葡萄籽提取物（GSE）是一种具有多种生物活性成分的天然植物提取物，主要的活性成分之一是超酚类物质。GSE中的超酚类物质主要包括原花青素、没食子酸、儿茶素、槲皮素、单宁等[1-2]。超酚类物质在动物机体中具有抗氧化、抗菌、抗炎症、提高免疫力等多种生物活性功能[3-6]。GSE作为饲料添加剂可改善断奶仔猪生长性能，提高肠道健康，调节免疫功能[7-8]。GSE对欧洲鳗鲡生长和提高机体抗氧化能力也具有一定作用[9]。李欣泽等[10]和侯福银等[11]研究表明，在日粮中添加适量的GSE对肉鸡生长性能、脂质代谢、肉品质和抗氧化功能等均具有一定作用。目前，GSE在蛋鸡中的相关研究较少，尤其是产蛋高峰后期蛋鸡。本试验旨在日粮中添加不同剂量的GSE，探究GSE对产蛋高峰后期蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标的影响，为GSE在蛋鸡养殖领域中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料选取53周龄产蛋高峰后期京粉2号蛋鸡，试验于广西南宁上林县漓柳农牧有限公司养殖场内进行。GSE由味氏（广东）生物科技股份有限公司提供，为红棕色粉末，原花青素含量≥15%。1.2试验设计选取产蛋性能相近蛋鸡540羽，随机分成A组、B组、C组，每组6个重复，每个重复30羽蛋鸡。A组蛋鸡饲喂基础日粮，B组和C组分别在基础日粮中添加200、300 mg/kg的GSE。预试期7 d，正式试验期42 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米54.55代谢能/(MJ/kg)12.28豆粕23.00粗蛋白/%16.25小麦10.00蛋氨酸/%0.35豆油1.00钙/%4.20石粉7.00总磷/%0.60磷酸氢钙1.50碳酸氢钠0.10赖氨酸0.15蛋氨酸0.20食盐0.40硫酸钠0.10预混料2.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 8 000 IU、VD3 3 000 IU、VE 300 mg、VK 10 mg、VB1 12 mg、VB2 4.0 mg、VB6 2.0 mg、VB12 0.02 mg、烟酸30 mg、叶酸0.6 mg、泛酸8 mg、Cu 10 mg、Fe 80 mg、Mn 45 mg、Zn 30 mg、Se 0.2 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验蛋鸡饲养于四层阶梯式笼，自由采食，固定时间投放日粮（7：00和14：00）。试验蛋鸡所在的鸡舍内采用全自动环控系统控制温度、湿度和通风。试验期间按照养殖场的常规管理程序进行饲养管理。每日观察蛋鸡的健康状况，并于每日第1次饲喂前将剩余的饲料清理，并称重记录。1.4测定指标及方法1.4.1生产性能试验期每日统计产蛋数、总蛋重、不合格蛋数（破壳蛋、畸形蛋、软壳蛋和脏蛋等）、死淘鸡数和采食量。平均日采食量=总采食量/(试验鸡数×试验天数)(1)产蛋率=总产蛋数/(试验鸡只数×试验天数)×100%(2)料蛋比=总采食量/总蛋重(3)平均蛋重=总蛋重/总产蛋数(4)蛋合格率=合格蛋数/总产蛋数×100%(5)1.4.2鸡蛋品质试验第42 d，每个重复随机抽取6枚鸡蛋，采用电子天平（杭州友恒称重设备有限公司，精度0.01 g）测定蛋重、蛋黄重；采用RH-DQ200型自动蛋壳强度测定仪（广州润湖仪器有限公司）测定蛋壳强度；采用7301A型螺旋测微仪（日本三丰公司）测定蛋壳厚度；采用游标卡尺（精密度0.01 mm）测量鸡蛋的纵径和横径，计算蛋形指数；采用一体化蛋品质测定系统（北京天翔飞域科技有限公司）进行蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋黄颜色、蛋黄重、蛋黄高度、蛋白高度和哈夫单位的测定。