仔猪在断奶阶段由于肠道屏障功能发育不全、免疫功能不完善，会导致仔猪细菌性腹泻，严重制约了我国养猪业的发展。在饲粮中添加抗生素可以减少断奶仔猪腹泻，缓解断奶应激，但使用抗生素会引发细菌耐药性、肉产品中药物残留等问题[1-2]。因此，为了维护动物源食品安全和公共卫生安全[3]，自2020年起我国在饲料端全面禁止添加抗生素。目前，益生菌[4]、天然多糖[5]、中草药饲料添加剂[6]、植物提取物[7]和微量元素[8]等添加剂作为抗生素替代品已在动物生产中应用，但这些添加剂在抑菌效果、生产能力和经济成本等方面仍存在诸多问题[7]。寻找能够提高动物生产性能、改善动物肠道健康的安全高效的抗生素替代品已成为畜牧业可持续发展的必然趋势。高剂量氧化锌因具有预防腹泻、提高免疫力、促生长等效果，普遍应用于仔猪生产，但随着其使用量增加，会对仔猪健康造成负面影响，污染环境[9]。与无机锌相比，有机锌具有更高的生物利用度，能够增强仔猪食欲，提高饲料利用率，降低腹泻，改善皮毛情况[10]。研究表明，200 mg/kg的赖氨酸锌与2 500 mg/kg的氧化锌对改善断奶仔猪的腹泻率与生长性能的作用效果相当[11]。中链脂肪酸具有改善仔猪的生长性能[12]、提高机体免疫、改善肠道菌落和维持肠道稳态[13]等功能。癸酸甘油酯具有广谱抑菌性，广泛应用于日化、食品和医药等行业[14]。以癸酸为原料合成癸酸锌，具有改善仔猪生长性能、保护肠道健康和抑制有害菌生长等潜在功效，可提高锌在仔猪体内的生物利用度，减少环境污染[15]，在替代抗生素和高剂量氧化锌方面具有较高的应用价值。本试验以癸酸和硫酸锌为原料合成癸酸锌并对其结构进行表征，以革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，CICC AB 91093）和革兰氏阴性菌产肠毒素大肠杆菌（Escherichia coli，CICC 10667）为代表，研究癸酸锌的体外抑菌效果并解析其抑菌机制，为癸酸锌在畜牧生产中的开发应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料正癸酸、氢氧化钠、无水乙醇、七水硫酸锌、酵母培养物、胰蛋白胨、琼脂、β-巯基乙醇、溴酚蓝等均购自郑州润研商贸有限公司；溶葡萄球菌酶、细菌基因组DNA提取试剂盒等购自生工生物工程（上海）股份有限公司；金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌为本实验室保存。1.2皂化复分解法制备癸酸锌室温下，在1 L烧杯中加入400 mL水，搅拌并加入7.6 g氢氧化钠，溶解后加入30 g正癸酸，搅拌1 h，滴加硫酸锌水溶液（26.2 g七水硫酸锌+100 mL水），继续搅拌3 h，静置1 h，过滤，水洗3次，抽干，50 ℃烘箱中干燥8 h以上，得癸酸锌。1.3癸酸锌的结构表征1.3.1癸酸锌的傅里叶红外光谱（FTIR）将1~2 mg癸酸锌和正癸酸样品分别放在玛瑙研钵中，加入200 mg溴化钾粉末，混合均匀并研成粉末，加入模具中，在压片机上制成厚度约为1 mm的透明薄片。将薄片放入傅里叶变换红外光谱仪（Thermo Fisher Scientific，Niscolet IS 20）中进行扫描。扫描速率2-10 s/次，扫描范围4 000~400 cm-1。1.3.2癸酸锌的粒度分析取少量癸酸锌样品，使用Malvern 2000激光粒度分析仪进行粒度分析。1.3.3癸酸锌的X-射线衍射（XRD）分析使用X-射线衍射仪（Bruker AXS，Karlsruhe，德国）分析癸酸锌和硫酸锌的晶体结构。采用铜靶，管压40 kV，电流40 mA，测量范围5°~90°，扫描速率为3°/min，扫描方式为连续。1.4癸酸锌的抑菌活性1.4.1菌种的活化与溶液的配制LB培养基：牛肉膏0.5 g、蛋白胨1.5 g、氯化钠0.5 g，用去离子水定容至100 mL（固体培养基加入1.5 g琼脂粉）。将冻存的金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌菌株接种于灭菌的LB液体培养基中，置于摇床37 ℃、120 r/min培养至107 CFU/mL，保存。抗菌剂溶液的配制：称取一定量的癸酸锌溶于体积比为30%的乙醇中，超声波处理，搅拌振荡，制备癸酸锌悬浊液。1.4.2最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）测定采用二倍稀释法和平板划线法进行MIC和MBC的测定。