蛋鸡产蛋高峰期过后，卵巢功能减弱，机体生殖激素水平降低，导致产蛋率下降，此阶段的养殖管理对养殖经济效益至关重要[1-2]。艾草是多年生菊科蒿属植物，具有浓烈香气，全草可入药，具有温经、去湿、散寒、止血、消炎、平喘、止咳、安胎、抗过敏等作用[3-4]。艾叶中不仅含有蛋白质、脂肪、矿物质等多种营养物质，还含有多糖、黄酮、三萜类及挥发油等活性成分[5-7]。艾叶具有抗菌、抗炎、增强免疫、抗氧化、抗病毒等功效[8-10]。目前已有关于艾叶在动物生产中应用的相关研究结果。艾叶中的黄酮可改善脂多糖刺激导致的肉鸡免疫功能下降，提高肉鸡的生长性能[11]。在日粮中添加艾叶粉可提高肉鸡肠道和肝脏的抗氧化功能，增强机体的抗应激能力[12]。使用1%~3%的艾草粉可显著提高蛋鸡的产蛋性能，对机体的健康未产生负面影响；2%~3%的艾草粉还可改善蛋品质，增强机体的抗热应激能力[13]。亢君芳等[14]研究发现，甪里艾叶粉可以改善海兰褐蛋鸡的产蛋性能,蛋的比重和蛋白高度显著提高，蛋壳比率呈降低的趋势。研究发现，当艾草粉添加量为3%时可显著改善鹌鹑的蛋品质[15]。日粮中添加4%的艾叶粉可以提高蛋鸭的平均日增重，降低料重比；提高免疫球蛋白水平，增强抗氧化酶活性[16]。基于此，本试验以产蛋后期的京红1号蛋鸡为研究对象，探讨不同水平的艾叶粉对蛋鸡的产蛋性能、蛋品质及生殖激素的影响，以期为艾叶粉在家禽养殖中的高效利用提供参考。1材料与方法1.1艾叶粉艾叶购自当地中药材市场，粉碎，过40目筛。艾叶粉的营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.008.T001表1艾叶粉的营养水平项目粗蛋白粗脂肪粗灰分粗纤维干物质钙磷含量16.023.0510.1922.3288.381.171.52%1.2试验设计选择54周龄健康的京红1号蛋鸡1 000只，按照单因素设计，随机分为5组，每组10个重复，每个重复20只蛋鸡。对照组蛋鸡饲喂基础日粮，各艾叶粉组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%和2.0%的艾叶粉。预试期1 w，正式试验期8 w。京红1号蛋鸡的基础日粮参考《蛋鸡营养需要标准》（NY/T 33—2004）配制，其原料组成及营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.008.T002表2基础日粮组成及营养水平（干物质基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米60.00代谢能/(MJ/kg)12.03麦麸4.00粗蛋白/%17.02豆粕23.00钙/%3.42豆油2.00总磷/%0.68石粉8.20有效磷/%0.43磷酸氢钙1.30赖氨酸/%0.88蛋氨酸0.20蛋氨酸/%0.40氯化胆碱0.05食盐0.25预混料1.00注：1.预混料为每千克日粮提供：铁82 mg、铜25 mg、锌75 mg、锰50 mg、硒0.45 mg、碘0.18 mg、VA 7 300 IU、VD3 2 800 IU、VE 26 mg、VK3 1.2 mg、VB1 1.8 mg、VB2 3.8 mg、VB6 2 mg、VB12 0.04 mg、烟酰胺33 mg、叶酸0.6 mg、D-泛酸11 mg、生物素0.2 mg。2.营养水平中粗蛋白、钙、总磷为实测值，其余均为计算值。1.3饲养管理试验在同一鸡舍内进行，预试期的前4 d所有组蛋鸡均饲喂基础饲粮，后3 d逐渐饲喂试验饲粮。蛋鸡采用3层阶梯式笼养方式，饮水采用乳头饮水器。每3 d消毒一次，每日打扫鸡舍卫生。每天蛋鸡饲喂2次，自由采食，不间断供水。每日采用自然光照和人工日灯结合方式光照16 h，每日9：00捡蛋。1.4测定指标及方法1.4.1产蛋性能每天按照各重复记录京红1号蛋鸡的产蛋数量、采食量，称量蛋重。平均日采食量=总采食量/(试验天数×试验鸡数量)(1)平均蛋重=总蛋重/蛋总数(2)料蛋比=平均日采食量/日产蛋重(3)平均日产蛋重=蛋重×产蛋率(4)1.4.2蛋品质试验第56 d，从每组中挑选蛋重相近的20枚鸡蛋检测蛋品质，采用罗氏比色扇测定蛋黄颜色；使用ORKA蛋品质分析仪测定哈夫单位，采用数显千分尺测量蛋壳厚度，用天平称量蛋壳重量、蛋白重量和蛋黄重量，计算蛋壳相对重、蛋黄相对重、蛋白相对重。