近年来,在畜牧行业绿色健康养殖的背景以及“禁抗”“替抗”“减抗”趋势下,寻找天然安全的饲料添加剂对促进动物生长、提高产品品质、改善抗病力以及降低碳氮排放具有重要意义[1]。缩合单宁又名原花色素,属于多酚类化合物,广泛分布于植物界中,尤其以豆类植物含量较高。前期研究认为,缩合单宁是一种抗营养因子,其过量摄入会影响机体对营养物质的消化与吸收,严重甚至产生毒性[2-4]。近年来,随着对缩合单宁化学结构特性研究的深入,其在抗氧化、抗炎、抗菌、抗寄生虫以及改善动物肠道微生态环境等方面的功能被陆续报道,学者们开始探究在畜禽饲料中添加单宁对动物生产性能和胴体品质等影响[5-7]。有研究表明,饲粮中添加100 mg/kg缩合单宁能够在一定程度上改善肉鸡的生长性能、肉品质、免疫功能、抗氧化功能以及肠道形态[8]。少量添加缩合单宁也能够在一定程度上提高断奶仔猪生长性能和缓解腹泻[9]。缩合单宁能够提高反刍动物对饲粮及营养物质消化率,并且其在调控瘤胃发酵模式、减少甲烷排放方面具有较大潜力[10]。但目前关于缩合单宁在反刍动物中的研究多为体外试验,关于缩合单宁调控肉羊生长和抗氧化能力的研究未见报道。本试验研究不同添加水平缩合单宁对肉羊生长性能、屠宰性能、肉品质及抗氧化能力的影响,旨在为缩合单宁在肉羊实际生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料缩合单宁由竹山天新医药提供,购自山东优索化工科技有限公司,纯度为81%,其余组分为载体。1.2试验动物及日粮试验动物选用5月龄左右、无病健康、体重相近的杜寒杂交(杜泊羊×小尾寒羊)母羊,基础饲粮参照《肉羊饲养标准》(NY/T 816—2004)进行配制,基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.002.T001表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米35.10代谢能/(MJ/kg)9.62豆粕5.00干物质/%85.70棉籽粕5.00粗蛋白/%16.62玉米胚芽粕23.00钙/%1.05葵花皮13.00磷/%0.49米糠12.00石粉1.50食盐0.70预混料2.00碳酸氢钙0.70膨润土2.00注:1.每千克预混料为饲粮提供:VA 350 000 IU、VB1 62 mg、VB6 62 mg、VB12 0.7 mg、VD3 93 750 IU、VE 938 mg、铜500 mg、铁3 240 mg、锌3 000 mg、锰2 500 mg、碘23 mg、硒18 mg、钴30 mg。2.营养水平中代谢能为计算值,其余均为实测值。1.3试验设计与饲养管理试验在吉林省农业科学院动物营养与饲料研究所实验场进行。选取27只杜寒杂交(杜泊羊×小尾寒羊)母羊,随机分成3组,每组9个重复,每个重复1只羊。对照组的羊饲喂基础饲粮,低剂量组和高剂量组分别在基础饲粮中添加39.47、78.94 g/kg的缩合单宁。试验分为预试期和正式试验期,预试期7 d,正式试验期60 d。试验羊由专人饲喂,自由采食和饮水。每天定时清理圈舍,保持圈舍清洁。采用常规防疫制度进行免疫,定期驱虫[11]。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能正式试验开始和结束时,试验肉羊均空腹禁食12 h后,称重,记为初重、末重;试验期间每日准确记录每个重复的饲喂量和余料量,计算平均日采食量、平均日增重、料重比[12]。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2屠宰性能饲养试验结束后,肉羊在屠宰前24 h禁食、禁水,保持环境安静。屠宰前用电子秤测定宰前活重。放血、剥离皮毛,去头、蹄、内脏称重,测定胴体重、GR值、眼肌面积等,计算屠宰率[13]。屠宰率=胴体重/宰前活体重×100% (4)1.4.3肉品质取屠宰肉羊的右背最长肌,测定pH24 h值、滴水损失率、剪切力等指标,具体操作参照赵亚星等[14]的方法。1.4.4抗氧化能力屠宰试验前,每组随机采集3只肉羊的血液样品,分离血清,按照抗氧化指标试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书测定总氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)以及丙二醛(MDA)等指标。