肉鸡养殖具有周期短、成本投入低、经济效益好等特点，但肉鸡的集约化养殖使生产环境压力增加，导致肉鸡的免疫功能下降，进而引发各种疾病。传统养殖模式下，在饲粮中添加少量抗生素可预防肉鸡疾病，维持机体的健康，但使用抗生素也会造成药物残留、细菌耐药性提高等问题[1]。因此，寻找新型、绿色健康的抗生素替代品已成为当前畜牧业研究的热点。植物多糖具有调节肠道健康、抗肿瘤、抗氧化和降血糖等生物学功能[2]，能够改善动物生长性能，维持动物肠道菌群健康，提高机体免疫能力和抗病力[3]。辣木营养丰富，含有蛋白质、维生素和氨基酸等多种营养物质，为药食两用植物[4]。研究表明，在AA型肉鸡饲粮中加入0.05%的辣木叶提取物，可明显提高AA型肉鸡的日增重，增强肉鸡的血清抗氧化能力[5]。辣木多糖作为辣木的主要活性成分之一，具有良好的抗氧化、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性[6]。目前，关于辣木多糖作为饲料添加剂在畜禽养殖中的应用较少。因此，本研究以三黄鸡为试验对象，探究不同水平的辣木叶多糖对其生长性能、免疫功能及血清生化指标的影响，为辣木叶多糖开发成新型替抗产品在实际生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验设计选取体重相近、公母各半的1日龄三黄鸡600羽，随机分为5组，每组8个重复，每个重复15羽三黄鸡。试验分为前期（1~21日龄）和后期（22~42日龄），共42 d。CON组饲喂基础饲粮，T1组、T2组、T3组、T4组分别在基础饲粮添加0.08%、0.12%、0.16%、0.20%辣木叶多糖。辣木叶多糖由西安四叶草生物科技有限公司提供，多糖含量为50.18%。基础饲粮为玉米-豆粕型，其组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.009.T001表1基础饲粮组成及营养水平原料组成/%1~21日龄22~42日龄营养水平1~21日龄22~42日龄合计100.00100.00玉米55.7059.50代谢能/(MJ/kg)12.3812.87豆粕26.3022.35粗蛋白/%20.3219.00鱼粉2.502.50粗脂肪/%3.454.23膨化全脂大豆8.206.45钙/%0.970.85猪油1.003.30总磷/%0.690.64食盐0.400.40赖氨酸/%1.150.98石粉1.601.40蛋氨酸/%0.480.42磷酸氢钙2.302.10预混料2.002.00注：1.预混料为每千克饲粮提供：VB1 3.0 mg、VB2 7.25 mg、VB6 4.75 mg、VE 4.5 mg、VK 28.5 mg、VA 10 500 IU、VD3 3 200 IU、胆碱550 mg、泛酸25 mg、生物素0.30 mg、烟酸32 mg、叶酸1.20 mg、Cu 8.8 mg、Mn 95 mg、Zn 80 mg、Se 0.25 mg、Fe 75 mg、Co 0.15 mg。2.营养水平中粗蛋白和总磷为实测值，其他均为计算值。1.2饲养管理试验在广西富凤鸡育种有限公司养殖基地进行。三黄鸡采用双层笼养方式进行饲养，每天8：00定时饲喂，试验期间鸡可自由采食和饮水。鸡舍内保持良好的卫生环境和适时通风，温度和湿度按照饲养管理进行调整，按照日常管理程序进行免疫接种，并对鸡舍定期消毒，每日监测鸡群的健康情况。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能于试验第21、42 d对三黄鸡称重，称重前停饲10~12 h。在试验过程中，以重复为单位详细记录试验期间试验三黄鸡的饲料饲喂量和剩余饲料量，用于统计分析平均日采食量、料重比等指标。平均日采食量(ADFI)=总采食量/(试验鸡数×试验天数)(1)平均日增重(ADG)=(末重-初重)/(试验鸡数×试验天数)(2)料重比(F/G)=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2血清生化指标、免疫指标第42 d时，每组中随机选取8只三黄鸡，称重后翅静脉采血，血样静置20 min，3 500 r/min离心15 min，取上清液，于-80 ℃保存。