金莲花为传统蒙药，系多年生毛茛科金莲花属植物[1]，始见于《本草纲目拾遗》，谓其“味苦，性寒，无毒”，可“治口病、喉肿、牙宣、牙痛、明目、解岚瘴”[2]。研究表明，在饲料中添加金莲花药渣或提取物有助于提高动物的免疫力及生产性能，增强动物的抗氧化力和抗病力[3]。敖杨等[4]研究发现，在饲粮中添加金莲花药渣发酵物可提高肉鸡体重及成活率，提高未免疫鸡的免疫能力和抗病能力，降低料重比，并确定最优添加量为4%和6%。丁海东等[5]研究了金莲花总黄酮对老年小鼠肺气肿的保护作用机制，结果显示，金莲花总黄酮通过其特有的抗炎作用下调了老年肺气肿小鼠肺组织p-p38MAPK、p-ERK1/2基因的表达量，减少了气道分泌物，减轻了小鼠肺部炎症反应，延缓了气道重塑的出现，抑制了肺气肿的形成。近年来，金莲花的相关研究主要集中在化学成分和药效方面[6-8]，尚未见评价金莲花饲用安全性的报道。因此，本试验探究金莲花的饲用安全性，以期为金莲花作为饲料添加剂的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验原料为采自黑龙江地区的短瓣金莲花，经齐齐哈尔湃鳄生物科技有限公司提取加工制成试验样品。90 d经口试验毒性试验采用拌入饲料法，其他试验均选用蒸馏水作溶剂。1.2试验动物试验选用SPE级KM小鼠（体重18~22 g）、Wistar（180~220 g）大鼠和SD大鼠（60~90 g），均由辽宁长生生物技术股份有限公司提供，生产许可证号和使用许可证号分别为SCXK（辽）2020-0001、SYXK（黑）2016-001。饲养环境温度为20~25 ℃，相对湿度为45%~65%。饲料由沈阳茂华生物科技有限公司提供，饲料生产许可证号为SCXK（辽）2017-0001。受试动物通过检疫合格后投入试验。1.3仪器与试剂试验仪器：AU5800全自动生化分析仪（贝克曼库尔特），URIT-3081全自动血细胞分析仪（优利特），URIT-180尿液分析仪（优利特），CX31生物显微镜（Olympus），HG1419-4200H小动物天平（百万），JD200-3电子天平（沈阳龙腾），生化培养箱（Friocell ECO222），全自动菌落计数器（IUL Countermat flash），生物安全柜（Baker SG603AINT）。试验试剂：环磷酰胺（97%上，海源叶生物科技有限公司），柠檬酸三钠（优级纯，天津市科密欧化学试剂有限公司），秋水仙素（95%，美国Sigma），2, 4, 6-三硝基酚（厦门慧嘉生物科技有限公司），水合氯醛（分析纯，上海恒远生物科技有限公司），茜素红（99%，上海抚生实业有限公司），2-氨基芴（99%，Sigma-Aldrich公司），甲基磺酸甲酯（99.99%，Sigma-Aldrich公司），1, 8-二羟基蒽醌（99.99%，Sigma-Aldrich公司），敌克松（Chem Service公司），2-氨基蒽（94%，AlfaAesar公司），叠氮钠（天津市大茂化学试剂厂）。1.4试验方法1.4.1急性经口试验采用最大耐受剂量法，KM小鼠20只，雌、雄各半，以10 g/kg·BW为1个剂量组（金莲花原料40 g/kg·BW），小鼠试验前禁食16 h，单次给予受试物体积为20 mL/kg·BW，给予2次，每次间隔4 h，连续观察记录14 d内体重变化、饮食情况、活动状态及中毒表现和死亡情况。1.4.2遗传毒性试验（1）细菌回复突变试验。按照平板掺入法，选取TA1535、TA97a、TA98、TA100和TA102作为菌株，设立48、153、488、1 563、5 000 µg/皿5个剂量，另外设立自发回变和3个对照组（溶剂对照、DMSO对照和阳性对照组），试验在两组混合液（加S9和不加S9）下进行，每个组别设3个平皿。计算均值及标准差。按上述方法，改变试验剂量间距用以验证，改后剂量分别为8、40、200、1 000、5 000 µg/皿。（2）哺乳动物红细胞微核试验。采用30 h给予受试物法，选用KM小鼠50只，雌、雄各半，同性同组，每组5只。试验设立10.0、5.0、2.5 g/kg·BW共3个剂量组（相当于金莲花原料40、20、10 g/kg·BW），同时设立阴性和阳性对照组。对各组小鼠每24 h灌胃1次，共计2次，第二次灌胃后6 h对骨髓样本进行采集。油镜观察，记录每个小鼠的嗜多染红细胞中微核数，计数1 000个，计算嗜多染红细胞的比率。（3）小鼠精母细胞染色体畸变试验。选用雄性KM小鼠25只，随机分5组，每组5只，按1.4.2（2）设置剂量组和对照组。连续给予受试物5 d，正常喂养8 d，于末次给予受试物后第9 d处死小鼠，取两侧附睾常规制片，染色，观察每个小鼠中期分裂细胞数，计数500个，计算精细胞畸形发生率。