我国肉鸭养殖量占全国肉类总产量的8%以上，在农业经济中起重要作用[1]。传统养殖模式下，肉鸭生长周期较长，生长速度相对较低[2]，并且肉鸭在密集养殖条件下易引发疾病点，生产中通常会使用抗生素来减少疾病发生率，提高肉鸭的生产效率和产品质量。但抗生素不规范使用易导致抗药性菌株产生，还可能引发食品安全和环境污染问题[3]。因此，寻找绿色、安全的替抗饲料添加剂迫在眉睫[4-5]。益生菌是指对宿主生理功能有益的微生物[6]，能够改善肠道微生态环境，促进养分消化吸收，增强免疫功能[7-8]。复合益生菌是由多个不同种类的益生菌混合而成的微生物制剂，可通过多种菌株的协同作用提供更全面的益生效果。在家禽养殖中，复合益生菌具有调节肠道微生态平衡、促进养分消化利用的潜力，其作为替抗产品的应用也越来越广泛[9-10]。大量研究表明，益生菌能够调节家禽肠道内的微生物群落结构，增加有益菌数量，抑制有害菌生长，维持肠道微生态平衡[11]。良好的肠道微生态环境有助于促进消化吸收[12]，提高饲料利用率，改善家禽的生长性能[13]。此外，益生菌能够产生多种代谢产物和酶类，分解复杂的饲料成分[14]，促进蛋白质、碳水化合物和脂肪等营养物质的消化吸收，从而提高养分利用效率，加快生长速度，并提高养殖效益[13]。本试验旨在研究复合益生菌对肉鸭生长性能、血清免疫、肠道微生物数量及营养物质表观消化率的影响，为复合益生菌在肉鸭生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料复合益生菌购自山东大益生物科技有限公司，主要成分为枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌（枯草芽孢杆菌活菌数为1.5×109 CFU/g，植物乳杆菌活菌数为1.5×109 CFU/g）。1.2试验设计采用随机分组的方法，将480只1日龄樱桃谷肉鸭分为4组，每组6个重复，每个重复20只鸭。其中Ⅰ组（对照组）肉鸭饲喂基础日粮，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%和1.5%的复合益生菌。试验期42 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.009.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成/%1~21 d22~42 d营养水平1~21 d22~42 d合计100.0100.0玉米61.066.0干物质/%85.0084.00豆粕13.08.0粗蛋白质/%15.0013.00麸皮8.58.1蛋氨酸/%0.420.38鱼粉7.07.3赖氨酸/%0.750.65贝壳粉6.56.8钙/%1.561.56磷酸氢钙1.71.3有效磷/%0.570.57氯化钠0.81.0代谢能/(MJ/kg)12.4513.14预混料1.51.5注：1.预混料购自河南百盛饲料有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理所有鸭苗均养在同一栋鸭舍内，采用笼养方式。试验期间各组肉鸭自由采食和饮水。定期清洁鸭舍、水槽，控制鸭舍温湿度，每日观察鸭群健康状况，并做好相关试验记录。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能在试验第1、21、42 d，分别对肉鸭进行空腹称重，记录初重和末重，计算1~21、22~42、1~42 d肉鸭的平均日增重、平均日采食量、料重比和存活率。平均日增重=(阶段末重-阶段初重)/饲养天数(1)平均日采食量=总采食量/(试验天数×肉鸭只数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2血清免疫指标试验第42 d，每个处理组抽取6只鸭（每个重复各1只），翅静脉采血后室温静置30 min，3 000 r/min离心15 min。采用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定麻鸭血清中免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白A（IgA）、补体C3、补体C4、干扰素-γ（IFN-γ）和白细胞介素-2（IL-2）的含量。1.4.3肠道微生物数量试验结束时，每个重复选取3只鸭，处死解剖后分离盲肠和空肠，收集内容物-80 ℃保存。采用平板计数法测定肠道中大肠杆菌、乳酸杆菌、沙门氏菌和双歧杆菌的数量[15]。菌落数用每克肠道内容物所含细菌菌落总数的对数表示（lgCFU/g）。1.4.4养分表观消化率在试验结束的前6 d，从每个重复中选出3只肉鸭进行消化试验。