欧拉型藏羊在2018年被列入《国家畜禽物种资源名录》，被命名为欧拉羊[1]。欧拉羊是青海和甘肃的优良地方品种，养殖数量较多，并且分布区域较广[2]。欧拉羊具有抗寒、抗粗饲等优良生物学特性，可适应青海高海拔环境[3-4]。欧拉羊饲养方式主要以放牧为主，生产环境多为海拔3 400~4 800 m的高寒草甸[5]。欧拉羊因具有体型大、屠宰率高、肉用性能优良、繁殖性能好等特征，成为青藏高原地区重要的肉用品种资源[6-7]。青藏高原地区冷季长而暖季短，冷季牧草短缺，暖季牧草丰盛[8]，但暖季牧草水分相对含量高而干物质相对不足。团队在前期研究中发现，枯草期补饲能够改善欧拉羊血清抗氧化指标、生长代谢指标和免疫指标[9]，但关于秋季暖季补饲对欧拉羊血清生化指标的研究仍存在不足。本试验在牧草丰富的秋季（7—9月）对不同年龄阶段的欧拉羊进行补饲，研究秋季补饲对不同年龄阶段欧拉羊血清抗氧化、生长代谢和免疫相关指标的影响，为不同年龄阶段欧拉羊秋季补饲及高效养殖提供参考。1材料与方法1.1试验设计本试验于2022年7—9月在黄南藏族自治州河南县柯生乡托雷森热生态有机畜牧业牧民专业合作社进行，选取6、12、36月龄各年龄阶段健康且体况相近的欧拉羊母羊各24只，共72只。各年龄阶段欧拉羊随机分为放牧组（Ⅰ组）和放牧+补饲组（Ⅱ组），每组3个重复，每个重复4只羊。Ⅰ组自然放牧，由于牧区饲养设备及生产条件有限，生产较为粗放，在传统生产基础上对Ⅱ组不同年龄阶欧拉羊进行定量补饲（6月龄：100 g/d；12月龄：400 g/d；36月龄：600 g/d）。预试期10 d，正式试验期60 d。1.2饲养管理在自然放牧的基础上，每天18：00归牧时对Ⅱ组所有欧拉羊定量补饲1次饲料，Ⅰ组和Ⅱ组各年龄阶段的欧拉羊均自由采食、饮水，根据羊场的规定进行正常免疫。按照《肉羊饲养标准》配制饲粮，饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T001表1饲粮组成及营养水平（干物质基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米39.92代谢能/(MJ/kg)12.62豆粕12.99粗蛋白/%15.99小麦麸7.73钙/%0.79菜籽饼6.93总磷/%0.40石粉1.42赖氨酸/%0.67预混料1.01蛋氨酸/%0.26青干草30.00中性洗涤纤维/%33.34酸性洗涤纤维/%19.79注：1.预混料为每千克饲粮提供：VA 2 000 IU、VD 342 IU、VE 200 mg、铜18 mg、锰15 mg、铁50 mg、锌16 mg、碘0.36 mg、硒0.56 mg、钴0.08 mg。2.营养水平均为计算值。1.3样品采集补饲试验结束后，每组各年龄阶段随机选取8只欧拉羊，早晨空腹颈静脉采血，每只羊采血5 mL，静置30 min，4 ℃、3 000 r/min离心10 min，取上清液，置于-80 ℃保存。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能在试验第1、60 d，每组各年龄阶段选取8只欧拉羊在空腹状态下进行称重，计算平均日增重。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)1.4.2血清指标采用TecScan Safire2（TECAN公司，瑞士）多功能酶标仪和Elisa试剂盒（江苏酶标生物科技有限公司）检测血清中各项生化指标，按照说明书进行操作。血清生化指标包括谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、白蛋白（ALB）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、雌二醇（E2）、生长激素（GH）、胰岛素（INS）、尿素氮（BUN）、谷草转氨酶（AST）和总蛋白（TP）。血清免疫指标包括免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、球蛋白（GLB）、白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-6（IL-6）。血清抗氧化指标包括超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）。