金针菇菇渣的营养价值较高，含有蛋白质、氨基酸、粗纤维以及生物酶、菌体蛋白、菌类多糖、多酚等生物活性物质[1]。康永刚等[2]发现，日粮中添加20%的金针菇菇渣后，湖羊平均日增重提高了25.47%。武伟成等[3]在日粮中使用金针菇菇渣代替50%酒糟，发现西门塔尔杂交牛的平均日增重提高了27.9%。研究表明，在猪、肉兔、家禽和草鱼日粮中应用金针菇菇渣能够降低养殖成本，提高动物生长性能，改善肉品质，提高动物的免疫和抗氧化能力，降低动物发病率[4-7]。新鲜金针菇菌渣含水量约60%，易发热腐烂变质，不易储藏，且菌糠的营养成分根据生产配方不同而有所差异，使新鲜金针菇菌渣的应用受到限制。在金针菇菇渣中添加豆粕、玉米等原料，调节碳氮比及粗纤维的含量进行微贮发酵，可以通过微生物的繁殖和代谢，提高菌渣的菌群丰度，调节动物肠道菌群，促进菌渣的循环利用[8]。梅花鹿是一种具有较高药用价值的特种经济动物，圈养的梅花鹿每只每年大约需要精饲料450 kg和粗饲料2 000 kg[9]，饲料中粗纤维原料的来源成为梅花鹿养殖的核心问题。本研究在日粮中添加发酵金针菇渣，探讨发酵菇渣对梅花鹿的生长性能、血清生化指标、免疫指标和抗氧化指标影响，为开辟新型粗纤维饲料提供参考。1材料与方法1.1试验原料金针菇菇渣由河南省清丰县沐阳菌业提供，复合菌酶（枯草芽孢杆菌≥2.5×1013 CFU/kg、酵母菌≥4.0×1012 CFU/kg、乳酸菌≥5.5×1011 CFU/kg、纤维素酶≥1.8×106 U/kg、中性蛋白酶活≥1.0×106 U/kg、果胶酶活≥1.5×105 U/kg）由福建省和裕链生态农牧发展有限公司提供。1.2发酵金针菇菇渣饲料的制备新鲜金针菇菇渣烘干，在烘干的金针菇菇渣（占比55%）添加5%豆粕、5%玉米和0.1%复合菌酶，放入GTMR07型饲料搅拌机中，混匀后调整水分含量为35%，装入带排气阀专用发酵袋中封口，自然发酵1周使用，发酵后的菇渣具有一定的酸香味。1.3试验设计与饲养管理选取育成期（7月龄）、平均体重（32.23±1.85）kg的健康雄性梅花鹿12头，随机分为对照组和试验组，每组6个重复，每个重复1头鹿。对照组日粮的粗饲料为花生秧（占比60%），试验组使用发酵金针菇菇渣代替部分花生秧，占全价日粮的40%。调节花生秧的水分含量，使之与发酵饲料的水分含量一致，配制全混合日粮，现配现用。预试期10 d，正式试验期60 d。试验日粮组成与营养水平见表110.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.012.T001表1试验日粮组成及营养水平（干物质基础）项目对照组试验组原料组成玉米2323豆粕1212花生秧6020发酵金针菇菇渣饲料040小苏打11预混料44合计100100营养水平粗蛋白14.6114.26粗灰分5.956.53粗纤维18.9418.14钙0.950.92磷0.580.55注：1.预混料购自北京英美尔饲料公司。2.营养水平均为计算值。%试验在福建梅花山自然保护区鹿园进行，梅花鹿早、晚各饲喂1次，自由采食饮水。鹿舍和料槽、饮水器定期清洗消毒，保持圈舍干净卫生，试验期间观察梅花鹿的健康情况。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能正式试验期间每日记录各组梅花鹿的喂料量。正式期的第1 d和第60 d早晨，梅花鹿空腹进行飞针麻醉，称取每只梅花鹿的初重（IBW）和末重（FBW），参考王华等[10]方法分别计算梅花鹿的总增重（TWG）、平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）等。ADG=(末重－初重)/试验天数(1)ADFI=(总喂料量－总剩料量)/试验天数(2)F/G=ADFI/ADG(3)1.4.2血清生化指标对飞针麻醉的梅花鹿颈静脉采血，每只采集5 mL血液装入一次性真空采血管，离心并分离血清，使用迈瑞BS200全自动生化分析仪检测总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）等指标，具体操作按上海科华生物工程股份有限公司检测试剂盒说明书进行。1.4.3血清免疫指标使用瑞士帝肯IF50酶标仪检测血清中白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-4）、免疫球蛋白G（IgG）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和干扰素-γ（IFN-γ）含量，具体操作按上海优选生物科技有限公司检测试剂盒说明书进行。