预饲3 d后，收集3 d内肉鸭的全部粪便，记录采食量，将粪便置于恒温干燥箱内75 ℃烘至恒重，粉碎后过筛。饲料样同样进行上述处理，计算养分含量和养分利用率[16]。养分表观消化率=（日粮中该养分含量-粪便中该养分含量）/日粮中该养分含量×100%(4)1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合益生菌对肉鸭生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，各复合益生菌组肉鸭42 d体重显著提高（P0.05）。Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭1~42 d平均日增重显著提高（P0.05），22~42、1~42 d料重比显著降低（P0.05）。Ⅲ组肉鸭1~21、22~42、1~42 d存活率最高，分别比对照组高0.15%、0.16%和0.82%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.009.T002表2复合益生菌对肉鸭生长性能的影响项目Ⅰ组（对照组）Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组体重/(g/只)1 d58.63±7.8858.52±6.9458.94±10.0358.68±8.0621 d1 184.86±25.651 198.61±19.301 239.77±30.001 242.24±26.7442 d2 632.88±84.36b2 835.07±99.50a2 969.89±102.04a2 993.78±92.33a平均日增重/[g/(只·d)]1~21 d53.63±0.56b54.29±0.36ab56.23±0.47a56.36±0.28a22~42 d85.29±3.22b87.43±1.84ab90.02±4.50a91.14±3.88a1~42 d73.55±2.10b79.33±1.84ab83.17±3.71a83.86±2.01a平均日采食量/[g/(只·d)]1~21 d90.63±1.0092.83±1.0493.35±1.6893.00±1.3122~42 d193.60±11.23185.35±9.66188.14±7.52191.40±14.011~42 d168.93±8.51176.11±7.22181.31±6.80183.65±9.66料重比1~21 d1.69±0.091.71±0.231.66±0.161.65±0.1322~42 d2.27±0.14a2.12±0.11ab2.09±0.20b2.10±0.12b1~42 d2.30±0.30a2.22±0.11ab2.18±0.07b2.19±0.09b存活率/%1~21 d98.0098.0898.1598.1122~42 d98.1198.2198.2898.221~42 d96.7796.9597.5697.31注：同行数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2复合益生菌对肉鸭血清免疫指标的影响（见表3）由表3可知，各复合益生菌组肉鸭血清中IgM含量均显著高于对照组（P0.05）。与对照组相比，Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭血清IFN-γ含量显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.009.T003表3复合益生菌对肉鸭血清免疫指标的影响项目Ⅰ组（对照组）Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组IgM/(g/L)0.62±0.01b0.74±0.01a0.77±0.02a0.80±0.02aIgG/(g/L)3.83±0.023.88±0.023.91±0.034.00±0.02IgA/(g/L)1.23±0.031.36±0.041.40±0.051.41±0.03C3/(μg/L)174.20±21.04176.53±18.79177.06±26.22178.11±25.48C4/(μg/L)133.52±19.88135.47±14.35138.61±13.60138.44±20.33IFN-γ/(ng/L)12.03±0.84b12.56±0.95ab13.81±1.13a14.77±1.27aIL-2/(ng/L)34.56±5.6734.99±4.9035.18±8.1635.90±7.432.3复合益生菌对肉鸭肠道微生物数量的影响（见表4）由表4可知，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭空肠乳酸菌数量显著高于对照组（P0.05），Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭空肠双歧杆菌数量显著高于对照组（P0.05）。