植物多糖是提取自植物的根、茎、叶、皮、花、种子等部位的一大类天然高分子聚合物[1-3],具有降血脂、降血糖、抗凝血、耐氧化、抗肿瘤、抗病毒、抑菌、调节免疫活性、保护肠道健康等多种生物学功能[4-6]。目前,分离和纯化得到的植物多糖已有近百种,且已被广泛应用食品、医药、动物生产等领域[7-9]。植物多糖在动物养殖生产中的研究主要集中在新型饲料添加剂和新型疫苗免疫佐剂研发和应用方面[10-12]。植物多糖具有来源广泛、无毒副作用、安全高效等优点,可以改善动物的生长性能,提高消化代谢功能,改善肉品质,增强机体免疫功能和抗氧化功能[13-15]。复合植物多糖是将不同种植物多糖按照一定比例配伍复合而成,能够协同发挥不同种植物多糖的功能[16-17]。夏明明等[18]研究表明,黄芪多糖可以改善仔兔生长性能,促进机体代谢,提高免疫功能。张磊等[19]研究表明,岩藻多糖可提高肉兔生长性能,提高内脏器官指数和抗氧化能力。郭力伟等[20]研究表明,姬松茸多糖能够提高肉兔生长性能,调节肠道菌群和免疫功能。赵倍莹等[21]研究表明,枸杞多糖可以改善肉兔肉品质。目前,关于复合植物多糖在兔养殖生产中的研究报道较少。本试验将黄芪多糖、枸杞多糖、苜蓿多糖合理配伍,研究其不同添加剂量对肉兔生长性能、养分表观消化率、血清生化和免疫指标的影响,为复合植物多糖在肉兔养殖生产中的推广应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料黄芪多糖、枸杞多糖、苜蓿多糖均购自山东淄博维希尔生物技术有限公司,纯度均≥70%。黄芪多糖、枸杞多糖、苜蓿多糖以2∶1∶1混匀,组成复合植物多糖。35日龄新西兰肉兔购自山东青岛康大兔业有限公司。总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)检测试剂盒,均购自南京建成生物工程研究所有限公司。1.2试验设计及饲养管理将120只35日龄、体重(914.04±4.08)g新西兰肉兔随机分成4组,每组15个重复,每个重复2只肉兔。对照组肉兔饲喂基础饲粮,复合植物多糖Ⅰ组、复合植物多糖Ⅱ组、复合植物多糖Ⅲ组分别在基础饲粮中添加0.01%、0.05%、0.10%的复合植物多糖。基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.010.T001表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米20.00消化能/(MJ/kg)10.78麸皮21.00粗蛋白/%17.14豆粕14.00粗脂肪/%1.78苜蓿草粉25.00粗纤维/%11.12花生壳10.00中性洗涤纤维/%28.53花生秧7.00酸性洗涤纤维/%15.24石粉0.75钙/%0.94食盐0.50磷/%0.52磷酸氢钙0.75预混料1.00注:1.预混料为每千克饲粮提供:VA 4 000 IU、VD3 1 500 IU、VE 80 IU、Fe 100 mg、Zn 80 mg、Mn 30 mg、Cu 20 mg、I 0.50 mg、Se 0.20 mg、Co 0.15 mg。2.营养水平均为实测值。肉兔采用笼养方式,每日早晚各饲喂1次,自由饮水,常规免疫、消毒、打扫卫生。试验期35 d。1.3样品采集1.3.1粪便样品采集试验结束前7 d,每日上午准时采集新鲜粪便,将同一只肉兔连续7 d的粪便混合均匀,密封保存。1.3.2血清样品采集在试验结束时,采用心脏采血方法对每只肉兔采集血液10 mL,装入15 mL离心管中,待血清析出后,5 000 r/min离心10 min,吸取上清液,分离血清。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始和结束时对肉兔空腹称重,记录饲料消耗量,分别计算平均日增重、平均日采食量和料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=饲料消耗总量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2养分表观消化率参考张丽英[22]的方法测定粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、粗纤维(CF)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、总能(GE)、干物质(DM)、钙(Ca)、磷(P)的养分表观消化率。