母乳中脂肪不仅是后代仔猪重要的能量来源,其中包含的必需脂肪酸还对仔猪免疫系统、神经系统发育具有重要影响,而乳汁中脂肪含量及脂肪酸组成受饲粮中脂肪来源影响极大[1-2]。鱼油中富含n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFA),其中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量尤为丰富,对促进幼龄动物神经系统发育、抑制机体炎症等具有显著的生理作用[3-6]。因此,有学者在母猪饲粮中添加鱼油,研究其是否可以通过改善母乳中必需脂肪酸含量及组成来提高仔猪成活率和生长性能[7-9]。LLAURADÓ-CALERO等[8]、JIN等[10]及陈进超[11]研究发现,在母猪饲粮中添加不同水平的鱼油提高了母乳中DHA、EPA和总n-3 PUFA的含量,有利于提高仔猪的成活率和生长性能。但也有研究发现,在妊娠后期和哺乳期母猪饲粮中添加8%和10%鱼油对仔猪增重和成活率会产生不利的影响[1],表明过高的鱼油摄入也有可能不利于仔猪生长。因此,目前饲粮中添加鱼油是否能够提高母猪泌乳性能和仔猪生长性能结论尚不明确。本研究通过在哺乳母猪饲粮中添加不同比例鱼油验证鱼油是否可以影响母猪泌乳性能及仔猪生长性能,为鱼油在哺乳母猪生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料选用56头妊娠后期(107 d)健康的“长×大”杂交后备母猪,在广东海大集团研究院江门母猪试验基地开展试验。试验所用鱼油为50%鱼油+50%膨化玉米制成的鱼油粉。1.2试验设计56头后备母猪按照体况、背膘厚度和预产期相近的原则随机分成4组,每组14个重复,每个重复1头母猪。试验分为对照组、0.5%鱼油组、1.0%鱼油组、2.0%鱼油组。试验饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.006.T001表1试验饲粮组成及营养水平(风干基础)项目对照组0.5%鱼油组1.0%鱼油组2.0%鱼油组原料组成/%玉米59.258.758.257.2豆粕(43%)18.518.518.518.5面粉8.08.08.08.0豆油2.01.51.00膨化大豆8.08.08.08.0磷酸氢钙1.61.61.61.6石粉0.60.60.60.6预混料2.12.12.12.150%鱼油粉01.02.04.0合计100.0100.0100.0100.0营养水平消化能/(MJ/kg)14.4814.4814.4814.48粗蛋白/%17.1717.3617.1017.22粗脂肪/%5.645.785.735.72钙/%0.730.720.720.71总磷/%0.610.600.630.61赖氨酸/%1.161.151.191.20苏氨酸/%0.710.740.700.74蛋氨酸+胱氨酸/%0.690.650.680.66C18∶2(n-6)/%3.223.072.742.28C18∶3(n-3)/%0.270.240.230.18C22∶5(n-3)/%未检出0.050.100.19C22∶6(n-3)/%未检出0.040.080.17注:1.预混料为每千克饲粮提供:Cu 15 mg、Fe 120 mg、Mn 60 mg、Zn 120 mg、I 0.40 mg、Se 0.40 mg、VA 8 000 IU、VD3 2 200 IU、VE 120 mg、VK3 4 mg、VB1 1.80 mg、VB2 6.50 mg、VB6 3.60 mg、VB12 0.03 mg、生物素0.85 mg、泛酸22 mg、叶酸4.50 mg、烟酸30 mg。2.营养水平中消化能为计算值,其余均为实测值。1.3饲养管理所有母猪在同一产房内饲养,产房内通过风机、水帘保持温度、湿度相对适宜,仔猪采用保温灯保暖。试验处理从母猪进入产房后及妊娠第107 d开始饲喂对应试验饲粮,并在哺乳第18 d统一断奶后结束。