紫苏籽提取物中富含多不饱和脂肪酸、酚酸、黄酮、维生素E、维生素B1等,具有抗炎、抑菌及抗氧化等多种功能[1-2]。农业农村部饲料评审委员会已将紫苏籽提取物认定为“安全、有效、不污染环境的新型饲料添加剂”[3]。紫苏籽提取物可以有效提高肉鸡、蛋鸡、猪、牛的生产性能[4]。目前,紫苏籽提取物在家兔养殖中的应用研究较少。因此,本研究探讨紫苏籽提取物对肥育期伊拉肉兔生长性能、免疫性能、血清生化指标、器官发育的影响,为紫苏籽提取物在肉兔养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验设计及饲养管理选取35日龄伊拉肉兔96只(由临沂康大家园食品有限公司提供),随机分成4组,每组12个重复,每个重复2只。对照组肉兔饲喂基础饲粮(参照DB37/T 1837—2011配制),基础饲粮组成及营养水平见表1。试验组肉兔饲喂在基础饲粮中分别添加100、200、300 mg/kg紫苏籽提取物(陕西海益斯生物科技有限公司,纯度92%)的试验饲粮。预试期7 d,正式试验期35 d。肉兔自由采食,自由饮水,按照正常程序接种疫苗。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.011.T001表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米20.00消化能/(MJ/kg)10.45麸皮7.40粗蛋白/%16.02豆粕20.00粗纤维/%13.99花生秧35.00钙/%1.02稻壳粉10.60总磷/%0.58大豆油3.00预混料4.00注:1.预混料为每千克饲粮提供:VA 8 000 IU、VD3 1 000 IU、VE 50 mg、Lys 1.5 g、Met 1.5 g、Cu 50 mg、Fe 100 mg、Mn 30 mg、Zn 90 mg、Mg 150 mg、I 0.1 mg、Se 0.1 mg。2.营养水平中消化能为计算值,其余均为实测值。1.2测定指标及方法1.2.1生长性能在试验开始、结束时分别称取各重复肉兔的体重,每周测定各重复兔子的采食量,参照DB51/T 159.9—2014测定平均日采食量、平均日增重、料重比、腹泻率,统计死亡率。1.2.2血清生化、免疫、抗氧化指标试验结束时,每组选6只肉兔,禁食12 h,自由饮水,清醒状态下采血。采集5 mL血液样品,于普通采血管中保存,室温放置30 min,3 000 r/min离心10 min,取上清液于干净的EP管内。使用全自动生化分析仪(博科BK-280)测定肉兔血清生化指标,使用酶联免疫试剂盒(江苏酶免实业有限公司)测定血清免疫指标、抗氧化指标。1.2.3器官指数试验结束时,每组选公、母各半的6只肉兔屠宰,并采集心、肺、肾、肝、胸腺、脾等脏器,吸去残留的血液,除去脂肪和被膜,测定器官指数。器官指数(g/kg)=器官重量/宰前活体重(1)1.3数据统计与分析采用SPSS 21.0软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较,死亡率采用卡方检验。除死亡率外,其余指标数据结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1紫苏籽提取物对肉兔生长性能的影响(见表2)由表2可知,试验Ⅲ组肉兔的末重显著高于其余组(P0.05);试验Ⅲ组肉兔的平均日增重显著高于对照组(P0.05);试验Ⅱ组、Ⅲ组肉兔的平均日采食量显著低于对照组(P0.05),试验Ⅰ组肉兔的平均日采食量显著高于试验Ⅱ组(P0.05);试验Ⅱ组、Ⅲ组肉兔的料重比显著低于对照组(P0.05)。对照组肉兔的死亡率最高。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.011.T002表2紫苏籽提取物对肉兔生长性能的影响组别初重/(kg/只)末重/(kg/只)平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[g/(只·d)]料重比死亡率/%对照组0.904±0.1152.251±0.103b32.59±3.40b109.68±5.09a3.31±0.11a10试验Ⅰ组0.814±0.0832.217±0.099b33.41±2.65ab105.76±5.41ab3.17±0.21ab0试验Ⅱ组0.831±0.0912.199±0.129b33.16±1.21ab97.96±5.77c3.12±0.22b0试验Ⅲ组0.837±0.1092.357±0.096a35.66±2.95a104.35±5.88bc3.02±0.17b0注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表4~表6与此同。