（1.佛山科学技术学院生命科学与工程学院，广东 佛山 528231；2.西藏农牧科学学院畜牧兽医研究所，西藏 拉萨 850000；3.云南农业大学动物科学技术学院，云南 昆明 65020）娟姗牛原产于英吉利海峡的娟姗岛，具有耐粗饲、耐热性强、采食性好的优点[1]。西藏地区具有高寒、低氧、阳光辐射强等独特的气候条件，基础物资匮乏，导致西藏黄牛泌乳性能不足，无法满足人们对奶制品的需求。因此西藏自治区开始进行本地黄牛改良和奶牛引进工作，将引入的娟姗牛与本地黄牛杂交，以期适应低氧环境。低氧适应机制是引进高原动物对低氧习服产生的不良反应经世代选择得到遗传钝化，从而对抗缺氧的一种内源性保护机制。血液参数是衡量动物适应高原的重要指标之一，可以反映动物体能否适应低氧环境[2]。奶牛生产性能测定（DHI）与后裔鉴定技术相结合，可有效评估奶牛的生长发育及泌乳性能。本试验旨在通过测定杂交娟姗牛（娟姗牛♂×西藏黄牛♀）的血常规、血流变以及DHI指标，与相同饲养条件下的纯种娟姗牛及西藏黄牛对比，评估杂交娟姗牛血液生理及泌乳性能改良效果，为奶牛饲养管理、健康监测和群体改良方案的完善提供参考。1材料与方法1.1试验样本纯种娟姗牛60头血液样品采自西藏拉萨（海拔约3 800 m），均为从澳大利亚引入的1~2岁母牛；杂交娟姗牛58头（娟姗牛♂×西藏黄牛♀）血液样品采自西藏日喀则（海拔约3 800 m）；西藏黄牛56头血液样品采自日喀则市白朗县德村（海拔约3 871 m），本地母牛均在标准化奶牛场饲养。采用高海拔专用含EDTA抗凝剂真空采血管，颈静脉采血10 mL。1.2测定指标及方法1.2.1血液常规生理指标使用BC-2 800Vet兽用全自动血细胞分析仪测定红细胞数目（RBC）、血红蛋白数（HGB）、血细胞比容（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞分布宽度变异系数（RDW）、血小板计数（PLT）、血小板平均体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、血小板压积（PCT）水平。1.2.2血液黏稠度使用ZL6000北京众驰伟业全自动血流变测试仪测定血浆黏度、全血低切、中切、高切相对指数、红细胞聚集指数和系数、卡松黏度、红细胞内黏度、低切、中切、高切流阻、纤维蛋白原及屈服应力。1.2.3DHI指标母牛产后每天6：00和17：00定时挤奶，记录每头牛每个月的泌乳量，产奶后每月中旬的前后2 d，按照上午和下午5∶5的比例挤奶混匀取样10 mL，使用Lactoscan MCC型乳成分分析仪检测乳脂率（fat）、乳蛋白率（protein）、乳糖（lactose）、乳脂固体（SF）、非乳脂固体（SNF）、尿素氮（BUN）、体细胞数（SCC）。1.3数据统计与分析试验数据采用Excel统计，SPSS 23.0统计分析软件对泌乳量进行t检验分析，对血液生理指标数据进行单因素方差分析。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同品种牛血液常规生理指标测定结果（见表1）由表1可知，杂交娟姗牛血液MCH、MCHC水平显著高于纯种娟姗牛（P0.05），RBC、HGB、HCT、RDW水平显著低于纯种娟姗牛（P0.05）。