1.4.3血清生化和免疫指标正式试验期第42 d，每个重复随机选取1羽体况相近的蛋鸡，空腹翅下静脉采血5 mL，静置离心，分离血清样品分装于离心管内，采用全自动生化分析仪测定血清指标；采用江苏酶免实业有限公司试剂盒测定血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白A（IgA）的含量。操作按照说明书执行。1.4.4经济效益蛋鸡饲料的采购价格为3.50元/kg，GSE添加剂价格为85元/kg，鸡蛋11.0元/kg（市场价），计算各组试验蛋鸡经济效益指标。饲料成本=试验阶段总采食量×饲料价格+GSE添加剂使用量×GSE添加剂价格(6)鸡蛋销售额=试验阶段总蛋重×鸡蛋销售单价(7)利润=鸡蛋销售额-饲料成本(8)1.5数据统计与分析试验数据采用Excel软件进行整理，SPSS 26.0统计分析软件进行方差分析，LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1GSE对产蛋高峰后期蛋鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，与A组相比，C组平均蛋重显著提高（P0.05）；B组的蛋鸡蛋合格率显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.006.T002表2GSE对产蛋高峰后期蛋鸡生产性能的影响项目产蛋率/%料蛋比平均蛋重/(g/枚)蛋合格率/%平均日采食量/[g/(只·d)]P值0.9960.5610.0010.0120.097A组90.26±0.321.95±0.0659.66±0.37b93.54±3.08b104.78±3.51B组90.32±2.171.98±0.0659.97±0.68b95.94±2.10a107.40±3.84C组90.26±1.911.94±0.0660.44±0.49a94.44±1.90ab105.80±3.77注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表5与此同。2.2GSE对产蛋高峰后期蛋品质的影响（见表3）由表3可知，与A组相比，B组和C组蛋壳强度显著提高（P0.05），C组蛋白高度也显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.006.T003表3GSE对产蛋高峰后期蛋品质的影响项目A组B组C组P值蛋重/g61.45±3.1963.23±2.7364.31±2.810.263蛋形指数1.31±0.021.33±0.031.27±0.100.278蛋壳强度/N37.93±1.45b40.42±1.72a40.60±1.54a0.017蛋黄颜色12.50±1.0512.83±0.4112.67±0.820.775蛋黄高度/mm17.67±0.6818.03±0.6718.06±0.300.451蛋白高度/mm6.71±0.58b7.33±0.74ab7.78±0.79a0.029蛋黄重/g16.78±0.8617.89±1.8217.58±1.830.468蛋黄直径/mm42.56±0.5243.46±1.7343.04±1.810.585哈夫单位80.34±1.0280.61±0.9881.32±0.700.192蛋黄比率%42.56±0.5243.46±1.7343.04±1.810.585注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4与此同。