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel软件进行处理,SPSS 21.0统计软件进行单因素方差分析,LSD方法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1缩合单宁对肉羊生长性能的影响(见表2)由表2可知,低剂量组肉羊的末重、平均日增重、平均日采食量均显著高于对照组(P0.05),料重比显著低于对照组(P0.05);高剂量组肉羊的平均日采食量显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.002.T002表2缩合单宁对肉羊生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[g/(只·d)]料重比对照组29.13±3.1341.15±2.05a200.35±28.42a1 309.61±88.31a6.68±0.33b低剂量组29.89±2.9046.79±2.72b281.58±13.33b1 588.90±125.24b5.65±0.44a高剂量组29.95±2.6944.44±3.16ab241.43±43.62ab1 496.67±92.92b6.35±0.38ab注:同列数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05),不同字母表示差异显著(P0.05);下表同。2.2缩合单宁对肉羊屠宰性能的影响(见表3)由表3可知,低剂量组肉羊的GR值、胴体重显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.002.T003表3缩合单宁对肉羊屠宰性能的影响组别屠宰率/%GR值/mm眼肌面积/cm2胴体重/kg背膘厚度/mm对照组41.97±2.091.88±0.15a16.36±0.9023.36±0.98a4.76±0.42低剂量组44.06±2.242.23±0.11b18.32±0.8425.13±0.92b5.01±0.56高剂量组43.99±2.062.12±0.12ab17.46±1.2123.54±0.88a4.88±0.292.3缩合单宁对羊肉品质的影响(见表4)由表4可知,低剂量组和高剂量组羊肉pH24 h值、内聚性、咀嚼性显著高于对照组(P0.05)。低剂量组羊肉滴水损失率显著低于对照组(P0.05),蒸煮损失显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.002.T004表4缩合单宁对羊肉品质的影响项目pH24 h值滴水损失率/%剪切力/N蒸煮损失/%弹性内聚性咀嚼性可恢复形变对照组5.81±0.18a11.74±1.57b33.61±0.3133.95±2.98a4.81±0.150.66±0.09a1 755.00±0.05a6.23±0.31低剂量组6.27±0.14b9.04±0.76a28.74±0.7634.09±1.17b4.11±0.180.72±0.05b1 851.00±0.04b6.27±0.21高剂量组6.12±0.14b10.32±1.08ab32.83±0.3833.99±1.01ab3.68±0.120.69±0.06b1 842.00±0.05b3.25±0.892.4缩合单宁对肉羊血清抗氧化指标的影响(见表5)由表5可知,低剂量组肉羊血清T-AOC及T-SOD、CAT、GSH-Px的活性均显著高于对照组(P0.05),MDA含量显著低于对照组(P0.05)。高剂量组肉羊血清CAT活性显著高于对照组(P0.05),T-AOC、GSH-Px、MDA水平与对照组相比差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.002.T005表5缩合单宁对肉羊血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)T-SOD/(U/mL)CAT/(U/mL)GSH-Px/(mmol/L)MDA/(μmol/L)对照组2.01±0.31a88.49±3.39a1.47±0.40a134.92±9.97a3.25±0.31b低剂量组2.99±0.38b108.82±5.81b2.70±0.20b169.14±13.27b2.54±0.37a高剂量组2.38±0.23ab94.03±3.45a2.64±0.12b151.41±10.62ab2.75±0.25ab3讨论3.1缩合单宁对肉羊生长性能的影响生长性能常用于评价饲料添加剂在动物饲喂中的直接营养作用效果[15]。