粗饲料的质量与奶牛的生产性能、乳品质、机体健康等方面密切相关[1]。目前，奶牛养殖中使用较为普遍的粗饲料主要有苜蓿、青贮饲料和秸秆等[2]。近年来，青贮饲料在反刍动物养殖生产中的应用逐渐增多，其品质也得到逐步改善[3-4]。全株玉米青贮在反刍动物生产中应用效果较为突出，高质量的全株玉米青贮不仅可以改善反刍动物机体健康和生产效益，还可以提高养殖的经济效益[5-6]。青贮过程中使用添加剂可以提高青贮成功率和青贮饲料质量，对缓解养殖过程粗饲料资源紧缺具有重要意义[7-8]。目前，关于缩短青贮时间和提高青贮饲料营养品质方面的研究较多[9-10]，在制作青贮的过程中经常使用的添加剂为菌制剂、酶制剂和有机酸等[11-13]。研究发现，全株玉米青贮可以提高反刍动物的生产性能、改善瘤胃发酵功能，提高养分利用率，改善畜产品品质[14-15]。但不同处理的全株玉米青贮对奶牛生产性能及瘤胃发酵方面的研究结果较少，需要更多的试验进一步研究其应用效果。本试验探讨了经菌制剂、酶制剂、菌酶复合制剂处理的全株玉米青贮对奶牛生产性能的影响，为荷斯坦奶牛的高效养殖提供一定的参考依据。1材料与方法1.1试验材料本试验使用的全株玉米品种为先达101，在蜡熟期收割，制作青贮。全株玉米营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.004.T001表1全株玉米营养水平项目粗蛋白中性洗涤纤维酸性洗涤纤维干物质钙磷淀粉含量8.0446.2925.2835.310.530.3127.55%青贮过程中使用的菌制剂主要成分为植物乳杆菌（2x108 CFU/g）；酶制剂为纤维素酶（25 000 U/g）。1.2青贮制作全株玉米青贮制作方法参考张金银[16]的试验方法进行制作。采用克拉斯青贮收割机进行破碎，填入青贮窖中，加入添加剂。对照组不添加添加剂直接青贮，试验1组添加0.3 g/kg菌制剂进行青贮，试验2组添加1 g/kg酶制剂进行青贮，试验3组添加0.3 g/kg菌制剂和1 g/kg酶制剂进行青贮。压实，覆膜，封窖。发酵90 d后进行饲养试验。1.3试验设计试验选择胎次（2~3胎次）、泌乳期（110±5 d）、产奶量相近的荷斯坦奶牛60头，按照单因素设计分为4个处理组，每组5个重复，每个重复3头奶牛。对照组奶牛饲喂无添加剂处理的全株玉米青贮。试验1组奶牛饲喂益生菌制剂处理的全株玉米青贮，试验2组奶牛饲喂酶制剂处理的全株玉米青贮，试验3组奶牛饲喂菌酶复合制剂处理的全株玉米青贮。预试期1周，正式试验期8周。基础饲粮组成及营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.004.T002表2基础饲粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100全株玉米青贮25泌乳净能/(MJ/kg)6.74羊草10粗蛋白/%16.04苜蓿干草15中性洗涤纤维/%36.85玉米22酸性洗涤纤维/%23.76豆粕14钙/%0.57DDGS5磷/%0.46麦麸5预混料4注：1.预混料由鹤壁中科未来农牧发展有限公司提供。2.营养水平均为计算值。1.4饲养管理本试验中，荷斯坦奶牛自由采食、自由活动，一直供水。牛舍的温度、湿度适宜，保证每日通风。每日打扫牛舍卫生，保持干燥。饲养人员仔细观察每头奶牛的健康状态。1.5测定指标及方法1.5.1生产性能试验期间，准确记录奶牛的日干物质采食量及日产奶量，用于分析养殖阶段奶牛的生产性能。1.5.2乳品质试验最后1 d，早、中、晚每头奶牛各采集100 mL的牛奶，将3份牛奶均匀混合。牛奶中的乳脂、乳糖、乳蛋白、乳总固体等指标使用MilkoScan TM FT 6000全自动乳成分分析仪［福斯华（北京）科贸有限公司］进行测定。1.5.3瘤胃发酵参数试验最后1 d，奶牛晨饲前，采集瘤胃液（口腔导管方法），过滤，-20 ℃条件下保存。瘤胃液pH值使用精密型pH计测定；氨态氮浓度的测定方法参照文献[17]，挥发性脂肪酸浓度参考文献[18]的试验方法，使用GC-2010气相色谱仪（Shimadzu）检测，菌体蛋白浓度参考文献[19]使用嘌呤法进行测定。