与对照组相比，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭空肠大肠杆菌数量均显著降低（P0.05）。Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭盲肠双歧杆菌和乳酸菌数量显著高于对照组（P0.05）。与对照组相比，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭盲肠大肠杆菌数量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.009.T004表4复合益生菌对肉鸭肠道微生物数量的影响项目Ⅰ组（对照组）Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组空肠乳酸杆菌7.06±0.17b7.53±0.20a7.69±0.24a7.80±0.11a大肠杆菌7.75±0.23a7.14±0.12b6.58±0.33c6.60±0.14c双歧杆菌8.31±0.16b8.30±0.31b8.85±0.33a8.96±0.19a沙门氏菌4.28±0.114.10±0.204.03±0.173.95±0.09盲肠乳酸杆菌6.81±0.61b7.04±0.39b8.13±0.30a7.98±0.55a大肠杆菌8.74±0.37a8.26±0.42b7.19±0.77c7.05±0.68c双歧杆菌8.79±0.20b9.04±0.63b9.72±0.15a9.85±0.33a沙门氏菌4.42±0.024.30±0.144.08±0.063.97±0.08lgCFU/g2.4复合益生菌对肉鸭养分表观消化率的影响（见表5）由表5可知，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭干物质、粗脂肪、粗灰分的表观消化率均显著高于对照组（P0.05），各组肉鸭对粗蛋白质的表观利用率差异均不显著（P0.05）。Ⅲ组、Ⅳ组肉鸭对钙、磷和有机物的表观消化率显著高于I组和Ⅱ组（P0.05）。与对照组相比，Ⅱ组肉鸭对钙和有机物表观消化率分别显著提高了18.21%、6.45%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.20.009.T005表5复合益生菌对肉鸭养分表观消化率的影响项目Ⅰ组（对照组）Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组干物质56.56±1.45c59.84±1.21b63.01±1.19a62.77±1.23a粗蛋白质58.22±1.1358.86±1.0458.92±1.0059.07±1.27粗脂肪61.36±0.30b64.03±0.11a65.41±0.07a65.79±0.09a粗灰分30.71±1.14b34.66±1.05a35.32±2.00a36.08±1.45a钙30.64±1.40c36.22±1.26b47.88±1.11a47.90±2.00a磷36.60±1.58b37.40±2.34b45.30±2.06a46.33±1.33a有机物59.04±1.02c62.85±1.16b64.88±1.02a65.01±1.05a%3讨论3.1复合益生菌对肉鸭生长性能的影响益生菌可产生多种消化酶、有机酸等物质，促进饲料中营养物质的消化，提高机体对营养物质的吸收[17]，还可以合成多糖、氨基酸、维生素等营养物质，从而提高肉鸭生长性能。本研究结果显示，在肉鸭日粮中添加复合益生菌可显著提高肉鸭42 d体重，Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭的全期平均日增重显著高于对照组，22~42、1~42 d料重比显著降低，日粮中添加符合益生菌的肉鸭存活率有提高的趋势。复合益生菌能够促进肉鸭生长可能是益生菌发挥协同作用，分泌纤维素酶、蛋白酶等多种酶类，促进胃肠道蠕动，改善消化功能[18]。张淑芳等[19]在麻鸭基础日粮中分别添加0.1%、0.2%和0.3%的复合益生菌，发现各试验组麻鸭末重显著提高，说明复合益生菌对麻鸭的生长具有促进作用。将复合益生菌和中链脂肪酸甘油三酯联合应用，鸭产蛋率显著提高，对产蛋后期绍兴麻鸭的生产性能具有积极影响[20]。