进入产蛋后期的肉种母鸡会出现腹脂沉积增加、卵巢机能下降、抗病能力和抗氧化水平下降等现象，易出现产蛋率下降、蛋品质变差、疾病多发等问题，从而降低经济效益[1-2]。微量元素铜、铁、锰、锌是动物体内多种酶的组成成分，在机体的组织发育、抗氧化能力以及免疫力方面发挥重要作用[3-4]。锌可以有效提高畜禽机体内的生长激素、性激素等激素的活性[5]。日粮中微量元素的添加形式有很多种。无机微量元素因其在肠道中易与植酸等其他成分形成复合物，且蛋白盐易发生水解，导致其利用率降低[6-7]。羟基蛋氨酸螯合矿作为一种新型有机微量元素添加剂，是羟基蛋氨酸类似物（MHA）与微量元素金属离子按照一定的物质的量之比在特定的压力、pH值以及环境温度下螯合而成的物质，具有稳定性好、利用率高、毒性低、适口性好等优点[8-9]。目前，关于羟基蛋氨酸螯合矿在母猪、蛋鸡生产中的应用研究较多。大量研究表明，羟基蛋氨酸螯合矿能够有效提高蛋鸡、母猪的生产性能、繁殖性能等[10-11]，而关于羟基蛋氨酸螯合矿对肉种鸡影响的研究较少。因此，本试验研究不同种类矿物质对产蛋后期的肉种母鸡生产性能、蛋品质、繁殖性能以及抗氧化指标的影响，以期为羟基蛋氨酸螯合矿在产蛋后期肉种母鸡生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料本试验所用的基础无机矿、不同浓度的羟基蛋氨酸螯合矿及预混料由长沙兴嘉生物工程股份有限公司提供。1.2试验设计与饲养管理试验采用单因素随机分组设计，选用432羽50周龄，产蛋率、体重相近、健康的哈伯德（利丰）父母代白羽肉种母鸡，按照随机的原则分成3组，每组6个重复，每个重复24只鸡。A组（对照组）母鸡饲喂基础日粮+无机微量元素（铜、铁、锌、锰）；B组母鸡饲喂基础日粮+无机微量元素+有机微量元素（羟基蛋氨酸螯合铜、铁、锌、锰混合剂）；C组母鸡饲喂基础日粮+有机微量元素。日粮中微量元素的种类和浓度见表1。预试期7 d，正式试验期56 d。预试期各组统一饲喂基础日粮，调整鸡群至各组试验鸡采食量、产蛋率和蛋重差异不显著后开始正式试验。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.025.T001表1日粮中微量元素的种类和浓度微量元素A组（对照组）B组C组硫酸铜10.07.0—羟基蛋氨酸螯合铜—2.46.0硫酸亚铁50.035.0—羟基蛋氨酸螯合铁—7.530.0硫酸锌110.077.0—羟基蛋氨酸螯合锌—16.566.0硫酸锰120.084.0—羟基蛋氨酸螯合锰—18.072.0注：“—”表示未添加。mg/kg饲养试验在湖南顺成实业有限公司宁乡分公司进行。基础日粮采用玉米-豆粕型日粮，营养水平参考白羽肉种鸡的营养需要标准。基础日粮组成及营养水平见表2。试验鸡采用上、中、下3层阶梯式笼养，每笼2只，试验鸡随机均匀分布在鸡舍。每日喂料1次（4：30—5：00），收蛋2次（8：30、14：30），自由采食、饮水，采用人工光照，每日光照时间14 h。卫生、消毒、防疫等工作按常规饲养管理进行。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.025.T002表2基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米71.00粗蛋白质/%14.11豆粕17.52赖氨酸/%0.61豆油1.03蛋氨酸+半胱氨酸/%0.46粗石粉6.00钙/%3.12细石粉2.00有效磷/%0.35敌毒素0.02代谢能/(MJ/kg)11.56预混料2.43注：1.预混料购自长沙兴嘉生物工程股份有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3测定指标及方法1.3.1生产性能正式试验期，每天按照不同的重复记录产蛋数、不合格蛋数（包括破壳蛋、畸形蛋、碎壳蛋、软壳蛋和无壳蛋等）、蛋重及存活鸡数，统计并计算试验期的平均蛋重（g）、产蛋率（%）、种蛋合格率（%）、料蛋比。平均蛋重=产蛋总重量/产蛋总个数(1)产蛋率=产蛋个数/母鸡存栏数(2)种蛋合格率（%）=合格种蛋数/总产蛋数×100%(3)料蛋比=采食总重量/产蛋总重量(4)1.3.2蛋品质正式试验期第4 w末和8 w末，每个重复收集5个种蛋进行蛋品质测定。