1.4.3致畸试验采用最大耐受量法，选用Wistar大鼠120只，以雌雄2∶1的比例合笼交配，将受孕鼠随机分成4组，每组16只，记录体重。试验设置5.00、2.50、1.25 g/kg·BW（相当于金莲花原料20、10、5 g/kg·BW）3个剂量组，同时设置阴性对照组。大鼠孕期第6 d起给予受试物，连续10 d，正常喂养4 d，分别在孕期第0、6、9、12、15、20 d记录孕鼠体重，并于孕期第20 d处死，取出子宫，检查母鼠受孕情况及胎体发育状态，记录黄体数、着床数、吸收胎数、活胎数及死胎数，记录活胎鼠畸形数量。制作胎鼠骨骼标本，通过显微镜检查胎鼠骨骼缺陷情况，同时检查活胎鼠的内脏。1.4.490 d经口急性试验选用SD大鼠80只，雌、雄各40只，雌、雄随机分成4组，每组10只，依据中草药在动物饲料中的常规添加用量（日粮的0.25%~1.50%）的25、50和100倍设置低、中、高3个剂量组，即0.43、0.85、1.70 g/kg∙BW（相当于金莲花原料1.7、3.4、6.8 g/kg∙BW），同时设置阴性对照组。采用拌入基础饲料法给予受试物，单次给予受试物的体积按大鼠体重的8%计算，连续喂养90 d。每天观察并记录大鼠行为表现、中毒程度和死亡情况。每周记录大鼠体重、食物剩余量和撒食量，试验结束后计算食物利用率。试验中期及末期，检测大鼠各项血常规、血液生化指标及尿常规指标；试验结束后对所有动物进行大体解剖，称量脑、垂体、甲状腺、肺、心脏、肝、脾、睾丸、子宫和卵巢等器官组织的绝对重量，计算脏体比，同时进行病理组织学检查。1.5数据统计与分析采用SPSS 18.0软件分析数据，统计指标进行方差齐性检验，根据检验结果采用秩和分析和单因素方差分析比较，采用Dunnett-t法进行组间两两比较，采用Fisher法进行不同性别比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1急性经口毒性试验结果（见表1）由表1可知，观察染毒后的试验小鼠，未出现明显的中毒症状，未见死亡。解剖后，主要脏器未见明显异常。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.T001表1急性经口毒性试验结果性别剂量/(g/kg)数量/只体重/g死亡数/只死亡率%首次7 d14 d雄10.01021.07±0.5325.47±1.1929.67±1.3600雌10.01019.95±0.5523.95±0.6327.75±0.9000金莲花提取物对试验小鼠经口LD5010.0 g/kg·BW，依据GB 15193.1—2003判断，属实际无毒级。2.2遗传毒性试验2.2.1细菌回复突变试验结果（见表2、表3）由表2、表3可知，两次试验中各剂量组的回变菌落数均未达到自发回变菌落数的2倍以上，在两种混合液（加S9和不加S9）条件下，金莲花对5株试验菌株均未呈现致突变作用。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.T002表2细菌回复突变试验结果（第1次）组别TA97aTA98TA100TA102TA1535-S9+S9-S9+S9-S9+S9-S9+S9-S9+S948 µg/皿136.0±10.3131.0±8.536.0±4.236.0±4.0137.0±11.9154.0±15.1256.0±15.1259.0±9.018.0±4.717.0±2.3153 µg/皿138.0±8.2133.0±5.735.0±3.833.0±4.2149.0±14.7152.0±14.2265.0±12.5260.0±12.118.0±3.616.0±4.0488 µg/皿137.0±8.5134.0±9.039.0±6.235.0±2.5141.0±7.8151.0±14.7253.0±5.3253.0±7.619.0±1.018.0±4.01 563 µg/皿135.0±5.5138.0±4.037.0±5.636.0±5.6150.0±5.8144.0±14.7249.0±6.4252.0±8.317.0±3.116.0±3.15 000 µg/皿139.0±7.5134.0±10.036.0±4.533.0±2.1146.0±14.6147.0±9.5266.0±13.1257.0±16.417.0±3.816.0±1.7自发回变138.0±7.4138.0±5.738.0±2.038.0±3.6154.0±8.5157.0±13.6258.0±11.8261.0±13.915.0±4.517.0±3.8溶剂对照137.0±8.5134.0±9.039.0±6.235.0±2.5141.0±7.8151.0±14.7253.0±5.3253.0±7.617.0±6.115.0±3.1DMSO对照130.0±5.3132.0±6.736.0±5.737.0±6.4146.0±18.0147.0±14.0255.0±10.6259.0±12.216.0±2.517.0±4.0阳性对照2 