植物提取物是从植物中提取的高效活性成分,通常含有多糖、酚酸、黄酮和生物碱等成分[1-3],具有多种生物学功能,如抗氧化、调节免疫、抗炎、抗肿瘤、抗应激和调节胃肠道菌群等[4-6]。近年来,植物提取物作为饲料添加剂的应用研究逐渐增多。与抗生素相比,植物提取物具有低残留、无耐药和安全绿色等特点,在动物养殖中应用具有较好的发展前景[7-8]。蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.)为菊科多年生草本植物,富含VA、VC、VB2、VB1、VB6、叶酸、钾、铁、钙、镁和铜等成分[9-10]。蒲公英中含有多种生物活性成分,如蒲公英醇、蒲公英素、胆碱、有机酸和菊糖等[11];性味甘、微苦、寒;归肝、胃经;具有利尿、缓泻、退黄疸和利胆等功效[12]。目前,蒲公英及其提取物在动物养殖中已有部分应用研究结果,尤其是在水产生物和生猪养殖中应用较多。在饲料中添加200 mg/kg的蒲公英提取物可以显著提高加州鲈的生长性能及机体的抗氧化性能[13]。在饲粮中添加500 g/t的蒲公英提取物可以提高育肥猪的生长性能,降低腹泻率,降低血清中胆固醇及甘油三酯水平,改善血脂代谢功能[14]。毛金菊等[15]研究了蒲公英对肉鸡生长性能、消化酶活性及养分表观代谢率的影响,发现1 000 mg/kg的蒲公英粉末可以提高肉鸡的代谢率及消化酶活性,进而促进机体吸收饲粮中的营养成分,提高生长性能。目前,关于蒲公英提取物在肉鸡血清生化指标、免疫力方面的研究比较少。因此,本试验研究不同水平的蒲公英提取物对肉鸡生长性能、血清生化指标及免疫力的影响,为蒲公英提取物高效地应用于肉鸡养殖提供参考。1材料与方法1.1蒲公英提取物蒲公英提取物为棕黄色粉末,主要由多糖(6.5%)和黄酮(3.8%)组成。1.2试验设计将2 000只健康的1日龄的AA肉鸡分成4组,每组10个重复,每个重复50只肉鸡。各组肉鸡分别饲喂含有0(对照组)、0.1%、0.2%及0.4%的蒲公英提取物的试验日粮。试验期42 d。1.3基础饲粮试验AA肉鸡的基础饲粮参考《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)中肉鸡营养需要标准配制,其组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.008.T001表1基础饲粮组成及营养水平项目1~21日龄22~42日龄原料组成/%玉米61.9060.72面粉5.005.00玉米蛋白粉3.004.00花生粕2.003.00豆粕22.0020.00豆油1.503.00石粉1.201.20磷酸氢钙1.451.23氯化胆碱0.650.55食盐0.300.30预混料1.001.00合计100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.2713.05粗蛋白/%21.0719.85钙/%1.070.96磷/%0.490.47赖氨酸/%1.421.24蛋氨酸/%0.650.54苏氨酸/%0.980.86注:1.预混料由信阳富多佳饲料有限公司提供。2.营养水平中粗蛋白和钙为实测值,其余均为计算值。1.4饲养管理试验开始前,鸡舍熏蒸消毒。肉鸡第一周温度控制在32~33 ℃,一周之后温度逐渐降低至27 ℃左右,湿度控制在65%左右,舍内通风适宜。肉鸡的免疫程序按照肉鸡日常养殖管理规定进行。肉鸡自由采食和饮水。每日观察肉鸡的健康状态。1.5样品采集试验第42 d,肉鸡禁食12 h后,从每个重复中选择2只肉鸡,翅下静脉采血10 mL,静置2~3 h,4 000 r/min离心8 min,收集血清,用于分析血清生化指标及免疫指标。1.6测定指标及方法1.6.1生长性能试验第1、21、42 d,称量肉鸡的空腹体重,记录每天的采食量,用于分析肉鸡在1~21、22~42、1~42 d阶段的平均日采食量、平均日增重及料重比。平均日采食量=总采食量/(试验鸡数量×试验天数)(1)平均日增重=(末重-初重)/(试验鸡数量×试验天数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.6.2血清生化指标使用迈瑞BS-280全自动生化分析器检测血清总蛋白、白蛋白、甘油三酯、胆固醇、尿素氮、谷草转氨酶、谷丙转氨酶及血糖等指标。检测试剂盒由上海远慕生物科技有限公司提供。1.6.3免疫指标试验第42 d,每个重复屠宰2只肉鸡,取脾脏、法氏囊及胸腺,称重,用于分析肉鸡免疫器官指数。免疫器官指数=免疫器官重/宰前活重(4)血清新城疫抗体效价参照《新城疫诊断技术》(GB/T 16550—2020)设计的血凝抑制试验进行测定。血清免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G采用酶联免疫吸附法测定,试剂盒购自上海江莱生物有限公司。1.7数据统计与分析采用SAS 2009软件的Mix模型对试验数据进行统计分析,采用LSD法进行多重比较。