养分表观消化率=(饲粮中营养物含量-粪中营养物含量)/饲粮中营养物含量×100%(4)1.4.3血清生化、免疫、抗氧化指标按照试剂盒说明书测定血清TP、ALB、BUN、AST、ALT、IgG、IgA、IgM、IL-2、IL-6、T-AOC、SOD、GSH-Px、MDA等指标。1.5数据统计与分析采用SPSS 17.0统计软件对试验数据进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合植物多糖对肉兔生长性能的影响(见表2)由表2可知,3个复合植物多糖添加组的末重、平均日增重均显著高于对照组(P0.05)。复合植物多糖Ⅱ组、复合植物多糖Ⅲ组的料重比显著低于对照组、复合植物多糖Ⅰ组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.010.T002表2复合植物多糖对肉兔生长性能的影响组别初重/(g/只)末重/(g/只)平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[g/(只·d)]料重比对照组913.83±4.122 007.29±20.31c31.24±0.62c107.15±2.143.43±0.10a复合植物多糖Ⅰ组914.26±3.962 039.17±22.54b32.14±0.71b107.38±2.513.34±0.11a复合植物多糖Ⅱ组913.97±4.082 112.73±23.87a34.25±0.74a108.34±2.183.16±0.12b复合植物多糖Ⅲ组914.11±4.112 126.85±24.51a34.65±0.78a108.65±2.213.14±0.14b注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表4~表6与此同。2.2复合植物多糖对肉兔养分表观消化率的影响(见表3)由表3可知,3个复合植物多糖添加组的CP和NDF表观消化率均显著高于对照组(P0.05)。复合植物多糖Ⅱ组、复合植物多糖Ⅲ组的EE、CF、ADF表观消化率均显著高于对照组(P0.05)。结果表明,随着复合植物多糖添加剂量的增加,肉兔对各养分的表观消化率逐步提高。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.010.T003表3复合植物多糖对肉兔养分表观消化率的影响项目对照组复合植物多糖Ⅰ组复合植物多糖Ⅱ组复合植物多糖Ⅲ组CP70.21±1.25c72.35±1.32b74.52±1.41a74.63±1.43aEE72.65±2.14b73.54±2.41ab75.54±2.52a75.66±2.51aCF21.54±0.85b22.45±0.87ab23.34±0.84a23.47±0.82aNDF23.62±1.05b25.14±1.04a26.15±1.07a26.21±1.05aADF11.25±0.74b11.51±0.78ab12.24±0.81a12.35±0.78aGE55.12±0.9855.32±0.9755.43±0.9455.51±0.92DM61.21±1.1161.54±1.1461.85±1.2161.82±1.18Ca58.95±1.0458.97±1.1159.47±1.0459.65±1.06P35.64±0.5435.67±0.6235.95±0.6735.94±0.64注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。%2.3复合植物多糖对肉兔血清生化指标的影响(见表4)由表4可知,3个复合植物多糖添加组肉兔血清TP、ALB的含量均显著高于对照组(P0.05),BUN含量显著低于对照组(P0.05)。