2.3GSE对产蛋高峰后期蛋鸡血清生化、免疫指标的影响（见表4、表5）由表4、表5可知，与A组相比，B组蛋鸡血清总蛋白含量显著降低（P0.05），C组蛋鸡血清高密度脂蛋白、IgA含量显著增加（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.006.T004表4GSE对产蛋高峰后期蛋鸡血清生化指标的影响项目A组B组C组P值总蛋白/(g/L)61.45±1.22a57.10±3.35b61.98±1.71a0.028白蛋白/(g/L)19.13±0.5717.85±1.2619.28±0.620.089胆固醇/(mmol/L)6.24±0.246.09±0.245.81±0.530.286甘油三酯/(mmol/L)25.26±0.5425.03±0.3724.90±0.260.482谷丙转氨酶/(U/L)8.00±1.637.25±1.507.00±1.410.640谷草转氨酶/(U/L)7.25±2.066.75±1.506.25±1.710.735葡萄糖/(mmol/L)12.11±1.0912.48±0.6012.67±0.540.616碱性磷酸酶/(U/L)323.25±49.89348.00±34.45353.25±66.300.693高密度脂蛋白/(mmol/L)0.53±0.04b0.58±0.23ab0.62±0.05a0.029低密度脂蛋白/(mmol/L)0.63±0.040.62±0.070.57±0.070.48710.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.006.T005表5GSE对产蛋高峰后期蛋鸡血清免疫的影响项目IgGIgAIgMP值0.8670.0280.851A组0.63±0.250.43±0.15b7.10±2.48B组0.70±0.230.57±0.06ab7.73±1.56C组0.73±0.310.69±0.11a7.68±1.58g/L2.4GSE对产蛋高峰后期蛋鸡经济效益的影响（见表6）由表6可知，与A组相比，B组和C组的饲料成本分别增加了2.50%和0.97%，鸡蛋销售额增加了0.52%和1.31%，养殖利润为-3.08%和1.31%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.006.T006表6GSE对产蛋高峰后期蛋鸡经济效益的影响组别总采食量/(kg/组)饲料成本/(元/组)GSE用量/(kg/组)GSE使用成本/(元/组)总产蛋重/(kg/组)鸡蛋销售额/(元/组)利润/(元/组)A组792.1372 772.48000405.9274 465.1971 692.717B组811.9442 841.8040.0736.205408.0364 488.3961 640.567C组799.8482 799.4680.1099.265411.2344 523.5741 714.8413讨论3.1GSE对产蛋高峰后期蛋鸡生产性能的影响蛋鸡生产性能受内外部因素和外部因素影响，内部因素包括蛋鸡品种、日龄、健康程度等，外部因素包括饲料营养水平、环境等[12-14]。GSE作为一种天然的植物提取物，具有抗氧化、抗炎、抗菌和免疫调节、清除机体内游离自由基等作用[15]，对蛋鸡、肉鸡、育肥猪的生产性能均具有促进作用[16-18]。添加适量的GSE能够显著提高蛋鸡的生产性能。乔利敏[19]发现，蛋鸡日粮中添加0.02% GSE效果较好。胡如久等[20]发现，蛋鸡日粮中添加100 mg/kg GSE效果最佳。本研究表明，日粮中添加GSE能够提高平均蛋重和蛋合格率；与A组相比，两个处理组的平均日采食量分别提高了2.5%、1.0%。GSE中的营养成分可提供额外的营养补充，满足蛋鸡对营养素的需求，利于平均蛋重提高。同时，GSE可促进蛋鸡的食欲和消化吸收能力，GSE活性成分可改善饲料的适口性，提高蛋鸡对饲料的喜好度，进而增加平均日采食量，对蛋鸡的生产性能方面具有积极作用。3.2GSE对产蛋高峰后期蛋品质的影响影响蛋品质的因素可分为遗传因素（蛋鸡品种）和非遗传因素[21-22]（饲养条件、日龄、疾病等）。本研究结果显示，与A组相比，两个处理组的蛋壳强度均得到显著提高。原因可能是GSE中的一些活性成分可促进鸡体内胶原蛋白的合成，胶原蛋白是构成蛋壳的重要组成成分之一，增加胶原蛋白的合成有助于提高蛋壳的强度和耐压性，这与付兴周等[23]研究结果一致。蛋黄的颜色主要由蛋黄中类胡萝卜素的沉积量决定，在适当范围内，蛋黄颜色深更容易受到消费者的青睐[24]。蛋白高度和哈夫单位是衡量鸡蛋蛋白质量和新鲜度的重要指标。