大黄鱼（Larimichthys crocea）俗称黄鱼或黄花鱼，是我国养殖规模较大的海水鱼类。大黄鱼肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富[1]。野生大黄鱼资源丰富[2-3]。20世纪90年代，经过宁德市科技人员的努力，成功地突破大黄鱼全人工繁育和养殖技术，使大黄鱼养殖规模快速发展[3-8]。随着人们对食品品质要求的提高，如何培育体色金黄和口感优质的大黄鱼成为养殖从业者关心的问题。黄栀子（Gardenia jasminoides Ellis）俗称红果树或山栀子，是我国传统的中药材[9-11]。黄栀子中含有栀子黄色素。栀子黄色素具有着色效果好、安全、无毒性等优点，还具有降血糖、降血脂、改善睡眠、保肝等药用和保健价值[12-13]。中草药作为饲料添加剂具有低毒、低残留的特点。研究表明，在饲料中添加复方中草药可以改善水生动物的体色，改善肌肉品质[14-17]。关洪斌等[14]研究表明，刺五加、党参、杜仲等中草药显著提高了锦鲤体表的红度色泽，提高了锦鲤的观赏性。郝晨光等[15]研究发现，在饲料中添加甘草、板蓝根、黄芪多糖后投喂克氏原螯虾，显著提高了克氏原螯虾的增重率和特定生长率，显著降低饲料系数，改善肝胰腺结构。谭晓晨[16]研究表明，在基础饲料中添加4%的黄芪微粉显著提高团头鲂（Megalobrama amblycephala）的生长性能，促进免疫组织形态发育。谢映红等[17]研究表明，在南美白对虾基础饲料中以10 g/kg剂量添加中草药微生态复方制剂养殖30 d后，南美白对虾的平均体重、体长极显著高于对照组。关于黄栀子对水生动物体色和生长性能影响的研究尚未见报道。因此，本文研究黄栀子提取液对大黄鱼体色、生长性能和肌肉品质的影响，为黄栀子作为饲料添加剂在水产生物养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1试验用鱼大黄鱼由宁德市鼎诚水产有限公司提供，体表鳞片完整、活力好，体重为（74.34±8.68）g，体长为（14.07±1.62）cm。1.1.2黄栀子提取液的制备1.1.2.1黄栀子原料的准备生黄栀子使用粉碎机粉碎，均匀地撒在托盘上，置于烘箱中。烘箱温度设置为100 ℃，烘烤时间为5 h。将烘干好的黄栀子粉碎至粉末状，置于自封袋中。1.1.2.2黄栀子浸提物的制备浸提：称取100 g黄栀子粉末采用纯水分散于1 L三角瓶中，在95 ℃水浴锅中水浴2 h，间歇性搅拌。离心：将浸提液装至50 mL离心管，4 ℃，8 000 r/min，冷冻离心5 min，取上清液，于4 ℃冷藏保存。浓度测定与储存：在蒸发皿中滴1 mL离心后的上清液置于烘箱中，80 ℃烘干后称重，得到1 mL上清液中浸提物质量，计算出药材浓缩液的浓度为0.03 g/L。1.1.3试验饲料大黄鱼饲料为市售“上一”牌大黄鱼人工配合饲料。饲料营养成分为粗蛋白≥45.0%、粗脂肪≥6.0%、粗纤维≤5.0%、粗灰分≤14.0%、1.0%≤钙≤3.0%、总磷≥1.0%、0.5%≤氯化钠≤3.0%、赖氨酸≥2.8%、水分≤10.0%。1.2试验设计及饲养管理1.2.1试验设计试验在宁德市鼎诚水产有限公司海上塑胶鱼排养殖基地进行，养殖网箱规格为长5.0 m × 宽1.5 m × 高5.0 m。设置3个试验组和1个对照组，每个试验组养殖大黄鱼500尾，每组3个重复。C100组、C200组、C300组分别在基础饲料中添加100、200、300 mL/kg黄栀子提取液，对照组（C0组）不添加黄栀子提取物。养殖周期30 d。1.2.2饲养管理试验大黄鱼于每天8：30和17：30投喂2次。每次饲料投喂量为鱼体质量的1%~2%，可根据大黄鱼具体摄食情况酌情调整。养殖期间，养殖水体溶氧量为5 mg/L以上，pH值为7.9~8.2，水温为23.5~24.5℃，盐度为20‰~28‰。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能每组随机取30尾大黄鱼，使用尺子（精度0.1 cm）和电子天平（精度0.1 g）分别测定体长和体质量[18]。不同组的大黄鱼生物学统计参考李明云等[19]计算方法。绝对增重率(g/d)=(m2-m1)/(t2-t1)(1)绝对增长率(cm/d)=(L2-L1)/(t2-t1)(2)肥满度=m/L3×100(3)式中：m为体质量（g）；L为体长（cm）；m1、m2和L1、L2分别为时间t1、t2时的体质量（g）和体长（cm）。1.3.2体色每组随机选取30尾大黄鱼，使用色差计CM-700 d/600 d（柯尼卡-美能达，日本）逐尾测定大黄鱼背部、腹部及尾部的色差值，每个部位取3个点，大黄鱼体色测量部位见图1。