由于抗生素的残留和耐药性问题,我国从2020年开始在饲料生产中严格禁止添加抗生素[1],需要研制新型抗菌、杀菌的饲料添加剂。植物精油是一种绿色饲料添加剂,可以提高畜禽生长性能及畜产品质量[2]。与传统天然植物精油相比,香芹酚作为植物精油的主要成分,具有含量明确、成分稳定、便于研究和大规模应用等优势[3]。饲粮中添加香芹酚具有促进动物生长发育[4]、增强机体抗氧化[5]及免疫能力的作用[6]。香芹酚作为饲料添加剂单独使用的报道很少,且多在家禽[7-8]和猪[9-10]生产中使用,在水貂生产中鲜有报道。本试验探究饲粮中添加不同水平香芹酚对育成期母貂生长性能、养分表观消化率、血清抗氧化及免疫能力的影响,以确定香芹酚在育成期母水貂生产中的应用效果及适宜添加水平。1材料与方法1.1试验材料香芹酚购自牧德生物科技有限公司,纯度99.0%。1.2试验设计试验选用70日龄体重接近、生长发育良好的灰色母貂60只,随机分为6组,每组10个重复,每个重复1只母貂,单笼饲养。对照组母貂饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中依次添加75、150、225、300、375 mg/kg香芹酚。预试期1 w,正式试验期8 w。基础饲粮参考NRC(1982)[11]、徐燕红等[12]、尹红吉等[13]及我国母貂生产实际配制,基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.012.T001表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100海杂鱼30代谢能/(MJ/kg)15.94毛蛋24粗脂肪/%20.21鸡架10粗蛋白/%32.39鸡头15钙/%1.20膨化玉米7总磷/%1.30鸡肝5麦麸3猪血球蛋白粉2豆粕3预混料1注:1.预混料为每千克饲粮提供:VA 10 000 IU、VC 120 mg、VE 50 mg、VK3 1 mg、VB1 20 mg、VB2 10 mg、VB6 10 mg、VB12 0.1 mg、烟酸40 mg、泛酸13 mg、叶酸1 mg、生物素0.5 mg、Fe 60 mg、Zn 50 mg、Mn 30 mg、Cu 5 mg、I 0.5 mg、Se 0.4 mg。2.营养水平中代谢能为计算值,其余均为实测值。1.3饲养管理试验于2022年7月11日—2022年9月11日在山东海阳水貂养殖示范基地进行。试验前对母貂棚舍和貂笼进行清洗、消毒,并对母貂注射犬瘟热与出血性肺炎疫苗。母貂全期自由饮水和采食,每天5:30与15:30饲喂,11:00回收饲料,防止饲料变质对母貂造成不良影响。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能在试验过程中每日记录给料量及剩料量,并统计分析母貂的平均日采食量。预试期结束后空腹称重,计为试验母貂初重,每4周清晨空腹称重一次,并统计母貂的平均日增重。以平均日采食量、平均日增重为指标,计算料重比。试验结束时各组分别选取6只体重适中的母貂处死,测量鼻尖与尾根间长度作为体长,屠宰后放入楦板中测量鼻尖与尾根间距离作为鲜皮长。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=(初始料量-剩余料量)/(试验天数×母貂数量)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2养分表观消化率每组分别选取生长状况良好、采食正常的灰色母貂4只,于2022年7月23日至2022年7月25日采用全收粪法进行消化试验。每天收集的粪便按照鲜重的10%加入10%硫酸固氮,将所有粪便混合均匀,65 ℃烘箱烘干至恒重,粉碎过40目筛。参照文献[14]测定干物质、粗脂肪、粗蛋白、粗灰分、钙、磷含量。养分表观消化率=(该养分摄入量-粪中该养分含量)/该养分摄入量×100%(4)1.4.3血清抗氧化及免疫指标饲养试验结束后,各组选择6只体重接近的母貂进行屠宰,合计36只。母貂心脏采血10 mL,3 000 r/min低温离心15 min,取血清并分装在1.5 mL离心管内,-80 ℃保存,以检测血清的抗氧化和免疫指标。测定血清中总超氧化物歧化酶、丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶、总抗氧化能力以及血清IgA、IgM和IgG等指标[15]。1.5数据统计与分析采用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1不同水平香芹酚对育成期母貂生长性能的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,饲粮添加225 mg/kg香芹酚能够显著提高育成期母貂的末重与体长(P0.05);饲粮添加225、300 mg/kg香芹酚能够极显著提高母貂的平均日增重(P0.01),极显著降低料重比(P0.01)。