蛋白高度越高表明鸡蛋越新鲜；哈夫单位越大则表明蛋清黏稠度越好，蛋白质含量较丰富、蛋白质的凝聚性和稳定性也较好。研究表明，产蛋后期蛋鸡受日龄、环境应激、输卵管炎症等因素影响，哈夫单位随之降低[25-27]。张玉等[16]研究发现，蛋鸡日粮中添加50 mg/kg原花青素能够提升鸡蛋的蛋白高度和哈夫单位。原因可能是GSE具有良好的清除自由基和抗炎能力，能够减轻氧化应激对输卵管的损伤和炎症反应、减轻蛋清中的氧化反应，维持蛋白质的完整性和稳定性，对蛋鸡输卵管膨大部位分泌的蛋白具有积极的保护作用，从而提高蛋白高度和哈夫单位。本试验结果显示，在蛋鸡日粮中添加GSE，蛋白高度和哈夫单位均有升高趋势，与上述研究结果一致。3.3GSE对产蛋高峰后期蛋鸡血清生化指标的影响血清生理生化指标常作为评估畜禽机体生理、病理状态和日粮中营养物质吸收代谢能力的依据之一[28]。血清中总蛋白和白蛋白含量是评估机体运输营养物质和肝脏蛋白质合成能力的重要指标[29]。熊兆龙[30]研究表明，日粮中添加100 mg/kg GSE对AA肉鸡血清的总蛋白和白蛋白均有提升趋势。本试验中，在蛋鸡日粮中添加GSE能够显著提升血清中的总蛋白含量，白蛋白含量也有所提升，本研究与上述研究结果一致。原因可能是GSE含有的多酚类化合物可以减少自由基的产生，保护蛋白质减少氧化损伤，从而提高蛋白质的稳定性，进而增加总蛋白和白蛋白含量。动物机体的血脂水平和脂质代谢能力对动物的健康和生产性能具有重要影响作用[31]。本试验中，在日粮中添加GSE后，血清中甘油三酯、胆固醇和低密度脂蛋白含量均呈下降的趋势，同时高密度脂蛋白的含量显著提升。GSE中的活性成分可能通过调节脂质代谢相关酶的活性，促进脂质代谢的平衡。促进甘油三酯的分解和代谢，减少胆固醇和低密度脂蛋白的合成和吸收，同时促进高密度脂蛋白的合成和转运，从而提高高密度脂蛋白含量。谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性与肝脏炎症、肝细胞变性和坏死等症状密切相关，是反映肝脏情况的重要指标[32]。本试验中，日粮中添加GSE后，蛋鸡血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性下降，可能是因为GSE具有一定的抗炎作用，能够抑制炎症反应和炎症介质的释放。炎症反应在肝脏损伤过程中起到重要作用，降低炎症程度可以减少谷丙转氨酶和谷草转氨酶的释放，使得机体更加健康。3.4GSE对产蛋高峰后期蛋鸡血清免疫的影响免疫球蛋白在免疫应答中起到调节作用，是体液免疫中不可或缺的抗体之一，参与机体的非特异性免疫[33]。IgG主要存在于血液和组织液中，具有中和病原体、激活补体系统等作用；IgA主要存在于黏膜表面和分泌液中，提供第一道保护防线，阻止病原体侵入机体；IgM主要存在于体液中，在免疫系统中起到早期免疫应答的作用[34]。有研究表明，日粮中添加150 mg/kg葡萄籽原花青素可以提高青脚麻肉鸡机体免疫功能[35]。本试验中，日粮中添加GSE后，蛋鸡血清免疫球蛋白含量均有升高趋势，与上述研究结果一致。原因可能是GSE中的活性成分具有免疫调节和抗炎作用，能够调节免疫系统的功能和活性、抑制炎症反应。通过减轻炎症反应，促进免疫球蛋白的合成和释放，导致在血清中的含量提高。3.5GSE对产蛋高峰后期蛋鸡养殖经济效益的影响经济效益指标可用于评价GSE在畜禽养殖中应用的可行性。田跃等[36]在肉鸡日粮中添加100、200 mg/kg葡萄籽原花青素，与对照组相比，经济效益分别提高5.31%和11.18%。本研究结果显示，日粮添加200、300 mg/kg GSE能够提高平均蛋重和蛋合格率，使试验期间鸡蛋的销售额显著增加了3.33%和3.20%，养殖利润提高了5.63%、7.04%。综合利润计算结果显示，产蛋高峰后期蛋鸡日粮中GSE的添加量为300 mg/kg时，能够带来较好的养殖经济效益。4结论本试验条件下，日粮中添加GSE能够提高蛋鸡的生产性能和蛋品质，改善产蛋高峰后期蛋鸡机体免疫功能，增加养殖经济效益，且添加300 mg/kg GSE效果较明显。