母猪分娩当天饲喂1 kg,随后每天增加0.5 kg,在分娩第7 d开始自由采食。试验期间每天饲喂4次(8:00、12:00、15:00和18:00),每次饲喂时清理料槽,称重并记录余料。称量初生仔猪的初生重,并在处理组内调整(24~48 h内完成)母猪带仔数,保证不同处理间母猪平均带仔头数及带仔窝重无显著差异。其他饲养管理和免疫程序均按猪场要求统一执行。1.4样品采集准确记录试验期间母猪每天的采食量,测量并记录分娩和断奶当天母猪P2点背膘厚度,计算母猪泌乳期背膘损失。记录每头母猪总产仔数、活仔数、健仔数、死胎数等数据,记录每头母猪断奶后到再发情天数。称量并记录仔猪出生重、调窝后窝重、第18 d断奶当天窝重,计算仔猪的平均断奶重和平均日增重。仔猪腹泻率=各重复累计腹泻头数/(哺乳仔猪总头数×哺乳天数)×100%(1)在母猪分娩后第1 d和第14 d的8:00采集乳样,每头母猪颈部肌注2 mL催产素,约10 min后分别从前、中、后乳头均匀采集乳样约50 mL,-20 ℃保存。仔猪第18 d断奶当天早上空腹,并从每窝中随机挑选1头仔猪从前腔静脉采集血液样品,分离血浆,于-80 ℃保存。1.5测定指标及方法1.5.1乳成分乳汁中乳脂、非脂固形物、乳蛋白、乳糖含量用乳成分分析仪(MilkoScan TM FT120,FOSS)测定。1.5.2乳汁中脂肪酸成分母猪乳汁中脂肪酸成分由广东省农业科学院采用GC-MS进行测定,靶向分析各脂肪酸的含量,样品前处理、GC-MS检测方法及数据分析参考张选应[2]采用的研究方法。1.5.3免疫球蛋白血浆及乳汁中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量采用酶联免疫吸附方法检测,所用试剂盒购自南京建成生物工程研究所,采用Thermofish FC酶标仪测定。1.5.4炎症因子采用酶联免疫方法检测血浆中炎症因子含量,所用Elisa试剂盒购自上海恒远生物科技有限公司,采用Thermofish FC酶标仪测定。1.6数据统计与分析试验数据采用SPSS 28软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较,结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1添加不同比例鱼油对母猪泌乳性能的影响(见表2)由表2可知,添加鱼油对母猪哺乳期间平均日采食量、背膘损失、断奶发情间隔及仔猪哺乳期间成活率无显著影响(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.006.T002表2添加不同比例鱼油对母猪泌乳性能的影响项目对照组0.5%鱼油组1.0%鱼油组2.0%鱼油组窝均带仔数/头11.36±0.1511.36±0.1511.36±0.1511.36±0.15窝均断奶数/头11.36±0.1511.36±0.1511.36±0.1511.36±0.15成活率/%100.00100.00100.00100.00平均日采食量/[kg/(头·d)]4.92±0.194.55±0.214.58±0.244.80±0.08仔猪初重/(kg/头)1.98±0.111.97±0.081.97±0.071.97±0.08仔猪平均断奶重/(kg/头)5.41±0.16b5.49±0.10b5.46±0.18b5.91±0.12a仔猪平均日增重/[g/(头·d)]190.86±8.47b195.42±8.36ab193.85±10.94ab219.18±8.25a背膘损失/mm1.95±0.492.09±0.642.03±0.342.45±0.44断奶发情间隔/d4.85±0.775.01±1.105.16±0.835.11±1.35注:同行数据肩标字母不同表示差异显著(P0.05),字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。