各组皮长差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.012.T002表2不同水平香芹酚对育成期母貂生长性能的影响项目初重/(g/只)末重/(g/只)平均日采食量/[g/(只·d)]平均日增重/[g/(只·d)]料重比体长/cm皮长/cmP值0.9730.0460.7240.0010.0020.0110.199对照组947.02±30.121 372.90±40.56b211.27±7.197.61±0.44C28.49±1.65A39.48±0.47b51.40±0.5875 mg/kg组947.01±30.121 400.70±68.92ab215.70±7.697.97±0.51BC27.78±1.32A39.52±0.72b52.97±1.39150 mg/kg组982.72±30.511 465.80±47.97ab218.73±6.608.63±0.61ABC26.68±2.26AB41.03±0.51ab53.32±1.72225 mg/kg组971.82±43.261 551.30±51.08a219.67±7.1810.35±0.32A21.35±0.75C42.47±0.81a55.60±0.47300 mg/kg组981.71±30.511 530.20±49.07ab221.13±6.239.79±0.63AB23.11±0.98BC40.27±0.52b53.25±0.93375 mg/kg组962.79±28.221 375.70±38.70b208.93±3.877.37±0.34C28.80±1.24A40.20±0.42b53.13±0.78注:同列数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P0.05),不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01);下表同。2.2不同水平香芹酚对育成期母貂养分表观消化率的影响(见表3)由表3可知,与对照组相比,饲粮中添加75、150、225、300、375 mg/kg香芹酚能够显著提高育成期母貂的粗脂肪表观消化率(P0.05),饲粮添加225、300 mg/kg香芹酚能够显著提高育成期母貂的粗蛋白表观消化率(P0.05),饲粮中添加75、150、225 mg/kg香芹酚可显著提高育成期母貂的钙表观消化率(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.012.T003表3不同水平香芹酚对育成期母貂养分表观消化率的影响项目干物质粗脂肪粗蛋白粗灰分钙磷P值0.1600.0470.0360.0950.0380.189对照组65.59±2.3588.24±0.80b76.89±0.77b40.68±0.9736.92±0.47c35.21±0.8675 mg/kg组69.58±2.3591.52±0.45a79.97±1.14ab41.78±2.0543.09±1.50ab36.60±0.95150 mg/kg组67.96±1.0591.24±0.92a80.71±2.69ab44.29±0.8945.17±1.92a36.61±0.52225 mg/kg组65.81±1.5792.13±0.67a82.69±1.30a44.58±0.8943.30±1.39ab38.12±0.68300 mg/kg组72.75±0.7791.95±0.78a84.58±0.74a45.38±0.8941.91±2.71abc37.62±1.08375 mg/kg组68.90±2.8591.54±1.28a80.89±1.37ab42.48±1.2138.96±1.79bc36.46±0.75%2.3不同水平香芹酚对育成期母貂血清抗氧化指标的影响(见表4)由表4可知,与对照组相比,饲粮中添加225 mg/kg香芹酚能够显著降低育成期母貂血清中丙二醛的含量(P0.05),饲粮中添加300、375 mg/kg香芹酚能够显著提高血清总抗氧化能力(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.012.T004表4不同水平香芹酚对育成期母貂血清抗氧化指标的影响项目丙二醛/(μmol/L)总抗氧化能力/(mmol/L)总超氧化物歧化酶/(U/mL)谷胱甘肽过氧化物酶/(U/mL)P值0.0450.0160.4520.608对照组12.15±0.23a0.84±0.01c169.92±4.591 035.02±50.7475 mg/kg组11.64±0.38a0.86±0.02bc174.78±6.171 090.64±39.54150 mg/kg组10.67±1.12ab0.87±0.01abc180.56±5.191 129.21±83.91225 mg/kg组9.33±0.44b0.88±0.02abc191.98±13.761 065.84±53.14300 mg/kg组10.96±0.57ab0.91±0.01a181.42±8.171 102.71±52.73375 mg/kg组11.20±0.43ab0.89±0.01ab174.48±9.92992.58±59.522.4不同水平香芹酚对育成期母貂血清免疫指标的影响(见表5)由表5可知,与对照组相比,饲粮中添加75、150、225、300 mg/kg香芹酚均能够显著提高血清中IgA的含量(P0.05),饲粮中添加300、375 mg/kg香芹酚能够显著提高血清中IgG的含量(P0.05),饲粮中添加75、150、225、300、375 