采用Cobas C311全自动生化分析仪测定血清中总胆固醇（TC）、总蛋白（TP）、葡萄糖（GLU）、球蛋白（GLB）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、尿素氮（BUN）、白蛋白（ALB）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、谷丙转氨酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）和谷草转氨酶（AST）等指标。使用试剂盒（江苏酶免实业有限公司）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-1β（IL-1β）含量，测定步骤参照试剂盒说明书进行。1.3.3免疫器官指数肉鸡解剖后分别采摘脾脏、胸腺和法氏囊，称重记录，计算免疫器官指数。免疫器官指数(g/kg)＝免疫器官鲜重(g)/宰前空腹活重(kg)(4)1.4数据统计与分析使用Excel软件对所有的试验数据进行初步整理，利用SPSS 25进行单因素方差分析，若有差异性显著时，则以Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1辣木叶多糖对三黄鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，与CON组相比，1~21日龄时，T1组、T2组、T3组三黄鸡的F/G显著降低（P0.05），分别降低了4.4%、2.7%、3.3%。22~42日龄时，各试验组三黄鸡42 d体重均有增加的趋势，其中T3组三黄鸡42 d体重显著高于对照组（P0.05）；各试验组三黄鸡的F/G均显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.009.T002表2辣木叶多糖对三黄鸡生长性能的影响项目CON组T1组T2组T3组T4组1~21日龄1 d体重/(g/只)29.02±0.5228.98±0.4028.97±0.4929.01±0.5629.03±0.6221 d体重/(g/只)229.77±25.79232.43±25.88236.36±24.65237.32±26.83233.66±25.46ADG/[g/(只·d)]9.54±1.239.65±1.239.85±1.189.89±1.289.73±1.21ADFI/[g/(只·d)]17.93±1.5417.15±1.3917.63±1.4717.65±1.5517.53±1.73F/G1.85±0.05a1.77±0.04b1.80±0.03b1.79±0.05b1.82±0.07ab22~42日龄42 d体重/(g/只)516.79±29.58b520.86±29.78ab524.63±26.53ab532.26±28.92a525.31±31.37abADG/[g/(只·d)]13.67±0.6913.73±0.5613.92±1.6214.04±1.7713.89±0.35ADFI/[g/(只·d)]37.11±2.0136.06±2.2835.88±1.6836.02±1.8735.93±1.67F/G2.71±0.09a2.62±0.10b2.58±0.08b2.56±0.05b2.58±0.05b1~42日龄ADG/[g/(只·d)]11.60±0.70b11.70±0.71ab11.88±0.64a11.97±0.69a11.81±0.75abADFI/[g/(只·d)]27.02±2.2126.66±2.7127.00±3.5526.74±3.7526.97±3.59F/G2.20±0.03a2.15±0.02b2.16±0.03b2.11±0.03c2.14±0.03b注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表3与此同。1~42日龄，与CON组相比，T2组、T3组三黄鸡的ADG显著提高（P0.05），各试验组三黄鸡的F/G显著降低（P0.05）。2.2辣木叶多糖对三黄鸡血清生化指标的影响（见表3）由表3可知，与CON组相比，T2组和T3组三黄鸡血清ALB含量显著升高（P0.05），T3组三黄鸡血清BUN含量显著降低（P0.05），T1组、T2组、T3组三黄鸡血清GLU含量均显著升高（P0.05）。而辣木叶多糖对三黄鸡血清其他指标未产生显著影响。