硒(Se)是动物体内必不可少的微量元素,通过形成硒蛋白存在于机体内,进而发挥重要的生理功能,可参与抗氧化和免疫应答等生理机能的调控[1-2]。缺硒易引发动物机体多种疾病,如充血性心肌病、动脉硬化、肝纤维化以及炎症性肠病等[3-5]。因此,在畜禽养殖的过程中,需要通过添加硒补充剂来满足畜禽对硒的营养需求[6]。目前,用于饲粮添加的含硒制剂主要包括有机硒和无机硒。有机硒是以含硒氨基酸和富硒酵母的形式存在,而无机硒则是以硒酸盐(SeO42-)、亚硒酸钠(Na2SeO3)等不同价态的硒化合物存在[7]。研究发现,有机硒比无机硒具有更低的毒性和更高的生物利用率,且已在生产实践中广泛应用[8-9]。五谷虫属于丽蝇科(Calliphoridae)大头金蝇[Chrysomyia megacephala(Fabricius)]及其近缘昆虫的幼虫或蛹壳。五谷虫具有多种药理作用,如抗菌消炎、促进创面愈合、降低血糖血脂、抗肿瘤、抗粥样动脉硬化、免疫调节以及防治心脑血管疾病等[10-11]。富硒五谷虫粉(SECP)作为一种有效且毒性低的有机硒源,是利用五谷虫生物转化并富集硒磨成的粉末[12-13]。但目前鲜有关于富硒五谷虫粉在生猪上的应用研究报道。因此,本试验探究饲粮中添加不同剂量的富硒五谷虫粉对生长育肥猪的生长性能、血清生化指标、屠宰性能和肉品质的影响,为富硒五谷虫粉在生猪养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料富硒五谷虫粉由亿海蓝尔(北京)生物科学研究院有限公司提供。富硒五谷虫粉中蛋白质、粗脂肪、粗纤维和硒含量分别为14.10%、13.53%、26.64%和0.826%。1.2试验设计试验选择72头60日龄健康、体重21 kg左右的三元杂交(杜×长×大)生长育肥猪,随机分为3个组,每组6个重复,每个重复4头猪。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,0.1%组、0.2%组分别在基础饲粮中添加1 kg/t和2 kg/t的富硒五谷虫粉。基础饲粮参考NRC(2012)推荐的营养需要配制,各阶段基础饲粮组成及营养水平见表1。试验期17周。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.005.T001表1基础饲粮组成及营养水平(干物质基础)项目20~30 kg31~60 kg61~120 kg原料组成/%玉米65.0072.3059.00麦麸6.003.000稻谷0020.00豆粕(43%)25.0019.5014.00大豆油01.203.00石粉1.000.800.80磷酸氢钙0.800.700.50食盐0.400.450.30L-赖氨酸盐酸盐0.300.600.25DL-蛋氨酸0.100.100L-苏氨酸0.200.200L-色氨酸00.030预混料1.201.122.15合计100.00100.00100.00营养水平消化能/(MJ/kg)13.8614.2814.03粗蛋白/%17.5115.5712.55钙/%0.640.530.46总磷/%0.500.430.38有效磷/%0.230.200.17赖氨酸/%1.031.120.71蛋氨酸/%0.360.330.20苏氨酸/%0.730.650.37色氨酸/%0.150.150.10注:1.预混料为每千克饲粮提供:VA 13 000 IU、VB1 4 mg、VB2 10 mg、VB6 6 mg、VB12 6 mg、VB3 48 mg、VB5 24 mg、VD3 4 000 IU、VE 32 IU、VK 4 mg、叶酸2 mg、生物素 0.20 mg、FeSO4·H2O 180 mg、CuSO4·5H2O 12 mg、ZnSO4·H2O 140 mg、MnSO4·H2O 8 mg、Ca(IO3)2·H2O 0.40 mg、Na2SeO3·5H2O 0.20 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验在同一栋猪舍内进行,试验前对猪舍进行消毒,保证适宜的环境温度和湿度,保持通风,干燥清洁。在试验前期每天饲喂3次(8:00、15:00和18:00),试验后期(60 kg以后)每天饲喂2次(10:00、18:00),自由采食和饮水。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能在试验期间,记录生长育肥猪的初重、末重、总采食量,计算生长育肥猪的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)以及料重比(F/G)。