维生素A（VA）在动物骨骼发育中有重要作用。家禽缺乏VA时，其骨骼会发生钙化并出现发育不良等疾病[1]。家禽摄入VA过量会出现腿部疾病[2-3]。Aburto等[4]发现，VA过多对VD3的吸收和利用有不利影响，而VD的含量会影响骨骼发育。试验在种鹅饲粮中加入不同剂量的VA，在其后代雏鹅饲粮中加入不同剂量的VA，研究VA水平对后代雏鹅胫骨发育的影响，为今后VA在鹅生产上的应用提供参考。1材料与方法1.1试验动物与材料试验动物为1日龄扬州鹅。试验用VA以VA醋酸酯的形式添加，VA醋酸酯购自帝斯曼维生素有限公司，有效成分为5×105 IU/g。1.2试验设计和饲粮选取180日龄种鹅90只，随机分成5组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组），每组15只母鹅、3只公鹅。处理Ⅰ组饲喂基础日粮，处理Ⅱ~Ⅴ组分别在基础饲粮中添加4 000、8 000、12 000、16 000 IU/kg的VA。种鹅均从180日龄开始养到300日龄（产蛋高峰期）开始收蛋，然后将所收种蛋分批进行孵化。选取96只后代雏鹅，随机分为2组，每组6个重复，每个重复8只。分别饲喂不添加VA和添加9 000 IU/kg VA的饲粮，试验期7 d。试验采用玉米-豆粕型基础饲粮，预混料中不添加VA。种鹅和雏鹅基础饲粮营养成分根据实验室多年的研究成果进行配制，种鹅和雏鹅基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.010.T001表1种鹅和雏鹅基础日粮组成及营养水平（风干基础）项目种鹅雏鹅原料组成/%玉米63.0063.00大豆粕23.0030.20稻壳8.703.20蛋氨酸0.260.10食盐0.300.30石粉2.001.10磷酸氢钙1.501.10氯化胆碱0.24—预混料1.001.00合计100.00100.00营养水平代谢能/（MJ/kg）11.1211.34粗蛋白质/%15.5418.98粗纤维/%5.864.07钙/%1.290.83总磷/%0.590.56有效磷/%0.370.32赖氨酸/%0.760.99蛋氨酸/%0.490.42维生素A/（IU/kg）1 210.001 277.00注：1.种鹅每千克预混料中含有：VD3 225 000 IU、VE 3 600 IU、VK 225 mg、VB1 220 mg、VB2 975 mg、VB6 375 mg、VB12 2.75 mg、烟酰酸3 750 mg、泛酸1 500 mg、叶酸140 mg、生物素9.5 mg、氯化胆碱55 g、Fe 8 g、Cu 0.5 g、Mn 10 g、Zn 10 g、Se 30 mg、I 125 mg。2.雏鹅每千克预混料中含有：VD 3 000 IU、VE 1 800 IU、VK 150 mg、VB1 60 mg、VB2 600 mg、VB6 200 mg、VB12 1 mg、烟酸3 000 mg、D-泛酸900 mg、叶酸50 mg、生物素4 mg、胆碱35 g、Fe 6 g、Cu 1 g、Mn 9.5 g、Zn 9 g、Se 30 mg、I 50 mg。3.营养水平中维生素A为实测值，其余均为计算值。1.3饲养管理试验在扬州大学试验牧场进行。试验种鹅自由饮水和采食，地面垫料平养，全期舍饲，每日12 h光照，室温保持（24±3）℃。试验雏鹅地面垫料平养，自由饮水和采食，保持圈舍卫生和通风良好，每日24 h光照，温度保持29 ℃左右。1.4测定指标及方法1.4.1胫骨指标参照NY/T 823—2004《家禽生产性能术语及计量统计》。采用卷尺和卡尺测量鹅胫长和胫围。采用美国Instron 3367型双柱台式电子试验机，测量胫骨弯曲载荷和弹性模量。采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS，ICAPQ）测定胫骨钙磷。若有杂质的样品不能完全消化，则溶液必须通过0.45 μm水滤膜才能测定。1.4.2血清钙磷含量分离血清，采用电极法分离测定血清钙、磷，采用内建参数对Backman原始校准液进行校准和测定。在室温下取0.04 mL样品，加入1.3 mL缓冲液和3.3 mL参比液，测定时间为17.8~18.7 s。校准程序采用校准品校准。校准后经质量控制产品验证。如果不在可接受范围内，则需要重新校准。根据仪器的固有参数计算测量值。1.5数据统计与分析采用Excel 2017处理数据，采用SPSS 17.0进行双因子方差分析（Two-way ANOVA）。方差分析采用一般线性模型，显著性检验采用LSD法，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨指标的影响2.1.1种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨发育的影响（见表2）由表2可知，第Ⅲ、Ⅳ组种鹅的后代雏鹅胫长显著高于第Ⅰ组（P0.05）。第Ⅳ组种鹅的后代雏鹅胫骨重量显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组（P0.05），第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组种鹅的后代雏鹅胫骨重量显著高于第Ⅰ组（P0.05）。