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.009.T003表3辣木叶多糖对三黄鸡血清生化指标的影响项目CON组T1组T2组T3组T4组TP/(g/L)32.73±2.7836.47±1.8935.27±1.3336.60±1.7733.90±2.96ALB/(g/L)10.53±1.11c11.07±0.76bc12.30±1.21ab12.90±0.78a11.67±0.42abcGLB/(g/L)23.87±3.0023.57±2.2825.63±0.5724.20±1.6522.57±3.35ALT/(U/L)4.27±1.223.27±0.583.33±1.533.23±1.023.67±2.08AST/(U/L)238.67±33.01230.00±23.43225.33±10.07216.00±13.23235.67±17.24BUN/(mmol/L)0.46±0.07a0.38±0.03ab0.41±0.07ab0.34±0.06b0.36±0.05abTC/(mmol/L)3.39±0.203.28±0.033.31±0.053.23±0.053.30±0.22HDL-C/(mmol/L)1.91±0.171.75±0.101.86±0.181.69±0.161.84±0.16LDL-C/(mmol/L)0.93±0.230.89±0.120.96±0.150.92±0.180.87±0.11LDH/(U/L)1 305.00±199.501 198.67±61.331 168.00±125.371 207.00±176.211 319.67±196.30GLU/(mmol/L)11.10±0.24b12.58±0.44a12.24±0.31a12.75±0.23a11.91±0.54ab2.3辣木叶多糖对三黄鸡免疫器官指数的影响（见表4）由表4可知，与CON组相比，T3组三黄鸡的胸腺指数显著升高（P0.05）；各组法氏囊指数和脾脏指数无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.009.T004表4辣木叶多糖对三黄鸡免疫器官指数的影响 单位：g/kg组别胸腺指数法氏囊指数脾脏指数CON组5.55±1.13b2.21±0.261.48±0.27T1组7.18±1.39ab2.30±0.191.56±0.25T2组6.25±1.02ab2.51±0.351.64±0.34T3组7.39±1.69a2.48±0.251.78±0.38T4组6.62±0.80ab2.34±0.331.70±0.28注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.4辣木叶多糖对三黄鸡血清免疫指标的影响（见表5）由表5可知，与CON组相比，T1组、T3组、T4组三黄鸡血清IL-4含量显著升高（P0.05），T2组、T3组三黄鸡血清IL-6的含量显著降低（P0.05），各试验组三黄鸡血清IL-1β含量均显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.24.009.T005表5辣木叶多糖对三黄鸡血清免疫指标的影响组别TNF-αIL-4IL-6IL-1βCON组69.36±2.69185.05±11.5b48.51±2.30a116.62±3.32aT1组73.88±1.59210.42±9.21a44.79±4.03ab108.36±4.93bT2组70.73±3.61197.50±8.69ab42.46±1.26b109.20±2.96bT3组71.32±2.16211.83±7.74a43.23±1.73b106.75±4.65bT4组69.21±0.69207.16±6.69a45.24±2.32ab107.77±2.23bng/L3讨论3.1辣木叶多糖对三黄鸡生长性能的影响辣木含有丰富的营养物质，尤其是蛋白质和多种维生素以及矿物质元素含量丰富，可作为动物蛋白饲料来源。唐子婷等[7]研究发现，在天府肉雏鸡中添加辣木叶粗提取物能够显著提高肉鸡的平均日增重，降低料重比。Liaqat等[8]研究发现，用辣木叶替代菜籽作为肉鸡饲粮的植物蛋白来源可以增强肉鸡对新城疫和传染性法氏囊病疫苗的免疫应答，提高肉鸡的采食量和体重，但对血清生化指标无显著影响。杨汝才等[9]研究发现，在雏鸭饲粮中添加0.2%的辣木粗黄酮能够提高饲料转化率，增加血清免疫球蛋白的含量。