ADG=(末重-初重)/(每个重复猪数×试验天数)(1)ADFI=总采食量/(每个重复猪数×试验天数)(2)F/G=ADFI/ADG(3)1.4.2血清指标试验结束,每个重复随机选择1头生长育肥猪,在空腹条件下,前腔静脉采血10 mL,室温静置1 h,3 000 r/min、4 ℃离心15 min,取上清液,-20 ℃冰箱保存。测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、IgG、IgM、IgA、丙二醛(MDA)含量,试剂盒购自南京博研生物有限公司,具体操作按照说明书进行。1.4.3屠宰性能试验结束后,每组选择6头猪屠宰,每个重复1头,测定胴体重(去除头、蹄、尾及内脏,保留板油及肾脏),计算屠宰率。用游标卡尺测量左半胴体背膘厚及眼肌高和眼肌宽(第1肋骨、第6~7肋骨和最后腰椎肋骨处,取平均值),计算眼肌面积。胴体分割后,去掉骨头称取肌肉的重量,计算瘦肉率。测量右边胴体的胴体直长、胴体斜长。1.4.4肉品质分别测定背最长肌(第6~7根肋骨处)pH值、肉色、滴水损失、剪切力和肌内脂肪,检测方法参考《猪肌肉品质测定技术规范》(NY/T 821—2004)。1.4.5背最长肌硒含量本试验采用湿法消化的方法测定背最长肌样品的硒含量[14]。对样品进行预处理,取样品2.5 g于三角瓶中,加入25 mL混合酸浸泡过夜。12 h后,将样品进行加热直至瓶中液体剩余量约为1~2 mL,消化冷却后,加入6 mol/L盐酸5 mL,继续加热至瓶中液体剩余量约为1~2 mL,加入20 mL双纯水,继续加热至瓶中液体剩余量约为1~2 mL,定容至25 mL。吸取3 mL样品于10 mL试管中,加入2 mL浓盐酸和1 mL(100 g/L)铁氰化钾,用双纯水定容,采取同样方法做空白。采用原子荧光光谱仪(AF-610C,北京北分瑞利分析仪器有限公司)对样品进行测定,以硒国家标准物质配制标准溶液,绘制标准曲线对样品进行定量测定。X=(ρ-ρ0)×V/(V'×1 000)(4)式中:X为样品中硒含量(mg/kg),ρ为样品消化液测定浓度(μg/L),ρ0为空白样品消化液测定浓度(μg/L),V'为移取体积(mL);V为样品中消化液总体积(mL);1 000为换算系数。1.4.6背最长肌脂肪酸含量将冷冻干燥处理的背最长肌样品粉碎,称取0.5 g于50 mL离心管中,加入苯-石油醚(体积比1∶1)混合溶剂5 mL,密闭浸提24 h。加入氢氧化钾-甲醇溶液(0.4 mol/L)5 mL,快速甲酯化,倒入涡旋混合器中振荡3 min,静置30 min。加入超纯水分层,取上层溶液,加入适量无水硫酸钠,去除多余的水分。取200 μL样品,加入正己烷800 μL稀释,过滤膜(0.22 μm)至上机瓶,使用气相色谱仪(7890A,安捷伦科技有限公司)对样品的脂肪酸含量进行检测。1.5数据统计与分析采用Excel 2019进行数据统计,SPSS 22.0进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1富硒五谷虫粉对生长育肥猪生长性能的影响(见表2)由表2可知,0.1%组生长育肥猪的平均日增重显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.005.T002表2富硒五谷虫粉对生长育肥猪生长性能的影响项目对照组0.1%组0.2%组初重/(kg/头)20.96±0.3120.83±0.3721.08±0.34末重/(kg/头)116.83±2.88120.75±1.87119.69±2.29平均日增重/[kg/(头·d)]0.806±0.024b0.840±0.015a0.829±0.019ab平均日采食量/[kg/(头·d)]2.25±0.062.32±0.022.18±0.10料重比2.80±0.022.76±0.032.64±0.14注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2富硒五谷虫粉对生长育肥猪血清指标的影响(见表3)由表3可知,与对照组相比,饲粮添加0.2%富硒五谷虫粉可以显著增加生长育肥猪血清中IgA含量及GSH-Px活性(P0.05),饲粮添加0.1%和0.2%富硒五谷虫粉可显著提高生长育肥猪血清中SOD活性(P0.05),显著降低MDA含量(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.005.T003