准备数支加入1 mL LB液体培养基的5 mL EP管，将1 mL癸酸锌溶液加入第1支EP管中，混匀后吸取1 mL溶液，加入第2支EP管，依此操作直至加入最后一支EP管并弃去1 mL，使癸酸锌溶液浓度分别为2 000、1 000、500、250、125 mg/L。向含有不同浓度癸酸锌溶液的EP管内加入40 μL菌液（107 CFU/mL）作为处理组，另外分别设置对照组（加40 μL菌液不加癸酸锌组和加40 μL癸酸锌不加菌液组）。将各组试管置于摇床上，37 ℃培养18~24 h，测定每管的吸光度（OD600 nm值），以无菌体生长或未检测到OD600 nm值升高所对应的癸酸锌最终浓度为MIC。将经不同浓度癸酸锌处理后的菌液于LB固体培养基上划线，37 ℃培养24 h，培养基表面无菌生长的最低浓度即为癸酸锌的MBC。1.4.3相对电导率测定将菌液培养至107 CFU/mL后，5 000 r/min离心20 min，收集菌体，37 ℃ PBS缓冲液洗涤3次，等量无菌水重悬。将1 mL 10倍MIC的癸酸锌溶液和9 mL菌悬液充分混合，以等量无菌水作为对照。混合液于37 ℃ 120 r/min振荡培养，在不同时间（1、2、3、4、5、6、7、8、9 h）用电导仪（DDS-307，上海仪电科学仪器股份有限公司）测定电导率。1.4.4生物膜形成检测采用结晶紫染色法研究癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌生物膜形成的影响。产肠毒素大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别接种到含100 mL液体培养基的500 mL锥形瓶中，置于摇床中，37 ℃、120 r/min振荡，培养至菌液浓度为106 CFU/mL。取10 mL 10倍MIC浓度的癸酸锌和90 mL产肠毒素大肠杆菌或金黄色葡萄球菌悬浮液，加入500 mL的锥形瓶中，37 ℃孵育不同时间，以接种细菌的LB培养液作为对照。待菌液培养6、12、24、36、48和72 h后吸去培养基，蒸馏水洗涤3次，加入200 μL 0.1%的结晶紫，染色30 min后采用蒸馏水洗涤，使用200 μL 95%乙醇脱色，并用酶标仪（Bio-TEK ELx800，美国）测定595 nm处的吸光度。1.4.5DNA合成检测将10 mL癸酸锌和90 mL金黄色葡萄球菌或产肠毒素大肠杆菌悬液加入250 mL的锥形瓶中，置于摇床中，37 ℃、150 r/min孵育，以未添加癸酸锌的金黄色葡萄球菌或产肠毒素大肠杆菌为对照。每隔3 h取5 mL菌液，12 000 r/min离心2 min，收集金黄色葡萄球菌或产肠毒素大肠杆菌菌体。收集的菌体用溶葡萄球菌酶预裂解，并用细菌基因组DNA提取试剂盒提取金黄色葡萄球菌或产肠毒素大肠杆菌菌体的总DNA。1.4.6全细胞蛋白分析将10 mL 10倍MIC的癸酸锌和90 mL金黄色葡萄球菌或产肠毒素大肠杆菌悬液加入250 mL的锥形瓶中，置于摇床中，在37 ℃、150 r/min条件下孵育，以未添加癸酸锌的金黄色葡萄球菌或产肠毒素大肠杆菌为对照。每隔3 h取5 mL菌液，12 000 r/min离心10 min后弃上清，金黄色葡萄球菌或产肠毒素大肠杆菌细胞沉淀与50 μL无菌水和200 μL样品缓冲液充分混合（1.0 mol/L Tris-HCl、50%甘油、10% SDS、10% β-巯基乙醇和0.10%溴酚蓝，pH值6.8），煮沸10 min后恢复至室温。12 000 r/min离心10 min，取40 μL上清，进行SDS-PAGE检测。2结果与分析2.1癸酸锌的结构表征（见图1）由图1（a）可知，通过FTIR测定癸酸锌的结构，在2 915.59、2 848.17 cm-1处的吸收峰为甲基（—CH3）的重要特征峰；而在721.6 cm-1处出现的吸收峰是分子中亚甲基（—CH2—）的特征峰。当癸酸分子中羧酸的质子被锌离子取代，生成羧酸盐时，在1 689.42 cm-1附近的R-COO—红外特征峰消失，随之出现1 392~1 581 cm-1之间的两个谱带，此时R-COO—与Zn主要以络合结构的形式存在。由图1（b）可知，相比硫酸锌，癸酸锌的XRD图谱形成一个新的特征峰，衍射峰高且比较尖锐，表明癸酸锌晶型良好。由图1（c）可知，癸酸锌呈单一波峰，且粒径在0.631 μm以下和6.607 μm以上的颗粒均不到总体积的4%，表明制备出的癸酸锌一致性好，粒径较集中。