龚萍等[21]发现，在樱桃谷肉鸭饲粮中添加凝结芽孢杆菌（1×109 CFU/g）和粪肠球菌（4×1010 CFU/g）能够降低日采食量和料重比，提高肉鸭成活率。上述研究结果与本研究结果相似，说明复合益生菌可提高樱桃谷鸭的饲料转化率，促进肉鸭生长。3.2复合益生菌对肉鸭血清免疫指标的影响免疫球蛋白是一种具有抗体活性的糖蛋白，能够防御致病菌和病毒对机体的侵害，抑制病菌的繁殖，免疫球蛋白含量越高，代表机体免疫力越强[22]。IgA主要存在于黏膜表面；IgM可在早期中和病原微生物、激活补体；IgG是体内主要的抗体类型，具有中和毒素、激活补体等功能。阮胜钢等[18]研究发现，在雏鸭日粮中添加0.15%的益生菌制剂可显著提高雏鸭血清IgA的含量。胡振华等[23]研究发现，日粮中添加2 g/kg的枯草芽孢杆菌能够促进樱桃谷肉鸭免疫器官的发育。张淑芳等[19]研究发现，在饲粮中添加0.2%的复合益生菌可以提高麻鸭血清中免疫球蛋白的含量。本研究结果显示，日粮中添加复合益生菌可显著提高肉鸭血清IgM的含量，Ⅲ组和Ⅳ组肉鸭血清IFN-γ含量显著高于对照组，说明复合益生菌具有提高肉鸭免疫力的功能。3.3复合益生菌对肉鸭肠道微生物数量的影响益生菌可增加动物消化道内有益菌的数量，通过养分和黏着位点竞争、产生抗菌物质等手段[24]抑制有害菌的生长繁殖[25]。益生菌主要通过改善肠道环境的pH值、产生抗菌肽等维持肠道微生物群落的平衡。本研究中，日粮中添加1.0%的复合益生菌可显著提高肉鸭空肠和盲肠中乳酸菌、双歧杆菌数量，降低大肠杆菌数量，说明由枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组成的复合益生菌能够有效调节肉鸭肠道内的微生物群落结构，促进肠道健康。张淑芳等[19]联合应用复合益生菌（嗜酸乳杆菌、屎肠球菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，100 g）和中链脂肪酸甘油三酯（900 g），结果发现，产蛋后期绍兴麻鸭十二指肠、空肠中沙门菌和大肠杆菌的数量显著降低，空肠的肠壁厚度显著提高，小肠绒毛高度也有提高的趋势。周泉勇等[26]研究表明，日粮中添加由乳酸粪肠球菌、芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌组成的复合益生菌能够显著降低肉鸭排泄粪便中大肠杆菌的数量。胡振华等[23]研究表明，肉鸭日粮中添加1 g/kg的枯草芽孢杆菌可改善肉鸭肠道形态。袁慧坤[27]发现，日粮中添加5×108 CFU/kg丁酸梭菌+1×109 CFU/kg地衣芽孢杆菌能够显著改善北京鸭的肠道形态，调节肠道菌群平衡。综上所述，益生菌调节肠道微生态平衡的功效主要与其抑制有害菌和促进有益菌增殖有关。3.4复合益生菌对肉鸭养分消化利用的影响动物机体对日粮中养分的消化吸收和利用情况可反映机体的生长及健康状态。枯草芽孢杆菌能够增强肠道黏膜屏障功能，降低肠道pH值，分泌纤维素酶等复杂碳水化合物的降解酶，促进机体对营养物质的消化吸收，刺激有益菌繁殖[28]。植物乳杆菌在肠道中分泌多种消化酶，如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等[29]，促进碳水化合物降解，而后产生的乳酸可降低肠道pH值，进而促进饲料消化，发挥益生效应。枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌在发挥作用方面具有一定重叠性，能够产生优势互补的作用，提高日粮养分的消化率[30]。本试验中，与对照组相比，复合益生菌添加组肉鸭对干物质、粗脂肪、粗灰分的表观消化率均显著提高。1.0%和1.5%复合益生菌组肉鸭对钙、磷和有机物的表观消化率显著高于对照组。栾海宏[31]发现，肉鸡日粮中添加0.15%的复合益生菌（植物乳酸菌、枯草芽孢杆菌、双歧杆菌和酵母菌）可显著提高肉鸡对粗脂肪和粗蛋白的表观消化率，但对干物质的表观消化率无显著影响，与本研究中添加复合益生菌对肉鸭粗蛋白质的表观利用率无显著影响的结果有所差异，说明复合益生菌的具体效果可能会受到多种因素的影响，包括饲料成分、环境条件以及具体使用的益生菌品种和菌株等[32]。实际应用中应根据养殖情况和需求选择合适的益生菌产品，以达到最佳的利用效果。上述结果表明，复合益生菌能够通过产生一系列的代谢产物和酶类，分解复杂的饲料成分，促进蛋白质、碳水化合物和脂肪等营养物质的消化吸收，进而提高养分的利用效率。4结论本研究结果表明，日粮中添加复合益生菌可提高肉鸭的生长性能和免疫力，增加肠道有益微生物数量，改善肠道健康，促进机体消化吸收饲料中的养分。本试验条件下，肉鸭日粮中复合益生菌的适宜添加水平为1.0%。