伊犁马主要产自新疆维吾尔自治区伊犁地区,是具有国家行业标准的乘用型马品种。与其他国产马品种相比,伊犁马的体型结构和运动性能等方面具有较大优势[1]。目前,关于马匹运动性能与心脏的相关研究主要集中在疾病诊断[2]、辅助疾病治疗[3]、运动影响[4]、健康状态评估[5]及行为学[6]等。饲粮中适宜水平的能量、蛋白质、维生素及矿物质均可以维持马匹的心脏健康,过度饲喂会导致马匹肥胖,从而增加心脏负担[7]。在进行长期运动训练时,马匹的心脏会出现不同的适应性反应,使心脏形态发生改变,从而影响心脏功能。并且马匹的性激素及心率等差异均会对心脏结构与功能产生影响。目前,我国对伊犁马心脏的研究较少,导致开展马匹心脏功能评估期间无参考范围。因此,本研究旨在初步探究不同性别伊犁马的心脏生长发育情况,为进一步评估伊犁马匹心脏功能提供参考。1材料与方法1.1试验设计及饲养管理本试验所采用马匹为新疆维吾尔自治区地方国营伊犁种马场2岁伊犁马30匹,分为公、母两组,即公马组15匹,母马组15匹。饲养管理和饲养环境相同,所有马匹健康状况良好。基础饲粮组成及营养水平见表1,每匹马分别饲喂干牧草和精料8、4 kg/d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.012.T001表1基础饲粮组成及营养水平(干物质基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米17.28粗蛋白/%12.69麸皮5.26粗脂肪/%1.77豆粕9.26中性洗涤纤维/%42.23磷酸二氢钙1.15酸性洗涤纤维/%37.98食盐0.63粗灰分/%8.16预混料0.31钙/%0.86蛋氨酸0.19磷/%0.41干牧草65.92消化能/(MJ/kg)9.03注:1.预混料为每千克饲粮提供:VA 14 000 IU、VB1 21.29 mg、VB2 336.5 mg、VB6 1.27 mg、VD 2 300 IU、VE 500 IU、生物素6 mg、泛酸4.56 mg、烟酰胺12.17 mg、Cu 43.24 mg、Fe 111.94 mg、Mn 183.27 mg、Zn 176.04 mg、I 29.69 mg、Se 42.29 mg、Co 4.06 mg。2.营养水平均为实测值。1.2试验设备及试剂迈瑞M6兽用便携式彩色多普勒超声系统(迈瑞公司)、医用超声耦合剂、75%医用酒精。1.3测定指标及方法1.3.1体尺指标将马匹牵至保定架固定,使用测杖、软尺测定体尺、体高、体长、胸围及管围。1.3.2心脏结构、功能指标试验在2.5 MHz条件下使用迈瑞M6兽用便携式彩色多普勒超声系统在马匹右胸第3到第4或第4到第5肋骨之间进行2D和M型成像各2次,最大成像深度为30 cm,换能器的焦点被固定在5 cm处,最大扇形角为110°。所有超声心动图检查均由同一操作者进行,每个参数取2次测量结果的平均值。采集心脏舒张末期和收缩末期的B模式右胸骨旁长轴、B模式右胸骨旁左室流出道、B/M模式右胸骨旁短轴静态及动态图像。记录心率区间在32~45 bpm的不连续3个心动周期图像,取平均值。在进行超声心动图记录时,使用心内标志物确定位置。在右胸骨旁短轴获得共计32个心脏结构、功能指标。计算左心室短轴缩短分数(FS)、左心室射血分数(EF)、左室射血时间(ET)、每搏量(SV)、每搏量指数(SI)、心输出量(CO)、心排量指数(CI)、心脏指数(VTI)、舒张末期左室容量(EDV)、收缩末期左室容量(ESV)、舒张期平均左心室壁厚(MWTd)、相对舒张期壁厚(RWTd)、左室射血时间(LVET)、左室心肌质量(LVM)及左室心肌质量指数(LV MASS-I)等心脏功能及结构指标。FS=LVIDd-LVIDsLVIDd×100% (1)EF=EDV-ESVEDV×100% (2)EDV=7×LVIDd3(2.4+LVIDd) (3)ESV=7×LVIDs3(2.4+LVIDs) (4)SVmL=EDVmL-ESVmL (5)COL/min=SVmL×HRbmp1 000 (6)SI=SVmL体表面积m2 (7)CI=COL/min体表面积m2 (8)MWTd=LVFWd+IVSd2 (9)RWTd=IVSd+LVFWdLVIDd (10)VTI=HRbpm×SI1 000 (11)LVET=EF(%)HR(bpm) (12)LVM=1.04×[(LVIDd+LVFWd+IVSd)3- LVIDd3]-13.6 (13)LV MASS-I=LVMg体表面积m2 (14)式中:HR为心率;LVIDd为舒张末期左心室内径(cm);LVIDS收缩末期左心室内径(cm);IVSd为舒张末期室间隔厚度(cm);LVFWd为舒张末期左心室游离壁厚度(cm)。1.4数据统计与分析采用Excel软件对测量收集的心脏结构、心脏功能以及体尺数据进行初步整理和筛选,SPSS 26.0软件进行独立样本t检验。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1不同性别2岁伊犁马的体尺测定结果(见表2)由表2可知,纳入本研究的30匹2岁伊犁马中,公马与母马的体重、体表面积、体长、胸围及管围等体尺均无显著差异(P0.05)。