按国际发光照明委员会（OE，1976）规定，测量亮度值（L）、红绿色值（a）和蓝黄色值（b），色差计使用前用白板进行校准[20]。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.009.F001图1大黄鱼体色测定部位1.3.3肌肉营养成分分离各组活体大黄鱼背部肌肉200 g，委托福建省农业科学院农业质量标准与检测研究所进行营养成分检测。基本营养成分中粗蛋白、粗脂肪、水分、灰分分别采用国标GB/T 5009.5—2016、GB/T 5009.6—2016、GB/T 5009.3—2016、GB/T 5009.4—2016方法检测。氨基酸和脂肪酸含量分别采用国标GB/T 5009.124—2016、GB/T 5009.168—2016的试验方法检测。营养评价根据1973年FAO/WHO（联合国粮农组织/世界卫生组织）建议的每克氮氨基酸评分标准模式[21-22]和中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所提出的全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式[23]以及必需氨基酸指数（EAAI）评定肌肉蛋白质的氨基酸营养价值，计算氨基酸评分（AAS）、化学评分（CS）、必需氨基酸指数（EAAI）。AAS=待测样品氨基酸含量(mg/g pro)FAO/WHO模式同种氨基酸含量(mg/g pro) (1)CS=待测样品氨基酸含量(mg/g pro)全鸡蛋蛋白质同种氨基酸含量(mg/g pro) (2)EAAI=tLys×100⋯×tVal×100sLys×⋯×sValn (3)式（3）中：n为比较的必需氨基酸数；t为待测样品蛋白质必需氨基酸的含量（mg/g pro）；s为全鸡蛋蛋白质模型中必需氨基酸含量（mg/g pro）。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 23.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1黄栀子提取液对大黄鱼生长性能的影响（见表1）由表1可知，C300组大黄鱼的绝对增长率显著高于其他组（P0.05），绝对增重率显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.009.T001表1黄栀子提取液对大黄鱼生长性能的影响组别终末体重/g终末体长/cm绝对增长率/(cm/d)绝对增重率/(g/d)肥满度/(g/m3)C0组85.56±7.9316.83±1.520.092±0.003a0.374±0.036a1.79±0.27C100组85.80±8.0317.46±1.660.113±0.005b0.382±0.067b1.61±0.25C200组87.03±9.1217.64±1.720.119±0.007b0.423±0.089b1.59±0.21C300组90.21±9.8517.94±1.930.129±0.012c0.529±0.094b1.57±0.18注：同列数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；表3、表5与此同。2.2黄栀子提取液对大黄鱼体色的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，各试验组大黄鱼背部、腹部和尾部L值均显著降低（P0.05）。试验组大黄鱼背部a值随黄栀子浓度提高而降低，对照组和C100组大黄鱼背部a值为正值，两者差异不显著（P0.05）；C200组和C300组大黄鱼背部a值为负值，C300组显著小于C200组（P0.05）。大黄鱼背部b值随黄栀子浓度提高而升高，C300组大黄鱼背部b值显著高于其他组（P0.05）。大黄鱼腹部a值随黄栀子浓度提高而降低，C300组为负值，C200组大黄鱼腹部a值显著低于对照组与C100组（P0.05）。大黄鱼腹部b值随黄栀子浓度提高而升高，C300组大黄鱼腹部b值显著高于对照组、C100组（P0.05）。大黄鱼尾部a值随黄栀子浓度提高而降低，C300组显著低于其他组（P0.05）。