2.2紫苏籽提取物对肉兔血清生化指标的影响(见表3)由表3可知,试验Ⅰ组、Ⅱ组肉兔血清中胆固醇含量显著低于对照组(P0.05),对照组肉兔血清中甘油三酯(TG)含量显著高于试验Ⅰ组、Ⅱ组(P0.05),试验Ⅰ组、Ⅱ组肉兔血清中血糖(GLU)含量显著低于对照组(P0.05)。试验组肉兔血清中谷丙转氨酶(ALT)活性显著低于对照组(P0.05),试验Ⅰ组、Ⅲ组肉兔血清ALT活性显著高于试验Ⅱ组(P0.05),试验组肉兔血清谷草转氨酶(AST)活性显著低于对照组(P0.05),试验Ⅰ组、Ⅲ组的肉兔血清AST活性显著高于试验Ⅱ组(P0.05),试验Ⅱ组肉兔血清中碱性磷酸酶(ALP)活性显著高于试验Ⅰ组(P0.05),试验Ⅱ组血清中尿素氮(BUN)含量显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.011.T003表3紫苏籽提取物对肉兔血清生化指标的影响项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组白蛋白/(g/L)49.57±9.1459.48±6.2359.65±5.2153.67±12.47球蛋白/(g/L)31.21±7.3537.17±8.4735.75±5.5630.20±10.69白球比(A/G)1.60±0.111.64±0.241.68±0.141.84±0.26总蛋白/(g/L)80.78±16.3196.64±14.3995.39±10.5883.87±22.95胆固醇/(mmol/L)4.20±0.29a3.05±0.85b2.58±0.99b3.65±0.85ab甘油三酯/(mmol/L)3.60±0.38a2.66±0.69bc1.90±0.50c2.85±0.91ab血糖/(mmol/L)10.74±1.13a9.54±0.57b9.34±0.50b10.16±0.84ab谷丙转氨酶/(U/L)112.24±5.17a92.51±4.76b83.29±5.61c95.78±2.95b谷草转氨酶/(U/L)126.65±3.94a111.32±4.04b101.00±7.29c116.39±5.47b碱性磷酸酶/(U/L)238.82±36.44ab172.70±41.58b267.07±68.25a250.66±80.90ab尿素氮/(mmol/L)14.79±6.82a13.08±7.44ab5.89±3.86b8.57±0.67ab注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。2.3紫苏籽提取物对肉兔血清免疫性能的影响(见表4)由表4可知,试验Ⅱ组、对照组的肉兔血清IgG含量显著高于试验Ⅰ组、Ⅲ组(P0.05);试验Ⅱ组的肉兔血清IgM含量显著高于其余各组(P0.05),试验Ⅲ组肉兔血清中IgM含量显著低于对照组(P0.05);试验Ⅱ组肉兔血清IgA显著高于其余各组(P0.05),试验Ⅰ组肉兔血清IgA显著高于试验Ⅲ组、对照组(P0.05)。试验Ⅱ组肉兔血清白细胞介素-6(IL-6)含量显著低于其余各组(P0.05),试验Ⅲ组肉兔血清IL-6含量显著低于试验Ⅰ组、对照组(P0.05);试验Ⅱ组肉兔血清白细胞介素10(IL-10)含量显著高于其余各组(P0.05),试验Ⅲ组肉兔血清IL-10含量显著高于试验Ⅰ组、对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.011.T004表4紫苏籽提取物对肉兔血清免疫性能的影响组别IgG/(g/L)IgM/(mg/L)IgA/(mg/L)白细胞介素-6/(ng/L)白细胞介素-10/(ng/L)对照组2.37±0.01a53.98±0.86b171.28±1.16c72.36±1.46a43.94±0.42c试验Ⅰ组2.29±0.03b53.32±0.67bc175.80±0.89b71.30±0.90a44