复合植物多糖Ⅱ组、复合植物多糖Ⅲ组肉兔血清TG、GLU的含量均显著高于对照组(P0.05),AST、ALT活性显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.010.T004表4复合植物多糖对肉兔血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)TG/(mmol/L)GLU/(mmol/L)AST/(U/mL)ALT/(U/mL)BUN/(mmol/L)对照组57.21±2.21b33.25±1.14b0.72±0.11b7.14±0.58b52.14±1.75a45.21±1.51a6.87±0.48a复合植物多糖Ⅰ组60.36±2.14a35.14±1.18a0.79±0.10ab7.45±0.49ab50.17±1.32ab43.52±1.41ab6.27±0.44b复合植物多糖Ⅱ组61.14±2.21a35.78±1.35a0.86±0.11a7.83±0.52a48.95±1.24b42.17±1.38b6.07±0.42b复合植物多糖Ⅲ组61.35±2.18a35.84±1.24a0.88±0.10a7.89±0.53a48.75±1.21b41.98±1.27b6.02±0.38b2.4复合植物多糖对肉兔血清免疫指标的影响(见表5)由表5可知,3个复合植物多糖添加组肉兔血清IgG、IgA、IL-2的含量均显著高于对照组(P0.05)。复合植物多糖Ⅱ组、复合植物多糖Ⅲ组肉兔血清IgM、IL-6的含量均显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.010.T005表5复合植物多糖对肉兔血清免疫指标的影响组别IgG/(g/L)IgA/(g/L)IgM/(g/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)对照组1.52±0.11c0.31±0.04c0.24±0.03b84.32±4.38c114.36±6.87b复合植物多糖Ⅰ组1.71±0.12b0.36±0.04b0.27±0.03ab89.54±4.51b118.54±6.75ab复合植物多糖Ⅱ组1.91±0.14a0.51±0.06a0.31±0.04a96.57±5.11a121.65±6.98a复合植物多糖Ⅲ组1.97±0.16a0.54±0.06a0.33±0.05a98.32±5.41a125.67±6.76a2.5复合植物多糖对肉兔血清抗氧化指标的影响(见表6)由表6可知,3个复合植物多糖添加组血清T-AOC均显著高于对照组(P0.05)。复合植物多糖Ⅱ组、复合植物多糖Ⅲ组肉兔血清SOD活性均显著高于对照组(P0.05),MDA含量显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.010.T006表6复合植物多糖对肉兔血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组7.32±0.36c88.65±5.14b215.14±8.973.87±0.14a复合植物多糖Ⅰ组7.74±0.37b91.45±5.62ab217.65±8.143.72±0.12ab复合植物多糖Ⅱ组8.35±0.41a94.71±5.74a220.14±9.153.65±0.15b复合植物多糖Ⅲ组8.47±0.40a96.25±5.73a221.64±8.743.63±0.16b3讨论3.1复合植物多糖对肉兔生长性能的影响黄芪多糖、枸杞多糖、苜蓿多糖均能够在一定程度上改善动物的肠道功能,提高饲料的转化利用率,提高动物生长性能。夏明明等[18]研究表明,饲粮中添加200 mg/kg黄芪多糖能够提高断奶仔兔的平均日增重,降低料重比。郑梦荷等[23]研究表明,10 g/(头·d)枸杞多糖能够提高犊牛的体重和平均日增重。刘燕[24]研究表明,饲粮中分别添加5.0%和10.0%苜蓿多糖可使育肥猪末重分别提高5.8%、6.2%,平均日增重提高14.0%、14.9%,料重比降低4.6%、5.0%。本研究参考夏明明等[18]、郑梦荷等[23]、刘燕[24]的研究结果,将黄芪多糖、枸杞多糖、苜蓿多糖合理配伍成复合植物多糖,结果表明,0.01%、0.05%和0.10%复合植物多糖均能够提高肉兔的末重和平均日增重,且0.05%和0.10%的添加剂量能够降低料重比,与上述研究结果具有一致性。3.2复合植物多糖对肉兔养分表观消化率的影响养分表观消化率是评价饲料特性的重要指标之一,养分表观消化率越高表明饲料中的营养物质被动物机体消化吸收利用率越高。张磊等[19]研究表明,饲粮中添加300 mg/kg岩藻多糖能够提高肉兔ADF和NDF的表观消化率。