与对照组相比,添加2.0%鱼油显著提高了仔猪第18 d的平均断奶重及哺乳期间仔猪的平均日增重(P0.05)。2.2添加不同比例鱼油对母猪乳汁成分的影响(见表3)由表3可知,饲粮中添加鱼油对母猪初乳和第14 d常乳中乳脂、乳蛋白、乳糖和非脂固形物含量均无显著影响(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.006.T003表3添加不同比例鱼油对母猪乳汁成分的影响项目对照组0.5%鱼油组1.0%鱼油组2.0%鱼油组初乳乳脂4.02±0.573.99±0.754.24±0.624.15±1.02乳蛋白7.83±0.728.16±0.518.08±0.807.85±0.85乳糖3.01±0.432.74±0.413.07±0.742.98±0.44非脂固形物22.23±1.1421.87±0.6722.13±1.0322.28±1.25常乳乳脂6.21±0.776.28±0.866.24±1.086.30±0.91乳蛋白4.98±0.475.23±0.364.85±0.545.18±0.25乳糖5.95±0.725.74±0.386.03±0.515.87±0.56非脂固形物11.15±0.9610.94±1.0311.07±0.7710.67±0.84%2.3添加不同比例鱼油对母乳中脂肪酸组成的影响(见表4)由表4可知,与对照组相比,哺乳母猪饲粮中添加1.0%和2.0%鱼油显著提高了初乳中C22∶5n-3和C22∶6n-3脂肪酸含量(P0.05),对其他脂肪酸含量则无显著影响(P0.05)。与对照组相比,添加1.0%鱼油显著提高了常乳中C20∶5n-3、C22∶5n-3和C22∶6n-3脂肪酸含量(P0.05);添加2.0%鱼油显著提高了常乳中C16∶1、C20∶5n-3、C22∶5n-3和C22∶6n-3脂肪酸含量(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.006.T004表4添加不同比例鱼油对母乳中脂肪酸组成的影响项目对照组0.5%鱼油组1.0%鱼油组2.0%鱼油组初乳C14∶01.25±0.541.33±0.361.64±0.841.35±0.79C16∶021.85±3.2620.74±2.8522.53±1.9422.18±3.19C16∶12.15±0.632.28±0.352.07±0.462.34±0.30C18∶04.22±0.623.96±0.544.11±0.354.12±0.74C18∶127.35±1.9328.20±2.1126.99±1.5727.44±0.86C18∶2n-626.47±2.6427.22±1.4926.94±1.9525.45±2.12C18∶3n-31.23±0.421.30±0.281.32±0.681.19±0.37C20∶4n-60.63±0.210.55±0.160.52±0.160.53±0.13C20∶5n-30.25±0.090.31±0.060.28±0.100.45±0.17C22∶5n-30.11±0.03c0.13±0.02c0.22±0.04b0.34±0.06aC22∶6n-30.04±0.01d0.16±0.02c0.40±0.05b0.71±0.16a常乳C14∶03.84±0.613.98±0.733.67±0.443.74±0.51C16∶032.15±2.5933.39±3.1131.76±3.0532.03±4.41C16∶19.04±0.26b9.13±0.48b9.74±0.59ab10.47±0.28aC18∶03.82±0.413.76±0.863.73±0.753.68±0.39C18∶125.70±2.1825.13±1.8223.85±1.6522.31±1.94C18∶2n-617.21±1.0316.96±0.9816.24±1.1715.48±1.43C18∶3n-31.12±0.371.03±0.431.28