145.0±104.8（1）935.0±117.2（2）999.0±129.0（1）2 058.0±69.3（2）1 064.0±68.4（3）1 095.0±63.5（2）1 894.0±113.0（3）1 108.0±98.0（4）361.0±37.2（5）413.0±32.1（6）注：（1）为敌克松，50 µg/皿；（2）为2-氨基芴，10 µg/皿；（3）为甲基磺酸甲酯，0.5 µg/皿；（4）为1，8-二羟基蒽醌，50 µg/皿；（5）为叠氮钠，0.25 µg/皿；（6）为2-氨基蒽，1 µg/皿；表3与此同。CFU10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.T003表3细菌回复突变试验结果（第2次）组别TA97aTA98TA100TA102TA1535-S9+S9-S9+S9-S9+S9-S9+S9-S9+S98 µg/皿137.0±11.1131.0±8.737.0±5.038.0±2.6159.0±18.0135.0±16.4259.0±18.0256.0±17.616.0±2.016.0±2.140 µg/皿132.0±10.3134.0±10.134.0±2.637.0±3.5154.0±16.3147.0±18.8262.0±10.6263.0±13.116.0±1.515.0±4.7200 µg/皿135.0±8.5136.0±11.334.0±2.636.0±3.1155.0±17.0155.0±13.9257.0±7.4256.0±13.315.0±2.617.0±2.01 000 µg/皿138.0±11.0136.0±9.535.0±4.536.0±4.0141.0±17.3144.0±17.1263.0±5.7255.0±12.318.0±2.516.0±2.55 000 µg/皿134.0±8.9133.0±13.337.0±5.535.0±2.1141.0±11.1153.0±14.6256.0±16.2264.0±18.116.0±1.516.0±3.6自发回变133.0±10.0139.0±8.937.0±5.835.0±3.0140.0±15.0149.0±10.8263.0±8.3264.0±7.417.0±3.215.0±3.5溶剂对照132.0±9.1135.0±9.636.0±4.734.0±2.6139.0±15.3149.0±15.9248.0±14.4256.0±8.315.0±4.216.0±4.9DMSO对照127.0±12.5143.0±12.639.0±5.142.0±2.6158.0±11.9140.0±9.3264.0±18.8258.0±15.516.0±2.514.0±1.2阳性对照2 120.0±93.2（1）916.0±131.3（2）944.0±136.0（1）1 998.0±107.9（2）1 014.0±78.5（3）1 012.0±103.1（2）1 827.0±142.6（3）1 033.0±122.8（4）347.0±37.2（5）435.0±48.8（6）CFU2.2.2哺乳动物红细胞微核试验结果（见表4）由表4可知，雌雄各剂量组含微核细胞率与阴性对照组相比差异均不显著（P0.05），雌雄阳性对照组含微核细胞率均极显著高于阴性对照组和各剂量组（P0.01）；雌雄各剂量组嗜多染红细胞比率均未低于阴性对照组的20%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.T004表4哺乳动物红细胞微核试验结果性别组别剂量/(g/kg)动物数/只检查细胞数/个微核数/个微核率/%嗜多染红细胞比率/%雄性阴性对照0510 000161.60±0.8951.77±0.95阳性对照40.0510 00028628.60±5.54**51.73±1.15低剂量组2.5510 000141.40±0.8451.50±0.80中剂量组5.0510 000212.10±0.8452.07±0.87高剂量组10.0510 000141.40±1.3052.32±0.96雌性阴性对照0510 000141.40±0.4551.88±0.84阳性对照40.0510 00028328.30±4.39**51.66±0.98低剂量组2.5510 000111.10±1.3052.07±0.87中剂量组5.0510 000141.40±0.8452.32±1.13高剂量组10.0510 000171.70±1.1451.38±1.13注：“**”表示与阴性对照组相比差异极显著（P0.01）；下表同。