充足的营养摄入是保障仔猪健康生长的主要因素，营养不足会限制仔猪的生长[1]。饲料成本是仔猪生产过程最主要成本，占比达72%[2]，而能量饲料占饲料成本的85%~90%[3-4]。能量摄入过量会显著影响饲料效率，从而增加养殖成本[5]。此外，能量摄入过量会增加排放，加重环保负担[6]。仔猪生长主要依赖蛋白及脂肪沉积[7]，饲料中蛋白及能量水平影响猪的生长性能。研究显示，能量摄入量的差异会显著影响猪的生长性能、瘦肉率、脂肪沉积、血浆尿素氮和肉品质等特性[8-10]。因此，适宜的日粮能量水平在保证仔猪生长性能及肉质前提下，有助于降低养殖成本，减少环境问题。Smith等[11]研究发现，生长猪的日粮能量水平从13.85 MJ/kg增加到14.94 MJ/kg，其日增重和饲料转化率显著增加，采食量显著降低。日粮能量水平对生长猪生长性能及胴体性状的影响在不同饲养阶段存在差异[12]。当日粮消化能水平从12.93 MJ/kg提高到14.94 MJ/kg，生长育肥猪的体重从31.2 kg生长到115.3 kg，日增重、饲料转化率、屠宰率及背膘厚呈线性增加，而日采食量及瘦肉率则呈线性降低[12]。与生长育肥后期相比，在生长育肥早期日粮能量水平对生长性能的提高作用更明显[12]。早期营养摄入量对仔猪生长发育及后续生长具有显著影响[13]。本研究分析日粮能量水平对保育期仔猪生长性能、血液指标、皮毛情况、抗氧化指标的影响，确定仔猪保育期的适宜能量摄入水平，为保育猪的精准营养配制提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验1选取240头平均体重为7.45 kg的健康仔猪进行试验，试验2选取125头平均体重为9.90 kg的健康仔猪进行试验。所有仔猪均来自广东海大饲料科技有限公司高州三和猪场。试验1和试验2分别在2021年10月和2022年8月开展。1.2试验设计试验1采用单因素设计，将240头平均体重为7.45 kg仔猪，随机分配至5个不同能量日粮处理组中（各组能量水平为10.42、10.59、10.76、10.93、11.09 MJ/kg），每组8个重复，每个重复6头仔猪，试验期为25 d。试验2同样采用单因素设计，将125头平均体重为9.90 kg的仔猪，随机分配至5个不同能量日粮处理组中（各组能量水平分别为10.21、10.46、10.67、10.84、11.05 MJ/kg），每组5个重复，每个重复5头仔猪，试验期为20 d。试验期间仔猪自由采食和饮水，每天记录采食量和腹泻评分，试验开始和结束时称取猪的体重并在每周对皮毛进行评分。试验日粮组成及营养水平见表1、表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.004.T001表1试验1日粮组成及营养水平（风干基础）项目10.42 MJ/kg组10.59 MJ/kg组10.76 MJ/kg组10.93 MJ/kg组11.09 MJ/kg组原料组成/%玉米（一级）56.7055.0952.7851.1649.46面粉5.406.107.908.709.50低蛋白乳清粉5.005.005.005.005.00大豆油0.000.801.502.303.10豆粕（46%）16.9017.0016.8016.8016.90膨化大豆10.0010.0010.0010.0010.00超级鱼粉2.002.002.002.002.00食盐0.400.400.400.400.40石粉0.280.270.260.250.25磷酸氢钙0.940.960.971.001.00L-赖氨酸硫酸盐（70%）0.800.800.800.800.80DL-蛋氨酸0.230.230.240.240.24L-苏氨酸0.280.280.280.280.28L-色氨酸0.040.040.040.040.04氧化锌0.200.200.200.200.20硫酸铜0.040.040.040.040.04乙氧基喹啉（≥6.5%）0.020.020.020.020.02丙酸（50%）0.070.070.070.070.07预混料0.600.600.600.600.60氯化胆碱（60%）0.100.100.100.100.10合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平净能/(MJ/kg)10.4210.5910.7610.9311.09粗蛋白/%19.0019.0019.0019.0019.00粗脂肪/%4.335.075.716.467.20粗纤维/%2.352.332.312.292.27钙/%0.600.600.600.600.60总磷/%0.600.600.600.600.60赖氨酸/%1.401.401.401.401.40蛋氨酸/%0.540.540.550.550.55蛋氨酸+半胱氨酸/%0.850.850.850.850.85苏氨酸/%0.970.970.970.970.97注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 16 000 IU、VD3 4 000 IU、VE 10 IU、VK3 2 mg、VB1 0.8 mg、VB2 6.4 mg、VB6 2.4 mg、VB12 12 μg、叶酸0.2 mg、烟酰胺14 mg、D-泛酸10 mg、铁120 mg、铜6 mg、锰40 mg、锌100 mg、碘0.3 mg、硒0.3 mg；下表同。