表3富硒五谷虫粉对生长育肥猪血清指标的影响项目对照组0.1%组0.2%组ALT/(U/L)60.6±3.159.1±7.458.6±4.8AST/(U/L)85.2±10.283.2±14.464.2±9.9LDH/(U/L)805±47802±64711±38IgG/(g/L)4.01±0.243.66±0.143.65±0.34IgM/(g/L)1.18±0.071.13±0.211.11±0.13IgA/(mg/L)660±32b711±34ab757±29aGSH-Px/(μg/L)129.4±7.1b138.0±8.4b158.8±10.0aSOD/(μg/L)197.6±12.0b233.6±8.1a247.7±9.3aMDA/(μmol/L)4.06±0.16a3.02±0.19b2.26±0.06c2.3富硒五谷虫粉对生长育肥猪屠宰性能的影响(见表4)由表4可知,与对照组相比,各试验组生长育肥猪胴体重、胴体直长、胴体斜长、眼肌面积、瘦肉率及屠宰率等指标均有改善(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.005.T004表4富硒五谷虫粉对生长育肥猪屠宰性能的影响项目对照组0.1%组0.2%组胴体重/kg91.08±1.2893.38±3.5595.17±2.34胴体直长/cm103.48±0.82104.88±1.43105.10±1.55胴体斜长/cm90.22±0.9391.58±1.1390.65±0.69背膘厚度/cm2.58±0.182.35±0.162.50±0.09眼肌面积/cm253.45±4.6256.67±2.7956.60±2.24瘦肉率/%56.17±1.1457.35±1.4056.96±0.67屠宰率/%77.79±0.9378.23±2.2878.23±2.622.4富硒五谷虫粉对生长育肥猪肉品质的影响(见表5)由表5可知,添加0.2%富硒五谷虫粉显著降低了生长育肥猪肌肉滴水损失(P0.05),添加0.1%和0.2%富硒五谷虫粉显著增加了肌肉脂肪和硒含量(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.005.T005表5富硒五谷虫粉对生长育肥猪肉品质的影响项目对照组0.1%组0.2%组L*值45.23±1.5645.72±1.1844.98±1.16a*值13.86±0.3315.31±0.8416.79±1.58b*值5.40±0.575.74±0.465.64±0.52pH45 min值6.60±0.096.39±0.116.43±0.14pH24 h值5.60±0.075.65±0.045.65±0.04滴水损失/%3.58±0.50a2.93±0.48ab2.84±0.36b剪切力/N56.90±8.7552.55±4.7361.54±2.28肌内脂肪/%2.26±0.18b2.63±0.16a2.67±0.15a硒/(mg/kg)0.145±0.014b0.209±0.018a0.212±0.009a2.5富硒五谷虫粉对生长育肥猪背最长肌脂肪酸组成的影响(见表6)由表6可知,与对照组相比,饲粮添加0.1%和0.2%富硒五谷虫粉猪背最长肌显著增加了亚油酸、α-亚油酸、二十碳烯酸的含量(P0.05),添加0.2%富硒五谷虫粉可显著增加花生酸和二十碳二烯酸含量(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2024.05.005.T006表6富硒五谷虫粉对生长育肥猪背最长肌脂肪酸组成的影响项目对照组0.1%组0.2%组棕榈酸954.3±85.11 126.1±95.21 223.4±51.9棕榈烯酸123.7±26.9161.6±25.72 14.9±22.4十七酸14.03±3.5720.15±4.3118.73±2.14十七碳烯酸9.41±3.3114.99±3.6214.52±2.47硬脂酸713.7±79.8883.8±99.4955.1±46.9油酸897±1991 281±2151 469±162亚油酸270.1±82.4b405.5±93.9a471.3±80.7aγ-亚油酸2.52±0.263.20±0.373.25±0.36α-亚油酸24.9±9.4b40.2±10.9a42.9±8.6a花生酸18.2±3.8b26.1±4.5ab26.5±2.9a二十碳烯酸33.1±10.4b54.1±12.4a63.4±10.1a二十碳二烯酸16.1±5.3b27.7±8.5ab33.1±7.7a二十碳五烯酸2.09±0.082.11±0.172.22±0.09二十碳六烯酸2.54±0.152.43±0.142.48±0.21μg/g3讨论3.1富硒五谷虫粉对生长育肥猪生长性能的影响CHEN等[15]研究发现,饲粮适度降低能量和蛋白质水平并不影响育肥猪的生长性能,在此基础上添加富硒酵母对育肥猪的日采食量、日增重、料重比和末重均未产生影响,但改善了猪的抗氧化能力和肉品质。