有氧运动是指动物机体在氧气充分供应的情况下进行的运动模式。有氧运动可使动物机体原内稳态被打破后重新建立新的内稳态[1],在这个过程中动物机体激素分泌、免疫指标等达到新的水平[2],并对动物器官功能及心理状态产生持续影响[3]。长期有氧运动可改善动物机体各系统和器官的状态和功能[4]。舍饲母羊产羔性能和成活率均低于放牧母羊,但放牧母羊的乳品质较舍饲母羊更优[5]。花卫华等[6]采用CIDR+PG+PMSG生物制剂,使不同地区、不同季节、不同品种羊的发情率和排卵率得到了显著提升。不同饲养方式可使羊肉中的风味物质含量及乳品质产生差异,进而影响羊肉品质及羔羊成活率。目前,我国的肉羊养殖方式以放牧和舍饲两大类为主。放牧羊一般具有较大的运动量,可以采食多种新鲜牧草,机体抗氧化能力较强,羊肉及羊乳品质较高[7];而舍饲羊活动空间较小,运动量少,日粮种类单一,以秸秆、青贮及大量的精饲料为主,导致肉羊免疫力及肉品质下降[8]。随着人们对绿色、健康、高品质二毛期滩羊肉需求的增加,本试验在舍饲滩羊母羊的基础上增加滩羊母羊每日有氧运动量,以期改善不同季节繁殖母羊的繁殖性能,提高乳品质,为生产优质、健康的滩羊肉提供参考。1材料与方法1.1试验设计与饲养管理试验选取盐池滩羊集团生态牧场选取2017年出生、体况良好、采取全舍饲养殖、已产2胎的健康滩羊母羊120只,随机分为4组,每组30只。即每日运动4~6 km组(记为试验1组和试验2组)和全舍饲养殖组(记为对照1组和对照2组)。4组试验羊饲粮配方和采食量均完全相同。2021年10月对试验1组和对照1组试验羊做同期发情处理,人工授精。2022年1月对试验2组和对照2组试验羊做同期发情处理,人工授精。试验1组和试验2组每日沿生态牧场运动围栏运动4~6 km,对照1组和对照2组全舍饲养殖。各组试验羊佩戴北斗定位器,记录每日运动轨迹、运动量及行走路程。2022年3月26日—4月6日,试验1组和对照1组试验羊产羔结束。繁殖母羊产羔后50 d断奶,试验1组和对照1组于2022年6月24日—26日测定自然发情率,对未发情母羊药物处理(肌肉注射PMSG 1.5 mL+PGF2α 1 mL)后,6月27日—29日测定药物处理后发情率,试验1组和对照1组测定有氧运动对非自然发情季节滩羊发情性能影响。2022年6月13日—23日,试验2组和对照2组试验羊产羔结束。繁殖母羊产羔后50 d断奶,试验2组和对照2组于2022年9月25日—27日测定自然发情率,对未发情母羊药物处理(肌肉注射PMSG 1.5 mL+PGF2α 1 mL)后,9月28日—30日测定药物处理后发情率,试验2组和对照2组测定有氧运动对自然发情季节滩羊发情性能影响。剩余试验母羊数=试验母羊数-自然发情母羊数(1)试验中母羊发情鉴定采取种公羊试情方法测定[9]。采集试验1组和对照1组母羊初乳、常乳及产羔日颈静脉全血,待血液凝固后,离心分离血清,置于5 mL冻存管中,与乳汁一同保存于-20 ℃冰柜。试验期间测定试验母羊发情个数、血清生化指标、乳成分等指标,分析有氧运动对滩羊的影响。试验期内,试验母羊由专人管理,每只羊每日饲喂量为1.3 kg,早晚各饲喂1次,自由饮水。基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.017.T001表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米16.00代谢能/(MJ/kg)11.70玉米秸秆30.00粗蛋白/%10.08苜蓿5.00粗纤维/%62.70青贮32.00粗脂肪/%2.07稻草7.00灰分/%7.67青干草6.00酸性洗涤纤维/%12.26食盐1.00钙/%0.65预混料3.00磷/%0.27注:1.预混料为每千克饲粮提供:VA 8 000 IU、VD 1 000 IU、VE 20 IU、五水硫酸铜46.80 mg、碘酸钙2.88 mg、一水硫酸亚铁257.22 mg、一水硫酸锰130.50 mg、六水氯化钴1.44 mg、一水硫酸锌135.54 mg、酵母硒71.84 mg。2.营养水平中代谢能为计算值,其余均为实测值。1.2主要试剂PMSG(批号210727)由上海莼试生物技术有限公司提供,PGF2α(批号210727)由赫澎(上海)生物技术有限公司提供。