目前,我国养兔业中应用较广泛的饲粮结构为玉米-豆粕型[1]。玉米在家兔饲粮组成中占比较高,是饲粮中重要的能量饲料。随着食品业和酿造业的发展,玉米需求量增加,导致饲用玉米缺口较大,价格上涨[2]。我国北方干旱地区的玉米产量相对较低,对其他地区玉米的依赖程度较高,加大了运输成本,相应地提高了养兔的生产成本。因此,合理利用当地的饲料资源并降低饲料运输成本是当前研究重点。“张杂谷”是张家口市农业科学研究院选育的高产谷子杂交品种,具有耐贫瘠、产量高[3]、抗逆性强[4]、节水和抗旱[5-7]等优点。从营养水平方面分析,“张杂谷”的粗蛋白含量为10.4%~12.9%[8],略高于玉米的9.07%[9],且氨基酸组成较玉米更为平衡[10];粗脂肪含量为2.5%~4.0%;淀粉含量为65.7%~72.1%[8]。因此,在非玉米主产区利用“张杂谷”替代玉米有着非常大的开发潜力。家兔的繁殖力直接影响家兔数量和质量,同时影响养殖业的经济效益[11-12]。在规模化的兔场中,种公兔的数量不多,但作用非常重要[13]。种公兔质量会影响整个兔群的品质和养殖场的生产力水平。赵月平等[14]、柳迪[15]和杨玉增等[16]利用“张杂谷”替代常规饲料饲喂鸡、猪取得了很好的效果,而“张杂谷”在养兔业中的应用较少。本研究拟在种公兔饲粮中使用不同比例的“张杂谷”,探讨其对种公兔精液品质及血清生化指标的影响,为合理开发利用当地饲料原料提供参考。1材料与方法1.1试验设计将36只健康的成年伊拉公兔,随机分为6组,每组6个重复,每个重复1只公兔。对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组、试验Ⅳ组和试验Ⅴ组饲粮中分别含有0、5%、10%、15%、20%和25%“张杂谷”。预试期7 d,正式试验期90 d。1.2试验饲粮试验所用“张杂谷”为河北省张家口地区2022年秋季收获的籽实。选择玉米、豆粕、饲料酵母、麦麸、玉米秸秆、苜蓿草粉、石粉、碳酸氢钙等作为原料,按配方混合原料,利用制粒机做成直径5 mm、长约10 mm的颗粒料,在干燥通风条件下保存。各组饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.013.T001表1试验饲粮组成及营养水平项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组试验Ⅳ组试验Ⅴ组原料组成/%玉米30.025.021.016.013.08.5豆粕16.016.016.016.016.016.0饲料酵母2.02.02.02.02.02.0麦麸11.512.011.012.011.012.5玉米秸秆22.021.521.520.519.517.5苜蓿草粉13.013.013.013.013.013.0石粉0.50.50.50.50.50.5磷酸氢钙0.50.50.50.50.50.5食盐0.50.50.50.50.50.5预混料4.04.04.04.04.04.0张杂谷05.010.015.020.025.0合计100.0100.0100.0100.0100.0100.0营养水平总能/(MJ/kg)16.3416.3116.3216.2316.1416.64粗蛋白/%15.2615.3015.2115.3715.3315.43粗纤维/%13.5813.5613.3613.2412.9512.53粗脂肪/%1.381.292.062.222.192.24钙/%1.871.911.942.012.092.27磷/%0.660.640.630.650.620.61酸性洗涤纤维/%17.6717.7017.7217.2116.9717.11中性洗涤纤维/%30.0130.0329.7428.5627.4130.41注:1.预混料为每千克饲粮提供:VA 6 000 IU、VD3 1 600 IU、VE 25 IU、Fe 160 mg、Zn 75 mg、Cu 25 mg、Mn 70 mg、I 2 mg、Se 0.25 mg。2.营养水平均为实测值。1.3饲养管理试验公兔采用单笼饲养,对各组试验公兔进行编号,按常规程序进行免疫接种及驱虫。定期对兔舍和饲槽进行清洗消毒。每日分别在8:00和17:00饲喂公兔,保证公兔有充足的饮水。1.4测定指标及方法1.4.1精液品质根据精子发生和成熟规律,对公兔进行人工采精。检测第30、60、90 d的精液品质,期间每周采精2次。精液采集用假阴道法,由集精杯上的刻度直接读出其容量。采用MDO2108动物精子分析仪(南宁松景天伦生物科技有限公司)检测精子活力、精子密度和精子畸形率。1.4.2血清生化指标试验最后1 d,种公兔采精结束后,耳缘静脉采血5 mL,室温放置30 min,3 000 r/min离心10 min,将血清分装于1.5 mL EP管中,-20 ℃保存。血清中的总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、尿素氮(BUN)含量采用Celercare V5全自动生化仪(微纳芯MNCHIP公司)测定。