大黄鱼尾部b值随黄栀子浓度提高而升高，C300组显著高于其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.009.T002表2黄栀子提取液对大黄鱼体色的影响项目C0组C100组C200组C300组背部L值61.12±2.24a57.45±2.32b57.01±1.90b55.76±2.03ba值0.23±0.93a0.24±1.14a-0.66±1.16b-1.38±1.55cb值4.87±1.16a5.84±1.14a6.68±2.67b7.83±2.10c腹部L值69.16±1.58a66.16±1.53b65.13±2.12bc62.83±1.87ca值1.42±0.45a0.93±0.87a0.54±0.78b-0.73±0.82cb值8.83±1.89a11.53±2.45b13.37±2.56bc14.32±2.67c尾部L值42.45±4.09a40.25±4.43b39.22±4.45b38.39±4.57ba值1.55±0.72a1.34±0.87b0.95±0.79c0.56±0.83db值14.31±4.60a16.52±4.12b17.54±4.14b18.30±4.17c注：同行数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同表示差异不显著（P0.05）；表4、表6与此同。2.3黄栀子提取液对大黄鱼肌肉营养成分的影响（见表3）由表3可知，3个试验组大黄鱼肌肉中蛋白质含量均显著高于对照组（P0.05），且C300组最高。C100组大黄鱼肌肉中脂肪含量最高，但各组间无显著差异（P0.05）。C0组大黄鱼肌肉中水分含量最高，但各组间无显著差异（P0.05）。3个试验组大黄鱼肌肉中灰分含量均显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.009.T003表3黄栀子提取液对大黄鱼肌肉营养成分的影响组别蛋白质脂肪水分灰分C0组15.4±0.7a11.3±0.570.1±4.23.2±0.1aC100组15.8±0.9b12.5±0.667.9±4.32.8±0.1bC200组15.9±0.6b11.9±0.568.9±3.83.0±0.2bC300组16.1±0.9b11.6±0.470.4±3.73.0±0.2b%2.4黄栀子提取液对大黄鱼肌肉氨基酸成分的影响及评价（见表4、表5）由表4可知，3个试验组大黄鱼肌肉中氨基酸总量均显著高于对照组（P0.05），C300组大黄鱼肌肉氨基酸总量显著高于C100组和C200组（P0.05）。3个试验组大黄鱼肌肉中必需氨基酸总量均显著高于对照组（P0.05）。C300组大黄鱼肌肉中呈味氨基酸总量显著高于其他3组（P0.05）。各组EAA/TAA、DAA/TAA比值基本一致，分别在37和41左右。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.009.T004表4黄栀子提取液对大黄鱼肌肉氨基酸成分的影响项目C0组C100组C200组C300组天门冬氨酸（Asp）**1.48±0.051.51±0.071.56±0.061.55±0.05苏氨酸（Thr）*0.67±0.020.69±0.020.71±0.030.7±0.02丝氨酸（Ser）0.61±0.030.62±0.020.64±0.030.66±0.02谷氨酸（Glu）**2.36±0.122.37±0.112.45±0.122.44±0.13甘氨酸（Gly）**1.07±0.041.08±0.040.99±0.031.28±0.03丙氨酸（Ala）**1.00±0.021.03±0.011.02±0.021.10±0.02胱氨酸（Cys）0.12±0.010.14±0.010.11±0.010.14±0.01缬草氨酸（Val）*0.73±0.020.76±0.020.77±0.020.76±0.02蛋氨酸（Met）*0.26±0.010.29±0.010.34±0.010.34±0.01异亮氨酸（Ile）*0.64±0.020.67±0.020.70±0.020.66±0.02亮氨酸（Leu）*1.12±0.031.15±0.031.21±0.031.15±0.02酪氨酸（Tyr）0.48±0.010.50±0.010.53±0.020.48±0.01苯丙氨酸（Phe）*0.57±0.020.60±0.020.62±0.020.61±0.01赖氨酸（Lys）*1.30±0.041.32±0.051.38±0.031.33±0.04组氨酸（His）0.30±0.010.32±0.010.32±0.010.32±0.01精氨酸（Arg）0.99±0.030.99±0.031.00±0.041.04±0.03脯氨酸（Pro）0.60±0.010.