结果表明，金莲花不能导致哺乳动物嗜多染红细胞含微核细胞率增加，无细胞毒性。2.2.3小鼠精母细胞染色体畸变试验结果（见表5）由表5可知，各剂量组染色体异常细胞率、常染色体和性染色体与阴性对照组相比差异均不显著（P0.05），阳性对照组染色体异常细胞率极显著高于阴性对照组（P0.01）。结果表明，金莲花对小鼠精母细胞染色体畸变未产生明显影响，无致畸变作用。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.T005表5小鼠精母细胞染色体畸变试验结果组别剂量/(g/kg)观察细胞数/个常染色体单价体/个性染色体单价体/个易位/环状体/个断片/微小体/个染色体异常细胞/个染色体异常细胞率/%阴性对照0500310220.4阳性对照40.0500812211132.6**低剂量组2.5500230110.2中剂量组5.0500320110.2高剂量组10.0500330220.42.3致畸试验结果（见表6、表7）由表6、表7可知，试验期间孕鼠摄食、饮水均正常，增重情况良好，无中毒和死亡发生。受孕大鼠各时期的体重、增重及净增重与阴性对照组比较均差异不显著，各剂量孕鼠生殖功能指标和发育外观指标与阴性对照组相比差异均不显著（P0.05），各剂量组胎鼠外观、骨骼、内脏发育未见异常。结果表明，金莲花的大鼠致畸试验中受孕大鼠未出现中毒体征，未对孕鼠生殖功能产生影响，未观察到胎鼠骨骼畸形和内脏畸形。因此，在本试验条件下，金莲花对大鼠无致畸效应。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.T006表6金莲花对胎鼠生长指标的影响组别剂量/(g/kg)受检胎鼠/只雌性比胎鼠体重/g胎鼠体长/cm阴性对照02021∶1.104.02±0.6837.50±4.41低剂量组1.252001∶1.014.02±0.5438.16±4.20中剂量组2.501971∶0.964.00±0.5736.69±4.51高剂量组5.002021∶0.983.98±0.5637.59±5.0910.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.T007表7金莲花对胎鼠外观、内脏和胸骨的影响组别剂量/(g/kg)外观畸形内脏畸形胸骨畸形受检胎鼠数/只畸形率/%受检胎鼠数/只畸形率/%受检胎鼠数/只畸形率/%阴性对照02000100010020.0低剂量组1.2520009809922.2中剂量组2.501970101010115.8高剂量组5.002020101010120.82.490 d经口急性试验结果试验期间，各组动物自主活动正常，生长发育状态良好，未见中毒表现和体征。解剖后通过组织学观察未见明显病理组织学变化。在眼部、体重、进食量、食物利用率、血常规、血液生化检查、尿常规、脏器重量及脏体比等指标检查过程中均未见损害性影响。2.4.1金莲花对大鼠体重和进食利用率的影响（见图1、图2）各剂量组雌雄大鼠体重增长情况良好，与阴性对照组相比差异不显著，表明金莲花对大鼠的体重增长无显著抑制作用。由图1可知，各剂量组大鼠前4周体重增长较多，第5~13周增重较少。由图2可知，各组大鼠每周食物利用率均呈下降趋势，表明金莲花对大鼠体重和进食无明显影响。图1金莲花对大鼠每周增重的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.F1a110.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.F1a2图2金莲花对大鼠食物利用率的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.F2a110.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.F2a22.4.2金莲花对大鼠血常规和血液生化指标的影响（见表8、表9）由表8可知，与雌性阴性对照组相比，雌性低剂量组大鼠凝血酶时间极显著升高（P0.01），血液中淋巴细胞数目显著升高（P0.05）；雌性中剂量组大鼠凝血酶原时间极显著升高（P0.01），血液中单核细胞数目显著升高（P0.05）；雌性中剂量组和雌性高剂量组大鼠凝血酶时间显著升高（P0.05）。与雄性阴性对照组相比，雄性低剂量组大鼠红细胞数目显著降低（P0.05），血小板数目极显著升高（P0.01）；雄性中剂量组大鼠血细胞比容显著降低（P0.05），淋巴细胞数目显著升高（P0.05）；雄性高剂量组大鼠凝血酶原时间极显著升高（P0.01）。所有检测值均在正常范围内，表明无毒理学影响。