1.5.4血清生化指标试验最后1 d，奶牛晨饲前，尾根静脉处采集血液10 mL于抗凝管中，3 500 r/min离心10 min，收集血清于-20 ℃冰箱保存。使用VET-5360全自动血清生化分析仪（深圳迈瑞）检测血清白蛋白、血糖、胆固醇、谷丙转氨酶、尿素氮、谷草转氨酶等指标，依据试剂盒（南京建成生物工程研究所）说明书进行检测。1.6数据统计与分析采用SPSS 25软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛生产性能的影响（见表3、表4）由表3可知，与对照组比较，试验各时间段，试验3组奶牛的平均日干物质采食量均显著提高（P0.05）；而试验1组和试验2奶牛的平均日干物质采食量与对照组差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.004.T003表3不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛平均日干物质采食量的影响组别1~30 d31~60 d1~60 d对照组23.42±1.84b24.05±2.19b23.74±1.47b试验1组24.38±1.05ab24.95±1.45ab24.67±2.14ab试验2组24.59±1.20ab25.14±1.41ab24.87±1.74ab试验3组26.04±1.29a26.41±1.35a26.23±2.18a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4、表5与此同。kg/（头·d）由表4可知，与对照组比较，试验各时间段，试验1组、2组和3组奶牛产奶量均显著增加（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.004.T004表4不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛平均日产奶量的影响组别1~30 d31~60 d1~60 d对照组24.28±0.94b26.16±0.83b25.22±1.05b试验1组26.25±1.64a27.94±1.81a27.10±1.49a试验2组26.52±0.95a28.31±1.37a27.42±0.74a试验3组27.43±1.95a28.95±1.74a28.19±2.07akg/（头·d）2.2不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛乳品质的影响（见表5）由表5可知，与对照组比较，试验3组奶牛乳蛋白率显著提高（P0.05），试验1组、试验2组和试验3组奶牛体细胞数量显著降低（P0.05）。不同处理方法的全株玉米青贮对乳脂率、总固形物、乳糖、非脂乳固体、乳尿素氮水平无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.004.T005表5不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛乳品质的影响组别乳脂率/%乳蛋白率/%总固形物/%体细胞数量/(×104/mL)乳糖/%非脂乳固体/%乳尿素氮/%对照组3.46±0.213.02±0.14b10.47±1.0424.15±1.72a4.95±0.289.56±0.658.04±0.55试验1组3.53±0.433.23±0.15ab10.55±1.0222.54±2.03b4.85±0.319.44±0.437.84±1.01试验2组3.58±0.213.28±0.21ab10.73±1.0522.04±1.59b4.75±0.229.36±0.517.68±0.65试验3组3.65±0.183.46±0.17a11.27±1.4221.32±1.26b4.62±0.419.29±0.477.14±0.492.3不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛瘤胃发酵参数的影响（见表6）由表6可知，与对照组比较，试验3组奶牛瘤胃乙酸、总挥发性脂肪酸、菌体蛋白水平显