严格按照《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》（NY/T 823—2004）的规定测定蛋形指数、蛋重、蛋壳强度、蛋壳厚度、哈夫单位、蛋黄指数、蛋黄色泽、蛋壳色泽等指标。1.3.3繁殖性能正式试验期，每天按照重复记录合格种蛋数。正式试验期第4、6、8 w以重复为单位收集并标记合格种蛋孵化，记录每批次入孵总蛋数、无精蛋数、死精蛋数、死胚数及弱雏数，计算受精率、入孵蛋孵化率、受精蛋孵化率、健雏率。受精率=受精蛋数/入孵蛋数×100%(5)入孵蛋孵化率=出雏数/入孵蛋数×100%(6)受精蛋孵化率=出雏数/受精蛋数×100%(7)健雏率=健雏数/出雏数×100%(8)1.3.4抗氧化指标正式试验期第8 w末，以重复为单位，每个重复随机选取2只鸡静脉采血5 mL，采血管倾斜静置30 min后，3 000 r/min离心10 min，用移液枪吸取上清液1.0~1.5 mL，注入1.5 mL离心管中，分组编号并标记日期，-20 ℃冰箱保存，用于抗氧化、激素指标的测定。每个重复随机采集2个种蛋，用蛋清分离器将蛋清蛋黄分离，蛋黄充分混匀后取1~2 g置于-20 ℃冰箱保存，用于测定抗氧化指标。抗氧化指标包括总超氧化物歧化酶（T-SOD）、锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）、铜锌超氧化物歧化酶（Cu-Zn-SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）。采用酶联免疫吸附方法，使用上海茁彩生物科技有限公司生产的ELISA试剂盒进行抗氧化指标的相测定，测定步骤均按照说明书进行规范操作。1.4数据统计与分析使用SPSS 22.0进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡生产性能的影响（见表3）由表3可知，各组肉种母鸡的产蛋率、平均蛋重、料蛋比均无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.025.T003表3添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡生产性能的影响组别产蛋率/%平均蛋重/g料蛋比种蛋合格率/%A组60.32±5.8068.27±0.543.64±0.3394.40±1.99B组62.65±5.2268.67±1.893.48±0.2296.11±1.00C组63.94±4.2367.55±0.943.46±0.2496.23±1.15注：同列数据肩标字母相同或者无字母表示差异不显著（P0.05），字母不同表示差异显著（P0.05）；表5与此同。2.2添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡蛋品质的影响（见表4）由表4可知，试验第28、56 d，各组肉种母鸡蛋品质无显著差异（P0.05）。试验第28 d，B组、C组的蛋壳厚度较对照组有所增加，B组、C组的蛋壳强度较对照组分别提高了3.6%、12.3%。试验第56 d，B组、C组的蛋壳厚度较对照组均有所增加，B组、C组的蛋壳强度较对照组分别提高了4.0%、11.5%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.025.T004表4添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡蛋品质的影响项目试验时间/dA组B组C组蛋重/g2867.88±4.7468.81±3.6867.72±4.835669.28±4.4869.42±4.3069.99±5.23蛋形指数280.76±0.030.76±0.030.76±0.02560.77±0.020.76±0.020.75±0.02蛋壳强度/N2832.54±7.2533.71±8.2336.55±10.585634.10±3.7235.48±7.1538.02±5.49蛋壳厚度/mm280.35±0.020.36±0.030.36±0.04560.37±0.030.38±0.030.38±0.02哈夫单位2871.48±6.9873.02±8.8070.20±8.075670.65±5.7467.84±4.3667.73±8.23蛋黄指数280.38±0.030.38±0.020.37±0.03560.42±0.030.41±0.020.41±0.03蛋黄色泽288.86±0.748.79±0.798.60±0.85566.70±1.666.73±1.466.56±1.56蛋壳色泽281.82±0.652.06±0.692.03±0.82562.23±0.812.00±0.832.06±0.78注：同行数据肩标字母相同或者无字母表示差异不显著（P0.05），字母不同表示差异显著（P0.05）；表6与此同。