公马的体重、体表面积、体高、体长、胸围及管围的变异系数分别为9.35%、6.19%、2.19%、3.85%、4.05%和3.82%;母马的体重、体表面积、体高、体长、胸围及管围的变异系数分别为7.81%、5.15%、3.54%、3.88%、3.46%和4.58%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.012.T002表2不同性别2岁伊犁马的体尺测定结果项目测定结果项目变异系数/%公马母马公马母马体重/kg386.00±36.08403.77±31.47体重9.357.81体表面积/m25.34±0.335.49±0.28体表面积6.195.15体高/cm151.00±3.31150.47±5.33体高2.193.54体长/cm156.00±6.00159.49±6.19体长3.853.88胸围/cm168.27±6.81171.47±5.93胸围4.053.46管围/cm17.80±0.6818.13±0.83管围3.824.582.22岁伊犁马心脏结构指标测定结果(见表3)由表3可知,收缩末期左室游离壁厚度(LVFWs)、收缩末期室间隔厚度(IVSs)、左室左右径(LV minor)、二尖瓣内径(MVD)、舒张末期左心室内径(LADd)、收缩末期左心房内径(LADs)、AODd、收缩末期主动脉根部内径(AODs)、PAd、收缩末期肺动脉内径(PAs)及变异系数相对较小,收缩末期右心室内径(RVDs)和RWTd变异系数相对较大。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.012.T003表32岁伊犁马的心脏结构指标测定结果项目平均值标准差最小值最大值项目变异系数/%LVFWd/cm2.030.391.442.74LVFWd0.19LVFWs/cm4.080.352.874.69LVFWs0.09LVIDd/cm9.320.9610.838.37LVIDd0.10LVIDS/cm4.730.786.273.34LVIDS0.16IVSd/cm2.440.333.061.83IVSd0.14收缩末期室间隔厚度(IVSs)/cm4.240.365.113.23IVSs0.08舒张末期右心室内径(RVDd)/cm2.700.493.711.77RVDd0.18收缩末期右心室内径(RVDs)/cm1.780.572.810.66RVDs0.32左室左右径(LV minor)/cm15.410.8917.2013.43LV minor0.06二尖瓣内径(MVD)/cm8.940.8010.177.54MVD0.09舒张末期左心房内径(LADd)/cm8.930.7010.237.94LADd0.08收缩末期左心房内径(LADs)/cm10.560.5711.409.53LADs0.05舒张末期主动脉根部内径(AODd)/cm4.930.305.574.37AODd0.06收缩末期主动脉根部内径(AODs)/cm5.620.426.304.90AODs0.07LAD/AOD0.550.050.630.47LAD/AOD0.09收缩末期肺动脉内径(PAd)/cm4.010.335.333.27PAd0.08舒张末期肺动脉内径(PAs)/cm5.000.445.464.16PAs0.09MWTd/cm2.070.612.621.02MWTd0.29RWTd/cm0.490.190.840.37RWTd0.39LV MASS-I365.55131.95272.96575.83LV MASS-I0.36VTI4.780.863 211.873.21VTI0.33LVM/kg2 136.96306.261 515.513 261.46LVM0.142.32岁伊犁马心脏功能指标测定结果(见表4)由表4可知,EF、ET及LAD/AOD的变异系数相对较小;CI、SI、SV、LV MASS-I及VTI的变异系数相对较大,表明上述指标在伊犁马群体内离散程度较高,个体间差异大。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.012.T004表42岁伊犁马的心脏功能指标测定结果项目平均值标准差最小值最大值项目变异系数/%EDV/mL904.8194.85547.191 279.48EDV0.10ESV/mL224.4963.99139.33394.23ESV0.29EF/%0.860.050.770.94EF0.06ET/s0.640.060.500.73ET0.09SV/mL618.95188.58386.16885.25SV0.30SI115.4735.7076.00157.90SI0.31CO/(mL/min)25 399.633 963.9016 318.9137 941.74CO0.16CI4 295.711 379.653 211.87687.11CI0.32FS/%49.316.4638.5961.73FS0.132.4不同性别2岁伊犁马心脏结构、功能指标比较2.4.1不同性别2岁伊犁马心脏结构差异性分析(见表5)由表5可知,公马的RVDd和LV minor均显著高于母马(P0.05);母马的MVD显著大于公马(P0.05),而PAd极显著高于公马(P0.01)。