饲料原料严重紧缺是制约我国畜牧业发展的主要原因之一[1]。开发利用菌糠、酒糟等非常规饲料资源,可以促进我国畜牧业的可持续发展,缓解饲料资源短缺,降低饲养成本。马金等[2]研究表明,在生长期西门塔尔杂种肉牛饲粮中使用杏鲍菇菌糠替代青贮玉米,每头肉牛饲料成本可降低2.29 [元/(d·只)]。魏涛[3]研究表明,用杏鲍菇菌糠代替和牛30%的精料可提高和牛的免疫力,经济效益提高8.01%~12.62%。杨春红等[4]研究表明,在黔北麻羊羔羊日粮中添加7%~14%白酒糟,可提高羔羊日粮养分消化率。彭忠利等[5]研究表明,用微生态白酒糟替换36%的全混合日粮可以提高川中黑羊的生产性能和日粮养分表观消化率。目前,关于菌糠,白酒糟等非常规饲料资源的研究多集中在动物营养领域的开发利用,研究其饲用安全问题也很重要。李佳腾等[6]研究表明,菌糠中AFB1、ZEN、DON含量分别为4.66、151.23、191.08 μg/kg;自然发酵的杏鲍菇菌糠中AFB1、ZEN、DON含量分别为2.98、147.16、182.46 μg/kg。周闯等[7]研究发现,酒糟中霉菌毒素检出率为60.53%,超标率为28.95%;AFB1、ZEN、DON含量为139.36、2 699.3、5 368.5 μg/kg。日粮中霉菌毒素浓度过高会导致动物机体免疫机能失常、生长受抑、繁殖性能降低,会通过畜产品进一步危害人类健康。随着贮存时间延长,菌糠、白酒糟中霉菌毒素含量可能会发生变化。因此,试验研究贮存时间对菌糠、白酒糟的常规营养成分及霉菌毒素含量的影响,为菌糠、白酒糟在实际生产中的安全应用提供参考。1材料与方法1.1样品采集本试验分别于2019年11月11~17日、24~30日采集白酒糟、菌糠贮存第1~7 d样品,测定AFB1、ZEN、DON含量及常规营养成分。1.2测定指标及方法1.2.1AFB1、ZEN、DON含量参照国家标准(GB 5009.22—2016),样品经甲醇-水溶液提取、稀释、过滤、免疫亲和柱净化、分离目标物、氮吹干后定容,采用高效液相色谱-柱后衍生法测定AFB1、ZEN、DON含量。1.2.2常规营养成分含量饲料中干物质、钙、总磷含量的测定方法参照国标[8-10];中性洗涤纤维与酸性洗涤纤维含量的测定方法参照国标[11-12],使用ANKOM-A2000i全自动纤维仪测定;粗蛋白质含量的测定方法参照国标[13],使用FOSS-8400全自动凯氏定氮仪测定。1.3数据统计与分析数据采用SPSS 21.0统计软件进行单因素方差分析,采用Duncan氏法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1贮存时间对菌糠霉菌毒素及常规营养成分含量的影响2.1.1贮存时间对菌糠霉菌毒素含量的影响(见表1)由表1可知,菌糠样品中AFB1以及ZEN的含量随着贮存时间的延长极显著增加(P0.01)。第7 d时,菌糠样品中AFB1、ZEN含量较第1 d分别增加199.09%、83.09%(P0.01)。不同贮存时间的菌糠DON含量差异极显著(P0.01),第7 d时DON含量达到最高,为76.81 μg/kg。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.028.T001表1贮存时间对菌糠霉菌毒素含量的影响项目贮存时间/dP值1234567AFB12.19±0.02F2.96±0.03E3.02±0.01E3.29±0.02D3.78±0.04C3.89±0.01B6.55±0.01A0.01ZEN36.91±0.85E46.05±0.50D47.07±1.07D50.81±0.76C62.64±0.33B65.96±0.06AB67.58±1.65A0.01DON72.26±1.20B63.44±0.54C65.43±0.24C71.14±0.54B54.85±0.01E59.41±0.17D76.81±0.19A0.01注:同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01),相同或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。