62±0.010.57±0.010.72±0.02氨基酸总量（TAA）14.30±0.71a14.66±0.68b14.92±0.81b15.28±0.75c必需氨基酸（EAA）5.29±0.21a5.48±0.25b5.73±0.22b5.55±0.19b呈味氨基酸（DAA）5.91±0.11a5.99±0.15a6.02±0.14a6.37±0.14bEAA/TAA36.99±2.0137.38±2.2538.40±2.1836.32±1.93DAA/TAA41.33±3.0540.86±2.8740.35±3.1241.69±2.88注：“*”为必需氨基酸，“**”为呈味氨基酸。%由表5可知，3个试验组必需氨基酸指数EAAI值均高于对照组，C300组必需氨基酸指数EAAI值最高。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.009.T005表5大黄鱼肌肉中氨基酸成分的营养评价组别项目IleLeuLysMet+CysThrValPhe+TyrEAAIC0组AAS1.121.111.670.521.171.031.2180.21CS0.900.921.380.291.010.780.81C100组AAS1.171.141.700.581.211.071.2783.89CS0.940.941.400.331.040.810.85C200组AAS1.221.201.770.681.241.091.3280.97CS0.980.991.470.381.070.820.89C300组AAS1.151.141.710.681.221.071.2585.52CS0.930.941.410.381.050.810.842.5黄栀子提取液对大黄鱼肌肉脂肪酸组分的影响（见表6）由表6可知，各组大黄鱼肌肉脂肪酸总量差异不显著（P0.05）。C300组大黄鱼肌肉中饱和脂肪酸含量显著低于对照组（P0.05）。C300组大黄鱼肌肉中不饱和脂肪酸含量显著高于对照组（P0.05）。3个试验组大黄鱼肌肉中高不饱和脂肪酸含量、EPA+DHA含量显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.19.009.T006表6黄栀子提取液对大黄鱼肌肉脂肪酸组分的影响项目C0组C100组C200组C300组C14∶02.30±0.151.90±0.122.10±0.141.90±0.11C15∶00.30±0.010.20±0.010.20±0.010.30±0.01C16∶022.90±1.8923.10±1.9023.50±2.1221.60±1.58C16∶ln7c8.20±0.518.00±0.437.70±0.376.60±0.48C17∶00.60±0.020.62±0.030.57±0.020.72±0.02C17∶ln7c0.30±0.010.30±0.010.30±0.010.30±0.01C18∶04.90±0.364.70±0.415.00±0.284.40±0.29C18∶ln9c25.40±1.3727.70±1.7227.00±1.6725.30±1.90C18∶2n6c11.40±0.6219.00±0.8516.30±0.7323.40±0.92C18∶3n6c0.10±0.010.10±0.010.10±0.010.10±0.01C18∶3n3c1.50±0.062.10±0.111.80±0.082.40±0.13C20∶00.30±0.010.30±0.010.30±0.010.30±0.01C20∶ln9c1.00±0.050.70±0.030.80±0.030.70±0.04C20∶2n6c0.30±0.010.30±0.010.30±0.010.40±0.01C20∶3n6c0.10±0.010.10±0.010.10±0.010.10±0.01C20∶4n6c0.70±0.030.60±0.010.60±0.020.60±0.02C20∶3n3c0.10±0.010.10±0.010.10±0.010.10±0.01C22∶00.10±0.010.10±0.000.10±0.010.20±0.01C20∶5n∶3c（EPA）4.20±0.192.10±0.122.90±0.142.10±0.14C22∶ln9c0.10±0.000.10±0.010.10±0.000.10±0.01C24∶1n9c1.20±0.040.80±0.030.90±0.020.90±0.03C22∶6n3c（DHA）9.50±0.044.70±0.036.20±0.034