公马的LVFWd、LVFWs、LVIDS、IVSs、RVDd、RVDs、MWTd、RWTd及LVM的变异系数分别为17.87%、11.36%、17.67%、10.00%、13.50%、38.33%、21.74%、10.42%和13.40%,其余指标的变异系数均低于10.00%。母马的LVFWd、LVIDS、IVSd、RVDd、RVDs、PAd、MWTd、RWTd及LVM变异系数分别为17.17%、13.98%、15.10%、19.37%、22.78%、10.51%、22.60%、21.57%和20.68%,其余指标的变异系数均低于10.00%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.012.T005表5不同性别2岁伊犁马心脏结构差异性分析项目测定结果项目变异系数/%公马母马公马母马LVFWd/cm2.07±0.371.98±0.34LVFWd17.8717.17LVFWs/cm3.96±0.454.18±0.29LVFWs11.366.94LVIDd/cm9.52±0.659.24±0.64LVIDd6.836.93LVIDs/cm4.81±0.854.65±0.65LVIDS17.6713.98IVSd/cm2.40±0.202.45±0.37IVSd8.3315.10IVSs/cm4.20±0.424.29±0.35IVSs10.008.16RVDd/cm2.89±0.39a2.53±0.49bRVDd13.5019.37RVDs/cm1.80±0.691.80±0.41RVDs38.3322.78LV minor/cm15.86±0.62a15.06±1.00bLV minor3.916.64LADd/cm8.83±0.689.27±0.57LADd7.706.15LADs/cm10.47±0.6010.78±0.35LADs5.733.25AODd/cm4.79±0.275.14±0.19AODd5.643.70AODs/cm5.73±0.345.60±0.39AODs5.936.96MVD/cm8.72±0.69b9.27±0.59aMVD7.916.36PAd/cm3.89±0.22B4.28±0.45APAd5.6610.51PAs/cm5.13±0.264.88±0.42PAs5.078.61MWTd/cm2.07±0.452.08±0.47MWTd21.7422.60RWTd/cm0.48±0.050.51±0.11RWTd10.4221.57LVM/cm2 241.07±300.302 223.09±459.84LVM13.4020.68注:同行数据肩标不同大写字母表示差异极显著(P0.01),不同小写字母表示差异显著(P0.05),无字母或相同字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.4.2不同性别2岁伊犁马心脏功能差异性分析(见表6)由表6可知,公马的SV显著高于母马(P0.05),SI极显著大于母马(P0.01);母马的HR、ET、LAD/AOD极显著大于公马(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.02.012.T006表6不同性别2岁伊犁马的心脏功能差异性分析项目测定结果项目变异系数/%公马母马公马母马HR/bpm36.52±4.08B40.37±2.52AHR11.176.24EF/%0.86±0.050.87±0.04EF6.254.60ET/s0.61±0.07B0.67±0.04AET11.485.97SV/mL706.71±73.72a636.10±110.68bSV10.4317.40SI134.38±14.33A115.49±17.19BSI10.6614.88CO/(mL/min)26 204.19±4 539.3225 660.80±4 810.52CO17.3218.75CI4 937.57±956.684 658.48±748.78CI19.3816.07FS/%49.69±6.7950.33±5.00FS13.669.93VTI4.94±0.964.66±0.75VTI19.4316.09EDV/mL940.36±78.00885.09±161.66EDV8.3018.27ESV/mL225.86±55.55248.99±82.15ESV24.6032.99LAD/AOD0.54±0.04B0.56±0.03ALAD/AOD7.415.36LV MASS-I420.78±55.80393.02±66.39LV MASS-I13.2916.89公马的HR、ET、SV、SI、CO、CI、FS、VTI、ESV、LV MASS-I的变异系数依次为11.17%、11.48%、10.43%、10.66%、17.32%、19.38%、13.66%、19.43%、24.60%和13.29%,其余心脏功能指标的变异系数低于10.00%。