2.营养水平均为计算值；下表同。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.004.T002表2试验2日粮组成及营养水平（风干基础）项目10.21 MJ/kg组10.46 MJ/kg组10.67 MJ/kg组10.84 MJ/kg组11.05 MJ/kg组原料组成/%玉米（一级）54.0058.4053.6052.3051.00膨化大豆7.007.007.007.007.00面粉5.305.0010.0010.0010.00豆粕（46%）17.7019.1018.1018.3018.50低蛋白乳清粉5.005.005.005.005.00磷酸氢钙0.700.910.830.850.86石粉0.760.640.690.680.67L-赖氨酸硫酸盐（70%）0.920.890.930.930.92预混料1.071.071.071.071.07蒙脱石0.500.500.500.500.50氯化钠0.400.400.400.400.40L-苏氨酸0.270.260.270.270.27DL-蛋氨酸0.240.240.240.240.24氧化锌0.200.200.200.200.20氯化胆碱（50%）0.150.150.150.150.15丙酸（50%）0.100.100.100.100.10L-色氨酸0.070.070.070.070.07硫酸铜0.040.040.040.040.04乙氧基喹啉（≥6.5%）0.030.030.030.030.03沸石粉0.050.000.080.070.08豆油0.000.000.701.802.90小麦麸5.500.000.000.000.00合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平净能/(MJ/kg)10.2110.4610.6710.8411.05粗蛋白/%18.2018.2018.2018.2018.20粗脂肪/%3.843.784.395.426.46钙/%0.600.600.600.600.60总磷/%0.530.530.530.530.53赖氨酸/%1.401.401.401.401.40蛋氨酸/%0.510.520.520.520.51蛋氨酸+半胱氨酸/%0.830.830.830.830.83苏氨酸/%0.930.930.930.930.931.3测定指标及方法1.3.1生长性能在试验开始和结束时的早晨，称取空腹状态下猪的体重。每天称量每栏猪的给料量、余料、浪费料，统计该栏每头猪的平均给料量、平均余料量、平均浪费量。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=(给料量-余料量-浪费量)/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2腹泻率及腹泻指数每天早晨喂料后由同一人记录每头仔猪的腹泻评分情况。粪便成型评0分，粪便略不成型评1分，粪便为粥状评2分，粪便为水样评3分。腹泻率=腹泻头次/(仔猪头数×试验天数)×100%(4)腹泻指数=总腹泻评分/(仔猪头数×试验天数)(5)1.3.3外观评分毛发评分标准为：无光泽且凌乱为1分，微弱光泽且微弱凌乱为2分，明显光泽且柔顺为3分；皮肤评分标准为：苍白为1分，微红为2分，红润为3分。体型评分标准为：偏瘦和脊柱突出为1分，不瘦且脊柱不突出为2分，体型丰满且健壮为3分。1.3.4血液指标在试验结束当天，挑选一头体重接近平均体重的仔猪，前腔静脉采血10 mL，分别采集至肝素钠采血管和EDTA采血管中。肝素钠采血管3 000 r/min离心10 min制备血浆，置于-80 ℃冰箱中保存。EDTA采血管混合后成为全血样品。根据试剂盒（江苏酶免实业有限公司）说明测定血浆中血管内皮生长因子（VEGF）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSSG）、氧化型谷胱甘肽（GSH）含量，以及全血中血红蛋白（HB）含量。1.4数据统计与分析试验数据采用SAS 9.4统计软件进行分析。采用Mixed模型分析，以每个重复为试验单位，日粮能量水平作为固定效应，饲养的栏作为随机效应。使用正交多项式比较分析，以确定增加日粮能量水平对生长性能、皮毛评分、腹泻率、血液指标的线性和二次效应。结果以平均值与标准误表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1日粮能量水平对保育仔猪生长性能的影响（见表3、表4）由表3可知，在动物试验1中，随日粮能量水平逐渐增加，各组仔猪每天的实际能量摄入量为6.61、6.82、6.53、6.20、6.24 MJ。