图1癸酸锌的结构表征10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.016.F1a1（a）FTIR图10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.016.F1a2（b）XRD图10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.016.F1a3（c）粒度分布2.2癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的MIC与MBC（见表1）由表1可知，癸酸锌对金黄色葡萄球菌的MIC为250 mg/L，MBC为500 mg/L；对产肠毒素大肠杆菌的MIC为350 mg/L，MBC为800 mg/L。癸酸锌对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC均低于产肠毒素大肠杆菌，表明癸酸锌对金黄色葡萄球菌的抑菌效果强于产肠毒素大肠杆菌。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.016.T001表1癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的MIC与MBC菌种项目癸酸锌质量浓度/(mg/L)空白对照（30%乙醇）125250350500800金黄色葡萄球菌MIC-++++-MBC---++产肠毒素大肠杆菌MIC--+++-MBC----+注：“+”表示有抑菌效果；“-”表示无抑菌效果。2.3癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的相对电导率（见表2）相对电导率是衡量细胞膜通透性的重要指标，其值越大，表明电解质的渗漏越多，细胞膜的损伤越大。由表2可知，经癸酸锌处理的金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌相对电导率均高于对照组（P0.05），且随处理时间增加，两菌液的电导率均明显增加，表明癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌细胞膜的破坏作用随着时间增加而增强。相同处理时间下，经癸酸锌处理后的金黄色葡萄球菌相对电导率明显高于产肠毒素大肠杆菌，表明癸酸锌对金黄色葡萄球菌细胞膜的破坏作用高于产肠毒素大肠杆菌，与MIC和MBC结果一致。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.016.T002表2癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的相对电导率时间/h金黄色葡萄球菌产肠毒素大肠杆菌空白对照MIC空白对照MIC122.45±0.03b98.27±0.40a17.05±0.02b72.37±0.12a222.69±0.03b110.63±0.25a17.13±0.02b80.87±0.21a325.15±3.44b130.33±0.25a17.19±0.02b92.73±0.25a422.97±0.03b138.90±0.46a17.19±0.03b100.77±0.45a523.04±0.03b141.70±0.50a17.21±0.01b116.50±0.24a624.12±0.06b153.53±0.40a17.21±0.02b127.57±0.29a724.35±0.03b168.47±0.31a17.28±0.02b145.63±14.19a825.16±0.92b185.70±0.36a17.29±0.02b148.77±0.45a925.19±0.02b192.83±0.40a17.32±0.02b159.57±0.29a注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.4癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌吸光度的影响（见表3）由表3可知，与空白对照相比，癸酸锌处理12~72 h的金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌样品吸光度均明显降低（P0.05），随着处理时间的延长，吸光度逐渐上升；而空白对照几乎无变化。结果表明，加入癸酸锌使金黄色葡萄球菌膜破裂，从而导致膜内物质流出，加入MIC浓度的癸酸锌对金黄色葡萄球菌生物膜的形成起到抑制作用。