霉菌毒素是霉菌在生长过程中产生的一种次级代谢产物，可通过饲料或食品进入动物体内，引起动物的急慢性中毒，造成器官损伤、机能衰退，严重者出现死亡。每年全球受到霉菌毒素污染的谷物大约占25％[1]。霉菌毒素会在畜禽的肉、蛋、奶等产品中蓄积和残留，威胁人类食品安全[2]。重金属随饲料进入动物体内后一般不会被分解，会在动物的肝脏和肾脏等器官中蓄积，与某些物质结合引起动物的慢性中毒。重金属会在动物饲料与环境中长期存在，会在食物链中积累，给动物健康及畜产品安全造成危害[3]。因此，检测饲料中霉菌毒素以及重金属污染情况对促进动物饲料安全预警工作具有重要意义。1材料与方法1.1试验材料2018年11月~2019年6月，在宁夏固原市8个肉牛养殖场采集样品76份，包含玉米15份、青贮12份、麸皮13份、其他（玉米芯、稻草、麦草、油渣等）36份。黄曲霉毒素B1（AFB1）检测试剂盒、玉米赤霉烯酮（ZEA）检测试剂盒、T-2毒素（T-2）检测试剂盒、赭曲霉菌毒素A（OTA）检测试剂盒、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素，DON）检测试剂盒、伏马毒素（FB）检测试剂盒，均购自ROMER国际贸易（北京）有限公司。1.2试验方法样品收集与保存按照GB/T 14699.1—2005《饲料采样方法》进行，多次、多点采集具有代表性的样品。样品采集后，风干，采用四分法缩减取样约200 g，粉碎，过20目筛后装瓶，贴好标签备用；对于水分含量较高的样品，及时在60 ℃烘箱中烘干至恒重，然后按上述方法制成风干样品备用。样品在测定前密封保存于-20 ℃冰箱中。利用间接竞争酶联免疫吸附法测定饲料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、赭曲霉菌毒素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、伏马毒素。6种霉菌毒素检测均按照ELISA试剂盒提供的方法进行检测。亚硝酸盐、总砷（Total AS）、铅（Pb）、汞（Hg）、镉（Cd）、铬（Cr）检测均送浙江国正检测技术有限公司进行。2结果与分析2.1固原市肉牛养殖场亚硝酸盐的污染状况（见表1）由表1可知，各样品中均检出亚硝酸盐，其中麸皮中检出率最高达66.70%，但各类样品中亚硝酸盐平均含量较低。其他类样品中亚硝酸盐含量最高为15.20 mg/kg，超标率12.50%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.029.T001表1固原市肉牛养殖场亚硝酸盐的污染状况项目玉米青贮麸皮其他被检样品数89618最高含量/(mg/kg)1.802.003.1015.20平均含量/(mg/kg)0.230.701.673.88检出率/%12.5055.5666.7062.50超标率/%00012.50注：未检出0.64 mg/kg，饲料卫生标准≤15.00 mg/kg。2.2固原市肉牛养殖场黄曲霉毒素B1的污染状况（见表2）由表2可知，玉米、麸皮样品受到黄曲霉毒素B1污染的情况最轻，样品均未检出。青贮中黄曲霉毒素B1最高含量为106.00 μg/kg，超标率8.33%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.029.T002表2固原市肉牛养殖场黄曲霉毒素B1的污染状况项目玉米青贮麸皮其他被检样品数15121336最高含量/(mg/kg)—106.00—45.20平均含量/(mg/kg)—11.74—3.66检出率/%033.33011.11超标率/%08.3308.33注：未检出1.00 μg/kg，饲料卫生标准≤30.00 μg/kg。2.3固原市肉牛养殖场玉米赤霉烯酮的污染状况（见表3）由表3可知，各样品中玉米赤霉烯酮均有检出。其他类中玉米赤霉烯酮最高含量为4.30 mg/kg，超标率5.56%。各类样品中玉米赤霉烯酮平均含量较低。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.029.T003表3固原肉牛养殖场玉米赤霉烯酮的污染状况项目玉米青贮麸皮其他被检样品数15121336最高含量/(mg/kg)0.190.260.364.30平均含量/(mg/kg)0.020.060.030.54检出率/%26.6758.3355.5625.00超标率/%0005.56注：未检出0.005 mg/kg，饲料卫生标准≤1.00 mg/kg。2.4固原市肉牛养殖场T-2毒素的污染状况（见表4）由表4可知，麸皮检出率为30.77%，其他类检出率13.89%。各类样品中受到T-2毒素污染的情况最轻。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.029.T004表4固原市肉牛养殖场T-2毒素的污染状况项目玉米青贮麸皮其他被检样品数15121336最高含量/(mg/kg)93.39-113.18107.05平均含量/(mg/kg)6.23-22.707.18检出率/%6.67030.7713.89超标率/%0000注：未检出1.00 μg/kg，饲料卫生标准≤0.50 mg/kg。2.5固原市肉牛养殖场呕吐毒素的污染状况（见表5）由表5可知，各样品中呕吐毒素均有检出，玉米、青贮和麸皮样品中呕吐毒素平均含量较低。其他类中呕吐毒素最高含量为3.82 mg/kg，超标率2.78%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.029.T005表5固原市肉牛养殖场呕吐毒素的污染状况项目玉米青贮麸皮其他被检样品数15121336最高含量/(mg/kg)2.283.202.913.82平均含量/(mg/kg)0.570.831.020.37检出率/%64.6750.0053.8527.78超标率/%0002.78注：未检出0.10 mg/kg；饲料卫生标准：植物性饲料原料≤5.00 mg/kg，犊牛、羔羊精料补充料≤1.00 mg/kg。