与西藏黄牛相比，杂交娟姗牛血液MCV、MCH、MCHC、MPV、PDW水平显著高于西藏黄牛（P0.05），RBC、RDW、PLT、PCT水平显著低于西藏黄牛（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.011.T001表1不同品种牛血液常规生理指标测定结果项目纯种娟姗牛杂交娟姗牛西藏黄牛RBC/(×1012/L)8.84±0.83a6.20±0.75c7.06±1.14bHGB/(g/L)125.23±16.22a116.20±16.73b119.80±12.96abHCT/%35.87±4.99a32.62±5.27b35.01±3.80abMCV/fL50.89±4.49a52.56±5.01a39.79±3.40bMCH/(×10-12g)17.70±1.26b18.64±1.31a13.60±1.07cMCHC/(g/L)349.37±11.91b356.94±13.96a342.13±6.85cRDW/%16.87±1.48b15.95±1.17c18.72±1.40aPLT/(×109/L)316.77±152.66bc293.80±55.51c876.03±216.54aMPV/fL5.88±0.59a6.03±0.39a5.28±0.38bPDW/%16.04±0.48a16.26±0.43a14.31±0.26bPCT/%0.18±0.84bc0.17±0.32c0.46±0.11a注：同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05），不同字母表示差异显著（P0.05），下表同。2.2不同品种牛血液黏稠度指标测定结果（见表2）由表2可知，与西藏黄牛及纯种娟姗牛相比，杂交娟姗牛血液的红细胞聚集指数、全血低切相对指数、红细胞聚集系数、屈服应力、低切流阻指标显著升高（P0.05），表明杂交娟姗牛的红细胞变形性差、聚集性强，可能导致血液黏稠度增加。与纯种娟姗牛相比，杂交娟姗牛血液的红细胞内黏度、纤维蛋白原、血浆黏度指标显著降低（P0.05），杂交娟姗牛可能通过降低纤维蛋白原浓度和血浆黏度缓冲RBC、HGB、HCT带来的血液黏度升高。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.011.T002表2不同品种牛血液黏稠度指标测定结果项目纯种娟姗牛杂交娟姗牛西藏黄牛纤维蛋白原/(g/L)4.13±0.31a3.81±0.27bc3.70±0.42c血浆黏度/(mPa·s)1.88±0.14a1.73±0.12bc1.68±0.19c全血低切相对指数/(mPa·s)11.42±2.45c14.02±3.78a12.45±2.92bc全血中切相对指数/(mPa·s)3.31±0.503.65±0.633.66±0.52全血高切相对指数/(mPa·s)2.58±0.40b2.75±0.44ab2.87±0.40a红细胞聚集指数4.45±0.71b5.07±0.93a4.35±0.91b红细胞聚集系数3.05±0.49b3.48±0.64a2.98±0.62b卡松黏度/(mPa·s)4.07±0.783.89±0.534.05±0.59红细胞内黏度/(mPa·s)0.75±0.06a0.69±0.05b0.67±0.08b低切流阻/(mPa·s)63.75±12.82b71.97±17.28a62.13±14.7b中切流阻/(mPa·s)43.36±7.0643.93±6.4642.83±6.15高切流阻/(mPa·s)33.82±5.9133.18±4.5233.55±4.70屈服应力/mPa6.87±2.25b8.73±3.23a6.61±2.72b2.3不同品种牛DHI及泌乳量指标测定结果（见表3、表4）由表3可知，与纯种娟姗牛相比，杂交娟姗牛的乳蛋白率和非乳脂固体显著升高（P0.05），表明改良后牛奶质量有所提高。与西藏黄牛相比，杂交娟姗牛的乳脂率显著降低（P0.05），可能由于泌乳量不同引起。