μg/kg2.1.2贮存时间对菌糠常规营养成分的影响(见表2)由表2可知,贮存时间对菌糠的常规营养成分无显著影响(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.028.T002表2贮存时间对菌糠常规营养成分的影响项目贮存时间/dP值1234567干物质97.26±0.0497.52±0.1397.21±0.1397.57±0.1297.37±0.0597.26±0.2197.10±0.160.206粗蛋白质7.20±0.187.16±0.157.31±0.107.11±0.287.19±0.067.21±0.077.31±0.220.974中性洗涤纤维61.39±0.2061.76±0.4061.26±0.3060.91±0.6161.21±0.2762.31±0.9861.03±0.680.622酸性洗涤纤维41.28±0.1641.39±0.3541.01±0.2441.06±0.4040.93±0.1841.48±0.8441.10±0.150.946钙0.27±0.010.27±0.010.27±0.000.27±0.010.27±0.010.28±0.010.27±0.010.996总磷0.07±0.010.07±0.010.07±0.010.07±0.000.07±0.010.07±0.010.07±0.010.993%2.2贮存时间对白酒糟霉菌毒素及常规营养成分含量的影响2.2.1贮存时间对白酒糟霉菌毒素含量的影响(见表3)由表3可知,白酒糟样品中AFB1及ZEN的含量随着贮存时间的延长极显著升高(P0.01)。第7 d时,白酒糟样品中AFB1、ZEN含量比第1 d增加215.40%、99.17%(P0.01)。除第1 d外,其他时间样品中DON含量差异极显著(P0.01),第4 d采集的样品中DON含量极显著高于其他时间采集的样品(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.028.T003表3贮存时间对白酒糟霉菌毒素含量的影响项目贮存时间/dP值1234567AFB14.22±0.09Ff7.45±0.09Ee9.97±0.09Dd10.97±0.11Cc11.07±0.01Cc11.70±0.08Bb13.31±0.07Aa0.01ZEN61.34±0.40Ff81.52±0.30Ee82.35±0.63Ee87.26±1.73Dd101.81±1.10Cc126.52±1.36Aa122.17±0.47Bb0.01DON85.08±0.32De76.29±0.15Ef139.20±0.76Bb150.07±0.99Aa135.86±1.98Bc84.07±0.42De126.72±1.11Cd0.01μg/kg2.2.2贮存时间对白酒糟常规营养成分含量的影响(见表4)由表4可知,贮存时间对酒糟的常规营养成分无显著影响(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.028.T004表4贮存时间对白酒糟常规营养成分含量的影响项目贮存时间/dP值1234567干物质96.78±0.1197.48±0.3196.47±0.4197.09±0.2996.20±0.3596.94±0.1096.81±0.650.313粗蛋白质14.54±0.0814.46±0.1414.57±0.0114.58±0.0314.60±0.0914.39±0.1914.55±0.030.771中性洗涤纤维49.53±0.6449.62±0.4049.39±.1.0049.22±0.2748.46±1.5349.19±0.0749.21±0.070.949酸性洗涤纤维35.35±0.2135.25±0.2635.20±0.6735.23±0.1034.69±1.2035.25±0.0734.98±0.770.988钙0.15±0.010.15±0.020.15±0.020.14±0.020.15±