断奶仔猪多采用早期隔离断奶技术,此阶段断奶仔猪肠道屏障尚未发育完全,消化功能并不完善。断奶后,仔猪会受到许多环境和心理应激,进而对肠道发育、生理、微生物区系和免疫力产生负面影响[1-2],极易产生断奶应激,从而引起腹泻等症状,造成仔猪发育迟缓,严重时甚至会导致死亡[3-4]。使用抗生素可以控制断奶仔猪的腹泻等问题[5],但我国已于2020年7月1号全面禁抗[6-7]。因此,寻求抗生素替代品解决断奶仔猪腹泻等问题具有重要意义。低聚果糖又称寡果糖,是在蔗糖分子上以β-1, 2糖苷键结合几个(n≤8)D-果糖所形成的寡聚糖[8]。研究发现,动物体内的消化酶无法消化低聚果糖,而消化道内的有益菌可以消化利用低聚果糖,且有益菌会产生大量乙酸和乳酸,限制有害菌生长,有助于保持肠道微生物的平衡和健康的肠道环境,对动物的消化和免疫功能具有积极影响[9]。低聚果糖可以改善仔猪肠道健康,提高免疫功能,降低腹泻率,提高消化率及生长性能[10-12]。因此,低聚果糖作为一种新型绿色饲料添加剂替代抗生素具有一定的发展潜力。本试验比较研究了低聚果糖和金霉素在断奶仔猪养殖过程中的应用效果,为抗生素替代物的开发利用提供参考。1材料与方法1.1试验材料低聚果糖以蔗糖为原料通过果糖基转移酶和植物活性炭合成,由湖南粒丰生物科技有限公司提供,含量95%,微黄色固体粉末状。试验仔猪购自湖南百宜牧业科技有限公司。1.2试验设计采用完全随机分组试验设计,选取出生28 d、体重约7.85 kg的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪48头,分为3组,每组8个重复,每个重复2头猪。对照组仔猪饲喂基础饲粮,金霉素组为基础饲粮+25 mg/kg金霉素,低聚果糖组依照王坤等[13]的试验结果在基础饲粮中添加5 000 mg/kg低聚果糖。基础饲粮组成及营养水平见表1。试验期28 d,1~14 d为试验前期,15~28 d为试验后期。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.004.T001表1基础饲粮组成及营养水平项目1~14 d15~28 d原料组成/%玉米56.0560.82豆粕16.6018.03膨化全脂大豆13.7511.70鱼粉4.722.00乳清粉2.482.00豆油2.731.79磷酸氢钙1.000.85石粉0.790.90食盐0.290.29L-赖氨酸盐酸盐0.400.42DL-蛋氨酸0.080.09L-苏氨酸0.130.13L-色氨酸0.030.03三氧化二铬0.250.25氧化锌0.200.20预混料0.500.50合计100.00100.00营养水平消化能/(MJ/kg)14.8214.60粗蛋白质/%21.5319.79钙/%0.800.70磷/%0.400.33可消化赖氨酸/%1.351.23可消化蛋氨酸/%0.390.36可消化苏氨酸/%0.790.73注:1.预混料为每千克饲粮提供:VA 12 000 IU、VD3 2 500 IU、VE 30 IU、VK3 3 mg、VB1 1.5 mg、VB6 3 mg、VB12 0.012 mg、VB2 4 mg、D-泛酸15.0 mg、烟酸40.0 mg、氯化胆碱400.0 mg、叶酸0.7 mg、Mn 30 mg、Fe 90 mg、Zn 80 mg、Cu 10 mg、I 0.35 mg、Se 0.30 mg。2.营养水平中消化能为计算值,其余均为实测值。1.3饲养管理饲养试验在浏阳淳之宝药业猪场进行,采用不锈钢喂食器和饮水器,仔猪自由采食和饮水,做好驱虫和免疫工作,对猪舍进行定时的消毒和通风,猪舍温度与湿度适宜。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始和结束时,仔猪称重,计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及料重比(F/G)。ADG=(末重-试验)/试验天数(1)ADFI=(投料量-结料量)/(试验天数×试验猪数)(2)F/G=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2腹泻率每天8:00和16:00观察仔猪粪便。