1.3主要仪器ML204梅特勒电子天平购自梅特勒-托利多国际股份有限公司,SH220F石墨消解仪购自海能未来技术集团股份有限公司,SOX40脂肪测定仪购自海能未来技术集团股份有限公司,420-B电热恒温水浴箱购自江苏新康医疗器械有限公司,HC-3016R离心机购自安徽中科中佳科学仪器有限公司,K9860全自动凯氏定氮仪购自海能未来技术集团股份有限公司,RT-6100酶标分析仪购自北京凯奥科技发展有限公司,日立7180全自动生化分析仪购自株式会社日立科学系统。1.4测定指标及方法1.4.1乳成分乳成分指标测定依照《食品安全国家标准 生乳》(GB 19301—2010)进行。利用凯氏法测定样本中的含氮量,将结果乘以换算系数6.25,计算粗蛋白含量。总糖含量检测采用苏州梦犀生物医药科技有限公司生产的试剂盒进行测定。乳脂含量测定依照《牛乳检验方法》(GB 5409—1985)进行,采用索氏抽提法测定。尿素氮含量使用日立7180生化仪检测。粗蛋白含量=全氮×6.25(2)1.4.2乳免疫指标利用江苏晶美生物科技有限公司生产的ELISA试剂盒测定初乳和断奶乳中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)及免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白E(IgE)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和干扰素-γ(IFN-γ)等指标。1.4.3母羊血清免疫指标利用江苏晶美生物科技有限公司生产的ELISA试剂盒测定母羊产羔日血清中IL-2、白细胞介素-3(IL-3)、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、白细胞介素-12(IL-12)、IgA、IgE、IgM、载脂蛋白A(apo-A)和载脂蛋白B(apo-B)指标。1.5数据统计与分析采用Excel 2007软件对数据进行预处理,采用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析,LSD法对组间差异进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P<0.05表示差异显著。2结果与分析2.1有氧运动对不同季节滩羊母羊繁殖性能的影响(见表2)由表2可知,试验1组与对照1组在滩羊非自然发情季节6月24日—26日,利用种公羊试情的方法分别检测到2只和1只发情母羊,滩羊非发情季节发情率分别为6.6%和3.3%。对剩余未发情母羊肌肉注射PMSG+PGF2α后,于6月27日—29日,再次利用种公羊试情的方法分别检测到15只和7只发情母羊,滩羊非发情季节药物处理后发情率为53.5%和24.1%。试验2组与对照2组在滩羊发情季节9月25日—27日,利用种公羊试情的方法分别检测到11只和5只发情母羊,滩羊发情季节自然发情率为36.6%和16.6%。对剩余未发情母羊肌肉注射PMSG+PGF2α后,于9月28日—30日再次利用种公羊试情的方法分别检测到16只和15只发情母羊,滩羊发情季节药物处理后发情率为84.2%和60.0%。可见,滩羊在非发情季节和发情季节自然发情率变化较大,药物处理可提高不同时期滩羊的发情率。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.017.T002表2有氧运动对不同季节滩羊母羊繁殖性能的影响组别试验母羊数量/只自然发情数量/只发情率/%剩余试验母羊数量/只药物处理后发情数量/只发情率/%试验1组3026.6281553.5对照1组3013.329724.1试验2组301136.6191684.2对照2组30516.6251560.02.2有氧运动对滩羊母羊乳成分的影响(见表3)由表3可知,试验组和对照组滩羊初乳、常乳中总糖、尿素氮、乳脂的含量差异均不显著(P0.05)。同组母羊常乳中的总糖含量高于初乳,常乳中的尿素氮、乳脂含量均低于初乳。试验组初乳与常乳中总糖和尿素氮含量均低于对照组,而试验组乳脂含量高于对照组。