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.016.T003表3癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌吸光度的影响时间/h金黄色葡萄球菌产肠毒素大肠杆菌空白对照MIC空白对照MIC60.092±0.0050.062±0.0030.064±0.0020.047±0.002120.125±0.004a0.068±0.003b0.441±0.474a0.051±0.003b240.188±0.005a0.076±0.001b0.162±0.002a0.059±0.001b360.258±0.005a0.081±0.001b0.205±0.003a0.064±0.001b480.388±0.005a0.090±0.002b0.200±0.121a0.071±0.001b720.483±0.004a0.097±0.002b0.390±0.003a0.077±0.001b2.5癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌DNA合成结果的影响（见图2）由图2（a）、图2（c）可知，取相同菌液量时，对照组基因组DNA的条带亮度高于癸酸锌处理组，表明癸酸锌可能对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的生长或DNA的合成具有抑制作用。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.016.F002图2癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌DNA合成结果的影响注：条带1~7从左到右依次为Marker、3 h对照组、3 h试验组、6 h对照组、6 h试验组、9 h对照组和9 h试验组。由图2（b）、图2（d）可知，将癸酸锌处理后的菌液浓度调平后发现，对照组DNA的条带亮度与癸酸锌处理组接近，表明癸酸锌无法抑制菌体DNA的合成，其主要通过抑制菌体的生长，减少DNA合成总量。2.6癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌全细胞蛋白分析的影响（见图3）由图3（a）、图3（c）可知，取相同菌液量时，对照组菌体蛋白的条带亮度高于癸酸锌处理组，表明癸酸锌可能对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的生长或蛋白质的合成有抑制作用。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.016.F003图3癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌全细胞蛋白分析的影响注：条带1~7从左到右依次为Ladder、3 h对照组、3 h试验组、6 h对照组、6 h试验组、9 h对照组和9 h试验组。由图3（b）、图3（d）可知，将癸酸锌处理后的菌液浓度调平后发现，对照组菌体蛋白的条带亮度与癸酸锌处理组接近，表明癸酸锌无法抑制菌体蛋白的合成，其主要通过抑制菌体的生长，减少菌体蛋白合成总量。3讨论高剂量氧化锌通常用于缓解断奶仔猪的断奶应激，然而添加高锌不仅会造成仔猪中毒，增加致病菌的耐药性，还会对环境造成一定污染[16]。传统饲粮中添加的锌主要为无机锌（氧化锌、硫酸锌、氯化锌等），但无机锌存在生物利用率低的特点。目前，饲料中常使用有机锌、螯合锌、纳米氧化锌、包被氧化锌等新型锌源添加剂[17]。ZHAO等[18]研究表明，癸酸钠可通过激活GPR-43信号通路来改善肠道上皮细胞的抗氧化能力、肠道形态和肠道物理屏障，提高小鼠的生长性能。与之类似，辛酸钠可通过调节肠道微生物代谢激活GPR-43，从而在改善肠道屏障功能和肠道健康方面发挥重要作用[19]。仔猪饲粮中添加丁酸钠或庚酸钠可通过调控仔猪结肠微生物区系、发酵模式以及宿主对F4+ ETEC刺激的响应发挥益生作用[20]。在仔猪饲粮中添加月桂酸钙可显著提高回肠组织的绒毛高度和隐窝深度，进而改善断奶仔猪的肠道功能和肠道健康指标[21]。由此可见，中链脂肪酸盐具有调控动物肠道菌群结构、改善肠道屏障功能和维护肠道健康的功效。3.1癸酸锌结构的表征分析大多数中链脂肪酸及其衍生物可直接添加于饲料或食品中，且具有广泛的抑菌性[22]。