±0.321.09±0.47C20∶4n-60.24±0.090.27±0.050.25±0.070.30±0.06C20∶5n-30.17±0.03c0.26±0.03c0.88±0.14b1.29±0.17aC22∶5n-30.03±0.01c0.11±0.02c0.27±0.05b0.51±0.08aC22∶6n-30.01±0.01c0.25±0.12c0.71±0.15b1.12±0.18a%2.4添加不同比例鱼油对母猪乳汁中免疫球蛋白含量的影响(见表5)由表5可知,与对照组相比,添加1.0%和2.0%鱼油显著提高了初乳中IgG和IgM含量(P0.05),但添加鱼油对初乳中IgA以及常乳中IgA、IgG、IgM含量无显著影响(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.006.T005表5添加不同比例鱼油对母猪乳汁中免疫球蛋白含量的影响项目对照组0.5%鱼油组1.0%鱼油组2.0%鱼油组初乳IgA8.34±0.668.75±0.979.28±0.759.16±0.48IgG60.21±0.79c58.95±1.09c64.24±0.91b69.84±1.46aIgM3.97±0.19c4.17±0.14c4.71±0.15b5.29±0.21a常乳IgA2.45±0.332.20±0.522.36±0.472.74±0.39IgG0.63±0.040.65±0.070.59±0.050.69±0.07IgM1.38±0.341.51±0.401.67±0.481.76±0.37g/L2.5添加不同比例鱼油对哺乳仔猪血浆中免疫球蛋白含量的影响(见表6)由表6可知,与对照组相比,添加2.0%鱼油显著提高了仔猪血浆中IgG和IgM含量(P0.05),添加1.0%鱼油显著提高了仔猪血浆中IgM含量(P0.05),但饲粮中添加鱼油对哺乳仔猪血浆中IgA含量无显著影响(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.006.T006表6添加不同比例鱼油对哺乳仔猪血浆中免疫球蛋白含量的影响项目对照组0.5%鱼油组1.0%鱼油组2.0%鱼油组IgA0.44±0.020.46±0.020.48±0.030.50±0.02IgG9.54±0.09b9.50±0.12b9.92±0.18b11.13±0.39aIgM0.46±0.03c0.47±0.02c0.50±0.01b0.57±0.03ag/L2.6添加不同比例鱼油对哺乳仔猪血浆中炎症因子含量的影响(见表7)由表7可知,与对照组相比,添加2.0%鱼油显著降低了仔猪血浆中IL-1β和TNF-α含量(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.006.T007表7添加不同比例鱼油对哺乳仔猪血浆中炎症因子含量的影响项目对照组0.5%鱼油组1.0%鱼油组2.0%鱼油组IL-1β179.32±4.29a180.14±3.89a174.25±4.09ab164.71±3.64bIL-6277.28±7.73269.48±8.02283.79±5.83273.35±8.95TNF-α43.54±1.98a43.12±2.00a39.17±2.24ab36.08±1.91bng/L3讨论多不饱和脂肪酸(PUFA)是指含有两个或两个以上的直链脂肪酸,其中具有生物学意义的主要是n-3 PUFA和n-6 PUFA。在动物体内n3和n6脂肪酸二者共用同一套酶系,这些酶对n3脂肪酸的亲和力大于n6脂肪酸,因此增加n3脂肪酸的供给会降低n6脂肪酸向长链多不饱和脂肪酸的转化[12-13]。研究发现,n-6 PUFA在体内通常会转化为促炎症类花生酸,而n-3 PUFA会产生抗炎症类花生酸,同时二者也会直接调控繁殖相关激素(孕酮、前列腺素等)以及免疫因子(细胞因子、抗体等)的合成[13-14]。