1.4.4血清抗氧化指标使用瑞士帝肯IF50酶标仪测定血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量，具体操作按上海优选生物科技有限公司检测试剂盒说明书进行。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel 2010进行整理，SPSS 26软件中的独立样本t检验进行方差分析。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1发酵金针菇菇渣对梅花鹿生长性能的影响（见表2）由表2可知，试验组梅花鹿TWG、ADG显著高于对照组（P0.05），F/G显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.012.T002表2发酵金针菇菇渣对梅花鹿生长性能的影响项目IBW/(kg/头)FBW/(kg/头)TWG/(kg/头)ADG/[g/(头·d)]ADFI/[kg/(头·d)]F/GP值0.9580.3260.0310.0310.6650.027对照组32.19±0.7836.82±0.904.64±0.47b77.31±7.81b1.28±0.1216.61±1.14a试验组32.16±0.7237.34±0.825.18±0.24a86.28±3.99a1.30±0.0515.13±0.83b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或者无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同2.2发酵金针菇菇渣对梅花鹿血清生化指标的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验组梅花鹿血清BUN含量、AST活性显著降低（P0.05），ALP活性显著升高（P0.05），而发酵金针菇菇渣对梅花鹿其他血清生化指标未产生显著影响。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.012.T003表3发酵金针菇菇渣对梅花鹿血清生化指标的影响项目TP/(g/L)ALB/(g/L)BUN/(mmol/L)CRE/(μmol/L)ALT/(U/L)AST/(U/L)ALP/(U/L)P值0.3190.8420.0360.8670.5430.0110.036对照组73.33±8.3439.87±2.877.03±0.60a92.10±3.4429.53±9.0229.07±3.01a82.30±8.42b试验组67.53±2.9339.30±3.645.67±0.47b92.50±1.8033.70±6.0921.13±0.49b97.80±1.97a2.3发酵金针菇菇渣对梅花鹿免疫指标的影响（见表4）由表4可知，试验组梅花鹿血清IgG和IFN-γ含量显著高于对照组（P0.05）。发酵金针菇菇渣对梅花鹿其他血清免疫指标未产生显著影响。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.012.T004表4发酵金针菇菇渣对梅花鹿免疫指标的影响项目IL-2/(ng/L)IL-4/(ng/L)IL-6/(ng/L)IgG/(g/L)TNF-α/(ng/L)IFN-γ/(ng/L)P值0.7310.0870.0690.0110.7620.037对照组179.33±28.6542.25±5.7334.34±0.7017.22±0.33b59.26±4.23213.66±15.95b试验组187.79±27.4831.60±5.8636.95±1.1720.37±0.59a58.25±3.29251.12±13.80a2.4发酵金针菇菇渣对梅花鹿血清抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，试验组梅花鹿血清MDA含量显著低于对照组（P0.05），GSH-Px活性显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.012.T005表5发酵金针菇菇渣对梅花鹿血清抗氧化指标的影响组别SOD/(U/mL)CAT/(U/mL)MDA/(μmol/L)GSH-Px/(mmol/L)P值0.4060.1070.0130.011对照组105.99±3.961.46±0.1219.06±0.52a44.69±0.80b试验组107.89±2.691.64±0.8017.60±0.28b48.24±1.15a3讨论3.1发酵金针菇菇渣对梅花鹿生长性能的影响动物生长性能指标（包括ADG、ADFI和F/G等）在畜牧养殖生产中具有重要的指导意义[11]。