.94±1.27c试验Ⅱ组2.38±0.03a56.88±0.57a183.49±2.83a61.47±1.15c62.15±0.88a试验Ⅲ组2.28±0.04b52.57±0.86c172.91±2.06c64.28±0.94b51.57±1.31b2.4紫苏籽提取物对肉兔血清抗氧化性能的影响(见表5)由表5可知,试验Ⅱ组肉兔血清总抗氧化能力(T-AOC)显著高于其余各组(P0.05),试验Ⅲ组肉兔血清T-AOC显著高于试验Ⅰ组、对照组(P0.05);试验Ⅱ组肉兔血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于其他各组(P0.05),试验Ⅰ组肉兔血清SOD活性显著高于对照组(P0.05);试验Ⅱ组、Ⅲ组肉兔血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于对照组、试验Ⅰ组(P0.05);试验Ⅱ组、Ⅲ组肉兔血清丙二醛(MDA)含量显著低于试验Ⅰ组、对照组(P0.05),试验Ⅰ组肉兔血清MDA含量显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.011.T005表5紫苏籽提取物对肉兔血清抗氧化性能的影响组别总抗氧化能力/(U/mL)超氧化物歧化酶/(U/mL)谷胱甘肽过氧化物酶/(U/mL)丙二醛/(nmol/L)对照组21.10±0.55c20.29±0.37c341.44±7.45b46.36±0.34b试验Ⅰ组21.81±0.66c20.79±0.33b333.08±6.64b47.68±0.77a试验Ⅱ组26.46±0.82a21.74±0.35a362.29±5.61a45.42±0.60c试验Ⅲ组23.11±0.24b20.72±0.30bc355.69±5.46a45.56±0.44c2.5紫苏籽提取物对肉兔器官指数的影响(见表6)由表6可知,试验Ⅱ组肉兔心脏指数显著高于其余各组(P0.05);试验Ⅱ组肉兔肺脏指数、肾脏指数、肝脏指数、胸腺指数、脾脏指数高于其他各组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.011.T006表6紫苏籽提取物对肉兔器官指数的影响组别心脏指数肺脏指数肾脏指数肝脏指数胸腺指数脾脏指数对照组2.62±0.12b5.49±0.976.51±0.9230.05±8.561.95±0.490.98±0.43试验Ⅰ组2.62±0.32b6.11±1.775.61±0.7032.09±7.451.56±0.450.86±0.32试验Ⅱ组3.13±0.25a6.25±4.136.65±0.8939.44±9.562.08±0.701.07±0.48试验Ⅲ组2.73±0.27b5.13±0.576.11±1.2933.94±3.921.47±0.531.05±0.49g/kg3讨论3.1紫苏籽提取物对肉兔生长性能的影响紫苏籽提取物能够有效提高畜禽生产性能。王珍珊等[5]发现,在饲料中添加紫苏苜蓿复合提取物可以增加育肥猪试验末重、平均采食量、平均日增重,降低料重比。程慧林等[6]研究表明,添加0.6%、6.0%紫苏籽油组蛋雏鸡的日增重显著升高,料重比显著降低。李自鹏[7]发现,在饲粮中添加紫苏籽提取物可以提高断奶仔猪的生长性能,降低腹泻指数。潘雨琪[8]发现,在白羽肉鸡饲粮中添加植物提取物,能够显著提高白羽肉鸡对大肠杆菌的抵抗力,降低发病率及死亡率。陈建[9]研究发现,与对照组相比,在仔猪饲粮中添加复方中药添加剂极显著降低仔猪的腹泻率。本研究结果显示,在肥育期伊拉肉兔饲粮中添加紫苏籽提取物能够提高肉兔末重、平均日增重,降低平均日采食量、料重比。3.2紫苏籽提取物对肉兔血清生化指标的影响血清中白蛋白、球蛋白、白球比、总蛋白含量能够反映动物肝脏合成贮备蛋白质的功能,与机体的免疫功能密切相关[10]。陶勇等[11]研究发现,复合植物提取物能够显著提高苏姜猪血清总蛋白、白蛋白含量。本研究结果表明,紫苏籽能够促进肉兔血清中蛋白质合成,改善肉兔的代谢水平、生长性能、肝脏功能。血清总胆固醇及甘油三酯的含量可以反映机体对脂肪的利用情况和机体健康水平。血糖恒定是维持机体组织器官正常功能的基础。谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性是反映肝脏功能的重要指标。