目前，有关脂肪酸及其衍生物构效关系的研究报道十分有限。研究发现，碳链长短、不饱和程度、双键位置、取代基团等不同均会对中链脂肪酸的抑菌效果造成不同程度的影响，但尚未得出清晰的结论[22]。本试验采用皂化-复分解法制备癸酸锌，并对癸酸锌的结构进行初步表征。FTIR结果显示，当癸酸分子中羧酸的质子被锌离子取代，生成羧酸盐时，在1 689.42 cm-1附近的R-COO—红外特征峰消失，随之出现的是1 392~1 581 cm-1之间的两个谱带，表明此时R-COO—与Zn主要以络合结构的形式存在，与许家友等[23]研究发现的月桂酸锌的R-COO—与Zn也存在络合结构的结果相似。XRD是物质晶型结构表征的重要手段[24]。与硫酸锌相比，癸酸锌XRD图谱形成新的特征峰，衍射峰高且比较尖锐，表明癸酸锌晶型良好[25]。粒度分析结果所示，癸酸锌呈单一波峰，且粒径在0.631~6.607 μm，表明制备出的癸酸锌一致性好，粒径较集中，也表明癸酸与硫酸锌反应较完全。目前，针对癸酸锌的合成与结构表征研究较少，未来还需借助单晶X射线衍射、能量色散X射线衍射、核磁共振等多种手段对癸酸锌的空间构型进一步表征，解析其抑菌特性。3.2癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的MIC与MBC的影响中链脂肪酸具有供能、抗菌、免疫调节和改善动物肠道形态等作用，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和幽门螺旋杆菌等革兰氏阳性和阴性菌均具有抑菌活性[26]。因此，本研究创新性地将癸酸与硫酸锌螯合，制备癸酸锌，并研究癸酸锌对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性及其机制。陈倩倩等[26]研究发现，月桂酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌均具有抑菌作用，MIC分别为1 000、2 000 mg/L。晏家友等[27]研究发现，柠檬酸铜对大肠杆菌和沙门氏菌的MIC均为6 250 mg/L。本试验发现，癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的MIC为250、350 mg/L，低于陈倩倩等[26]研究月桂酸锌和柠檬酸铜的MIC，表明癸酸锌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果优于月桂酸锌和柠檬酸铜，这可能是由于癸酸和锌的抑菌能力显著高于月桂酸和柠檬酸铜。此外，中链脂肪酸的碳链越短，抑菌活性越强[28]，这可能也是癸酸锌的抑菌活性强于月桂酸锌的原因，与陈晨[28]的研究结果一致。癸酸及其衍生物具有较好的抑菌和促生长效果。MCT（辛酸/癸酸，2 kg/t）可提高仔猪肠道紧密连接蛋白（ZO-1、claudin-1和occludin-1）的表达，进而提升小肠绒毛高度，改善肠道屏障功能，促进养分的吸收[29]。饲粮中添加0.2%的辛酸/癸酸+0.5%酸化剂（甲酸和丙酸）可增加仔猪的日增重，提高饲料转化率（35~56 d）。在断奶仔猪饲粮中添加0.3%癸酸和粪肠球菌（0.35×109 CFU/kg饲料）也具有类似效果[30]。目前，癸酸锌的抑菌效果及在动物生产中的应用尚未见报道。但从体外抑菌效果分析，癸酸锌具有类似甚至优于中链脂肪酸及其单甘油酯的效果以及替代饲用高剂量氧化锌的潜力，未来还需开展动物试验，深入研究癸酸锌的体抑菌效果。3.3癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的相对电导率的影响细菌生物膜破坏可导致菌体蛋白质、核酸等胞内组分外泄，同时胞内电解质渗漏会引起细胞代谢紊乱，进而导致菌体死亡[31]。细菌胞膜外离子或电解质的泄露增加，会导致溶液电导率的增加，可用于衡量细菌细胞膜通透性[32]。低浓度的结晶紫溶解后可进入活细菌细胞壁内，与细胞内的物质结合染成紫色。因此，常采用结晶紫染色法检测细菌生物膜的生成[33]。WANG等[34]研究发现，癸酸单甘油酯能够破坏金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的细胞膜，使其通透性增加，进而导致菌体蛋白质、核酸、金属离子等胞内组分外泄，但细胞壁结构完整[35]。此外，癸酸单甘油酯可降低大肠杆菌和绿脓杆菌细胞壁主要成分脂多糖（LPS）的吸光度，表明癸酸单甘酯可通过破坏细菌细胞壁抑制细菌生长[34]。