母马的SV、SI、CO、CI、VTI、EDV、ESV、LV MASS-I的变异系数分别为17.40%、14.88%、18.75%、16.07%、16.09%、18.27%、32.99%和16.89%,其余心脏功能指标变异系数均低于10.00%。3讨论3.12岁伊犁马心脏结构与功能参考范围马匹内脏器官重量,尤其是心脏和肺部重量能够反映马匹的生理功能状态,对马匹速度性能的研究具有重要参考价值。饲粮营养水平可影响马匹各脏器器官的生长发育,内脏器官指数可直观反映马匹营养情况及功能状态[8]。因此,研究未成年马匹时要考虑生长因素。纯血马和美国速步马的生长迅速快,在2岁时便可达到成年体重的83%,而其他品种的生长速度较慢[9-10]。伊犁马是以哈萨克马为母本,用奥尔洛夫马、顿河马及布琼尼马等品种杂交改良选育而成,生长发育速度比纯血马慢。SLATER等[11]对比41匹不同年龄、性别和品种的马的心脏结构,结果发现,Pony马的每一项心脏指标均随着体重的增加而增加;而猎狐马(体重范围432~648 kg)的心脏结构与体重没有线性关系。本试验中,母马的体重、体长、胸围及管围等指标均大于公马,仅体高低于公马;在19个心脏结构指标中,母马有10个指标大于公马,在13个心脏功能指标中,母马有6个指标大于公马,这说明本试验中马匹的体重、体尺与心脏结构、功能指标没有线性关系;伊犁马体型和心脏结构参数均略小于纯血马,2岁伊犁马体重比同年龄纯血马轻10~70 kg。参考国外同年龄纯血马超声心动图参数范围[12],纯血马的平均心率大于伊犁马,表明纯血马易兴奋、悍威强,而伊犁马在测量时虽然也出现心率加快,但幅度小,总体稳定。伊犁马在RVDd、IVSd、IVSs、LVDd、LVDs及LVM等心脏结构参数比纯血马小,EF、FS及SV等心功能参数大于纯血马,EDV与ESV大于纯血马,造成差异的原因可能是由于本研究测量马匹EDV和ESV的方法为Teichholz法[13-14],而国外纯血马采用改良辛普森氏法。3.2不同性别2岁伊犁马心脏结构差异性分析本试验中,不同性别马匹的心脏结构指标中RVDd、LV minor、MVD及PAd差异显著。TRACHSEL等[15]在关于年轻耐力马的超声心动图尺寸关系的研究中测量4~6岁的不同性别阿拉伯马,发现公马的左心房尺寸小于母马。造成结果不同的原因可能是上述研究中部分母马为妊娠母马,妊娠可能会引起心脏尺寸变大,在分娩后一段时间后心脏会回到之前的结构[16-17];并且TRACHSEL等[15]的研究动物为成年马匹,成年马经过长时间训练会出现运动性心脏肥大,而本试验选用的2岁伊犁马还未进行调教训练。VERNEMMEN等[18]发现,公犬和骟犬的PAd小于母犬,但AOD高于母犬,这与本试验中母马的PAd大于公马的结果基本一致。KAYAR等[19]认为,性别对超声心动图参数影响较小。但有研究发现,不同性别的超声心动图参数存在显著差异[20-21]。LEADON等[22]发现,雄性纯血马的LVFWs、LVFWd、IVSs和LVM较高,但公马的体重也明显高于母马。SEDER等[23]发现,年龄和体重归一化后的雄性纯血马心脏尺寸平均值低于12~27月龄的母马。BUHL等[24]在对美国速步赛马研究中发现,公马的LVIDd较大。YOUNG[12]对482匹纯血马的研究表明,体重和性别调整后,长距离越障赛马的LVIDd和LVM明显高于短距离赛马,而FS明显低于短距离纯血马。而在本试验中伊犁马的FS差异不显著。造成上述指标存在差异的原因可能是马匹的运动能力存在差异。本试验使用的马匹是未训练的2岁伊犁马,而上述研究中的马匹已经通过特定的耐力训练。3.3不同性别2岁伊犁马心脏功能差异性分析健康的女性和男性的左心室的大小和功能存在明显的不同。研究发现,女性的左心室较小,射血量低[25],左心室舒张顺应性较低[26],每搏量也相应较低。本试验中,公马的SV显著高于母马(P0.05),可能是由于公马在生长发育期间会产生较高的雄性激素,且公马的左心室内径较大,有助于增加每搏量。ROVIRA等[27]研究发现,安达卢西亚母马驹的LVIDd较高,但LVIDs、LVFWs、EPSS和LVM较低,而这些心脏结构指标也会间接影响心脏的功能指标,22~60日龄和61~90日龄西班牙母马的AOD、E/A、EPSS、EDV和CO等参数均低于公马。造成这种差异的原因可能是22~60日龄和22~60日龄母马的体重较高,12月龄内西班牙马驹的LV、AOD和MVD受年龄、体重和性别等因素影响较大。本研究伊犁马的心脏参数指标与上述研究结果相似,说明伊犁马发育良好,具有运动潜力。4结论本试验发现,心脏结构指标中,伊犁马公马的RVDd、LV minor指标高于母马,而母马的MVD和PAd指标高于公马;心脏功能指标中,伊犁马公马的SV和SI指标高于母马,而母马的HR、ET、LAD/AOD高于公马。本试验结果可为伊犁马心脏疾病的诊疗提供参考。
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