使用游标卡尺测量鸡蛋的纵径和横径，计算蛋形指数。蛋黄中的粗蛋白、粗脂肪采用国标方法测定，胆固醇采用南京建成生物工程研究的试剂盒测定。蛋形指数=纵径/横径(5)1.4.3血清生殖激素试验第56 d，每组于晨饲前挑选体重相近的10只蛋鸡翅下静脉采血约10 mL，静置3~4 h，4 000 r/min离心6 min，收集上层血清用于检测生殖激素水平。检测项目包括雌二醇（E2）、促卵泡激素（FSH）、催乳素（PRL）、促黄体生成素（LH）、雄激素（AH）、黄体酮（P）、三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）等。按照试剂盒（北京北方生物技术研究所）说明书，采用放射免疫方法检测以上各项指标。1.4.4抗氧化指标使用Elisa试剂盒检测蛋鸡血清总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及超氧化物歧化酶（SOD）等抗氧化指标。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，操作步骤按照说明书执行。1.5数据统计与分析数据采用SPSS 26进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1艾叶粉对蛋鸡产蛋性能的影响（见表3）由表3可知，1.5%组和2.0%组蛋鸡的产蛋率、平均蛋重、平均日产蛋重均显著高于对照组（P0.05），料蛋比显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.008.T003表3艾叶粉对蛋鸡产蛋性能的影响组别产蛋率/%平均蛋重/(g/枚)平均日采食量/[g/(只·d)]料蛋比平均日产蛋重/(g/d)对照组83.65±4.02b58.05±3.19b115.37±6.302.38±0.16a48.56±2.18b0.5%组83.85±5.17b58.37±3.84b115.82±7.012.37±0.21a48.94±3.47b1.0%组84.47±4.26ab58.70±4.42ab116.48±8.372.35±0.14a49.58±3.74ab1.5%组84.91±5.28a59.82±5.04a116.50±7.462.29±0.26b50.79±4.34a2.0%组85.31±6.28a60.64±5.32a116.29±8.042.24±0.15b51.73±5.03a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2艾叶粉对鸡蛋品质、内容物的影响（见表4、表5）由表4可知，1.5%组、2.0%组鸡蛋的蛋壳强度、哈夫单位显著高于对照组（P0.05），1.0%组、1.5%组和2.0%组鸡蛋的蛋黄颜色显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.008.T004表4艾叶粉对鸡蛋品质的影响组别蛋壳厚度/mm蛋形指数蛋壳强度/N蛋黄颜色哈夫单位蛋黄相对重/%蛋壳相对重/%对照组0.35±0.051.33±0.1639.41±2.47b6.58±0.37b82.31±4.04b0.30±0.020.11±0.020.5%组0.36±0.041.35±0.1240.01±2.10b6.92±0.28b82.83±5.18b0.30±0.020.11±0.031.0%组0.37±0.051.36±0.1740.62±3.19ab7.36±0.37a83.38±6.03ab0.31±0.030.10±0.021.5%组0.37±0.031.38±0.1441.28±4.04a7.83±0.46a84.03±5.21a0.31±0.040.09±0.012.0%组0.38±0.061.38±0.1741.73±2.87a8.04±0.37a84.42±5.29a0.31±0.030.09±0.01由表5可知，1.5%组、2.0%组蛋黄胆固醇含量显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.008.T005表5艾叶粉对鸡蛋内容物的影响组别蛋黄胆固醇/(mg/g)粗蛋白/%粗脂肪/%钙/(mg/100 