1.5数据统计与分析采用Excel软件对试验数据进行初步整理,SPSS 26.0统计软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1“张杂谷”对种公兔精液品质的影响2.1.1“张杂谷”对种公兔采精量的影响(见表2)由表2可知,在试验第30、60、90 d时,各组种公兔的采精量差异不显著(P0.05),但随着饲养天数的增加,各试验组的采精量呈略微上升的趋势。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.013.T002表2“张杂谷”对种公兔采精量的影响组别第30 d第60 d第90 d对照组0.71±0.060.73±0.080.74±0.10试验Ⅰ组0.70±0.100.73±0.070.75±0.07试验Ⅱ组0.73±0.080.75±0.050.78±0.06试验Ⅲ组0.74±0.070.76±0.060.77±0.05试验Ⅳ组0.72±0.090.73±0.050.76±0.13试验Ⅴ组0.73±0.060.75±0.110.79±0.08mL2.1.2“张杂谷”对种公兔精子活力的影响(见表3)由表3可知,对照组的精子活力在第30、60、90 d时差异均不显著(P0.05)。各试验组的精子活力在第60、90 d时高于第30 d(P0.05),第90 d时略高于第60 d(P0.05)。在第30 d,对照组的精子活力略高于各试验组(P0.05)。在第60 d,对照组的精子活力与各试验组差异不显著(P0.05)。在第90 d,各试验组的精子活力略高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.013.T003表3“张杂谷”对种公兔精子活力的影响组别第30 d第60 d第90 d对照组69.42±3.6871.89±4.0372.18±3.97试验Ⅰ组65.93±4.19B73.78±4.33A75.34±4.61A试验Ⅱ组63.31±4.81B71.27±4.69A78.22±4.75A试验Ⅲ组66.53±5.06B72.27±4.86A77.68±4.73A试验Ⅳ组67.41±4.83B76.77±4.59A79.05±4.69A试验Ⅴ组64.60±4.97B75.53±4.76A78.56±3.08A注:同列数据肩标小写字母不同表示差异显著(P0.05),小写字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05);同行数据肩标大写字母不同表示差异显著(P0.05),大写字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。%2.1.3“张杂谷”对种公兔精子密度的影响(见表4)由表4可知,对照组的精子密度在第30、60、90 d时差异均不显著(P0.05)。各试验组的精子密度在第60、90 d时高于第30 d(P0.05),第60 d的精子密度与第90 d差异不显著(P0.05)。在第30 d,各组的精子密度差异不显著(P0.05)。在第60、90 d,各试验组的精子密度略高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.013.T004表4“张杂谷”对种公兔精子密度的影响组别第30 d第60 d第90 d对照组3.83±0.243.95±0.184.16±0.11试验Ⅰ组3.47±0.19B4.18±0.20A4.31±0.09A试验Ⅱ组3.38±0.08B4.23±0.13A4.65±0.14A试验Ⅲ组3.51±0.15B4.36±0.17A4.78±0.22A试验Ⅳ组3.32±0.21B4.22±0.16A4.59±0.16A试验Ⅴ组3.25±0.17A4.34±0.23A4.88±0.13A亿/mL2.1.4“张杂谷”对种公兔精子畸形率的影响(见表5)由表5可知,各组种公兔的精子畸形率在试验第30、60、90 d时变化不大,呈略微下降趋势(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.013.T005表5“张杂谷”对种公兔精子畸形率的影响组别第30 d第60 d第90 d对照组6.03±0.685.55±0.515.53±0.43试验Ⅰ组5.73±0.555.46±0.475.42±0.37试验Ⅱ组5.86±0.395.37±0.245.29±0.59试验Ⅲ组5.65±0.465.49±0.355.31±0.42试验Ⅳ组5.77±0.165.24±0.505.07±0.23试验Ⅴ组5.91±0.265.38±0.695.02±0.17%2.2“张杂谷”对种公兔血清生化指标的影响(见表6)由表6可知,“张杂谷”对种公兔血清中TP、ALB、GLO、TG、GLU和BUN含量的影响均不显著(P0.05)。其中,TG和GLU含量随着“张杂谷”水平的升高有略微降低的趋势。