RAO等[16]研究发现,在基础饲粮中分别添加3种不同硒源(Na2SeO3、酵母硒和硒代蛋氨酸)对育肥猪的平均日增重和料重比没有影响,其中硒代蛋氨酸具有降低平均日增重和平均日采食量的趋势。张凯[17]研究发现,在饲粮中分别添加不同浓度的硒代蛋氨酸(0.25、0.50、2.5 mg/kg Se)对育肥猪的生长性能没有促进作用,但提高了肌肉的系水力。本试验中,在饲粮中分别添加不同水平富硒五谷虫粉对育肥猪的末重、平均日采食量以及料重比无显著影响,与上述研究结果基本相似;但添加0.1%的富硒五谷虫粉可显著提高平均日增重,且末重具有上升的趋势。因此,富硒五谷虫粉更具有提高生长育肥猪生长性能的潜力。3.2富硒五谷虫粉对生长育肥猪血清指标的影响硒是维持机体正常免疫功能所必需的微量元素,在饲料中添加硒能够提升硒蛋白表达丰度,进而改善动物的免疫性能[18]。血清免疫球蛋白IgG、IgM和IgA的含量可在一定程度上反映机体免疫功能状况[19]。LEI[1]等研究发现,饲喂富硒酵母可以显著提高仔猪血清中IgA、IgG浓度,降低血清促炎细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6浓度,从而改善了敌草枯诱导的断奶仔猪免疫应激造成的损伤。ZHANG等[20]研究发现,相较于对照组和补充0.25 mg/kg亚硒酸钠组,补充0.25 mg/kg有机硒组可显著增加育肥猪血清IgA、IgG和IgM含量。高畅等[21]研究发现,相较于无硒组,在育肥猪饲粮中补充0.3%和0.5%富硒益生菌显著增加了IgA、IgG和IgM水平。本研究结果与上述结果类似,饲粮添加0.2%富硒五谷虫粉能够提高生长育肥猪血清IgA含量。GSH-Px、SOD和MDA是判断机体抗氧化性能的重要指标[22]。本试验发现,添加0.2%富硒五谷虫粉,生长育肥猪血清GSH-Px和SOD含量显著增强,MDA含量显著下降,表明添加富硒五谷虫粉可以提高生长育肥猪的抗氧化能力。3.3富硒五谷虫粉对生长育肥猪屠宰性能的影响屠宰性能是评价育肥猪生产性能以及经济价值的重要指标之一,主要包括胴体重、胴体斜长、屠宰率、背膘厚和眼肌面积等[23]。目前关于饲粮中补充硒是否影响生长育肥猪屠宰性能尚存在争议[24-28]。在本试验中,富硒五谷虫粉组和对照组育肥猪的胴体重、胴体直长、胴体斜长、背膘厚度、眼肌面积、瘦肉率和屠宰率均无显著差异,表明富硒五谷虫粉对生长育肥猪屠宰性能无影响。3.4富硒五谷虫粉对生长育肥猪肉品质的影响大理石纹、肉色、pH值、剪切力、肌内脂肪以及滴水损失可以判断猪肉品质。ZHANG等[29]认为,相同剂量不同硒源对生长育肥猪肉品质无显著影响。LUIS等[30]研究发现,在育肥猪饲粮中添加富硒酵母对育肥猪肌肉pH值、肉色和滴水损失均无显著影响。本研究结果与上述试验结果基本相同,添加不同水平的富硒五谷虫粉对生长育肥猪肉色、pH值等均无显著影响。本研究发现,饲粮添加0.1%和0.2%富硒五谷虫粉显著提高了育肥猪背最长肌硒含量,表明富硒五谷虫粉可以作为饲粮硒补充剂来提高生长育肥猪肌肉硒沉积量。3.5富硒五谷虫粉对生长育肥猪背最长肌脂肪酸组成的影响脂肪酸是组成脂肪的基础,可分为饱和脂肪酸(SFA)与不饱和脂肪酸(UFA),因其具有多样性在畜禽的生长发育中发挥多种营养和生理功能[31-32]。猪肉中的脂肪酸,尤其是UFA,在很大程度上影响着猪肉的营养价值、风味和嫩度[33]。有研究报道,在生长猪饲粮中添加富硒酵母或有机硒亚麻籽油可以有效增加猪肉中脂肪酸含量和不饱和脂肪酸的比例[34-35]。本研究发现,饲粮中添加0.1%和0.2%富硒五谷虫粉可以明显增加猪背最长肌亚油酸、α-亚油酸、花生酸、二十碳烯酸和二十碳二烯酸含量,说明添加富硒五谷虫粉可以通过改善生长育肥猪背最长肌肉中脂肪酸组成来提高猪肉的营养价值。4结论饲粮添加富硒五谷虫粉可以改善生长育肥猪的生长性能,提高免疫力和抗氧化能力,有利于促进肌肉中硒的沉积,改善肌肉脂肪酸组成。富硒五谷虫粉在生长育肥猪饲粮中的适宜添加水平为0.1%。
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