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.T008表8金莲花对大鼠血常规指标的影响项目雌性阴性对照雌性低剂量组雌性中剂量组雌性高剂量组雄性阴性对照雄性低剂量组雄性中剂量组雄性高剂量组白细胞数目/(×109/L)2.70±0.823.45±1.153.24±1.173.23±1.083.46±1.293.79±1.014.20±0.833.45±0.87红细胞数目/(×1012/L)7.52±0.387.41±0.337.65±0.467.36±0.368.17±0.187.84±0.51*8.33±0.368.25±0.11血红蛋白/(g/L)136.10±6.57137.70±5.33138.80±4.87136.70±5.87146.10±3.67146.10±8.74150.30±4.64146.80±3.12血细胞比容/%39.98±1.4840.67±1.2540.98±1.1739.36±1.2543.04±1.2742.18±1.8541.56±0.87*43.06±1.13血小板/(×109/L)922.60±46.04930.50±56.10971.50±79.15958.10±74.49821.10±67.16937.30±91.58**890.40±76.66836.40±36.27凝血酶原时间/s8.44±0.258.23±0.277.96±0.43**8.20±0.238.59±0.318.66±0.448.87±0.399.00±0.26**凝血酶时间/s14.72±1.0616.98±1.26**15.87±1.02*13.54±1.11*15.19±1.4716.31±2.0516.51±1.5915.31±1.17淋巴细胞数目/(×109/L)1.85±0.542.37±0.54*2.02±0.542.28±0.581.79±0.332.24±0.492.30±0.73*1.63±0.41单核细胞数目/(×109/L)0.17±0.070.21±0.070.24±0.08*0.16±0.040.21±0.080.20±0.070.22±0.080.21±0.05中性粒细胞数目/(×109/L)0.40±0.100.37±0.080.52±0.160.41±0.140.46±0.130.49±0.150.60±0.200.52±0.15注：“*”表示与阴性对照组相比差异显著（P0.05），“**”表示与阴性对照组相比差异极显著（P0.01）；下表同。由表9可知，与雌性阴性对照组相比，雌性低剂量组大鼠血液钾离子含量极显著升高（P0.01），葡萄糖含量极显著降低（P0.01），氯离子和尿素氮含量显著升高（P0.05）；雌性中剂量组大鼠血液总蛋白含量显著升高（P0.05），葡萄糖含量极显著降低（P0.01），谷丙转氨酶活性显著升高（P0.05）；雌性高剂量组大鼠血液总胆固醇含量显著升高（P0.05）。与雄性阴性对照组相比，雄性中剂量组大鼠谷丙转氨酶活性极显著升高（P0.01），钾离子含量显著升高（P0.05）；雄性高剂量组大鼠血液总胆固醇含量和谷氨酰转移酶活性显著降低（P0.05）。所有检测值均在正常范围内，表明无毒理学影响。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.017.T009表9金莲花对大鼠血液生化指标的影响项目雌性阴性对照雌性低剂量组雌性中剂量组雌性高剂量组雄性阴性对照雄性低剂量组雄性中剂量组雄性高剂量组总蛋白/(g/L)58.45±3.3460.01±3.6662.46±3.81*59.47±3.5556.22±1.5558.71±3.0059.45±5.7156.27±3.15白蛋白/(g/L)36.21±1.8338.72±9.4637.30±2.2336.38±1.5633.62±0.8634.62±2.2933.71±2.1333.48±1.58谷丙转氨酶/(U/L)38.40±5.0837.10±8.0943.90±4.61*37.70±3.4039.10±6.0638.90±5.8247.40±7.79**40.20±4.59谷草转氨酶/(U/L)124.60±9.77125.40±22.54131.80±19.90117.10±14.61113.10±14.45114.80±13.64129.10±25.17126.70±17.43碱性磷酸酶/(U/L)104.60±31.7897.30±32.23103.70±25.69126.00±23.56136.90±22.66117.50±26.40130.70±30.90148.10±18.14钾/(mmol/L)4.74±0.575.36±0.49