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.013.T006表6“张杂谷”对种公兔血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)GLO/(g/L)TG/(mmol/L)GLU/(mmol/L)BUN/(mmol/L)对照组67.05±1.3540.45±1.5526.60±0.841.08±0.137.37±0.596.12±0.31试验Ⅰ组67.03±1.9341.58±1.0425.46±0.921.06±0.097.16±0.436.10±0.38试验Ⅱ组66.80±1.7340.20±1.7426.59±1.081.01±0.127.03±0.685.93±0.45试验Ⅲ组67.75±1.6741.38±1.5026.38±1.140.98±0.106.93±0.346.07±0.33试验Ⅳ组67.10±1.5941.42±1.7025.68±1.280.95±0.156.86±0.275.97±0.28试验Ⅴ组66.40±1.2540.86±1.7225.54±1.190.92±0.186.83±0.615.71±0.352.3饲粮成本分析(见表7、表8)由表8可知,制作1 kg对照组饲粮需花费2.675元,与其他试验组相比成本最低。试验Ⅴ组的饲粮成本最高,制作1 kg需花费3.277元,比对照组多花费0.602元。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.013.T007表7饲粮原料价格项目玉米豆粕饲料酵母麦麸玉米秸秆苜蓿草粉石粉磷酸氢钙食盐预混料张杂谷价格2.824.803.281.880.242.400.152.405.009.404.80注:原料价格以饲养试验实际购买价格为准。元/kg10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.03.013.T008表8各组饲粮价格项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组试验Ⅳ组试验Ⅴ组价格2.6752.7832.8913.0063.1413.277元/kg3讨论3.1“张杂谷”对种公兔精液品质的影响谷子营养价值较高,在农业生产中具有重要价值[17-18]。谷子不仅含有丰富的维生素E和B族维生素[19]、全面均衡的氨基酸(特别是色氨酸和蛋氨酸含量较多)[20]和大量不饱和脂肪酸(如亚油酸、亚麻酸)[21-22],还含有大量的生物类黄酮、多酚[23-24]、小米黄色素[25]、硒和胡萝卜素等生物活性成分,使得谷子具有抗氧化、降血糖、降血脂和抗肿瘤等功能[26]。李建国等[27]研究表明,饲粮中添加β-胡萝卜素能够提升种公牛的射精量、精子活力和精子密度。在饲粮或精液稀释液中添加维生素E可通过增强抗氧化作用提高动物的精液品质[28]。牛海波等[29]研究表明,在饲粮中添加维生素E对猪的精子密度和采精量无不良影响,可以提高精子活率,降低精子畸形率。徐铭等[30]研究表明,与对照组相比,纳米硒和大蒜油组公兔的精液质量显著改善。金海峰等[31]研究表明,在饲粮中添加硒和维生素E,精浆抗氧化酶活性增强,公羊的精液品质得到改善。谷糠主要由谷壳、种皮、糊粉层和胚乳组成,含有很多营养成分,如不饱和脂肪酸、膳食纤维、微量元素和维生素,尤其多酚类化合物[32-33]含量为0.2%~3.0%,因此谷糠是酚类化合物的丰富来源[34]。公兔的精液品质直接影响种兔繁殖率,遗传、环境、管理和营养等因素均会影响公兔精液品质。在人工授精技术广泛应用的情况下,精液品质良好的种公兔是提高繁殖力的保障。本研究中,不同水平“张杂谷”对种公兔精液品质无负面影响。在第60、90 d时,各试验组种公兔的精子活力和精子密度均有不同程度的改善,这可能是“张杂谷”中各种生物活性物质、维生素E、硒和胡萝卜素长期累积的结果。“张杂谷”的部分营养成分高于玉米,可以代替日粮中的部分玉米,达到改善种公兔精液品质的目的。3.2“张杂谷”对种公兔血清生化指标的影响血液成分的变化能够反映动物机体对蛋白质、脂类、葡萄糖和矿物质等物质的代谢情况和健康状况[35]。血清中甘油三酯水平能够反映动物机体内脂肪组织的生长及沉积程度。血糖水平是动物机体内能量平衡的主要标志。血清尿素氮含量能够反映机体蛋白质代谢和氨基酸代谢的情况[36],是反映肾功能的重要检测指标。本试验表明,种公兔血清中甘油三酯和葡萄糖的含量随着“张杂谷”水平的增加而有略微下降的趋势,可能与谷子的降血脂、降血糖等功能有关。谷子可能通过调节脂质代谢相关基因的表达或肠道菌群的组成达到降血脂作用[37],谷子中含有的膳食纤维、多酚类物质及脂肪酸可以降低动物血糖。3.3饲粮成本分析结合成本分析和种公兔精液品质的改善情况,试验Ⅱ组每制作1 kg饲粮会比试验Ⅴ组少花费0.386元,且试验Ⅱ组与试验Ⅴ组种公兔的精液品质改善效果均比较好。综上所述,种公兔饲喂含有10%“张杂谷”的饲粮为最优选择。4结论“张杂谷”可以作为种公兔的能量饲料来源,对种公兔的血清生化指标无影响。从饲粮成本和公兔精液品质等方面综合考虑,饲粮中“张杂谷”添加比例为10%时的效果最佳。
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