3.1添加不同比例鱼油对母猪泌乳性能的影响鱼油中有较高含量的n-3 PUFA,最高可达到总脂肪酸的20%,主要是EPA和DHA[15]。ROOKE等[16]研究发现,在哺乳期母猪饲粮中添加3%金枪鱼油可以促进仔猪生长,有效提高仔猪断奶重。晋超[17]研究发现,在哺乳母猪饲粮中添加3.9%鱼油对改善母猪泌乳效果有显著效果,提高了仔猪断奶重和日增重,但对母猪泌乳期采食量无显著影响。本研究中,饲粮添加鱼油对母猪泌乳期采食量、背膘损失、断奶发情间隔、哺乳期仔猪成活率均无显著影响,但饲粮中添加2.0%鱼油对母猪泌乳性能有一定的改善作用,显著提高了仔猪断奶重和哺乳期日增重。LAURIDSEN等[1]在母猪妊娠后期和哺乳期添加8%动物脂肪、棕榈油、椰子油、菜籽油、鱼油和葵花籽油,发现鱼油组仔猪窝增重显著低于动物油脂和葵花籽油组。原因可能与鱼油的添加量有关,过高的n-3 PUFA会抑制机体内n-6 PUFA消化率,导致n-3/n-6比例失衡,同样对母猪泌乳性能产生不利影响。3.2添加不同比例鱼油对母乳中脂肪酸组成的影响饲粮中脂肪含量及脂肪酸组成对泌乳母猪乳汁成分及脂肪酸组成有直接影响,不同脂肪来源对母猪泌乳性能及后代仔猪健康水平有直接影响。目前,母猪饲粮中主要以大豆油作为脂肪来源,导致母猪乳猪中n-3 PUFA含量偏低,可能对母猪发挥其最大的生产潜力有一定影响[18-20]。EASTWOOD等[21]和肖成林[22]研究发现,哺乳母猪饲粮中添加鱼油对母猪乳汁中乳蛋白、乳脂、乳糖及非脂固形物含量无显著影响,但对乳汁中脂肪酸组成有显著影响,尤其是乳汁中n-3 PUFA含量显著提高。本研究发现,添加1.0%和2.0%鱼油显著提高了母猪初乳中C22∶5n-3、C22∶6n-3及常乳中C20∶5n-3、C22∶5n-3、C22∶6n-3含量,表明饲粮中添加鱼油可以提高母猪初乳及常乳中n-3 PUFA含量,可能对哺乳仔猪早期成长具有促进作用。3.3添加不同比例鱼油对母猪乳汁及仔猪血浆中免疫球蛋白含量的影响初乳中的免疫球蛋白可以为仔猪提供体液免疫保护,直到仔猪消化系统足够成熟,其中IgG是唯一可以通过胎盘的免疫球蛋白,IgM则是机体初次免疫应答出现的抗体,具有抵抗抗原、中和病毒和毒素、参与变态反应等重要生理功能[23-24]。在母猪妊娠后期和哺乳期添加功能性脂肪酸可以调节母猪机体免疫力,提高母猪乳汁中免疫球蛋白含量[25]。JIN等[10]及HAN等[7]研究发现,哺乳母猪饲粮中添加一定比例鱼油,可显著提高乳汁中免疫球蛋白含量,从而增强后代仔猪免疫能力,降低仔猪腹泻率。本研究同样发现,饲粮中添加1.0%及2.0%鱼油显著提高了母猪初乳中IgG和IgM含量,仔猪血浆中IgG和IgM含量也显著提高。以上研究表明,饲粮中添加鱼油可能通过提高母猪乳汁及仔猪血液中免疫球蛋白含量来增强仔猪免疫水平,提高仔猪成活率。3.4添加不同比例鱼油对仔猪体内炎症水平的影响研究证明,n-3 PUFA在动物体内通过竞争5-环氧合酶抑制花生四烯酸产生,降低促炎因子类二十烷酸-前列腺素2浓度,从而调节机体炎症反应,提高幼龄动物成活率[26-27]。MCAFEE[28]研究发现,在母猪哺乳期饲粮中添加1%鱼油显著抑制了仔猪由于LPS处理导致的炎症反应,降低了血浆中炎症因子TNF-α含量,从而缓解仔猪断奶应激,改善生长性能。LLAURADÓ-CALERO等[29]和许铭洙[30]研究发现,哺乳母猪饲粮中添加鱼油可以显著提高母猪初乳中IgG水平,降低炎症因子IL-6、TNF-α含量及NF-κB基因表达水平,从而增强后代仔猪免疫调节能力。本试验结果发现,哺乳母猪饲粮中添加2.0%鱼油显著降低了断奶仔猪血浆中IL-1β和TNF-α含量,对缓解后代仔猪体内炎症水平具有一定帮助。4结论本试验研究发现,在母猪饲粮中添加2.0%鱼油提高了母猪泌乳性能和仔猪生长性能,增加了母猪乳汁中n-3 PUFA比例及免疫球蛋白含量,改善了后代仔猪免疫能力。

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