本试验条件下,综合肉羊试验末重、平均日增重、平均日采食量及料重比等指标变化,饲粮添加低剂量的缩合单宁(39.47 g/kg)能够促进肉羊的生长。但很多报道证明缩合单宁的抗营养作用会降低动物的生长性能[16-19],与本研究结果不一致。缩合单宁抗营养作用原因是其特有的涩味会降低动物的干物质采食量[20],缩合单宁还可通过结合饲料中的蛋白质等营养物质形成不溶性复合物降低其利用率[21]。但一些研究报道也表明,在鱼类、断奶仔猪以及肉鸡养殖过程中添加适宜的缩合单宁有助于提高它们的生产性能[8-9,22]。尤其在反刍动物生产中,由于缩合单宁能够与蛋白质结合形成不溶于水的复合物,而被认为是天然有效的过瘤胃蛋白保护剂,进而避免被瘤胃微生物分解,达到提高蛋白质有效利用率的效果。单宁对瘤胃微生物具有毒性作用,可有效减少反刍动物甲烷排放[23-24],这在解湧芳等[25]对绵羊以及赵梦迪等[26]对湖羊的研究中也得到了证实。卢珍珍等[27]研究进一步验证,饲粮添加0.15%、0.30%和0.45%的缩合单宁均能够提高羔羊日增重和采食量,且以0.15%的添加比例效果最佳。综上所述,本试验缩合单宁提高肉羊生长性能的原因可能是在长期饲喂过程中肉羊适应了缩合单宁的味道;缩合单宁添加促进营养物质利用的作用大于抗营养作用,从而使添加低剂量缩合单宁改善了肉羊生长性能,但也因添加种类、时间、试验对象等因素存在差异而需要具体分析。3.2缩合单宁对肉羊屠宰性能的影响屠宰性能可直接体现饲料的转化率,也关乎肉用动物的经济价值,常规选用屠宰率、GR值、眼肌面积等指标衡量屠宰性[28]。屠宰率直接体现产肉量,眼肌面积和GR值分别是胴体肌肉含量以及脂肪含量的标志[29]。在本试验条件下,饲粮添加缩合单宁可在一定程度上提升肉羊的屠宰性能。这也符合缩合单宁促进肉羊生长性能的结果,但与梁雪等[30]的研究结果不一致。尽管存在差异,但在肉羊养殖中关于缩合单宁调控其屠宰性能的报道并不多见,尚不能深入分析差异产生的原因,还需深入探究。3.3缩合单宁对肉羊肉品质的影响随着生活水平的提升,广大消费者对羊肉的营养和口感的追求越来越高,因此,肉质提升也是目前关注的重点[31]。肌肉pH值、滴水损失以及剪切力均为评判肉品质的重要标准,三者与肌肉色泽、嫩度和持水性密切相关[32]。本试验条件下,综合低剂量组和高剂量组羊肉pH值、滴水损失率以及剪切力指标变化,可认为添加缩合单宁对肉品质也具有一定的提升作用。Buyse等[33]研究发现,饲粮中添加栗木单宁可增加肉鸡的肌肉pH值。饲粮添加葡萄籽源单宁也可改善兔肉品质[34]。还有报道发现,饲粮添加栗木单宁降低了滩羊肉的失水率和剪切力,并在一定程度上具有改善滩羊肉嫩度的作用[35]。因此,缩合单宁在改善肉羊的肉品质方面具有一定的潜力。3.4缩合单宁对肉羊血清抗氧化指标的影响缩合单宁的促生长作用可能归功于其在瘤胃中的代谢特性,但也有很多报道指出缩合单宁在抗氧化方面具有很大的功效,因此有必要探究缩合单宁对肉羊抗氧化指标的影响。氧化应激是生命活动中常见的反应,主要是机内活性氧自由基生成超过其正常清除的能力,对机体造成负面损伤,引起衰老和疾病[36]。在实践养殖过程中,养殖动物随时面对环境因素、饲料因素以及管理因素等带来的氧化应激,造成生长的负效应。评价动物机体的抗氧化能力一般通过检测与抗氧化功能相关的酶以及其他关键物质的变化水平实现。T-AOC及SOD、CAT、GSH-Px活性是评价动物抗氧化功能的指标[37],MDA作为脂质过氧化的产物也被认为是氧化应激的标志物[38]。本试验条件下,添加缩合单宁能够在一定程度上改善肉羊的抗氧化能力。原因与单宁结构中的多元酚羟基存在关联,多元酚羟基具有很强的还原性,在清除自由基方面发挥重要作用[39]。关于单宁提高动物机体抗氧化能力的研究非常多,在鱼类[5]、肉鸡[8]、生长獭兔[40]中均有报道。Liu等[41]研究发现,栗木水解单宁可提高泌乳后期奶牛血浆T-AOC,改善过渡期奶牛机体的抗氧化状态。牟春堂等[42]研究发现,葡萄籽缩合单宁可提高杜泊小尾寒羊杂交公羔羊睾丸和附睾组织的抗氧化能力,进而提升精液品质。饲粮中含2%和4%的单宁可以提高绵羊的抗氧化能力[43]。上述研究报道均可说明缩合单宁在抗氧化方面潜力巨大,但目前的研究大多仅是初步探究对抗氧化酶活性的初探,深入的抗氧化机制有待后续验证。4结论本研究结果显示,在肉羊生长育肥饲粮中添加39.47 g/kg缩合单宁可显著提高其生长性能,改善屠宰性能、肉品质及抗氧化能力,表明合理使用缩合单宁对肉羊的生长具有促进作用。
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