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.011.T003表3不同品种牛的DHI指标测定结果项目纯种娟姗牛杂交娟姗牛西藏黄牛乳脂率/%4.01±1.19b4.02±1.13b5.12±0.94a乳蛋白率/%2.91±0.48b3.40±0.63a2.80±0.50b乳糖/%5.12±0.364.98±0.354.80±0.31乳脂固体/%13.27±1.5713.40±1.4313.20±1.30非乳脂固体/%8.86±0.54b9.25±0.55a8.68±0.60b尿素氮/(mg/dL)17.28±3.7917.09±3.5616.35±3.14体细胞数/(万/mL)31.93±38.2438.57±26.3442.94±28.64由表4可知，杂交娟姗牛、纯种娟姗牛、西藏黄牛的泌乳期均不足305 d，且均在第2个月达到泌乳高峰期，杂交娟姗牛产奶176.4 kg，纯种娟姗牛产奶161.25 kg，西藏黄牛产奶138.25 kg。但从第3个月奶牛的泌乳量开始逐渐降低，西藏黄牛在第5个月结束泌乳，泌乳量为19.96 kg，纯种娟姗牛在第8个月结束泌乳，泌乳量为26.35 kg，杂交娟姗牛在第9个月结束泌乳，泌乳量为34.58 kg。杂交娟姗牛的泌乳总量为715.25 kg，比纯种娟姗牛提高了1.16倍，表明具有明显改良效果。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.011.T004表4不同品种牛的头胎次泌乳量测定结果项目杂交娟姗牛纯种娟姗牛西藏黄牛泌乳总量715.25±19.95a608.40±20.20b343.70±23.39c第1个月83.30±13.94a80.55±15.29b58.34±16.28c第2个月176.40±38.56a161.25±40.52b138.25±54.86c第3个月86.25±23.56a84.36±21.49b75.29±20.63c第4个月80.34±20.33a76.28±20.56b51.84±18.26c第5个月78.52±19.23a63.91±19.56b19.96±6.93c第6个月74.33±19.36a62.45±19.54b—第7个月58.12±18.66a53.26±16.43b—第8个月43.41±16.55a26.35±8.23b—第9个月34.58±9.33a——注：“—”表示无数据。kg3讨论3.1杂交改良对娟姗牛血常规指标的影响血常规指标可以反映机体的营养及健康状况。在低氧环境下，红细胞刺激肝细胞和肾细胞释放EPO，而EPO可以刺激骨髓制造红细胞，调控机体促进红细胞的增殖和分化，使RBC增多[3-4]。娟姗牛引入高原后，机体为适应高原极端环境而发生适应性改变，RBC、HGB极显著提高，MCV显著提高，MCH、MCHC显著降低，而在高原环境下的娟姗牛WBC极显著下降[5]。推测娟姗牛与本地牛的杂交后有了白细胞优势，这也是杂交娟姗牛在西藏高原地区能够生存下来的重要原因[6]。本试验结果发现，杂交娟姗牛血液RBC、HGB、HCT、RDW显著低于纯种娟姗牛，血液MCH、MCHC水平显著高于纯种娟姗牛，RBC、RDW、PLT、PCT指标显著低于西藏黄牛，表明娟姗牛与本地牛进行杂交后，生产下的后代明显改善了高原低氧适应能力。因此，引进娟姗牛较西藏黄牛无法适应低氧环境，RBC、HGB等指标均大幅增加，可以提高运氧能力，表现为应激特征及各种缺氧代偿现象。杂交娟姗牛低红细胞数和血红蛋白浓度的适应特征，可防止因红细胞数过度增加引起的血液黏稠度增加，从而使机体更能适应高原低氧环境。