1.5数据统计与分析采用Excel对试验数据进行初步整理，采用SPSS 23.0软件进行独立样本t检验，结果均以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1秋季补饲对不同年龄阶段欧拉羊生长性能的影响（见表2）由表2可知，6、12月龄Ⅱ组欧拉羊母羊的末重和平均日增重均高于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T002表2秋季补饲对不同年龄阶段欧拉羊生长性能的影响项目Ⅰ组Ⅱ组P值6月龄初重/(kg/只)31.31±1.1730.86±0.980.83末重/(kg/只)39.83±1.03b42.36±1.38a0.03平均日增重/[g/(只·d)]142.33±21.70b192.54±18.09a0.0112月龄初重/(kg/只)42.09±3.1941.73±2.650.71末重/(kg/只)47.67±1.37b50.55±1.08a0.04平均日增重/[g/(只·d)]93.27±17.32b147.93±25.77a0.0136月龄初重/(kg/只)60.85±4.2761.47±3.610.52末重/(kg/只)64.27±3.0966.39±2.710.37平均日增重/[g/(只·d)]57.00±13.4382.00±19.180.18注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），无字母表示差异不显著（P0.05）；表3~表8与此同。2.2秋季补饲对不同年龄阶段欧拉羊血清生化指标的影响（见表3~表5）由表3可知，6月龄Ⅱ组欧拉羊血清E2和GH含量均高于Ⅰ组（P0.05），而Ⅱ组ALT、ALP、ALB、TC、INS、AST和TP水平均低于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T003表3秋季补饲对6月龄欧拉羊血清生化指标的影响项目Ⅰ组Ⅱ组P值ALT/(U/L)107.30±23.89a79.09±5.42b0.01ALP/(IU/L)13.44±3.97a8.81±0.49b0.00ALB/(g/L)358.10±45.74a309.77±15.59b0.01TC/(nmol/L)15.23±1.90a13.25±0.16b0.02TG/(μmol/L)1 357.11±196.301 426.43±64.030.06E2/(ng/L)144.44±4.55b170.20±19.07a0.00GH/(µg/L)14.53±1.71b26.37±5.70a0.04INS/(IU/mL)49.83±8.35a37.73±2.59b0.01BUN/(nmol/L)9.84±1.6616.26±1.270.42AST/(IU/L)340.91±27.92a316.06±5.83b0.00TP/(mg/L)591.11±123.41a434.68±27.88b0.00由表4可知，12月龄Ⅱ组欧拉羊血清ALP、TG、E2和AST水平均高于Ⅰ组（P0.05），而Ⅱ组ALB和TC水平均低于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T004表4秋季补饲对12月龄欧拉羊血清生化指标的影响项目Ⅰ组Ⅱ组P值ALT/(U/L)88.55±3.5381.11±5.520.20ALP/(IU/L)13.86±0.53b14.60±0.57a0.00ALB/(g/L)376.30±11.66a360.31±51.48b0.01TC/(nmol/L)14.60±0.57a14.49±1.39b0.04TG/(μmol/L)1 403.38±36.22b1 537.94±175.10a0.01E2/(ng/L)150.25±10.29b168.61±3.09a0.03GH/(µg/L)14.32±0.6516.16±0.960.32INS/(IU/mL)43.26±2.1540.34±6.840.05BUN/(nmol/L)13.49±0.8812.83±0.980.81AST/(IU/L)311.95±16.02b326±37.52a0.01TP/(mg/L)465.01±25.98483.82±59.100.19由表5可知，36月龄Ⅱ组欧拉羊血清ALP、E2和TP水平均高于Ⅰ组（P0.05），而Ⅱ组TC和AST水平均低于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T005表5秋季补饲对36月龄欧拉羊血清生化指标的影响项目Ⅰ组Ⅱ组P值ALT/(U/L)75.17±9.82121.69±20.450.07ALP/(IU/L)8.06±0.53b11.65±1.24a0.01ALB/(g/L)295.35±19.06270.09±11.010.06TC/(nmol/L)12.26±0.86a11.69±0.28b0.04TG/(µmol/L)1 311.36±40.561 