试验组初乳中乳蛋白含量显著高于试验组常乳和对照组常乳(P0.05),对照组初乳中乳蛋白含量高于试验组常乳和对照组常乳(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.017.T003表3有氧运动对滩羊母羊乳成分的影响组别种类总糖/(g/L)尿素氮/(mmol/L)乳脂/(g/kg)乳蛋白/(g/kg)试验组初乳4.96±1.385.12±1.825.82±1.72140.88±80.07a常乳6.09±0.834.58±0.945.34±1.6956.04±6.08b对照组初乳5.26±1.115.51±2.525.37±4.19108.64±80.29ab常乳6.24±0.484.62±1.915.11±1.4044.63±5.47b注:同列数据肩标字母不同表示差异显著(P0.05),字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05)。2.3有氧运动对滩羊母羊乳免疫指标的影响(见表4)由表4可知,试验组初乳、对照组初乳、试验组常乳、对照组常乳中IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IgA、IgE、IgG、IgM、IFN-γ的含量均差异不显著(P0.05)。同组母羊常乳中IL-2、IL-6、IL-10的含量高于初乳。试验组常乳中IL-4、IL-5、IL-8、IgA、IgE、IgG、IgM和IFN-γ的含量均高于初乳,但对照组常乳中IL-4、IL-5、IL-8、IgA、IgE、IgG、IgM和IFN-γ的含量却低于初乳。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.017.T004表4有氧运动对滩羊母羊乳免疫指标的影响项目试验组对照组初乳常乳初乳常乳IL-2/(ng/L)955.62±125.461 142.07±132.731 007.59±216.611 027.84±31.98IL-4/(ng/L)54.92±8.8161.86±8.9055.79±12.1955.64±2.44IL-5/(ng/L)224.85±45.65250.78±46.70242.42±54.15223.23±11.31IL-6/(ng/L)131.57±16.60151.33±19.98141.74±23.22146.04±8.87IL-8/(ng/L)764.67±127.97882.32±189.25805.43±177.93741.02±23.41IL-10/(ng/L)156.88±17.33184.64±17.60174.24±40.01176.00±5.50IgA/(mg/L)310.94±36.20381.66±59.64340.61±72.04323.67±10.01IgE/(mg/L)45.71±11.1147.33±11.9844.71±10.2940.33±0.86IgG/(mg/L)87.36±17.8998.46±24.4890.69±21.4082.44±2.25IgM/(mg/L)2 563.33±287.892 994.58±600.512 764.71±560.172 461.24±110.58IFN-γ/(ng/L)821.53±93.081 020.96±234.73924.46±201.58844.54±29.29注:同行数据肩标字母不同表示差异显著(P0.05),字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.4有氧运动对产羔日滩羊母羊血清免疫指标的影响(见表5)由表5可知,与对照组相比,产羔日试验组母羊血清IL-2、IL-3、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IgA、IgE、IgM、apo-A、apo-B的含量差异均不显著(P0.05)。与对照组相比,产羔日试验组母羊血清中IL-2、IgA、IgM的含量升高,IL-3、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、apo-A、apo-B含量降低。