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.004.T006表6不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛瘤胃发酵参数的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组pH值6.56±0.436.5±0.396.47±0.556.42±0.43氨态氮/(mg/L)96.4±6.4a84.7±4.7ab83.3±5.8ab76.9±7.1b菌体蛋白/(g/L)4.88±0.37b5.03±0.41b5.14±0.38b5.83±0.41a乙酸/(mmol/L)44.34±2.18b46.31±2.84ab46.85±3.1ab48.57±3.38a丙酸/(mmol/L)15.46±1.3214.95±1.0414.84±1.3214.21±2.04丁酸/(mmol/L)11.88±.09411.93±0.8512.04±1.3911.94±2.02乙酸/丙酸2.87±0.143.10±0.423.12±0.353.42±0.04总挥发性脂肪酸/(mmol/L)71.68±5.18b73.19±5.74ab73.77±6.29ab74.72±7.06a注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.4不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛血清生化指标的影响（见表7）由表7可知，与对照组比较，试验3组奶牛血清中总蛋白水平显著提高（P0.05），试验1组、试验2组和试验3组奶牛血清葡萄糖水平显著提高（P0.05），尿素氮水平显著降低（P0.05）。不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛血清白蛋白、球蛋白、胆固醇、甘油三酯、谷草转氨酶和谷丙转氨酶等指标无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.04.004.T007表7不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛血清生化指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组总蛋白/(g/L)65.74±3.19b67.38±4.05ab67.71±4.15ab69.43±5.18a白蛋白/(g/L)36.24±1.8436.87±2.5136.77±3.0537.04±2.17球蛋白/(g/L)29.50±1.0630.51±2.3630.94±1.7532.39±3.63尿素氮/(mmol/L)6.83±0.42a5.75±0.29b5.58±0.32b5.04±0.36b碱性磷酸酶/(U/L)45.39±2.8446.54±2.1747.04±3.0547.31±2.63葡萄糖/(mmol/L)3.38±0.18b3.82±0.37a3.84±0.31a4.16±0.40a总胆固醇/(mg/L)49.4±3.247.7±2.847.0±1.846.2±2.5甘油三酯/(mmol/L)0.37±0.040.35±0.030.33±0.020.30±0.01谷丙转氨酶/(U/L)38.34±1.6938.13±1.9337.83±2.0537.66±2.17谷草转氨酶/(U/L)75.29±4.0674.79±5.0474.02±5.1973.71±4.543讨论3.1不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛生产性能及乳品质的影响制作全株玉米青贮时，添加酶制剂、菌制剂和有机酸盐等添加剂可以有效避免全株玉米中各类养分的损失，提高青贮饲料的营养品质，增加反刍动物的采食量，进而满足反刍动物机体对营养的需求[20]。研究表明，全株玉米青贮可以提高奶牛产奶量[21]。本研究中，与对照组比较，荷斯坦奶牛饲喂菌酶复合制剂处理的全株玉米青贮可以显著提高干物质采食量；菌制剂、酶制剂或者菌酶复合制剂的全株玉米青贮均可以显著提高产奶量。