325.75±26.390.47E2/(ng/L)137.66±11.55b207.11±54.82a0.00GH/(µg/L)16.33±1.8516.64±3.630.46INS/(IU/mL)38.43±3.8541.53±2.570.09BUN/(nmol/L)12.74±1.6318.28±3.030.22AST/(IU/L)274.93±14.68a273.99±2.74b0.00TP/(mg/L)356.95±12.82b416.53±5.09a0.032.3秋季补饲对不同年龄阶段欧拉羊血清免疫指标的影响（见表6~表8）由表6可知，6月龄Ⅱ组欧拉羊血清GLB水平高于Ⅰ组（P0.05），而Ⅱ组IgG和IL-2水平均低于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T006表6秋季补饲对6月龄欧拉羊血清免疫指标的影响项目Ⅰ组Ⅱ组P值GLB/(mg/L)271.05±12.47b277.32±36.35a0.01IgA/(mg/L)271.43±50.43292.36±33.940.11IgG/(mg/L)69.00±17.39a64.14±7.00b0.02IgM/(mg/L)1 885.63±202.81 935.06±192.600.78IL-1/(ng/L)54.10±16.9276.08±9.920.14IL-2/(ng/L)994.49±159.55a847.92±65.10b0.01IL-4/(ng/L)80.56±16.7869.17±11.790.08IL-6/(ng/L)126.92±16.23156.18±40.750.06由表7可知，12月龄Ⅱ组欧拉羊血清IL-2水平高于Ⅰ组（P0.05），而Ⅱ组血清GLB、IgG、IgM、IL-1、IL-4和IL-6水平均低于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T007表7秋季补饲对12月龄欧拉羊血清免疫指标的影响项目Ⅰ组Ⅱ组P值GLB/(mg/L)269.46±24.02a262.87±55.02b0.01IgA/(mg/L)326.50±20.53227.44±30.640.10IgG/(mg/L)70.59±0.43a64.17±8.75b0.01IgM/(mg/L)2 224.64±48.43a2 080.60±191.92b0.01IL-1/(ng/L)54.45±0.62a53.44±10.34b0.01IL-2/(ng/L)842.08±27.53b1 013.46±132.21a0.00IL-4/(ng/L)80.31±1.79a78.92±15.93b0.00IL-6/(ng/L)135.81±5.56a129.08±19.53b0.00由表8可知，36月龄Ⅱ组欧拉羊血清GLB、IgM、IL-4和IL-6水平均高于Ⅰ组（P0.05），而Ⅱ组血清IL-1水平显著低于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T008表8秋季补饲对36月龄欧拉羊血清免疫指标的影响项目Ⅰ组Ⅱ组P值GLB/(mg/L)317.64±92.28b344.03±53.19a0.01IgA/(mg/L)281.95±34.18281.01±33.880.91IgG/(mg/L)87.55±24.4387.55±24.430.37IgM/(mg/L)1 929.73±66.81b2 220.48±281.83a0.01IL-1/(ng/L)77.36±21.42a63.24±5.00b0.00IL-2/(ng/L)759.03±46.45848.55±65.150.23IL-4/(ng/L)88.66±5.28b174.93±38.31a0.01IL-6/(ng/L)100.82±0.60b193.41±27.94a0.002.4秋季补饲对不同年龄阶段欧拉羊血清抗氧化指标的影响（见表9~表11）由表9可知，6月龄时Ⅱ组欧拉羊血清GSH-Px活性高于Ⅰ组（P0.05），而Ⅱ组血清LDH和CAT活性均低于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T009表9秋季补饲6月龄欧拉羊血清抗氧化指标的影响项目SOD/(U/mL)LDH/(U/L)CAT/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(µmol/L)P值0.130.010.010.010.06Ⅰ组18.21±4.898.11±1.53a200.70±24.64a1 433.43±391.25b7.12±0.99Ⅱ组17.59±3.066.39±0.43b174.77±4.66b1 704.92±259.06a6.46±0.56注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。