mg/kg香芹酚均能够显著提高血清中IgM的含量(P0.05)10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.012.T005表5不同水平香芹酚对育成期母貂血清免疫指标的影响项目IgAIgGIgMP值0.0260.0150.026对照组0.33±0.01b0.84±0.01c2.16±0.04b75 mg/kg组0.35±0.01a0.86±0.02bc2.26±0.05a150 mg/kg组0.36±0.01a0.87±0.01bc2.32±0.03a225 mg/kg组0.36±0.01a0.88±0.02abc2.33±0.04a300 mg/kg组0.36±0.01a0.92±0.01a2.29±0.02a375 mg/kg组0.34±0.01ab0.89±0.01ab2.25±0.03ag/L3讨论3.1香芹酚对育成期母貂生长性能的影响夏季高温环境会加速水貂新鲜配合饲料变质腐败,引发水貂消化系统疾病,不仅增加了养殖成本,还会影响水貂肠道健康,对生长性能造成负面影响[16]。香芹酚具有较强的抑菌杀菌功能,常被用作食品添加剂以及防腐剂。本试验结果表明,水貂饲粮中添加香芹酚能够影响育成期母貂的生长性能,当饲粮中香芹酚的添加量为225 mg/kg时,提高了育成期母貂的末重及体长,提高平均日增重,降低料重比。李彬等[17]研究表明,在饲粮中添加30 mg/kg植物精油(主要为香芹酚和百里香酚)能够显著提高麻黄肉鸡的平均日采食量和末重,降低料重比。Wang等[9]研究表明,饲粮中添加50 mg/kg百里香酚和50 mg/kg香芹酚可以显著提高仔猪的平均日增重。Li等[18]研究表明,饲粮中添加150 mg/kg百里香酚和香芹酚的混合物可以显著提高肉鸡的平均日增重。本试验中,饲粮添加香芹酚可改善育成期母貂生长性能,主要是因为香芹酚可以刺激消化液的分泌,改善肠内消化酶活性,提高肠道消化吸收能力[19]。3.2香芹酚对育成期母貂养分表观消化率的影响与其他肉食性动物相比,水貂胃肠道比较简单,食糜在消化道内的时间较短,微生物也没有足够的时间作用于食糜,所以水貂的消化能力对其生长发育具有重要的影响。本试验表明,水貂饲粮中添加香芹酚影响了育成期母貂的养分表观消化率。其中,饲粮添加75、150、225、300、375 mg/kg香芹酚均能够提高育成期母貂的粗脂肪表观消化率,添加225、300 mg/kg香芹酚能够显著提高育成期母貂的粗蛋白表观消化率,添加175 mg/kg香芹酚能够显著提高育成期母貂的钙表观消化率。聂利芳[20]研究表明,AA肉鸡日粮中添加牛至油(香芹酚含量29.85%)提高了粗蛋白和粗脂肪养分表观消化率。杨在宾等[21]研究表明,在仔猪饲料中添加600 mg/kg复合植物精油能够显著提高干物质、粗蛋白、粗脂肪表观消化率,与本试验结果相同。本试验中,母貂饲粮中添加香芹酚能够提高肠道消化酶的活性,进而提高营养物质的吸收和利用。3.3香芹酚对育成期母貂抗氧化性能的影响动物在正常生命活动中始终伴随自由基的持续生成和消除,动物自身的抗氧化能力通常很难应对氧化自由基的生成速度,主要表现为免疫力低、炎症反应过强、发病率提高[22]。Prieto等[23]通过体外试验发现,牛至精油及其主要成分香芹酚具有明显的抗氧化功能,可防止活性氮被进一步氧化生成有毒分子。Hashemipour等[24]研究表明,饲粮中添加200 mg/kg复合植物精油(香芹酚+百里香酚)显著降低了42日龄肉鸡腿肌中丙二醛含量。马伟斌等[25]研究表明,饲粮中添加200、300 mg/kg植物精油(主要为香芹酚、百里香酚和肉桂醛)显著提高了肉仔鸡血清总抗氧化能力。本试验发现,水貂饲粮中添加香芹酚能够影响育成期母貂血清抗氧化能力,饲粮中添加225 mg/kg香芹酚显著降低了血清丙二醛含量,添加300 mg/kg香芹酚显著提高了血清总抗氧化能力。香芹酚能够有效清除动物机体中过剩自由基,降低脂质氧化产物丙二醛产生,从而增强动物机体抗氧化功能[26]。在育成期母貂饲粮中添加香芹酚作为内源氧化剂进行有效补充,有助于降低体内氧自由基水平,缓解机体组织因氧化应激而受到的伤害,进而增强机体的抗氧化能力。3.4香芹酚对育成期母貂免疫性能的影响免疫球蛋白是评价机体免疫功能的重要指标。免疫球蛋白A可进入呼吸、生殖及其他脏器黏膜表面,并中和感染因子;IgM是机体内分子量最大的免疫球蛋白;IgG在动物机体免疫应答中具有激活补体和中和毒素的功能[27]。本试验表明,饲粮中添加香芹酚可提高育成期母貂血清IgA、IgM和IgG的含量。毛婷[28]研究表明,饲粮中添加400 mg/kg植物精油(香芹酚含量大于10%、肉桂醛含量大于20%)显著提高了仔猪血清IgM和IgG含量。胡湘云等[29]研究表明,饲粮中添加200~300 mg/kg复合植物精油显著提高了肉鸡血清IgA、IgM及IgG的含量。刘娇等[30]试验表明,饲粮中添加200 mg/kg植物精油(香芹酚含量81.89%)显著提高了大肠杆菌攻毒后肉鸭血清IgM和IgG的含量。香芹酚能够提高白细胞吞噬率、淋巴细胞转化率,增加免疫球蛋白的释放,进而提高畜禽机体的免疫能力[31]。4结论本研究结果表明,饲粮中添加香芹酚可以改善育成期母貂的生长性能,提高养分表观消化率,增强抗氧化和免疫能力。综合考虑,育成期母貂饲粮中香芹酚的适宜添加水平为225 mg/kg。
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