结果以平均值和标准误(SEM)表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同水平的蒲公英提取物对肉鸡生长性能的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,0.2%和0.4%的蒲公英提取物显著提高了肉鸡42日龄体重(P0.05);22~42日龄,0.2%的蒲公英提取物显著提高了平均日增重(P0.05),0.2%和0.4%的蒲公英提取物显著降低了料重比(P0.05);1~42日龄,0.2%和0.4%的蒲公英提取物显著提高了平均日增重(P0.05),0.2%的蒲公英提取物显著降低了料重比(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.008.T002表2不同水平的蒲公英提取物对肉鸡生长性能的影响项目对照组0.1%组0.2%组0.4%组SEMP值1~21日龄1日龄体重/(g/只)45.5545.6045.5045.501.050.83521日龄体重/(g/只)805.59807.35825.60829.5015.290.318平均日增重/[g/(只·d)]36.1936.2737.1437.331.970.175平均日采食量/[g/(只·d)]56.4557.1756.7756.897.650.285料重比1.551.581.531.520.140.41922~42日龄42日龄体重/(g/只)2 556.40b2 684.29ab2 874.39a2 759.52a73.190.045平均日增重/[g/(只·d)]83.37b89.38ab97.56a91.91ab3.940.033平均日采食量/[g/(只·d)]170.56171.06172.16172.306.100.729料重比2.05a1.91ab1.76b1.87b0.110.0221~42日龄平均日增重/[g/(只·d)]59.78b62.83ab67.35a64.62a3.080.039平均日采食量/[g/(只·d)]107.65109.33111.76112.857.050.693料重比1.80a1.74ab1.66b1.75ab0.140.012注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或者无字母表示差异不显著(P0.05);表3与此同。2.2不同水平的蒲公英提取物对肉鸡血清生化指标的影响(见表3)由表3可知,与对照组相比,0.2%和0.4%的蒲公英提取物显著提高了肉鸡血清中总蛋白和白蛋白水平(P0.05),显著降低了肉鸡血清中尿素氮、胆固醇和甘油三酯水平(P0.05);0.2%的蒲公英提取物显著降低了肉鸡血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.008.T003表3不同水平的蒲公英提取物对肉鸡血清生化指标的影响项目对照组0.1%组0.2%组0.4%组SEMP值总蛋白/(g/L)32.45b34.74ab36.20a35.84a1.090.047白蛋白/(g/L)14.29b15.39ab16.48a16.63a0.930.039球蛋白/(g/L)18.1619.3519.7219.211.370.093尿素氮/(mmol/L)6.38a5.77ab5.02b4.85b0.270.035谷草转氨酶/(U/L)274.39a253.97ab236.17b240.46b16.390.042谷丙转氨酶/(U/L)684.29a671.90a621.08b654.96ab39.470.047血糖/(mmol/L)10.3810.2010.1710.030.320.394甘油三酯/(mmol/L)0.74a0.67ab0.61b0.57b0.040.042胆固醇/(mmol/L)3.76a3.05ab2.66b2.32b0.180.0322.3不同水平的蒲公英提取物对肉鸡免疫功能的影响(见表4、表5)由表4可知,与对照组相比,0.2%和0.4%的蒲公英提取物显著提高了肉鸡42日龄的脾脏指数和胸腺指数(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.008.T004表4不同水平的蒲公英提取物对肉鸡免疫器官指数的影响项目脾脏指数法氏囊指数胸腺指数对照组0.91b0.451.89b0.1%组0.97ab0.461.96ab0.2%组1.17a0.482.12a0.4%组1.22a0.492.20aSEM0.080.020.11P值0.0410.5290.038注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或者无字母表示差异不显著(P0.05);表5与此同。g/kg由表5可知,与对照组相比,0.1%、0.2%和0.4%的蒲公英提取物显著提高了新城疫抗体效价(P0.05),0.2%和0.4%的蒲公英提取物显著提高了免疫球蛋白M、免疫球蛋白A和免疫球蛋白G水平(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.008.T005表5不同水平的蒲公英提取物对肉鸡免疫球蛋白及新城疫抗体效价的影响项目新城疫抗体效价/lg2免疫球蛋白M/(g/L)免疫球蛋白A/(g/L)免疫球蛋白G/(g/L)对照组4.21b0.73b0.21b1.32b0.1%组5.75a0.84ab0.27b1.58b0.2%组5.93a0.92a0.42a2.17a0.4%组6.14a0.94a0.43a2.42aSEM0.280.050.030.01P值0.0120.0320.0460.0313讨论3.1蒲公英提取物对肉鸡生长性能的影响肉鸡的平均日增重、料重比等数据与养殖的经济效益密切相关。