按照Marquardt等[14]的方法对粪便进行评分并记录,评分等级见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.004.T002表2粪便黏稠度评分等级粪便程度评分等级固体坚硬粪便1略微松软的粪便2松软部分成形的粪便3半液体状粪便4液状、不成形,粪水有分离现象5发生腹泻的定义为粪便黏稠度评分连续2 d在4级或5级。腹泻率=仔猪腹泻头次总和/(仔猪头数×试验天数)×100%(4)1.4.3营养物质表观消化率试验最后3 d,以圈为单位,每个圈随机混合收集约300 g干净粪便样品,在65 ℃烘箱中烘干72 h,回潮24 h后粉碎过40目筛,装袋待测。日粮和粪便中干物质(DM)和粗蛋白质(CP)分别按照GB/T 6435—2006[15]和GB/T 6432—1994[16]方法进行测定,总能(GE)测定使用6400型氧弹式测热仪(美国PARR公司)按照ISO 9831:1998进行测定。营养物质表观消化率(%)=1-日粮Cr含量/样Cr含量×样某营养物质含量/日粮某营养物质含量×100%(5)1.4.4血清生化指标试验第28 d清晨每个重复任意选取1头仔猪,前腔静脉采集血液约5 mL,放入10 mL肝素钠抗凝真空采血管中静置30 min,4 ℃、3 500 r/min离心10 min,吸取上层血清放于-20 °C冰箱。测定血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、血清总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA),试剂盒购自南京建成生物工程研究所有限公司,操作程序按试剂盒说明书执行。免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)测定按照南京建成生物工程研究所有限公司试剂盒说明书执行。1.5数据统计与分析所有原始数据通过Excel 2010软件整理后,采用SAS 9.2统计软件对相关指标进行单因素方差分析,通过卡方检验(χ2)对腹泻率进行统计。结果用最小二乘的平均值和均值标准误表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪生长性能的影响(见表3)由表3可知,第14、28 d,金霉素组和低聚果糖组仔猪体重均显著高于对照组(P0.05)。1~14 d金霉素组和低聚果糖组仔猪的ADG均显著高于对照组(P0.05),腹泻率和F/G均显著低于对照组(P0.05);15~28 d低聚果糖组仔猪的F/G低于对照组(P0.05)。1~28 d金霉素组和低聚果糖组仔猪的ADG均显著高于对照组(P0.05),腹泻率和F/G均显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.004.T003表3低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪生长性能的影响项目对照组金霉素组低聚果糖组SEMP值体重/(kg/头)1 d7.867.857.840.010.4314 d11.87b12.32a12.47a0.060.0128 d18.99b19.56a19.76a0.110.01ADG/[g/(头·d)]1~14 d286.07b319.11a330.45a4.490.0115~28 d508.93517.59521.078.930.621~28 d397.50b418.35a425.76a3.770.01ADFI/[g/(头·d)]1~14 d465.82476.45489.628.310.1615~28 d878.46843.39852.8913.620.211~28 d672.14666.50664.678.150.80F/G1~14 d1.65a1.51b1.50b0.010.0115~28 d1.721.641.630.050.301~28 d1.69a1.59b1.57b0.030.01腹泻率/%1~14 d6.36a3.57b3.68b0.790.0415~28 d3.242.232.010.520.241~28 d4.80a2.90b2.85b0.330.01注:同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P0.05),不同字母表示差异显著(P0.05);下表同。