张玺等[25]研究表明,饲粮中添加200、300 mg/kg黄芪多糖能够提高育肥猪EE和P的表观消化率。赵倍莹等[21]研究表明,饲粮中添加0.2%和0.4%枸杞多糖能够提高獭兔CP、CF及NDF的表观消化率。本研究结果表明,0.01%、0.05%和0.10%复合植物多糖均能够提高肉兔的CP和NDF表观消化率,且0.05%和0.10%的添加剂量还能够提高EE、CF和ADF表观消化率,与张磊等[19]、张玺等[25]、赵倍莹等[21]的研究结果具有相似性,说明植物多糖中含有的大量活性物质能够促进营养物质在动物机体内的消化代谢,进而提高各种养分的表观消化率。3.3复合植物多糖对肉兔血清生化指标的影响血清生化指标是衡量动物机体健康状况的直观指标之一,其含量能够在一定程度上反映动物机体的新陈代谢和体内外平衡状况,其中TP、ALB等指标可监测动物机体内蛋白质的合成利用情况,AST、ALT等指标能够反映动物肝胆系统是否正常,BUN可反映蛋白质代谢情况,上述指标均与动物机体的新陈代谢活动密切相关。桂文龙等[26]研究表明,饲粮中添加0.1%和0.2%黄芪多糖能够提高湖羊血清TP和ALB含量,降低血清BUN含量。宫汝淳等[27]研究表明,饲粮中添加300 mg/kg桑黄多糖能够降低蛋鸡血清AST和ALT活性。本研究结果表明,0.01%、0.05%、0.10%复合植物多糖均能够提高肉兔的血清中TP和ALB含量,且0.05%和0.10%的添加剂量还能够降低血清中AST和ALT活性,与桂文龙等[26]、宫汝淳等[27]的研究结果具有相似性,说明植物多糖中含有的大量活性物质能够改善肝胆等器官的代谢功能,提高动物机体的健康状况。3.4复合植物多糖对肉兔血清免疫指标的影响动物机体的免疫反应主要包括体液免疫反应和细胞免疫反应。在体液免疫方面,免疫球蛋白(Ig)发挥主要调节作用,其中IgG主要发挥抗病毒和细菌感染作用,可特异性中和病毒和细菌产生的毒素;IgM主要在抗病毒和细菌感染的初期发挥作用,参与补体结合反应;IgA主要参与呼吸道和消化道黏膜免疫反应。在细胞免疫方面,IL-2和IL-6是介导细胞免疫反应的主要细胞因子,其含量直接影响动物机体的免疫功能。单舒萱等[28]研究表明,饲粮中添加2 g/kg蒲公英多糖能够提高肉仔鸡血清IgG、IgM、IgA及IL-2含量。李强等[29]研究表明,饲粮中添加200、400 mg/kg刺五加多糖能够提高奶牛血清IgM和IgA含量。郭力伟等[20]研究表明,饲粮中添加400 mg/kg姬松茸多糖能够提高肉兔血清IL-2和IL-6含量。本研究结果表明,0.01%、0.05%、0.10%复合植物多糖均能够提高肉兔的血清中IgG、IgA、IL-2含量,且0.05%和0.10%的添加剂量还能够提高血清IgM和IL-6含量,与单舒萱等[28]、李强等[29]、郭力伟等[20]的研究结果具有相似性,说明植物多糖中含有的大量活性物质,能够改善消化道和呼吸道的黏膜组织,发挥抗病毒和抗细菌作用,全面提高动物机体的免疫功能。3.5复合植物多糖对肉兔血清抗氧化指标的影响动物机体的氧化应激可降低动物自身的健康状况。提高动物机体的抗氧化功能可在一定程度上改善动物机体的健康状况。T-AOC、SOD等指标可监测动物机体的整体抗氧化能力,MDA能够体现氧化应激的程度。文英会等[30]研究表明,饲粮中添加500 mg/kg香菇多糖能够提高育肥猪血清SOD活性,降低MDA含量。李强等[29]研究表明,饲粮中添加200、400 mg/kg刺五加多糖能够提高奶牛血清中T-AOC和SOD活性。陈巍等[31]研究表明,饲粮中添加200、400 mg/kg桑黄多糖能够提高蛋鸡血清T-AOC和SOD活性,降低MDA含量。本研究结果表明,0.01%、0.05%、0.10%复合植物多糖均能够提高肉兔的血清T-AOC,且0.05%和0.10%的添加剂量还能够提高血清SOD活性,降低MDA含量,与文英会等[30]、李强等[29]、陈巍等[31]的研究结果具有相似性,说明植物多糖中含有的大量活性物质能够抑制动物机体的氧化应激反应,提高动物机体的抗氧化功能。4结论新西兰肉兔饲粮中添加复合植物多糖能够在一定程度上改善肉兔的生长性能、养分表观消化率、血清生化指标、免疫指标、抗氧化指标。在肉兔养殖中,选择0.05%复合植物多糖效果较好。
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