枝叶青贮感官评定的影响（见表2）由表2可知，3个不同生长时间的辣木枝叶青贮品质均达到尚好及其以上，生长60 d辣木枝叶青贮评分结果为13分，等级为2级尚好，生长105、120 d辣木枝叶青贮评分结果均为19分，等级均为1级优良。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.019.T002表2不同生长时间对辣木枝叶青贮感官评定的影响生长时间/d气味结构色泽总分等级601021132级尚好1051441191级优良1201441191级优良2.3不同生长时间对辣木枝叶青贮营养成分的影响（见表3）由表3可知，生长105、120 d的辣木枝叶青贮DM、WSC含量均显著高于生长60 d（P0.05）。3个不同生长时间的辣木枝叶青贮RFV均超过130。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.019.T003表3不同生长时间对辣木枝叶青贮营养成分的影响（干物质基础）生长时间/dDM/%CP/%NDF/%ADF/%CA/%WSC/%RFV6015.98±0.19b11.50±0.0146.50±0.0215.00±0.048.95±0.021.45±0.05b154.4710519.88±0.10a12.50±0.0046.60±0.0220.00±0.008.45±0.121.72±0.03a146.3612020.03±0.19a12.00±0.0046.75±0.0124.25±0.039.08±0.231.69±0.04a139.302.4不同生长时间对辣木枝叶青贮发酵品质的影响（见表4）由表4可知，生长105、120 d的辣木枝叶青贮的pH值、NH3-N/TN及PA含量均显著低于60 d（P0.05），LA、AA的含量均显著高于60 d（P0.05），各处理组均未检出BA。各生长时间辣木枝叶青贮的pH值、NH3-N/TN排序均为60 d120 d105 d，LA、AA含量排序均为120 d105 d60 d，PA含量排序为60 d105 d120 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.019.T004表4不同生长时间对辣木枝叶青贮发酵品质的影响（鲜样基础）生长时间/dpH值NH3-N/TN/%LA/%AA/%PA/%BA/%604.86±0.03a4.52±0.07a0.90±0.06b1.12±0.03b0.13±0.00aND1054.04±0.01b2.86±0.00b1.69±0.00a1.35±0.01a0.08±0.02bND1204.06±0.01b3.06±0.00b1.81±0.04a1.37±0.02a0.04±0.01bND注：ND表示未检出。3讨论3.1不同生长时间对辣木枝叶青贮感官评定的影响青贮饲料原材料的水分、可溶性碳水化合物含量以及乳酸菌数量等是影响饲料青贮发酵的重要因素[14]。本试验结果表明，辣木枝叶生长60 d刈割后青贮感官评定效果相对较差，为2级尚好；生长105、120 d刈割后青贮感官评定效果相对较好，均达到1级优良。因此，从感官评定分析，辣木枝叶生长105 d时即可刈割青贮。推测原因可能是生长2个月的辣木枝叶木质化程度低，含水量较高，不利于乳酸菌生存，导致乳酸菌繁殖发酵速度缓慢，并滋生部分有害菌，pH值下降缓慢，因此辣木枝叶青贮的酸味较强、芳香味弱，从而影响辣木枝叶青贮的发酵品质。但生长105、120 d时的辣木枝叶木质化程度升高，含水量降低，适宜的含水量利于乳酸菌的发酵，并能够有效抑制其他有害菌群繁殖，形成厌氧环境，pH值下降较快，因此青贮辣木枝叶具有淡淡的酒香味，感官评分得到提升。王成等[15]研究发现，含水量是影响辣木枝叶青贮品质的重要因素，适宜的含水量能够明显改善辣木枝叶的青贮品质，较高的含水量则会降低辣木枝叶青贮品质。刘凯丽[16]研究发现，非常规木本饲料杂交构树含水量为60%时青贮营养价值较高，青贮品质较好，含水量升高，青贮营养价值降低，青贮品质下降。付万龄等[17]研究发现，乳酸菌数量及可溶性碳水化合物含量增多，青贮饲料营养价值升高，品质提高。3.2不同生长时间对辣木枝叶青贮营养成分的影响DM、CP、WSC、NDF、ADF、CA含量等是评价青贮木本饲料营养成分的主要指标[18]。本试验中，生长105 d的辣木枝叶青贮CP含量高于生长60、120 d。推测原因与辣木枝叶青贮pH值有关，辣木枝叶青贮pH值降低，其所产生的微生物降解能力减弱，微生物利用氨合成部分蛋白质的能力提升，故使青贮辣木枝叶CP含量有小幅度上升。本试验中，生长60 d辣木枝叶青贮的NDF、ADF含量相对较低，RFV较高。推测原因可能是辣木枝叶生长60 d，生长期较短，木质化程度低，纤维素含量相对较少，青贮后有利于NDF、ADF分解，故NDF、ADF含量相对较低，RFV则较高。本试验中，3个不同生长时间辣木枝叶青贮CA含量无明显变化。推测原因可能是CA营养成分结构稳定，较难分解。生长105、120 d辣木枝叶青贮DM、WSC含量均大于生长60 d，推测原因可能是辣木枝叶生长时间在105~120 d，含水量较适宜，相应青贮过程中辣木枝叶发酵底物不断增多，pH值下降较快，LA含量有所增多，DM和WSC含量相应增加；辣木枝叶青贮含水量太高，导致腐败菌产生，同时其产生的渗出液会导致养分流失，表现出DM和WSC含量均降低，青贮养分流失严重，青贮效果受到影响。研究发现，适宜的刈割时间及含水量有利于提高饲草青贮后营养成分及青贮品质[18-21]。本试验结果显示，辣木枝叶生长105 d后刈割青贮营养价值相对较高。3.3不同生长时间对辣木枝叶青贮发酵品质的影响pH值、NH3-N/TN、LA、AA、PA、BA是衡量饲料青贮发酵品质的重要因素，青贮饲料的pH值在4.2以下、NH3-N/TN在10%以下，表明青贮饲料发酵过程较好[22-23]。本试验结果显示，生长105、120 d辣木枝叶青贮NH3-N/TN为2.86%、3.06%，pH值为4.04、4.06，而生长60 d的青贮辣木枝叶pH值达到4.86，未能达到优质青贮饲料标准。因此从NH3-N/TN、pH值方面分析，辣木枝叶生长105 d即可刈割青贮。推测原因可能是辣木枝叶的水分含量过高，而高湿的青贮发酵环境有利于梭菌发酵，青贮发酵后期梭菌发酵旺盛CP分解增多，NH3-N/TN升高，pH值下降缓慢。本试验中，不同生长时间辣木枝叶青贮后未检出BA，PA含量均很低，推测原因与辣木枝叶本身富含抑菌成分多酚类、黄酮类等活性成分有关，这些活性成分具有优良的抑菌作用，有害菌被有效抑制繁殖，从而抑制BA、PA的产生[24]。生长105、120 d时辣木枝叶青贮LA、AA含量均高于生长60 d，推测原因是生长60 d青贮辣木枝叶WSC含量低，发酵底物不够充足，乳酸菌数量相对较少，这也验证了充足的发酵底物及乳酸菌是保证饲料青贮发酵成功的关键[25]。4结论研究结果表明，本试验条件下，从辣木枝叶青贮的感官评价、营养成分及青贮发酵品质分析，辣木生长105 d时即可刈割辣木枝叶制作青贮。