郭万正等[12]报道，在全混合颗粒日粮中添加10%的金针菇菌糠饲喂2月龄断奶波尔山羊羔羊44 d，料重比降低了6.44%。潘军[13]发现，使用金针菇菌糠替代肉牛粗饲料中40%的麦秸，生长性能具有提高的趋势，经济效益明显提高。王霞等[14]报道，粗饲料中添加30％金针菇菌渣饲喂羔羊60 d，平均日增重比对照组显著提高了18.29%。康永刚等[2]研究发现，在湖羊基础日粮中添加35%菌酶协同发酵金针菇菌糠饲喂60 d，其料重比显著降低8.56%。本试验结果发现，与对照组相比，试验组梅花鹿的TWG和ADG均显著提高，F/G显著降低，与上述报道相符。可能是因为金针菇渣发酵过程中添加了有益菌，不仅改善了营养成分，提高了蛋白质、脂肪、氨基酸总量以及钙、磷等含量[15]，还增加了有利于改善动物肠道菌群的微生物数量，抑制有害微生物的生长，保障了肠道的健康，提高饲料转化率；还可能是发酵金针菇菌渣具有酸香味，适口性好，增加了动物的采食量。3.2发酵金针菇菇渣对梅花鹿血清生化的影响动物机体蛋白质代谢情况可通过血清中TP、ALB、GLB和BUN等指标反映[16]。蛋白质、氨基酸代谢产生的BUN含量能够反映机体对蛋白质和氨基酸的吸收利用程度，当动物体内蛋白质代谢和氨基酸之间代谢平衡良好时，BUN含量下降[17]。本试验中，日粮添加发酵菇渣降低了梅花鹿血清BUN的含量，表明饲喂金针菇发酵饲料可以加快梅花鹿体内的物质代谢，与康永刚等[2]研究结果一致。孟梅娟等[18]报道，在山羊日粮中添加15%、25%、40%的金针菇菌渣，山羊血清BUN含量均显著升高，与本研究结论不一致，可能与试验动物以及日粮配方和营养成分不同有关，其原因有待于进一步研究。ALT、AST和ALP能够催化多种反应合成氨基酸，为蛋白质合成提供充足底物。ALP是一种消化代谢过程中的关键性酶，与动物的生长性能有关，ALP活性提高有利于物质代谢，提高动物日增重[19]。本试验结果发现，饲喂金针菇菇渣发酵饲料后梅花鹿血清中ALT和ALP活性显著提高，可能与发酵饲料促进机体蛋白质代谢有关。3.3发酵金针菇菇渣对梅花鹿血清免疫指标的影响IL-4、IL-6和TNF-α具有免疫调节和抗炎等功能，免疫球蛋白对机体的免疫防御具有重要作用。本试验中，试验组梅花鹿血清IgG含量显著升高，可能与发酵过程中形成的小肽或者益生菌，刺激与活化肠黏膜有关的淋巴组织，诱发其生成淋巴细胞调节机体的免疫应答有关[20]。沈城等[4]研究报道，在育肥猪日粮中添加5%发酵金针菇菌糠，使血清中IgA、IgG和IgM含量分别提高了31.96%、64.75%和51.98%，增强了猪的免疫力。武伟成等[3]发现，在育肥牛的日粮中用金针菇菌糠替代酒糟，血清中的IgA、IgG有升高趋势。干扰素具有抗病毒调节细胞免疫的作用。本试验中，试验组梅花鹿血清IFN-γ含量显著高于对照组。微生物发酵饲料能够调节肠道菌群，还能够产生短链脂肪酸，短链脂肪酸可以促进杯状细胞MUC2的分泌和T细胞的分化，抑制核因子的表达，从而提高动物机体的免疫功能[4,20]。3.4发酵金针菇菇渣对梅花鹿血清抗氧化指标的影响MDA含量可衡量细胞受到胁迫的严重程度，MDA的积累不利于动物机体健康。SOD可反映机体内自由基代谢状态，其水平可间接反映机体清除自由基的能力，具有护肝，延缓细胞衰老的作用，有利于机体的健康。CAT大量分布于动物细胞内，可分解机体代谢过程中产生的活性氧[21-23]。本研究中，试验组梅花鹿血清SOD、CAT和GSH-Px活性均有一定程度的提升，MDA含量显著降低，表明发酵饲料可以提高动物机体抗氧化能力。盛清凯等[24]发现，45%金针菇菌渣作为肉羊育肥的发酵床底物可显著降低肉羊热应激蛋白70含量，提高肉羊的总抗氧化能力，结论与本研究结果一致。研究表明，发酵金针菇菌糠可提高湖羊血清T-AOC及GSH-Px和SOD的活性，降低MDA含量[2]。可能是因为发酵金针菇菇渣含有的酚羟基能有效清除氧自由基或者和过氧化自由基结合生成稳定的化合物，阻止氧化过程[25]，并且通过发酵产生的水解酶能够促进多酚的释放，增加其在体内的利用度从而提高其抗氧化活性[26]。4结论本研究结果显示，日粮中添加发酵金针菇菇渣可以提高梅花鹿的生长性能，改善机体对蛋白质的代谢水平，提高免疫功能和抗氧化能力。