本试验发现，经癸酸锌处理后，金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的相对电导率显著增加，表明癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的细胞膜具有较明显的破坏作用。3.4癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌生物膜的影响细菌生物膜指细胞通过聚合分子黏附在生物和非生物表面。一旦生物膜形成，生物膜的多糖壳可有效阻止抗生素进入细胞，从而促进抗菌耐药性发展[36]。本试验发现，癸酸锌对金黄色葡萄球菌的抑菌效果显著高于产肠毒素大肠杆菌，这与SCHLIEVERT等[37]和张璐[38]研究发现的中链脂肪酸及其衍生物对革兰氏阳性菌的抑菌活性强于革兰氏阴性菌的结果相似。原因可能是革兰氏阴性菌细胞壁组分LPS具有较强亲水性的O-特异性侧链，可阻止疏水性的中链脂肪酸与菌体结合。也有研究表明，产肠毒素大肠杆菌等革兰氏阴性菌具有独特的胞质间隙和外膜，结构较稳定；而金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌只有单层细胞壁[39]，更易受破坏。3.5癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌DNA合成结果的影响目前，中链脂肪酸及其衍生物的抑菌机制研究主要集中于对细胞壁的损伤、膜通透性的改变、蛋白质和核酸分子的合成等方面[40]，通过穿透细菌外膜，抑制菌体DNA、RNA等物质的合成，可达到抑菌的效果[41]。本试验发现，癸酸锌可抑制金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的菌体总蛋白和DNA的含量，且随时间的延长具有增强趋势。张文阁[42]研究显示，与沙门氏菌感染小鼠相比，添加0.5%的月桂酸及月桂酸单甘油酯可显著降低沙门氏菌的基因表达水平，且抑菌作用存在浓度依赖性，与本研究结果相似。本试验通过调平癸酸锌处理后的菌体浓度，发现癸酸锌处理前后的金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌菌体总DNA的含量差异不显著，表明癸酸锌是通过抑制金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的生长，减少DNA的总量。3.6癸酸锌对金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌全细胞蛋白的影响蛋白质的合成对细菌各种生化反应至关重要。本试验发现，癸酸锌可抑制金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的菌体总蛋白的含量，且随时间的延长呈增强的趋势。ZHANG等[43]研究发现，蝉虫草多糖可通过对全细胞蛋白的干扰对产肠毒素大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、副伤寒葡萄球菌和铜绿假单胞菌发挥抑菌作用。酪蛋白抗菌肽BCp12可使胞内蛋白质量浓度显著下降、菌体赖氨酸丙二酰化修饰水平明显下调等途径发挥抑菌作用[44]。但本试验调平癸酸锌处理后的菌体浓度后，发现癸酸锌处理前后的金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的菌体总蛋白含量差异不显著，表明癸酸锌是通过抑制金黄色葡萄球菌和产肠毒素大肠杆菌的生长，减少蛋白的总量。中链脂肪酸盐与多糖及抗菌肽结构组成不同，其抑菌机制也不尽相同，癸酸锌的体内外抑菌机制可从转录组、蛋白组等多方面开展深入研究。4结论本试验通过皂化-复分解法成功制备出晶型良好、粒径均一的癸酸锌，癸酸锌对产肠毒素大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均表现出较好的抑菌性，且癸酸锌对金黄色葡萄球菌的抑菌效果强于产肠毒素大肠杆菌。癸酸锌的抑菌效果可能通过增加产肠毒素大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性以及抑制菌体生物膜形成实现。此外，癸酸锌发挥抑菌效果，主要是抑制产肠毒素大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长，而不是抑制菌体基因组DNA和蛋白质的合成。