g)磷/(mg/100 g)对照组14.73±1.38a12.53±1.049.64±0.63108.32±4.87203.18±11.370.5%组14.05±1.47a12.64±1.389.36±0.53109.17±5.38204.27±12.041.0%组13.65±1.21ab12.85±1.639.30±0.61109.74±6.03205.63±12.611.5%组13.03±1.48b12.88±1.549.24±0.67110.43±7.28207.36±13.172.0%组12.85±1.62b12.76±1.739.18±0.52110.82±8.01208.30±14.612.3艾叶粉对蛋鸡血清生殖激素的影响（见表6）由表6可知，1.5%组和2.0%组蛋鸡血清E2、P水平显著高于对照组（P0.05），1.0%组、1.5%组、2.0%组蛋鸡血清FSH、T4水平显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.008.T006表6艾叶粉对蛋鸡血清生殖激素的影响组别E2/(ng/L)FSH/(IU/L)PRL/(IU/L)LH/(IU/L)AH/(μg/L)P/(μg/L)T3/(nmol/L)T4/(nmol/L)对照组63.68±4.72b2.57±0.21c236.94±12.432.47±0.210.07±0.010.07±0.02b1.35±0.1152.47±4.16c0.5%组64.28±4.39ab2.79±0.31c231.38±13.412.50±0.170.08±0.010.09±0.02b1.40±0.1353.68±5.03bc1.0%组64.83±4.61b3.45±0.36b241.90±14.292.57±0.140.08±0.020.11±0.03ab1.45±0.2155.38±6.02b1.5%组65.37±5.03a3.96±0.40a237.83±12.742.62±0.310.10±0.010.14±0.03a1.48±0.2357.26±3.86a2.0%组65.52±5.16a3.52±0.54a243.07±13.272.53±0.260.09±0.020.15±0.03a1.50±0.1857.18±4.28a2.4艾叶粉对蛋鸡血清抗氧化的影响（见表7）由表7可知，1.0%组、1.5%组、2.0%组蛋鸡血清CAT和SOD活性显著高于对照组（P0.05），1.5%组和2.0%组蛋鸡血清MDA含量显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.22.008.T007表7艾叶粉对蛋鸡血清抗氧化的影响组别T-AOC/(U/mL)CAT/(U/mL)MDA/(μmol/L)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)对照组0.87±0.031.18±0.11c3.97±0.17a193.45±26.3872.19±0.48b0.5%组0.92±0.031.46±0.14bc3.56±0.24a203.31±21.0576.29±0.36ab1.0%组0.96±0.041.85±0.12b3.05±0.31ab213.74±30.5381.27±0.41a1.5%组1.02±0.072.48±0.16a2.54±0.22b217.40±32.7483.16±0.53a2.0%组1.02±0.082.60±0.23a2.31±0.26b221.42±35.1084.39±0.63a3讨论3.1艾叶粉对蛋鸡产蛋性能的影响艾叶中含有多种营养物质，如维生素、叶绿素、矿物质及必需氨基酸等，以及黄酮、多酚、挥发油等活性物质[17]。在蛋鸡生产中适量使用艾叶可以通过调节机体生理功能，促进机体对饲料的消化吸收，进而改善蛋鸡的生产性能，并预防一些常见疾病[18]。本试验中，京红1号蛋鸡采食1.5%和2.0%的艾叶粉可显著提高产蛋率、平均蛋重、平均日产蛋重，且显著降低料重比。归荣等[19]研究发现，大午金凤蛋鸡采食2%和3%的艾草粉显著提高了蛋鸡的平均日产蛋重及饲料转化率。亢君芳等[14]研究发现，在海兰褐蛋鸡饲粮中添加甪里艾叶粉可显著提高蛋的比重，添加量为2%时效果最好。