研究发现，全株玉米添加酶制剂青贮后，奶牛产奶量提高了8.54%，干物质采食量提高9.41%[22]。王祖艳等[23]研究了不同处理的全株玉米青贮对奶牛生产性能及瘤胃菌群结构的影响，发现经有机酸、菌制剂及酶制剂处理的全株玉米青贮有提高干物质采食量的趋势，三组全株玉米青贮可以使奶牛产奶量显著提高（4.5%、1.1%、5.4%）。可能是因为全株玉米青贮中粗纤维含量更低，粗蛋白含量更高，可为机体提供更多的营养物质，且青贮中含有更多的有益菌促进瘤胃的发酵，改善瘤胃功能，促进机体更好地吸收饲粮中的养分[24]。乳品质对奶牛养殖的经济效益至关重要，主要由乳脂率、乳蛋白率、乳糖和体细胞数量等指标组成[25]。本试验中，与对照组比较，奶牛饲喂菌酶复合制剂处理的全株玉米青贮可以显著提高乳蛋白率，饲喂菌制剂、酶制剂及菌酶复合制剂处理的全株玉米青贮可以显著降低体细胞数量，表明全株玉米添加菌制剂、酶制剂青贮可以提高牛奶中蛋白水平，改善奶牛乳腺健康。李艳玲等[26]研究发现，奶牛采食经酶制剂处理的全株玉米青贮可以改善乳脂、乳糖、乳尿素氮、总固形物等指标水平。张帅等[22]研究表明，经菌制剂、酶制剂处理的全株玉米青贮对乳蛋白率、乳糖、乳脂率、乳尿素氮、总固形物等指标均无显著影响。目前，关于不同添加剂处理的全株玉米青贮对乳品质的研究结果较少，且结果并不一致，可能与青贮添加剂的添加水平、种类及全株玉米青贮添加水平不同等因素有关[27]。3.2不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛瘤胃发酵参数的影响瘤胃发酵功能可以反映反刍动物机体的健康程度及对饲粮中养分利用效果，主要由瘤胃pH值、菌体蛋白、氨态氮、挥发性脂肪酸等组成[28]。适宜的瘤胃pH值可以使瘤胃内环境处于稳定状态，更好地消化吸收纤维、蛋白质等营养物质；反刍动物机体所需的大部分能量由挥发性脂肪酸提供；而氨态氮、菌体蛋白水平可以反映反刍动物机体对氮的利用率[29]。本研究结果显示，与对照组比较，奶牛饲喂菌酶复合制剂处理的全株玉米青贮可以显著提高乙酸、总挥发性脂肪酸和菌体蛋白浓度，表明经添加剂处理的全株玉米青贮改善了瘤胃发酵功能，使机体更健康。王祖艳等[23]研究发现，与有机酸和菌制剂处理的全株玉米青贮相比，奶牛采食经菌酶复合处理的全株玉米青贮可以显著提高瘤胃中乙酸和丙酸浓度，调节瘤胃菌群丰度，改善菌群结构。张云凯等[30]发现，不同处理的全株玉米青贮可以显著降低肉羊瘤胃氨态氮浓度，全株玉米添加菌酶复合制剂青贮可以显著促进乙酸和丙酸的产生，改善瘤胃健康水平。经添加剂处理的全株玉米青贮中含有大量的有益菌和消化酶，可以帮助动物瘤胃及肠道建立一个相对稳定、健康的内环境，抑制有害菌的定植与繁殖，通过提高胃肠道功能改善生产性能[31]。3.3不同处理方法的全株玉米青贮对奶牛血清生化指标的影响血清生化指标的水平可以反映机体各种生理代谢水平，也能反映动物机体的健康状态[32]。本试验中，与对照组比较，奶牛饲喂菌酶复合制剂处理的全株玉米青贮可以显著提高血清中总蛋白水平，饲喂菌制剂、酶制剂及菌酶复合制剂处理的全株玉米青贮可以显著提高血清葡萄糖水平，显著降低尿素氮水平，说明全株玉米添加菌制剂和酶制剂青贮可以促进奶牛对蛋白质的消化利用率，改善血糖水平；而不同处理的全株玉米青贮对奶牛血清白蛋白、球蛋白、胆固醇、甘油三酯、谷草转氨酶和谷丙转氨酶等指标无影响。张帅等[22]研究发现，经菌制剂和酶制剂处理的全株玉米青贮使奶牛血清中谷丙转氨酶活性显著提高了24.01%和46.46%，而对照组和试验组奶牛血清中谷草转氨酶和碱性磷酸酶活性无差异。王改芳等[33]发现，全株玉米经纤维素酶发酵后，可以提高肉羊血清中葡萄糖和总蛋白水平，而全株玉米经有机酸盐和纤维素酶处理可以显著降低肉羊血清尿素氮水平。综上所述，全株玉米青贮过程中添加适量的青贮添加剂能够促进反刍动物机体内蛋白质的代谢。目前，关于不同添加剂处理的全株玉米青贮对反刍动物血清生化指标的研究结果较少，未来需要进一步深入研究作用机理。4结论本试验表明，菌制剂、酶制剂及菌酶复合制剂处理的全株玉米青贮能够改善荷斯坦奶牛的生产性能、乳品质、瘤胃发酵功能及部分血清生化指标，且菌酶复合处理组的全株玉米青贮饲喂效果较好。