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.017.T005表5有氧运动对产羔日滩羊母羊血清免疫指标的影响项目试验组对照组IL-2/(ng/L)1 144.56±37.081 132.24±19.72IL-3/(ng/L)204.40±19.44206.98±23.73IL-5/(ng/L)1 089.23±51.041 186.46±75.77IL-6/(ng/L)155.08±8.48164.03±2.56IL-8/(ng/L)67.06±09669.86±2.47IL-10/(ng/L)124.67±2.56137.74±15.26IL-12/(ng/L)1 580.25±92.331 730.25±75.20IgA/(mg/L)287.69±13.49205.85±162.26IgE/(mg/L)35.52±1.7337.82±2.04IgM/(mg/L)2 899.00±209.632 755.41±268.77apo-A/(mg/L)1 681.85±23.131 915.18±108.34apo-B/(mg/L)1 847.50±95.001 964.16±130.413讨论3.1有氧运动对不同季节滩羊母羊繁殖性能的影响滩羊是我国特有的优良轻裘皮绵羊品种[10]。滩羊作为季节性发情家畜,季节变化对其发情周期影响较大[11]。季节性发情动物主要在日照时间变短后的秋季发情,此时其下丘脑促性腺激素分泌水平增加[12]。有氧运动也同样能够调节动物机体内分泌水平,调控动物机体激素水平[13]。本试验结果显示,繁殖母羊每日有氧运动4~6 km,非发情季节发情率较对照组升高3.3%,发情季节发情率较对照组升高20%;PMSG+PGF2α处理后,滩羊母羊非发情季节发情率较对照组升高29.4%,发情季节发情率较对照组升高24.2%。可见,滩羊在不同季节自然发情率变化较大。季节性发情动物具有短日照季节性繁殖、发情周期不规则等繁殖缺点[14],可通过适量的有氧运动调节其激素分泌水平,改善发情状况。有氧运动配合药物处理可显著提高不同季节滩羊的发情率,与郭亚军等[15]研究结果一致。3.2有氧运动对滩羊母羊乳成分的影响乳汁是哺乳期羔羊的主要营养来源,对羔羊健康和生长发育至关重要。乳汁中含有羔羊生长发育所必需的各种营养物质,其中乳蛋白、乳脂和乳糖是决定乳品质的重要成分[16]。羊乳中乳脂、乳蛋白和乳糖含量较高,营养丰富,消化率高[17]。本试验结果显示,同组试验羊常乳中的总糖含量高于初乳,尿素氮、乳脂含量低于初乳。每日有氧运动4~6 km的试验组繁殖母羊初乳与常乳中总糖、尿素氮较对照组含量降低,而乳脂含量升高,这与NOWAK等[18]研究的结果一致。瘤胃微生物及其代谢物对乳脂代谢具有重要的影响[19]。厚壁菌门与拟杆菌门的比例和乳脂产量呈显著正相关,而拟杆菌门中普雷沃氏菌属的比例和乳脂产量呈显著负相关[20]。赵正伟等[21]研究表明,育肥期滩羊每日有氧运动8~10 km后,其瘤胃中厚壁菌门与拟杆菌门的比例升高,与对照组相比,试验组普雷沃氏菌属比例升高。与本试验中繁殖母羊每日有氧运动4~6 km乳脂含量升高的结果相呼应。可见,有氧运动引起的瘤胃菌群变化可调节滩羊乳脂率水平。乳蛋白是评价乳汁营养价值的关键指标[22]。本试验结果显示,繁殖母羊每日有氧运动4~6 km,其初乳中乳蛋白含量显著高于各组常乳,也高于对照组初乳。可见,两组试验羊在饲粮配方及饲喂量完全一致的情况下,规律的有氧运动可提高母羊乳汁中的乳蛋白的含量,可能也与肠道菌群丰度的变化相关。3.3有氧运动对滩羊母羊乳免疫和血清免疫指标的影响母羊乳汁中免疫指标越高,羔羊生长发育也越好。母羊生产后,乳中免疫球蛋白含量对仔畜成活及生长很重要[23]。免疫球蛋白与免疫因子可以提高仔畜的免疫力;同时,IgG和IgA对其乳腺也具有保护作用[24]。本试验结果显示,试验组母羊常乳中的IL-4、IL-5、IL-8、IgA、IgE、IgG、IgM、IFN-γ的含量高于试验组初乳和对照组常乳,但对照组常乳中上述指标却低于同组初乳。可见,繁殖母羊每日有氧运动4~6 km可提高其常乳中的免疫因子及免疫球蛋白水平,而舍饲模式养殖下繁殖母羊乳汁中的免疫因子及免疫球蛋白水平却由初乳到常乳逐渐降低,其血清中的相关免疫因子与免疫指标与乳汁中的指标一致。可见,舍饲模式养殖下,繁殖母羊产后机体免疫性能持续降低,舍饲模式养殖下繁殖母羊每日有氧运动4~6 km可提高其血清和乳汁中免疫因子及免疫指标水平。4结论滩羊繁殖母羊每日有氧运动4~6 km可提高不同季节滩羊的发情率,改善乳脂率水平,提高乳蛋白含量以及产羔日血清及乳汁免疫水平。

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