2.3添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡繁殖性能的影响（见表5）由表5可知，试验全期，各组肉种母鸡入孵蛋孵化率、受精率、健雏率、受精蛋孵化率无显著差异（P0.05）。试验B组、C组受精蛋孵化率较对照组分别提高了2.0%、4.6%，入孵蛋孵化率较对照组分别提高了2.7%、5.5%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.025.T005表5添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡繁殖性能的影响组别受精率受精蛋孵化率入孵蛋孵化率健雏率A组95.11±2.8784.43±6.2180.44±8.1692.29±4.29B组96.00±1.4686.11±8.0682.66±7.7793.04±4.85C组96.22±2.8588.28±6.4484.89±5.6994.23±3.98%2.4添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡抗氧化指标的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，B组、C组种蛋和母鸡血清中的CAT和活性显著提高（P0.05），MDA含量显著下降（P0.05）。C组种蛋和血清中的GSH-Px活性显著高于B组（P0.05），C组种蛋中MDA含量显著低于B组（P0.05），B组、C组血清中T-SOD、CuZn-SOD、Mn-SOD活性均显著高于对照组（P0.05）。C组种蛋中T-SOD、Mn-SOD活性均显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.21.025.T006表6添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡抗氧化指标的影响项目A组B组C组GSH-Px/(μg/L)血清254.92±21.27b260.19±30.46b304.83±34.43a种蛋150.72±17.14c173.44±20.35b198.07.95±22.94aCAT/(ng/L)血清947.53.36±126.90b1164.31±157.70a1273.24±143.62a种蛋496.94±73.20b582.24±86.60a634.44±114.78aMDA/(μmol/L)血清16.93±1.79a14.68±2.18b13.86±1.99b种蛋10.19±1.31a7.87±1.15b6.36±1.39cT-SOD/(μg/L)血清115.25± 16.02b130.95±11.81a141.68±16.72a种蛋59.07±14.28b67.62±7.46ab74.01±12.25aCuZn-SOD/(μg/L)血清11.17±1.86b13.36±1.40a13.56±1.25a种蛋5.89±1.596.79±0.807.22±1.85Mn-SOD/(μg/L)血清104.08±14.33b117.59±10.64a128.12±15.73a种蛋53.18±12.81b60.83±6.83ab66.78±10.56a3讨论3.1添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡生产性能的影响铜、铁、锰、锌是畜禽机体内多种酶的必需组成成分，大多数情况下以酶或者激活剂等形式参与畜禽机体内的一些生化和生理活动过程，为畜禽机体内的生长发育和新陈代谢提供保障[12-17]。Martin[18]、刘璇等[19]研究表明，在矮小型父母代种鸡日粮中添加羟基蛋氨酸螯合矿能够显著提高生产性能。