蒲公英提取物中的多糖和黄酮等活性物质可以增强动物机体的抗应激能力及抗病力[16-17]。本研究中,肉鸡采食适量的蒲公英提取物提高了平均日增重,降低了料重比,表明蒲公英提取物可以有效改善肉鸡的生长性能,提高饲料的利用率。在文昌鸡饲粮中添加500 mg/kg的蒲公英提取物可以改善肠道形态结构,提高机体的抗氧化功能,改善部分血清生化指标,进而提高生长性能[18]。邓海涛[19]研究了蒲公英粉对肉鸡的生长性能及抗病力的影响,发现1%的蒲公英粉可以显著提高肉鸡的采食量、日增重及饲料转化率,降低肉鸡疫病的发病率。赵阳[20]研究了酶解的蒲公英对肉鸡生长性能及免疫力的影响,发现1 000 mg/kg的酶解蒲公英可以增强机体免疫力,保护肠道黏膜,进而提高生长性能。蒲公英及其提取物改善肉鸡的生长性能,与其富含的营养物质及活性物质相关,其中的营养物质可以为机体提供营养,活性物质可以调节机体生理功能,提高机体健康,促进机体对饲粮中养分的消化吸收[21-22]。3.2蒲公英提取物对肉鸡血清生化指标的影响动物血清生化指标可以判断机体的健康状态。谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性可以反映肝功能状态,当机体发生炎症反应,肝脏中的谷丙转氨酶和谷草转氨酶会流向血液中;胆固醇和甘油三酯水平可以反映血脂代谢功能;总蛋白、白蛋白、球蛋白及尿素氮水平可以反映体内蛋白质的代谢状态[23-24]。本研究中,肉鸡饲粮中添加0.2%和0.4%的蒲公英提取物提高了血清中总蛋白和白蛋白水平;降低了尿素氮、胆固醇和甘油三酯水平;添加0.2%的蒲公英提取物降低了谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性。本试验结果表明,肉鸡采食适量的蒲公英提取物可以促进蛋白质沉积,改善肝功能及血脂代谢。王坤等[25]研究了蒲公英多糖对肉鸡生长及血清生化指标的影响,发现饮水中添加5 g/L的蒲公英多糖可以降低肉鸡血清中胆固醇和甘油三酯的水平。蒲公英多糖可以降低羔羊血清中尿素氮、甘油三酯及胆固醇水平[26]。100 mg/kg的蒲公英提取物可以降低鲤鱼血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶、肌酐、胆固醇及血糖的水平,改善了血液参数[27]。以上研究结果均表明,适量的蒲公英及其提取物可以改善肝功能,调节血脂,促进机体对蛋白质的吸收利用。蒲公英具有较好的抗炎、抑菌功能,利于机体抵抗外界不利因素及病原菌,从而增强了机体的健康[28]。3.3蒲公英提取物对肉鸡免疫功能的影响家禽免疫器官的发育与机体的免疫功能息息相关。本试验中,与对照组相比,0.2%和0.4%的蒲公英提取物可以有效提高肉鸡42日龄的脾脏指数和胸腺指数,表明蒲公英提取物改善了肉鸡机体的免疫功能。郭梦宇等[29]研究发现,蒲公英多糖具有改善肉鸡免疫器官指数的趋势。王坤等[25]研究发现,蒲公英多糖可以提高肉鸡的胸腺指数及脾脏指数。以上研究结果不完全相同的原因可能是蒲公英提取物活性成分及含量不同导致的。新城疫是一种急性白血病,当肉鸡注射新城疫疫苗后,机体会产生相应抗体,抗体效价越高,表明机体抗新城疫病毒的能力越强[30]。本研究中,与对照组相比,0.1%、0.2%、0.4%的蒲公英提取物可以有效提高新城疫抗体效价,表明适量的蒲公英提取物提高了机体对抗新城病毒的能力。在郭梦宇等[29]、王树艳等[30]、杨云云等[31]的研究中也得到类似的结果。上述研究表明,蒲公英提取物可以提高动物机体对抗新城疫病毒的能力,提高机体免疫功能。体内免疫球蛋白的水平可以反映机体免疫力的强弱。本试验中,0.2%和0.4%的蒲公英提取物显著提高了肉鸡血清免疫球蛋白M、免疫球蛋白A和免疫球蛋白G水平,表明适量的蒲公英提取物可以提高肉鸡机体的体液免疫功能。单舒萱等[32]研究了蒲公英多糖对肉鸡生长、免疫及血清生化指标的影响,发现1~4 g/kg的蒲公英多糖可以提高肉鸡血清中免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M的水平,与本研究结果类似,但蒲公英提取物的添加剂量不同。郭梦宇等[29]研究发现,蒲公英多糖可以极显著提高肉鸡21日龄的免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G的水平,极显著提高42日龄血清中免疫球蛋白G和免疫球蛋白M水平。原因是蒲公英提取物中的活性物质可以刺激机体产生相应的免疫细胞,并促进免疫细胞激活与增殖,分泌相应的免疫球蛋白对抗病原菌,从而提高机体的抗病力[33]。4结论本试验中,饲粮中添加适量蒲公英提取物提高了肉鸡的生长性能及免疫力,改善了血清生化指标,且蒲公英提取物的适宜添加水平为0.2%。
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