3.2杂交改良对娟姗牛血流变指标的影响血液黏度直接关系组织血液的升高与降低，从而影响组织的器官代谢及功能状态。研究表明，与中、低海拔绵羊相比，高海拔绵羊的血浆黏度和纤维蛋白原明显降低，表明当西藏曲松绵羊表现出血液黏度高时，其可通过降低纤维蛋白原浓度和血浆黏度来缓冲RBC、HGB、HCT带来的血液黏度升高，保证血液的流通性，这种自身调节过程即是低氧适应过程；西藏曲松绵羊血液的屈服应力明显高于中低海拔地区的云南丽江和云南腾冲绵羊，说明其血液黏稠度高，屈服应力也相应增高[7-8]，与本试验结果一致。本试验中，杂交娟姗牛血浆黏度（1.73 mPa·s）低于纯种娟姗牛（1.88 mPa·s），与西藏黄牛（1.68 mPa·s）差异不显著，纤维蛋白原指标也如此，表明杂交娟姗牛血液黏稠度没有纯种的高且与西藏黄牛数值接近，加快了血流流动，提高氧气流通，更能适应高原低氧环境。杂交娟姗牛全血高切黏度（2.75 mPa·s）高于纯种娟姗牛（2.58 mPa·s），与西藏黄牛（2.87 mPa·s）差异不显著，红细胞的变形性差，聚集性强，血液黏稠度高，杂交娟姗牛全血低切黏度、红细胞聚集指数、红细胞聚集系数高于纯种娟姗牛、西藏黄牛，表明杂交娟姗牛的相对指数大，HCT高或红细胞变形性差，红细胞聚集，且杂交娟姗牛血液屈服应力高于其他种群，说明杂交娟姗牛血液黏稠度高，屈服应力也相应增高。杂交娟姗牛低切流阻（71.97 mPa·s）显著高于其他种群，表明杂交娟姗牛血液黏度高，红细胞聚集性比其他种群强。3.3杂交改良对娟姗牛DHI及泌乳量的影响DHI是对奶牛泌乳性能及乳成分的测定工作[9]，牛乳的营养成分占比决定乳品质，其中乳蛋白、乳脂肪、乳脂固体、非乳脂固体、乳糖和尿素氮含量均是评价牛乳营养价值的关键指标，而体细胞数是反映动物体是否健康的关键指标，体细胞数减少牛奶质量下降，因此一般将体细胞数控制在50万/mL以下，从而保障奶牛的身体机能。娟姗牛头小而清秀，体型小，具有良好的乳用性能[10]。与荷斯坦奶牛相比，娟姗牛奶的乳蛋白含量更高[11]。于紫桐等[12]研究表明，娟姗牛乳的乳脂、乳蛋白、全乳固体含量优于荷斯坦牛和娟荷杂交牛。牛奶脂肪、牛奶蛋白质、干物质和非乳脂固体这些成分的减少会导致牛奶质量下降[13]。郭淑珍等[14]研究表明，娟姗牛乳品质接近牦牛，但蛋白质含量和非乳脂固体均高于牦牛。本试验中，纯种娟姗牛乳中的乳脂率、乳糖、乳脂固体、尿素氮、体细胞数与杂交娟姗牛无显著差异，说明杂交娟姗牛乳品质接近纯种娟姗牛乳品质，但乳蛋白率和非乳脂固体高于纯种娟姗牛，表明杂交娟姗牛的牛奶质量较高，可用于生产加工高端乳品。引进良种娟珊牛、西门塔尔牛、中国黑白花牛到西藏后，第2胎次平均泌乳量分别为2 930.67、2 241.45、2 704.42 kg[15]。娟姗牛初产牛的生长趋势与荷斯坦牛类似[16]，泌乳初期产奶量比荷斯坦牛高，当产奶量达到高峰时产奶量占比同样也较高，后期产奶量逐渐降低[17-18]。Kgwatalala等[19]研究发现，在不同泌乳时期奶牛的乳脂率不同，泌乳前期随泌乳量的增加而增加，高峰期显著降低，后期逐渐增加。在饲养管理水平较高的养殖场，娟姗牛每天泌乳量达到26 kg以上[20]，养殖条件一般的牧场，娟姗牛每天泌乳量在13.48 kg，个别养殖条件差的牧场，娟姗牛改良后泌乳量甚至不足2.5 kg/d[21-22]。本试验中，杂交娟姗牛泌乳高峰期在第2个月，其泌乳量迅速增加，乳脂率下降，而后期泌乳量逐渐减少，与上述研究具有一致性。4结论本研究发现，杂交娟姗牛的泌乳量得到提升，其低红细胞数及低血红蛋白浓度的适应特征，可以防止因红细胞数过度增加而引起的血液黏稠，提高了低氧适应性。