时艺霖等[12]研究发现,在蛋鸡产蛋高峰后期添加紫苏籽提取物,能够显著降低蛋鸡血清胆固醇含量。刘胜敏等[13]研究发现,在断奶仔猪饲粮中添加复合植物提取物可以显著降低仔猪血清胆固醇含量。周业飞等[14]研究发现,在饲粮中添加复合植物提取物能够显著降低蛋鸡血清总胆固醇、甘油三酯含量。王梦华等[15]研究发现,由桑叶黄酮、栗木单宁和桑叶多糖组成的复合植物提取物可降低大口黑鲈的血糖含量。本试验中,添加紫苏籽提取物能够降低肉兔血清中甘油三酯、血糖、谷丙转氨酶及谷草转氨酶水平,这与张文辉等[16]的研究结果一致。血清碱性磷酸酶活性能够反映肾小管重吸收能力。张彦利等[17]在饲粮中添加复合植物提取物可提高仔猪血清中碱性磷酸酶活性。血清尿素氮含量可以反映机体氨基酸平衡、蛋白质代谢状态。氨基酸平衡时,蛋白质利用率提高,血清尿素氮含量下降[18]。李自鹏[7]研究表明,紫苏籽提取物能够显著降低仔猪血清中尿素氮含量。本研究结果进一步证实了以上结论。3.3紫苏籽提取物对肉兔免疫性能的影响血清中免疫球蛋白含量能够衡量动物机体的免疫水平,较强的免疫能力可保证动物健康水平。B淋巴细胞受到抗原刺激后会产生IgG、IgM、IgA等免疫球蛋白。IgG是初级免疫应答中最持久的抗体,在机体的抗感染中起着主力军的作用,也是唯一能够通过胎盘的免疫球蛋白,在自然被动免疫中起重要作用;IgM在机体发育过程中分泌最早,也是初次体液免疫应答最先产生的抗体,在机体早期防御中有着突出作用;IgA具有抗菌、抗病毒、中和毒素的作用[19]。促炎因子白细胞介素-6、抗炎因子白细胞介素-10在血清中的含量可反映机体以血管为中心的病理过程及炎症过程。程慧林等[6]研究发现,在鸡饲粮中添加超过0.1%的紫苏籽提取物,能够显著提高肉鸡血清中IgG和IgM含量。张悻等[20]研究表明,植物提取物能够提高肉鸡的抗氧化能力。李欣等[21]研究发现,紫苏籽提取物能够显著提高肉鸡血清IgG、IgA含量,显著降低血清IL-6含量,显著提高IL-10含量,与本研究结论一致。3.4紫苏籽提取物对肉兔抗氧化性能的影响血清中T-AOC、SOD、GSH-Px活性可反映机体对自由基的消除能力。SOD、GSH-Px是机体重要的抗氧化酶,能够防止细胞遭受氧化破坏。MDA是脂质过氧化反应的产物,MDA含量可反映机体脂质过氧化的程度,体现细胞被自由基攻击的程度。Li等[22]研究发现,饲粮添加紫苏籽提取物可提高仔猪血清SOD活性,降低肝脏、脾脏和空肠黏膜MDA含量。张倩倩[23]试验确认紫苏籽提取物能够提高仔猪血清中SOD和肝脏中GSH-Px活性。李自鹏[7]研究表明,饲粮中添加1 g/kg紫苏籽提取物,能够提高仔猪血清中T-SOD和GSH-Px活性。张悻等[24]研究表明,在断奶仔猪日粮中添加复合植物提取物能够显著提高血清中总超氧化物歧化酶活性。曹林等[25]在断奶仔猪饲粮中添加天然植物提取物,可显著提高仔猪血清中T-AOC以及GSH-Px和T-SOD活性。李欣等[21]研究表明,肉鸡饲粮中添加紫苏籽提取物,能够显著提高肉鸡血清中T-AOC、SOD、GSH-Px的活性,显著降低血清中MDA含量,与本研究试验结果一致。3.5紫苏籽提取物对肉兔器官指数的影响器官指数可在一定程度上反映了动物对环境、饲料的适应程度、生长发育情况。其中,胸腺是细胞免疫的中枢器官;脾脏是最大的外周免疫器官,具有其他淋巴器官及造血器官没有的免疫功能[26],是动物体内重要的免疫器官。黄晨轩等[27]研究发现,植物提取物对雏鸡心脏指数、脾脏指数均没有显著影响。周广弛等[28]试验表明,饲粮添加中草药可显著提高肉鸡的脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数。李瑞萍等[29]研究发现,饲粮中添加高剂量蝉花多糖植物提取物能够使麻鸡的脾脏指数有所提高。吕慧源等[30]研究发现,饲粮中添加不同水平植物提取物后,肉鸡的胸腺指数、脾脏指数均较高。以上研究结果与本研究结果类似。4结论肥育期伊拉肉兔的饲粮中添加不同水平紫苏籽提取物,能够有效降低伊拉肉兔的死亡率,提高肉兔生长性能;改善肉兔的血清生化指标,提高血清中免疫球蛋白含量,增强肉兔血清抗氧化功能;提高了肉兔心脏指数。综合分析,肥育期伊拉肉兔饲粮中紫苏籽提取物的适宜添加水平为200 mg/kg。
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