随着日粮能量水平的增加，仔猪的平均日采食量呈线性降低（P0.05），平均日增重也呈线性降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.004.T003表3日粮能量水平对保育仔猪生长性能及能量摄入量的影响（试验1）项目初重/(kg/头)末重/(kg/头)平均日采食量/[kg/(头·d)]平均日增重/[kg/(头·d)]料重比能量摄入量/(MJ/d)10.21 MJ/kg组7.4419.060.64a0.47a1.376.6110.46 MJ/kg组7.4419.110.65a0.47a1.386.8210.67 MJ/kg组7.4518.400.60ab0.44ab1.396.5310.84 MJ/kg组7.4418.040.57b0.42ab1.346.2011.05 MJ/kg组7.4417.770.56b0.41b1.366.24SEM0.330.720.030.020.020.67P值线性0.990.120.010.020.200.12P值二次0.980.920.760.890.490.74注：同列数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著（P0.05），不同字母表示差异显著（P0.05）；下表同。由表4可知，在动物试验2中，随着日粮能量水平的逐渐增加，各组仔猪每天的实际能量摄入量为6.66、5.86、6.61、6.74、6.61 MJ。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.004.T004表4日粮能量水平对保育仔猪生长性能及能量摄入量的影响（试验2）项目初重/(kg/头)末重/(kg/头)平均日采食量/[kg/(头·d)]平均日增重/[kg/(头·d)]料重比能量摄入量/(MJ/d)10.21 MJ/kg组9.9419.500.650.481.366.6610.46 MJ/kg组9.9618.080.560.411.375.8610.67 MJ/kg组9.9618.920.620.451.406.6110.84 MJ/kg组9.9418.750.620.441.366.7411.05 MJ/kg组9.9418.720.600.441.376.61SEM0.210.550.020.020.020.06P值线性0.980.610.640.490.740.27P值二次0.940.400.360.240.390.412.2日粮能量水平对保育仔猪腹泻情况及外观评分的影响（见表5、表6）由表5、表6可知，日粮能量水平的增加对仔猪的腹泻率及腹泻指数均无显著影响。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.004.T005表5日粮能量水平对保育仔猪腹泻情况及外观评分的影响（试验1）项目腹泻率/%腹泻指数毛发得分皮肤得分体型得分10.21 MJ/kg组0.330.062.092.472.7210.46 MJ/kg组0.000.002.202.322.6210.67 MJ/kg组0.000.002.112.352.5810.84 MJ/kg组0.000.002.152.332.6711.05 MJ/kg组0.000.002.082.452.63SEM0.150.030.100.070.10P值线性0.740.770.810.890.64P值二次0.780.800.560.050.4810.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.004.T006表6日粮能量水平对保育仔猪外观评分的影响（试验2）项目毛发得分皮肤得分体型得分10.21 MJ/kg组2.832.392.9510.46 MJ/kg组2.802.352.8810.67 MJ/kg组2.792.392.9210.84 MJ/kg组2.722.362.9611.05 MJ/kg组2.682.372.92SEM0.080.040.06P值线性0.720.590.86P值二次0.190.700.91试验1及试验2的结果均显示，日粮能量水平的增加对仔猪毛发得分及体型得分均无显著影响。试验1结果表明，随着日粮能量水平的增加，仔猪的皮肤得分呈二次方效应降低的趋势。2.3日粮能量水平对DLY保育仔猪血液指标的影响（见表7）由表7可知，在试验2中，随着日粮能量水平的增加，仔猪血浆中血管内皮生长因子含量呈线性增加趋势，还原型谷胱甘肽具有呈二次方效应增加的趋势，还原型氧化型谷胱甘肽比值具有呈二次方效应增加的趋势。