本试验研究发现，在日粮中添加低于正常水平的羟基蛋氨酸螯合矿不会影响产蛋后期肉种母鸡的生产性能。薛颖等[20]在154日龄京红1号蛋鸡日粮中添加不同水平的有机复合微量元素，结果表明，在试验的第9~16 w，添加水平为推荐需要量25%的有机组蛋鸡的产蛋率显著高于无机组。甄霆等[21]研究发现，在每千克日粮中添加100 mg的氨基酸螯合锌、铁混合物替代无机铁、锌，能够显著降低1日龄藏鸡的料肉比，显著提高平均日增重。郝洋洋等[22]发现，用不同比例的羟基蛋氨酸螯合锌、锰混合物替代无机锌、锰，能够显著提高161日龄海兰褐壳蛋鸡的平均蛋重、产蛋率，且当无机和有机各添加50%的时候效果最明显。朱勇文[23]发现，在每千克日粮中添加120 mg羟基蛋氨酸锰能够有效缓解种母鸡因热应激而引起的产蛋量下降的现象。Meng等[24]研究表明，为满足白羽肉鸡的生长需要，日粮中只需添加50~75 mg/kg羟基蛋氨酸螯合矿。以上研究结果与本研究结果一致，说明日粮中添加低于正常无机添加水平的羟基蛋氨酸螯合矿能够满足产蛋后期肉种母鸡的生产需要。原因可能是因为羟基蛋氨酸螯合矿结构稳定，提高了微量元素在肉种鸡体内的吸收效率，同时MHA不仅给机体提供了蛋氨酸营养，同时还起到了酸化剂、抗生素的作用。3.2添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡蛋品质的影响Zn、Mn等微量元素作为畜禽机体内多种酶的辅基，通过影响壳膜、蛋壳形成过程中所需要的酶来影响蛋壳品质[25]，也可以通过相互作用影响钙质结构的形成来影响蛋壳品质[26]。Zn能够作为辅助因子来影响碳酸酐酶抑制剂发挥作用[27]，Mn则直接参与糖蛋白和糖胺聚糖的合成而影响蛋壳形成[28-29]，铜通过参与胶原蛋白的生成而影响蛋壳膜的形成[30]。本试验中，各组间蛋品质无显著差异。第28 d，B组、C组的蛋壳强度较对照组分别提高了3.6%、12.3%。第56 d，B组、C组的蛋壳强度较对照组分别提高了4.0%、11.5%。这与石磊等[31]发现的在蛋鸡日粮中添加0.03%~0.05%羟基蛋氨酸锌、锰能够显著提高蛋壳强度和蛋壳厚度的试验结果不一致。原因可能是试验的动物品种和添加羟基蛋氨酸螯合矿的量不一致。本研究表明，日粮中使用羟基蛋氨酸螯合矿完全替代无机矿能够保证产蛋后期肉种母鸡的蛋品质。3.3添加不同种类矿物质对产蛋后期肉种母鸡繁殖性能的影响受精率和孵化率受种蛋重的影响。本研究发现，日粮中添加不同水平羟基蛋氨酸螯合矿对产蛋后期肉种母鸡的受精率、受精蛋孵化率、健雏率均无显著影响，但有机组的受精率和孵化率均高于对照组。这与本研究结果中不同类型微量元素对蛋重无显著影响的结果相符合，同时与前人的研究结果基本一致。刘凤霞[32]研究发现，低剂量的有机锌对产蛋后期肉种母鸡的繁殖性能无显著影响。荆佳林[33]研究表明，饲粮中用适量的MHA-Zn替代硫酸锌能够改善产蛋后期种母鸡的繁殖性能。上述研究表明，低水平的羟基蛋氨酸螯合矿能够满足肉种母鸡产蛋后期的微量元素需要，对繁殖性能无显著影响。3.4添加不同水平羟基蛋氨酸螯合矿对产蛋后期肉种母鸡抗氧化指标的影响畜禽机体抗氧化指标直接反映畜禽机体的健康状态。Han[34]、Radmila等[35]报道，日粮中添加有机硒可提高肉鸡抗氧化能力。Min等[36]在母鸡日粮中添加40 mg/kg或80 mg/kg的羟基蛋氨酸锌，发现与对照组相比，第72 w，母鸡肝脏MT mRNA的表达量显著增加。超氧化物歧化酶作为自由基形成及氧化过程中的抑制剂是畜禽机体抗氧化体系中不可或缺的一部分，Fe、Zn作为动物机体中超氧化物歧化酶的辅助因子可直接影响动物机体的抗氧化水平[13]。本试验研究结果表明，日粮中添加不同水平的羟基蛋氨酸螯合矿能够显著提高产蛋后期肉种母鸡的抗氧化能力，且完全使用有机微量元素效果更好。这与曲湘勇等[37]、荆佳林等[38]、齐茜[39]的试验结果基本一致。本研究中Mn-SOD的含量随着有机锰的添加水平的增加而增加，这与马娅娅等[40]发现的日粮中有机锰的添加水平与肝脏Mn-SOD酶含量呈一次线性关系的研究结果基本一致。4结论日粮添加羟基蛋氨酸螯合矿能够有效满足哈伯德（利丰）产蛋后期肉种母鸡的正常生产需要，可以显著提高产蛋后期肉种母鸡的抗氧化能力。建议在产蛋后期肉种母鸡的日粮中使用羟基蛋氨酸螯合矿100%替代无机微量元素。