后代雏鹅饲粮中不添加VA时其胫围显著高于9 000 IU/kg VA添加组（P0.05）。种鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫长和胫骨重量有二次线性关系（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.010.T002表2种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨发育的影响项目种鹅VA水平/（IU/kg）雏鹅VA水平/（IU/kg）胫长/cm胫骨重量/g胫围/cmT1组006.573.271.58T2组9 0006.703.071.52T3组4 00006.763.551.67T4组9 0006.883.521.57T5组8 00007.143.701.60T6组9 0006.853.501.59T7组12 00007.044.021.70T8组9 0007.013.881.57T9组16 00006.893.701.61T10组9 0006.753.471.52SEM0.450.050.0206.64b3.17c1.554 0006.82ab3.53b1.628 0006.99a3.60b1.6012 0007.02a3.95a1.6316 0006.82ab3.58b1.56SEM0.050.520.0206.883.651.63a9 0006.843.491.55bSEM0.090.100.03P值母源VA组间0.0420.0010.536母源VA线性0.0670.0010.741母源VA二次0.0130.0010.150雏鹅VA0.6180.1250.022母源VA×雏鹅VA0.5040.9490.838注：同列数据肩标相同小写字母或无字母表示差异不显著（P0.05），不同小写字母表示差异显著（P0.05）；下表同。2.1.2种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨强度的影响（见表3）由表3可知，第Ⅳ组种鹅的后代雏鹅胫骨弹性模量显著高于第Ⅰ、Ⅲ组（P0.05）。第Ⅳ组后代雏鹅胫骨最大载荷显著高于其他各组（P0.05）。种鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨最大载荷有二次线性关系（P0.05）。种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨最大载荷有显著的互作效应（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.010.T003表3种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨强度的影响项目种鹅VA水平/（IU/kg）雏鹅VA水平/（IU/kg）弹性模量/MPa最大载荷/NT1组002 439.362.25T2组9 0002 374.782.16T3组4 00002 765.912.77T4组9 0002 673.782.31T5组8 00002 348.272.14T6组9 0002 685.182.79T7组12 00002 897.742.79T8组9 0002 669.253.22T9组16 00002 708.262.18T10组9 0002 442.282.64SEM40.370.06续表3　种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨强度的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.010.T004项目种鹅VA水平/（IU/kg）雏鹅VA水平/（IU/kg）弹性模量/MPa最大载荷/N02 407.07c2.20b4 0002 719.85ab2.54b8 0002 516.72bc2.47b12 0002 783.50a3.01a16 0002 575.27abc2.41bSEM40.370.0602 631.912.439 0002 569.052.63SEM81.000.12P值母源VA组间0.0170.001母源VA线性0.1380.014母源VA二次0.0740.004雏鹅VA0.4410.090母源VA×雏鹅VA0.0820.0012.1.3种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨钙磷含量的影响（见表4）由表4可知，第Ⅱ、Ⅳ组种鹅的后代雏鹅胫骨磷含量显著高于第Ⅴ组（P0.05）。种鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨磷含量有二次线性关系（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.010.T005表4种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨钙磷含量的影响项目种鹅VA水平/（IU/kg）雏鹅VA水平/（IU/kg）钙/（g/kg）磷/（g/kg）T1组0013.416.91T2组9 00013.937.82T3组4 000013.807.53T4组9 00013.937.86T5组8 000013.777.52T6组9 00013.777.44T7组12 000014.477.99T8组9 00015.078.08T9组16 000013.257.11T10组9 00013.686.26SEM0.190.13013.677.36ab4 00013.877.69a8 00013.777.48ab12 00014.778.03a16 00013.476.69bSEM0.190.13013.747.419 00014.087.49SEM0.380.26P值母源VA组间0.2410.014母源VA线性0.7120.239母源VA二次0.2350.013雏鹅VA0.3820.758母源VA×雏鹅VA0.9870.2312.2种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅血清钙磷含量的影响（见表5）由表5可知，第Ⅳ组后代雏鹅血清钙含量显著高于第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组（P0.05）。后代雏鹅饲粮中添加9 000 IU/kg VA时其血清钙含量显著高于无VA添加组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.010.T006表5种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅血清钙磷含量的影响项目种鹅VA水平/（IU/kg）雏鹅VA水平/（IU/kg）钙/(mmol/L)磷/(mmol/L)T1组002.382.31T2组9 0002.773.16T3组4 00002.592.38T4组9 0002.823.01T5组8 00002.592.53T6组9 0002.793.07T7组12 00002.702.75T8组9 0003.252.41T9组16 00002.612.92T10组9 0002.812.04SEM0.040.0602.58b2.734 0002.71b2.698 0002.69b2.8012 0002.98a2.5816 0002.71b2.48SEM0.040.0602.57b2.679 0002.89a2.64SEM0.070.12P值母源VA组间0.0260.512母源VA线性0.0510.165母源VA二次0.1190.396雏鹅VA0.0010.769母源VA×雏鹅VA0.3370.0013讨论3.1种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅胫骨指标的影响胫骨指标可以反映骨质量，骨强度可以反映骨质量的完整性。钙、磷是动物骨骼生长发育和维持骨量必不可少的矿物元素。Li等[5]研究表明，饲粮中添加大量VA会降低肉鸡的生长发育，同时增加肉鸡的腿部疾病发病率。VA过量会使家禽出现自发性骨折等疾病，会使其体内的钙磷沉积异常，降低其骨骼强度[6-8]。孙建萍等[9]研究VA对肉鸡骨骼钙磷代谢的影响，发现饲粮中添加过量VA会对肉鸡钙、磷代谢产生显著的负面影响，饲粮中VA水平达到45 000 IU/kg可引起肉鸡血清AKP活性、胫骨的钙与灰分浓度降低，胫骨矿化度下降。饲粮VA水平为15 000 IU/kg会对肉鸡钙、磷代谢造成负面影响。金久善等[10]研究表明，饲粮中添加过量VA会影响VD在机体内的代谢，进而影响钙、磷代谢。本试验发现，在种鹅饲粮中添加12 000 IU/kg VA有利于雏鹅胫骨发育，后代雏鹅饲粮中添加0、9 000 IU/kg VA对雏鹅胫骨发育无显著影响，这或许是由于雏鹅体内VA含量可以从种蛋中获取，后期雏鹅饲养时间为7 d，短期内由雏鹅自身的VA可以供应自身的生长发育。3.2种鹅及其后代雏鹅饲粮中添加不同水平VA对后代雏鹅血清钙磷含量的影响血清钙磷含量与动物的骨骼代谢密切相关。冯宇隆[11]研究发现，饲粮中添加过量VA会减少肠道对钙、磷的吸收，进而降低血清钙、磷的含量。董以雷等[12]研究VA对罗斯308×海兰褐肉杂鸡钙磷代谢的影响，发现VA的添加量对罗斯308×海兰褐肉杂鸡血清钙磷含量无显著影响。郭晓宇[13]研究过量VＡ对肉鸡骨骼钙磷代谢的影响，发现VＡ过量可引起肉鸡早期血清BAP活性的降低（BAP活性作为重要的骨形成标志物检测指标）。Hough等[14]在大鼠饲粮中添加过量VA，发现大鼠的血清钙变化不显著，血清磷含量高于对照组。本试验发现，种鹅饲粮中添加12 000 IU/kg VA，且雏鹅饲粮中添加9 000 IU/kg VA时，后代雏鹅血清钙含量增加。4结论在种鹅饲粮中添加12 000 IU/kg VA有利于后代雏鹅胫骨发育。VA可以由种鹅通过种蛋传递给后代雏鹅，饲粮中添加过量VA不利于雏鹅胫骨的发育，在种鹅饲粮中添加适宜的VA其后代雏鹅短期内可以不补充VA。