2.2低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪营养物质表观消化率的影响(见表4)由表4可知,第28 d金霉素组和低聚果糖组仔猪对CP和GM的表观消化率均显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.004.T004表4低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪营养物质表观消化率的影响项目对照组低聚果糖组金霉素组SEMP值DM81.3080.8781.210.360.67CP78.56b80.77a80.73a0.510.01GE79.78b81.26a81.34a0.470.04%2.3低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响(见表5)由表5可知,第14 d,金霉素组和低聚果糖组仔猪血清T-SOD活性和T-AOC均显著高于对照组(P0.05)。第28 d,低聚果糖组仔猪血清T-SOD活性显著高于对照组(P0.05)。第14、28 d,金霉素组和低聚果糖组仔猪血清MDA含量均显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.004.T005表5低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响项目对照组金霉素组低聚果糖组SEMP值14 dT-SOD/(U/mL)95.60b109.43a115.56a4.470.02MDA/(μmol/L)4.97a3.13b2.82b0.350.01GSH-Px/(U/mL)675.35687.72686.4134.100.96T-AOC/(U/mL)10.06b11.91a12.16a0.580.0528 dT-SOD/(U/mL)107.37b118.43ab125.56a3.960.02MDA/(μmol/L)3.72a2.69b2.36b0.310.02GSH-Px/(U/mL)689.14712.46718.5221.760.61T-AOC/(U/mL)12.1913.6613.540.700.282.4低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪血清免疫指标的影响(见表6)由表6可知,第14 d,金霉素组和低聚果糖组仔猪血清IgG、IgA的含量均显著高于对照组(P0.05)。第28 d,低聚果糖组仔猪血清IgG含量均显著高于对照组(P0.05),金霉素组和低聚果糖组仔猪血清IgA含量均显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.004.T006表6低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪血清免疫指标的影响项目对照组金霉素低聚果糖SEMP值14 dIgG6.98b8.53a8.86a0.140.01IgA0.80b0.90a1.00a0.030.01IgM0.520.560.570.030.4828 dIgG7.74b8.65ab9.46a0.370.02IgA0.85b0.97a1.06a0.030.01IgM0.660.690.720.030.30g/L3讨论3.1低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪生长性能的影响低聚果糖是一种寡糖,不能被动物体内消化酶消化。低聚果糖可通过促进有益菌生长和抑制有害菌增殖,从而维持肠道内菌群的平衡。这种平衡的微生态状态对于断奶仔猪的消化、免疫功能和整体健康至关重要[17]。曾惠斯等[18]研究发现,在饲粮中添加0.6%低聚果糖能够显著提高断奶仔猪25 d的平均体重,降低F/G。周建[19]研究发现,在断奶仔猪饲粮中添加适量低聚果糖可以显著提高ADG,降低F/G和腹泻率。本试验结果表明,在饲粮中添加5 000 mg/kg的低聚果糖可以提高仔猪生长性能,降低腹泻率,与上述研究结果相近。本试验中低聚木糖的与金霉素的作用效果相似,试验1~28 d,低聚果糖组仔猪ADG高于金霉素组,腹泻率和F/G低于金霉素组;但与对照组相比,1~14、15~28 d时,低聚果糖组仔猪ADG分别提高了15.4%和2.4%,腹泻率分别降低了42.1%和37.9%。结果表明,生长前期添加5 000 mg/kg的低聚果糖比后期更有利于提高仔猪生长性能、降低腹泻率。