**5.07±0.354.93±0.425.17±0.215.48±1.006.18±1.94*5.24±0.33钠/(mmol/L)142.33±1.65143.06±2.22143.01±1.44141.40±1.90144.11±2.13144.94±1.67143.98±1.78143.91±1.40氯/(µmol/L)103.66±1.92105.68±2.62*103.97±1.81102.30±1.82104.83±2.08104.10±1.29103.60±1.57105.54±1.07尿素氮/(mmol/L)7.25±1.238.80±1.72*7.66±0.748.13±1.046.54±0.797.40±1.007.39±1.066.72±1.11肌酐/(µmol/L)45.10±7.1148.10±8.0840.20±7.3043.70±8.7842.30±6.5545.40±7.7644.00±5.6642.90±5.32葡萄糖/(mmol/L)6.69±1.185.32±1.20**4.94±0.86**6.09±0.946.59±0.956.27±1.466.31±1.357.02±1.48总胆固醇/(mmol/L)2.01±0.132.11±0.402.18±0.232.38±0.40*1.86±0.311.97±0.161.63±0.351.60±0.21*甘油三酯/(mmol/L)0.44±0.170.37±0.140.43±0.140.45±0.140.35±0.230.44±0.200.51±0.240.27±0.10谷氨酰转移酶/(mmol/L)0.90±0.320.80±0.420.40±0.520.80±0.791.00±0.001.00±0.000.80±0.420.70±0.48*2.4.3金莲花对大鼠尿液及病理学检查结果的影响尿常规结果显示，各剂量组检测指标与阴性对照组相比差异均不显著。90 d喂养终止后，对各剂量组大鼠和阴性对照组大鼠进行病理学检查，剖检后肉眼观察，心脏、肝脏、胰脏、肺、肾脏、脑、胃、睾丸和子宫等26个主要脏器的色泽、大小和形态结构等均未见明显异常，未见与试验因素相关的病理组织学变化。3讨论本试验条件下，金莲花对试验动物半数致死量（LD50）大于10.0 g/kg·BW，属实际无毒级。刘琦等[9]用UPLC-MS法对金莲花进行了成分分析，尚未发现有毒有害成分，与本试验结果具有一致性。本研究中，3项遗传试验（细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验和小鼠精母细胞染色体畸变试验）的检测结果均为阴性，表明金莲花对试验动物无致突变作用。冯会红等[10]研究了金莲花对小鼠的免疫水平影响，均未发现金莲花对动物存在致突变作用；致畸试验中3个剂量下（高、中、低），孕鼠均未出现中毒体征，未观察到对大鼠的生殖毒性作用且无致畸作用。张秋翠等[11]研究发现，金莲花药渣可抑制小鼠体重增长。本研究中，各试验组雄鼠体重增加量均高于阴性对照，说明金莲花不抑制试验动物体重增长，与赵美等[12]研究阿尔泰金莲花对大鼠亚急性毒性的试验结果一致。90 d经口毒性试验中，未见动物出现中毒体征，血常规、血液生化、尿常规、脏器重量及脏体比等指标未见损害性影响，这与应用金莲花均未发生毒性损害的现状一致。我国农业农村部发布公告，要求退出除中药外的所有促生长类药物饲料添加剂品种[13]，中药饲料添加剂备受关注，但是在饲喂过程中必须保证其饲用安全性[14]。研究表明，中药饲料添加剂在促进动物生长发育[15]、改善动物肉品质[16]、提高动物免疫能力[17]和增加饲料的转化率等方面发挥重要作用。王兴群等[18]发现，复方中药饲料添加剂对育肥猪生长性能、屠宰性能、肉品质及免疫功能等方面均具有改善作用。张秀峰等[19]采用复方中药添加剂饲喂伊拉肉兔30 d后，肉兔体重均有不同程度的增加，并确定1.0%添加量对肉兔生产性能和抗病效果最佳。HUANG等[20]采用发酵中药饲喂肉仔鸡，结果显示，中药添加剂能够调节肠道微生物菌群，改善肉鸡生长性能。刘文涛等[21]探究影响金莲花药渣发酵物蛋白含量因素，发现利用乳酸菌发酵饲料能够提高产蛋率，并确定了最佳置换比例为15%。金莲花主要化学成分包含黄酮类化合物、有机酸、挥发油、酚类及少量萜类[22-24]，具有抗病毒、抗氧化、抗菌、抗肿瘤和抗炎镇痛等功效[25-27]，临床中用于治疗扁桃体炎、咽炎、支气管炎、鼻黏膜炎和呼吸道感染等疾病[28-30]。目前，有关金莲花作为饲料添加剂的研究越来越多，但金莲花毒性试验的报道较少。本试验条件下金莲花安全无毒，可作为饲料添加剂使用。4结论本研究结果表明，金莲花在急性毒性试验、遗传毒性试验、亚慢性毒性试验上均未显现毒性，表明金莲花安全无毒。