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.23.004.T007表7日粮能量水平对保育仔猪血液指标的影响（试验2）项目血红蛋白/(μmol/L)血管内皮生长因子/(ng/L)丙二醛/(μmol/L)还原型谷胱甘肽/(μmol/L)氧化型谷胱甘肽/(μmol/L)还原型氧化型谷胱甘肽比值10.21 MJ/kg组86.82701.11a1.5955.851.3543.1110.46 MJ/kg组80.91743.15ab1.7559.451.3146.8610.67 MJ/kg组95.03753.59ab1.7260.821.1354.5510.84 MJ/kg组76.27837.95b1.4857.401.3442.7911.05 MJ/kg组85.98838.14b1.7948.051.3037.95SEM5.7748.510.154.720.105.02P值线性0.790.030.730.250.820.39P值二次0.990.930.830.090.360.073讨论3.1日粮能量水平对保育仔猪生长性能的影响日粮能量水平对猪生长性能、营养代谢、肉品质等方面具有重要作用[14-15]，然而研究多集中于生长育肥阶段。本研究发现，随日粮能量水平增加，仔猪采食量呈降低趋势，这一结果与前人报道一致[15-17]。Smit等[3]研究发现，当日粮能量水平改变时，猪会通过血糖水平自动调节能量摄入量，因此能量水平的提高能够导致采食量的降低，降低则会促进采食。而本研究发现，随日粮能量水平升高，仔猪采食量呈线性降低。吴国芳等[18]研究表明，与低能量组相比，高、中能量组八眉猪平均日增重均显著提高。吕知谦等[17]研究发现，中等能量摄入能提高了22~55 kg猪的平均日增重。Beaulieu等[12]连续开展了两个饲养试验，在第一次试验中，随日粮代谢能水平增加，猪的平均日增重无显著差异；而第二次试验中，日粮代谢能的增加则显著地提高了猪试验前期的日增重。日粮能量水平对猪生长性能影响具有不确定性[12,19-20]。本研究的两个动物试验在生长性能上的结果也存在不一致。试验1中仔猪的日增重随日粮能量水平增加而降低的结果主要是由实际能量摄入量的降低所导致，与最低能量水平组相比，最高能量水平组仔猪每日净能摄入量减少了5.6%。而Beaulieu等[12]的研究显示，随着日粮能量水平增加，猪采食量也呈降低趋势，但试验早期猪的能量摄入量增加。本研究中，仔猪对于日粮能量水平增加的不同反应可能主要受年龄影响，试验所用仔猪起始体重明显低于前人研究。而有研究报道，大猪采食是为了满足能量需求，而小猪采食只是为了获得饱腹感[21]。与大猪相比，小猪更难通过采食来满足自己的能量需求[12]。因此，动物试验1中体重相对小的仔猪在日粮能量水平较高时反而实际摄入的能量更少，而动物试验2中体重相对大的仔猪随日粮能量水平增加，实际摄入能量并未减少。这也最终导致了两个动物试验中仔猪生长性能存在不一致结果。3.2日粮能量水平对保育仔猪腹泻情况及外观评分的影响本研究中，随日粮能量水平提高，仔猪皮肤得分有呈二次方效应降低趋势。能量对猪皮毛状况产生重要影响[22]。日粮中缺乏脂肪会引起脂溶性维生素的缺乏，并导致猪皮毛生长状况变差[23]。在动物试验1中，提高日粮能量水平所导致的皮肤评分降低可能是由于高能量组仔猪实际摄入的净能水平降低造成。而动物试验2中各组仔猪的净能摄入量十分接近，皮毛评分也因此未受影响。研究表明，过高的营养摄入容易导致仔猪断奶后腹泻率的升高[24]。而本研究中各组间仔猪腹泻率无显著差异，表明仔猪的饲粮营养摄入水平处于合理区间。3.3日粮能量水平对保育仔猪血液指标的影响VEGF是血管生成过程中最重要的因子之一[25-27]。本研究中，随日粮能量水平增加，血浆VEGF浓度呈线性增加。VEGF可以通过调控脂肪组织的生血管作用及扩张来调节机体能量稳态，在白色脂肪组织中VEGF有助于促进能量的存储[28]。本研究中，日粮能量水平增加最终导致了实际能量摄入量降低，而在较低的能量摄入水平下，仔猪可能启动了自我保护机制，生成VEGF来促进能量的存储，从而避免能量缺乏。本研究还发现，随着日粮能量水平的增加，仔猪血浆中GSH有呈二次方效应增加的趋势。GSH是动物体内重要的抗氧化剂，能够防止由活性氧、自由基、脂质过氧化物等来源引起对重要细胞成分的损害[29]。高脂饮食可以引起大鼠血浆中GSH水平的降低[30]，肌肉中GSSG水平的升高以及GSH/GSSG比值的降低[31]。短至两周的高脂饮食就可以引起大鼠肌肉GSH的下降[32]。高水平的脂质摄入容易引起脂质过氧化物以及ROS的生成，而GSH往往会参与ROS的生成过程，并转化为GSSG[30]。因此高脂饮食所引起的机体氧化应激状态是GSH降低的原因，而本研究中仔猪血浆GSH的增加趋势可能是由实际脂类摄入量的降低所引起。4结论本研究发现，在体重相对小的保育仔猪，随日粮能量水平提高，仔猪的采食量和生长速度呈线性降低，采食量的线性降低引起了仔猪实际能量摄入水平的下降，并最终影响了仔猪的皮肤评分。在体重相对大的仔猪生长周期中，随日粮能量水平的提高，提高了仔猪血浆GSH的水平以及GSH/GSSG比值，反映了仔猪在低能量摄入条件下机体有较好的氧化还原状态。