本研究发现，在饲粮中添加辣木叶多糖对肉鸡的生长具有一定的促进作用，可以增加肉鸡体重，降低料重比，与上述研究结果基本一致。植物多糖的抗氧化活性较强，可清除动物体内的自由基，缓解动物应激反应，且植物多糖还可以刺激肠道有益菌的生长，对肠道的发育起到一定的促进作用，从而增强肉鸡对营养物质的消化吸收能力，进而改善生长性能[10-13]。综上，辣木叶多糖可以提高三黄鸡的生长性能，且以0.16%的添加量效果较好。3.2辣木叶多糖对三黄鸡血清生化指标的影响血清生化指标可以反映动物机体对营养物质的吸收代谢情况。血清TP是一种由多种蛋白质组成的混合物，可以反映动物体内的蛋白质代谢情况。血清蛋白中的ALB主要与体内营养物质转运有关，血清中ALB含量增加会加快机体蛋白质代谢[14]。本试验中，添加0.12%、0.16%辣木叶多糖能够提高三黄鸡血清ALB的含量，表明辣木多糖在一定程度上能够改善肉鸡的蛋白质代谢水平。BUN也是反映动物蛋白质代谢的一个重要指标，同时也可以用于评估肝肾功能和氨基酸的平衡状态。当氨基酸平衡时，BUN含量降低[15]。本研究中，添加辣木叶多糖具有降低三黄鸡血清BUN含量的作用，表明辣木叶多糖不会对肝脏和肾脏的作用产生不良影响。ALT、AST和LDH是反映肝功能的主要指标，当肝功能不全时，血清AST和ALT活性明显提高[16]，LDH主要参与机体糖酵解途径，当LDH活性较高时，会导致动物肝功能异常[17]。本试验中，与CON组相比，各试验组三黄鸡血清ALT、AST和LDH的活性并无显著差异，表明饲喂辣木叶多糖对肉鸡的肝肾功能不会产生不良反应。GLU能够反映机体对碳水化合物消化吸收的能力以及机体内糖原代谢的动态平衡[18]。本研究表明，与对照组相比，各试验组中三黄鸡GLU含量显著提高，原因可能是辣木叶多糖被肉鸡消化吸收后，能够被肠道内的有益微生物利用生成短链脂肪酸，再通过血液输送到肝脏，通过糖异生途径转换成葡萄糖，从而提高了肉鸡血清GLU的含量。本试验中，三黄鸡血清GLU和ALB含量高于对照组，进一步表明了肉鸡体内蛋白质和糖类等物质合成代谢加快，肉鸡的体重增加，这与生长性能结果基本一致。3.3辣木叶多糖对三黄鸡免疫器官指数和免疫指标的影响禽类免疫器官的生长发育状态直接影响禽类的免疫功能，其生长发育状态可通过免疫器官指数反映[19]。免疫器官指数越高，表明机体的免疫能力越强。本研究表明，添加辣木叶多糖具有提高肉鸡的免疫器官指数的趋势，其中T3组三黄鸡的胸腺指数显著高于对照组，表明添加辣木叶多糖可以促进肉鸡免疫器官的发育，直接或间接影响肉鸡的免疫功能。炎症是机体免疫系统对不良刺激的一种防御反应，是机体的自动防御反应。当受到刺激时，多种外源抗原通过诱发巨噬细胞和中性粒细胞向受损伤部位转移，产生和释放某些促炎因子。这些促炎因子可以通过抑制粒细胞、淋巴细胞和肥大细胞的驱化，增强或活化炎性反应，从而增加组织损伤的危险，炎症持续时间变长。而细胞产生的抗炎因子，如IL-4能够很好地抑制炎性反应的发生，从而提高机体的免疫状态[20]。因此，有效抑制炎性介质的分泌和功能是防止炎症发生的重要途径。从植物中提取的多糖等生物活性大分子具有良好的抗炎功能，能够激活多种免疫细胞，促进免疫抗炎因子的分泌，可作为一种天然的免疫调节剂保护机体组织健康，减缓炎症的发生。袁雷等[21]研究发现，从血满草叶多糖可以抑制炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌。李荣等[22]在断奶仔猪饲粮中添加黄芪多糖发现，与对照组相比，黄芪多糖组显著降低了仔猪血清TNF-α的含量，显著提高了仔猪抗炎因子IL-4的含量。李文嘉等[23]研究表明，在饲粮中加入龙须菜多糖可以降低肉鸡血清中促炎因子，如TNF-α和IL-1β的含量，从而降低炎性损伤。在本研究中，添加辣木叶多糖可以显著降低肉鸡血清中IL-1β和IL-6的含量，显著提高IL-4含量，与上述结果基本一致。因此，辣木叶多糖具有抑制炎性因子释放的作用，减少炎症的发生，并促进抗炎因子的生成，进而调节动物机体的炎症反应，提高机体的免疫能力，降低肉鸡疾病发生的概率，但其提高机体免疫功能的作用机制仍需进一步研究并加以验证。4结论本研究结果表明，辣木叶多糖对三黄鸡的生长具有明显的促进作用，可改善蛋白代谢和能量代谢，促进三黄鸡的免疫器官发育，提高机体的免疫能力，且以0.16%的添加效果较好。