.80±0.02其他4.40±0.022.70±0.013.10±0.013.00±0.12饱和脂肪酸∑SFA31.40±1.92a30.92±1.78a31.77±1.93a29.42±1.63b不饱和脂肪酸∑UFA64.10±4.22a66.70±5.01a65.20±5.12a67.90±4.98b单不饱和脂肪酸∑MUFA36.20±2.18a37.60±2.32a36.80±2.55a33.90±2.14b多不饱和脂肪酸∑PUFA27.90±2.01a29.10±2.02a28.40±1.87a34.00±2.55b总脂肪酸n-3族0.30±0.010.30±0.010.30±0.010.30±0.01总脂肪酸n-6族9.50±0.55a4.70±0.23b6.20±0.34c4.80±0.21b高不饱和脂肪酸∑HUFA15.80±0.07a8.40±0.42b10.80±0.67b8.60±0.51bEPA+DHA13.70±0.62a6.80±0.43b9.10±0.52c6.90±0.41b脂肪酸总量FA95.50±5.7297.62±6.7796.97±6.5797.32±7.21%3讨论3.1黄栀子提取液对大黄鱼生长性能的影响叶黄素具有改善水产动物生长性能的作用。杨文平等[24]研究表明，天然叶黄素产品能够改善黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）生长性能，提高成活率、生长速度；饲料中添加0.4%~0.8%的天然叶黄素产品均不同程度地提高黄颡鱼胃、肠、肝胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。王鲁波[25]研究发现，饲料中添加天然叶黄素能够显著改善黄颡鱼生长性能，提高饲料利用率和营养物质消化率。阮少江等[26]研究表明，太子参提取液对大黄鱼具有促生长和改良形体指标的功效。黄栀子中含有栀子黄色素，能够保障大黄鱼肝脏的健康[10,13]。本试验结果表明，随饲料中黄栀子提取液添加量的增加，大黄鱼的绝对增长率、绝对增重率呈上升趋势，表明饲料添加黄栀子提取液能够促进大黄鱼生长。3.2黄栀子提取液对大黄鱼体色的影响在饲料中添加增色剂可以改善水产生物的体色。目前生产中所用的增色剂主要包括叶黄素（lutein）、虾青素（astaxanthin）、角黄素（canthaxanthin）等[27-29]。韩星星等[28]研究发现，在饲料中添加叶黄素和虾青素（1∶1）混合色素可以改善大黄鱼成鱼的体色。冷向军等[29]研究发现，在饲料中添加100 mg/kg天然叶黄素，可改善养殖胡子鲶的（Clarias fuscus）体色。刘翠等[30]研究发现，饲料中添加螺旋藻和叶黄素可增加黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）的皮肤颜色的黄度值和饱和度，进而改善体色。黄栀子中含有栀子黄色素，色泽鲜艳，无毒副作用，着色力强[10]。本试验表明，随着饲料中黄栀子提取液添加量的增加，大黄鱼的背部、腹部和尾部的蓝黄色值（b值）上升，红绿色值（a值）下降；试验组大黄鱼体色感观上也更加金黄，黄栀子提取物对改善大黄鱼体色美观的效果较为明显。3.3黄栀子提取液对大黄鱼肌肉营养的影响叶黄素具有改善水产动物肌肉营养成分的作用，叶黄素对水产动物尤其是淡水鱼具有一定的维生素A前体作用。Gross等[31]研究表明，天然叶黄素对孔雀鱼和剑尾鱼具有维生素A前体作用。Barua等[32]研究表明，印度淡水鲶鱼可将天然叶黄素最常见组分黄体素转化为脱氢视黄醇（VA2），但β-胡萝卜素和玉米黄质不能被转换。黄伟卿等[33]研究表明，太子参提取物作为大黄鱼的饲料添加剂可以改善肌肉品质,最适添加量为0.5%。本试验中，随着饲料中黄栀子提取液添加量的增加，大黄鱼肌肉中氨基酸总量、必需氨基酸总量呈上升趋势；说明饲料中添加黄栀子提取物能够起到提高大黄鱼肌肉中氨基酸含量的作用，浓度较高还可以提高必需氨基酸的含量。黄伟卿等[33]研究表明，在大黄鱼饲料中添加太子参提取液可提高肌肉中n-3族脂肪酸含量，降低n-6族脂肪酸含量，显著提高EPA+DHA的值。本试验中，各组大黄鱼脂肪酸总量差异不显著，C300组大黄鱼肌肉饱和脂肪酸含量显著低于其他组，不饱和脂肪酸含量显著高于其他组，表明一定的浓度黄栀子提取液能够起到影响大黄鱼肌肉脂肪酸含量的作用。4结论本研究表明，饲料中添加300 mL/kg的黄栀子提取液可以有效促进大黄鱼的生长，提升大黄鱼体表颜色的蓝黄值，提高肌肉中氨基酸总量、必需氨基酸含量、不饱和脂肪酸含量，降低饱和脂酸含量。