由表10可知，12月龄Ⅱ组欧拉羊血清SOD活性高于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T010表10秋季补饲12月龄欧拉羊血清抗氧化指标的影响项目SOD/(U/mL)LDH/(U/L)CAT/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(µmol/L)P值0.010.160.070.170.05Ⅰ组18.21±1.76b6.04±0.24200.61±10.711 325.58±113.407.17±0.58Ⅱ组20.30±3.89a6.68±0.60199.83±22.041 758.09±93.046.76±1.05由表11可知，36月龄Ⅱ组欧拉羊血清SOD、LDH和GSH-Px活性均高于Ⅰ组（P0.05），而Ⅱ组血清MDA水平低于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.001.T011表11秋季补饲36月龄欧拉羊血清抗氧化指标的影响项目SOD/(U/mL)LDH/(U/L)CAT/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(µmol/L)P值0.000.010.280.000.00Ⅰ组15.83±1.13b6.23±0.09b162.50±1.291 757.63±160.24b7.79±1.84aⅡ组33.54±11.09a7.62±0.63a171.74±0.842 444.86±864.95a5.82±0.12b3讨论3.1秋季补饲对不同年龄欧拉羊生长性能的影响暖季牧草水分相对含量高而干物质相对不足，在牧草丰富的暖季进行补饲，可以有效提高家畜的生长性能[10]。曾钰等[11]研究表明，在牧草旺盛的暖季，补饲舔砖可显著提高牦牛的生长性能。戴东文等[12]研究表明，与对照组相比，给牦牛补饲0.5、1.5、2.5 kg/d精料后，平均日增重分别提高了76.91%、170.27%和286.42%，暖季补饲明显增加了牦牛的生长速度。本试验中，6、12月龄Ⅱ组欧拉羊的平均日增重均高于Ⅰ组，而36月龄Ⅱ组欧拉羊的平均日增重与Ⅰ组无显著差异。这可能是因为幼龄期动物处于快速发育阶段，每天的体重增长较快，青年期动物生长速度开始逐渐缓慢，但体重仍然在增加，进入成年期后，动物生长速度几乎停止，体重基本稳定，没有明显的增长。3.2秋季补饲对不同年龄欧拉羊血清生化指标的影响动物机体血清生化指标可以反映物质代谢水平和机体健康情况[13]。TP和ALB水平能够反映蛋白质代谢水平以及肝脏合成蛋白质的能力[14-15]。刘梦等[16]研究表明，6、36月龄时无角型欧拉羊TP和ALB含量均高于有角型欧拉羊，表明补饲可以增强无角型欧拉羊对蛋白质消化吸收能力。本试验中，12、36月龄时Ⅱ组TP水平均高于Ⅰ组，表明秋季补饲对不同年龄阶段欧拉羊机体内蛋白质合成具有积极作用。GH可通过调控蛋白质与脂肪代谢影响动物机体的生长发育[17]。赵彦光等[18]研究表明，随着精饲料水平的增加，萨能奶山羊机体中GH水平也呈现上升的趋势。本试验中，6月龄Ⅱ组欧拉羊GH水平高于Ⅰ组，与龚飞飞等[19]研究结果一致。因幼龄期是动物生长代谢最旺盛的时期，在幼龄期补饲精料有利于促进欧拉羊的生长发育。动物机体生殖器官、第二性征的生长发育受E2调控[20]。本试验中，6、12、36月龄Ⅱ组欧拉羊E2水平均显著高于Ⅰ组，与王宏博等[21]研究结果一致，表明补饲促进了幼龄母羊的性成熟，使成年母羊更容易发情，进入生产周期。3.3秋季补饲对不同年龄欧拉羊血清免疫指标的影响GLB含量可在一定程度上反映机体的健康状况[22]。当动物机体发生初次体液免疫时，由IgM参与反应，IgG作为抗体与抗原发生反应[23]。本试验中，6、36月龄时Ⅱ组欧拉羊GLB水平均显著高于Ⅰ组，与韩翠等[24]的研究结果相似。王彩莲等[25]研究表明，与冷季放牧组（A组）相比，补饲提高了藏系绵羊血清中IgA、IgG和IgM含量。本试验中，6、12月龄时Ⅱ组欧拉IgA、IgM水平均高于Ⅰ组，表明秋季补饲提高了不同年龄阶段欧拉羊的免疫能力。B细胞的分化和分泌与IL-6有关，T淋巴细胞增殖与IL-2有关[26]。在本试验中，36月龄时Ⅱ组血清IL-6、IL-2水平高于Ⅰ组，与李光梅等[27]的研究结果相似，表明在秋季进行补饲可以提高不同年龄欧拉羊的机体免疫能力。3.4秋季补饲对不同年龄欧拉羊血清抗氧化指标的影响动物机体细胞内自由基的产生和消除处于动态平衡状态[28]，因细胞内有抗氧化酶的保护，如SOD、LDH、GSH-Px等抗氧化酶通过一系列的化学反应消除超氧化物和过氧化物，使动物机体的内环境达到稳定状态，确保动物可以进行正常的生命活动[29]。贺钰云[30]研究表明，在冷季进行补饲显著提高了藏羊血清中SOD的活性。本试验中，12、36月龄Ⅱ组欧拉羊SOD、LDH活性均高于Ⅰ组，6、12、36月龄Ⅱ组欧拉羊GSH-Px活性均高于Ⅰ组，说明在秋季进行补饲可以改善不同年龄阶段欧拉羊血清抗氧化性能，与韩翠等[31]研究结果相似。自由基与脂质发生化学反应的最终产物为MDA，其含量直接反映动物机体的抗氧化能力[32]。吴文旋等[33]研究发现，补饲精料可以提高山羊血清中SOD、GSH-Px活性，降低MDA含量。本试验中，6、12、36月龄Ⅱ组欧拉羊MDA水平均低于Ⅰ组，36月龄时达到差异显著水平，6月龄和12月龄时均未达到差异显著水平，说明在秋季进行补饲能够改善不同年龄阶段欧拉羊的抗氧化能力。4结论本研究表明，秋季补饲可促进6月龄生产母羊快速发育成熟，增强不同年龄阶段欧拉羊生长代谢能力，有效改善欧拉羊免疫机能和抗氧化能力。