张旭等[20]也发现，3%的艾草粉可以显著提高蛋鸡的产蛋率和饲料转化率，而且对其他生产性能指标无显著影响。以上研究结果与本研究结果类似，只是艾叶粉的添加剂量有所不同，可能与艾草品种、蛋鸡品种等因素有关。相关研究发现，艾叶中的多糖成分可增强机体的免疫力，如挥发油等物质具有抑菌作用，而绿原酸等活性成分具有抗癌、抗氧化等功能。因此，艾叶不仅可为蛋鸡提供营养物质，还能够增强机体抗病力和体质，进而提高产蛋率，促进饲料养分的转化吸收[21-22]。3.2艾叶粉对蛋品质的影响本试验结果发现，京红1号蛋鸡采食1.5%和2.0%的艾叶粉后，蛋壳强度显著增强；采食1.0%、1.5%、2.0%的艾叶粉后，蛋黄颜色显著提高；采食1.5%和2.0%的艾叶粉后，哈夫单位显著提高，表明适量的艾叶粉可以改善蛋壳质量及蛋白质量。王苗苗[23]研究了艾叶和香附的混合物对蛋鸡产蛋性能及蛋品质的影响，发现艾叶和香附的混合物可以显著提高蛋白高度、蛋壳强度及蛋形指数，表明艾叶和香附的混合物改善了蛋白质量及蛋壳质量。张旭等[20]研究发现，不同种类的艾草粉替代日粮中3%的麦麸，可以显著提高蛋黄颜色，且分别比对照组显著提高了30.03%、16.82%。徐红蕊等[13]、张燕红[15]在蛋鸡和鹌鹑的试验研究中也得出适量艾叶粉可以显著改善蛋黄颜色。艾叶粉改善蛋黄颜色主要是由于艾叶中含有叶黄素，动物采食后叶黄素会在畜产品中沉积，进而提高了蛋黄的颜色[24-25]。本研究中，京红1号蛋鸡采食1.5%和2.0%的艾叶粉后，蛋黄胆固醇含量显著降低；而艾叶粉对蛋中的粗蛋白、粗脂肪、钙、磷等营养物质未产生显著影响。结果表明，蛋鸡饲喂艾叶粉后不会对蛋中的营养物质产生负面影响，还能够有效降低胆固醇含量。徐红蕊等[13]研究发现，使用3%的艾叶可以使鸡蛋中的胆固醇含量显著降低5.53%。黄酮类物质可以显著降低胆固醇水平，而艾叶中富含黄酮，因此蛋鸡采食艾叶粉后可以有效降低蛋中的胆固醇水平，提高鸡蛋品质[26]。3.3艾叶粉对蛋鸡血清生殖激素的影响蛋鸡产蛋率与卵泡发育息息相关。家禽卵泡的发育主要依靠类固醇性腺激素的分泌刺激，受下丘脑-垂体-性腺轴的调节。促卵泡激素和促黄体素是调节卵泡发育的主要激素，刺激卵巢分泌E2，进而引起排卵[27]。本试验中，京红1号蛋鸡采食1.5%和2.0%的艾叶粉可显著提高E2水平；采食1.0%、1.5%和2.0%的艾叶粉可显著提高FSH水平，表明适量艾叶粉可调节蛋鸡生殖激素分泌而提高产蛋率。董晓龙等[28]使用含有艾叶成分的中草药饲喂蛋鸡，发现蛋鸡血清E2、LH、FSH水平明显提高，产蛋率明显提高。本研究中，采食1.5%和2.0%的艾叶粉可显著提高蛋鸡血清P水平。E2与P刺激家禽下丘脑和垂体分泌LH进而引起排卵。艾叶中含有的黄酮类物质具有调节神经内分泌的作用，也具有调节激素分泌和代谢的功能，进而对蛋鸡卵巢分泌雌激素、黄体酮等生殖激素起到促进作用[29]。甲状腺素可以促进动物机体器官、组织的分化与发育，是家禽生长中的必需的激素。甲状腺激素调节蛋鸡的繁殖系统而提高产蛋率[30]。本试验中，采食1.0%、1.5%和2.0%的艾叶粉可显著提高蛋鸡T4水平，表明艾叶粉可以促进蛋鸡卵巢和输卵管的细胞分化与发育的能力，进而提高蛋鸡的繁殖性能。3.4艾叶粉对蛋鸡血清抗氧化指标的影响CAT可分解体内的过氧化氢分解，使机体免受过氧化氢的损害，对机体起到防御作用；SOD也是机体内比较重要的抗氧化酶之一，可以有效清除体内产生的过量的自由基，增强机体的抗氧化能力[31]；MDA是脂质过氧化的终产物，其水平代表机体的氧化程度[32]。本试验中，蛋鸡采食1.0%、1.5%和2.0%的艾叶粉可显著提高CAT和SOD活性，采食1.5%和2.0%的艾叶粉可以显著降低MDA含量，表明艾叶粉有效改善了产蛋后期蛋鸡机体的抗氧化能力。徐红蕊等[13]研究表明，2%的艾叶粉可提高热应激状态下蛋鸡血清GSH-Px和SOD活性，有效抑制MDA的生成。张旭等[20]研究发现，日粮中添加3%鹅艾草粉可显著提高蛋鸡血清CAT和GSH-Px活性。原因是艾叶中的多糖、多酚、黄酮等活性物质具有较强的抗氧化功能，可增强机体的抗氧化功能[33-34]。4结论本研究结果表明，京红1号蛋鸡饲喂适量的艾叶粉可显著改善产蛋性能、蛋品质，并显著调节机体的生殖激素水平，艾叶粉的适宜添加水平为1.5%~2.0%。