导致早期断奶仔猪发生腹泻的原因是断奶应激导致仔猪其小肠黏膜的形态结构发生变化,导致肠道功能受到损伤,从而直接或间接导致腹泻[20];并且断奶导致肠道菌群的失衡,乳杆菌等有益菌数量减少,大肠杆菌等有害菌的数量增加,有害菌的代谢产物和毒素可能刺激肠道,影响肠道正常的生理功能,降低消化和吸收的能力,从而引发腹泻症状[21]。低聚果糖可以改善肠道黏膜的形态、结构和功能,从而促进断奶仔猪对营养物质的吸收和利用,提高生长性能[22]。低聚果糖也可改变肠道微生物环境,降低肠道pH值,加快有益菌增殖的速度,降低有害菌含量,为断奶仔猪提供更健康的肠道微生物环境,最终起到降低腹泻率提高生长性能的作用[23]。3.2低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪营养物质消化率的影响断奶仔猪对营养物质的消化率越高,对生长越有利。敖翔等[11]研究发现,在饲粮中加入低聚果糖可显著提高断奶仔猪对DM和GE的消化率。Suthongsa等[24]研究发现,在饲粮中添加适量的低聚壳糖可显著提高断奶仔猪对粗蛋白、粗脂肪等的消化率,改善肠道功能结构,与本试验研究结果相近。肠道的吸收能力与肠道的绒毛长度和绒毛高度/隐窝深度的值相关,绒毛越长、绒毛高度/隐窝深度的值越低表示肠道吸收能力越强[25]。而低聚果糖可增加断奶仔猪肠道绒毛长度,降低绒毛高度/隐窝深度的值,从而提高其消化能力[26]。3.3低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响低聚果糖作为一种未消化的低聚糖,能够促进胃肠中有益菌的生长,从而促进氧化酶生成,提高血液抗氧化能力。冯静[27]研究发现,添加低聚果糖能够显著提高断奶仔猪血清T-SOD、GSH-Px的活性,显著降低血清MDA含量。Zhang等[28]研究发现,在断奶仔猪饲粮中添加1%低聚果糖,可以显著提高血清中仔猪T-SOD和GSH-Px的活性。血清T-SOD、GSH-Px的活性以及MDA的含量可以反映动物体抗氧化的能力和氧化损伤的程度[24]。研究表明,添加适量的低聚果糖可以提高机体的抗氧化能力。本试验中,第14 d和第28 d,低聚果糖组仔猪血清T-SOD活性显著高于对照组,分别提高了20.9%和16.9%。结果表明,在试验前期添加低聚果糖提高断奶仔猪的血清T-SOD活性的效果优于后期。本试验中,与对照组相比,低聚果糖组仔猪血清GSH-Px活性分别在14 d和28 d提高了1.6%和4.3%;血清T-AOC在14 d提升了20.8%,第28 d提升了11.0%。结果表明,低聚果糖具有提高血清T-SOD的活性和降低MDA含量的能力。研究发现,低聚果糖可增强小鼠红细胞的抗氧化防御系统,防止血清T-SOD活性降低,降低MDA含量,提高短链脂肪酸的合成,而短链脂肪酸可以提高血清中GSH-Px等重要抗氧化酶的活性,从而总体提高断奶仔猪的抗氧化水平[29-32]。3.4低聚果糖替代金霉素对断奶仔猪血清免疫指标的影响低聚果糖可在断奶仔猪肠道中被有益微生物利用,优化肠道各菌群的组成,从而增强免疫力[33]。而各种免疫球蛋白含量可直接反映机体体液免疫强度[34]。王坤等[13]研究发现,饲粮中分别添加0.2%、0.5%和0.8%的低聚果糖可以显著提高仔猪IgG、IgA、IgM的抗体水平。王博[35]研究也发现,在后备母猪的饲粮中添加果寡糖可以显著提高IgM、IgG的抗体水平。本试验结果发现,在第14、28 d,低聚果糖组仔猪IgA、IgG水平显著高于对照组;第14、28 d,低聚果糖组仔猪IgM水平分别提高了9.6%和9.1%。结果表明,在饲粮中的添加低聚果糖可以明显促进断奶仔猪的免疫球蛋白的产生,从而提高体液免疫功能。低聚果糖提高免疫功能的主要作用机制一方面是本身可以刺激巨噬细胞从而提高其巨噬能力,二是低聚果糖作为非特异性免疫增生剂和抗原,参与到体液和细胞免疫中,三是提高T淋巴细胞转化功能和自然杀伤细胞的杀伤力[9],四是可以促进免疫器官的生长发育,并促进CD4+和CD8+细胞的增殖,从而提高抗体水平[36]。4结论本试验条件下,与对照组相比,在饲粮中添加5 000 mg/kg的低聚果糖可以改善断奶仔猪的生长性能、消化率、免疫力及抗氧化功能,在降低腹泻率方面的作用效果与金霉素相当。因此,低聚果糖在断奶仔猪生产中具有替代金霉素的潜力。

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