2.6固原市肉牛养殖场赭曲霉毒素A的污染状况（见表6）由表6可知，各样品中赭曲霉毒素A均有检出。青贮样品受到赭曲霉毒素A最高含量为218.81 μg/kg，检出率66.67%，超标率33.33%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.029.T006表6固原市肉牛养殖场赭曲霉毒素A的污染状况项目玉米青贮麸皮其他被检样品数15121336最高含量/(mg/kg)27.20218.816.8059.67平均含量/(mg/kg)1.8166.031.282.10检出率/%6.6766.6730.7713.89超标率/%033.3300注：未检出2.00 μg/kg，饲料卫生标准≤100.00 μg/kg。2.7固原市肉牛养殖场伏马毒素的污染状况（见表7）由表7可知，各样品中伏马毒素均有检出。玉米、青贮和麸皮样品中伏马毒素平均含量较低。玉米中检出率最高达66.67%，其他类中伏马毒素最高含量9.75 mg/kg。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.029.T007表7固原市肉牛养殖场伏马毒素的污染状况项目玉米青贮麸皮其他被检样品数15121336最高含量/(mg/kg)3.820.190.029.75平均含量/(mg/kg)0.550.020.0060.60检出率/%66.6741.6746.1527.78超标率/%0000注：未检出2.00 μg/kg，饲料卫生标准≤20.00 mg/kg。2.8固原市肉牛养殖场汞元素的污染状况（见表8）由表8可知，麸皮样品受重金属汞污染最严重，最高含量0.15 mg/kg，超标率达50%；其次是其他类汞元素超标率25%。玉米、青贮和其他类中汞元素没有超标，但均有检出，平均含量分别为0.005、0.005、0.090 mg/kg。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.029.T008表8固原市肉牛养殖场汞元素的污染状况项目玉米青贮麸皮其他被检样品数89618最高含量/(mg/kg)0.080.090.150.21平均含量/(mg/kg)0.0050.0050.0900.090检出率/%100.00100.00100.00100.00超标率/%005025注：未检出0.000 15 mg/kg，饲料卫生标准≤0.10 mg/kg。2.9固原市肉牛养殖场总砷、铅、镉、铬（见表9）由表9可知，总砷、铅、镉、铬检出率为87.80%、92.96%、70.73%和100%。各类样品中总砷、铅、镉含量均未超标。铬最高含量为5.25 mg/kg，超标率2.43%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.029.T009表9固原市肉牛养殖场总砷、铅、镉、铬的污染状况项目总砷铅镉铬被检样品数41414141最高含量/(mg/kg)0.791.750.875.25平均含量/(mg/kg)0.210.310.060.55检出率/%87.8092.6970.73100.00超标率/%0002.43注：总砷未检出0.01 mg/kg，铅未检出0.005 mg/kg，饲料卫生标准：饲料原料铬≤5.00 mg/kg。3讨论本研究中，其他类别亚硝酸盐含量有超标，与有关研究新疆北疆地区奶牛常用的饲料中亚硝酸盐含量未超标不相符[4]，这可能是地域性质不同造成的。黄曲霉毒素B1可降低奶牛采食量和产奶量、肝功能和瘤胃消化功能异常和牛奶中毒素残留[5]。此次黄曲霉毒素B1污染比较严重，可能是肉牛场部分青贮饲料露天放置、易被雨淋导致的饲料霉变。本次检测的黄曲霉毒素B1检出率情况与相关研究分析全球的霉菌毒素检测结果[6]相似。玉米赤霉烯酮是一种类雌激素。在玉米赤霉烯酮的作用下，怀孕母牛会产生乳腺增大、流产、产奶量下降等症状，公牛在采食发霉的干草后精液质量受损[7]。我国不同种类的饲料产品中玉米赤霉烯酮的检出率有很大差异[8]。有研究发现，我国18个省份176份饲料样品T-2毒素检出率为100%[9]。与本次检测结果不符，可能因为地域差异。本研究显示，呕吐毒素对反刍动物的危害较小。当奶牛饲粮中添加1.9 mg/kg BW的呕吐毒素时，只有不到1%的呕吐毒素被机体吸收[10]。赭曲霉毒素具有很强的肾脏毒性和免疫毒性，可造成肾小管间质纤维结构和机能异常，肾小球基底膜变薄[11]，严重时可致癌、致畸并导致机体神经系统受损。本研究发现，青贮中赭曲霉毒A素含量比较高。谷物和饲粮受到赭曲霉毒素A污染的程度较低，其含量在5.2~80.0 μg/kg[12-13]。有研究发现，赭曲霉毒素A在青贮饲料中的发生率和浓度相对其他主要真菌毒素含量通常较低[14]，与本次检测结果不太符合，可能在青贮料保存、运输过程中存在差异。伏马毒素在玉米、麸皮、青贮中伏马毒素检出率较高，说明伏马毒素在青贮玉米、麸皮、青贮中十分普遍。前人研究饲料中的重金属含量结果各异[15-17]，与本研究结果均不相同，可能是地域不同的原因。农业上使用的农药、化肥以及大规模的汞矿开采、冶炼等活动，造成矿区大气、水体、土壤受到汞的严重污染[18]，可能是麸皮原料被重金属汞污染的渠道。4结论2018年11月~2019年6月，宁夏固原市肉牛场饲料被亚硝酸盐、霉菌毒素和重金属污染程度相对较轻，但麸皮原料被重金属汞污染比较严重；青贮原料被黄曲霉毒素B1污染比较严重。为减轻重金属及霉菌素素的危害，肉牛养殖场应针对性地采取措施来减轻和降低重金属和霉菌毒素的污染。