0.010.14±0.020.15±0.010.997总磷0.27±0.010.27±0.010.27±0.010.27±0.010.28±0.010.27±0.010.27±0.010.997%2.3贮存时间与菌糠AFB1、ZEN、DON含量相关性分析(见表5)由表5可知,菌糠样品中AFB1、ZEN含量与贮存时间极显著相关(P0.01),DON含量与贮存时间无相关性,AFB1与ZEN为极显著相关(P0.01),AFB1与DON显著相关(r=0.295,P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.028.T005表5贮存时间与菌糠AFB1、ZEN、DON含量相关性分析项目贮存时间AFB1ZENDON贮存时间1AFB10.870**1ZEN0.956**0.797**1DON0.0490.295*-0.2161注:*表示显著相关(P0.05),**表示极显著相关(P0.01);下表同2.4贮存时间与白酒糟AFB1、ZEN、DON含量相关性分析(见表6)由表6可知,白酒糟样品中AFB1、ZEN含量与贮存时间极显著正相关(P0.01),DON含量与贮存时间显著正相关(P0.05)。ZEN、DON与AFB1极显著正相关(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.028.T006表6贮存时间与白酒糟AFB1、ZEN、DON含量相关性分析项目贮存时间AFB1ZENDON贮存时间1AFB10.932**1ZEN0.953**0.863**1DON0.314*0.549**0.09913讨论3.1贮存时间对菌糠霉菌毒素及常规营养成分含量的影响食用菌菌糠是一种新兴非常规饲料,因蛋白质含量及利用率高受到广泛关注[14]。潘军[15]发现,20种菌糠样品的粗蛋白含量高达5.80%~15.44%,18种氨基酸齐全,无氮浸出物33.00%~63.50%。菌糠中含有大量的菌丝和代谢物等活性物质,可以调节动物代谢机能。菌糠中的植酸酶可以提高动物对磷的利用率。史陈博等[16]研究表明,添加25%杏鲍菇菌糠可提高湖羊生长性能,增加瘤胃乳头厚度,改善瘤胃代谢,促进瘤胃发育。宫福臣等[17]检测发现,平菇菌糠中未检测到霉菌毒素,霉菌总数为2.30×104个/g,符合国家饲料卫生标准(GB 13078—2017)。郭万正等[18]研究发现,未发酵的金针菇菌糠中AFB1、ZEN、DON含量分别为0.97、1 149.80、904.00 μg/kg,而发酵的金针菇菌糠中AFB1、ZEN、DON含量分别为1.07、1 187.80、671.00 μg/kg。本试验结果表明,菌糠中AFB1及ZEN含量随着贮存时间的延长显著增加,且AFB1、ZEN含量与贮存时间之间存在极显著正相关,菌糠常规营养成分无显著变化。结果表明,随着贮存时间的延长,菌糠中AFB1、ZEN含量提高,有超标的风险。可能的原因是菌糠大批量堆放在一起,通风不良会造成发热,导致霉变。3.2贮存时间对白酒糟霉菌毒素及常规营养成分含量的影响白酒糟是以谷物为主要原料的酿酒副产物,其产量大、来源广泛、价格低廉。陈光吉[19]研究表明,舍饲育肥牦牛日粮中添加发酵酒糟的育肥效果优于未添加发酵酒糟。Crane等[20]研究表明,在羔羊饲粮中添加酒糟可以提高瘤胃中挥发性脂肪酸的含量。布登付等[21]研究发现,育成牛日粮中添加酒糟替代部分玉米和大豆榨油副产物不影响育成牛的生长性能,其添加量可达30%。曹广等[22]使用2.5%发酵酒糟作为育肥牦牛饲粮的蛋白质源,可提高育肥牦牛的平均日增重和饲料转化率。陈颀等[23]研究发现,白酒糟酿酒酵母培养物中AFB1、ZEN、DON含量分别为0.09、119.38、542.13 μg/kg。本试验结果表明,白酒糟中AFB1、ZEN含量与贮存时间存在极显著正相关,随着贮存时间延长而增加,常规营养成分无显著差异。DON含量与贮存时间无相关性,表明在本试验条件下贮存时间对DON含量无影响。4结论在本试验条件下,菌糠、白酒糟中AFB1和ZEN含量随着贮存时间延长而增加,常规营养成分无显著差异。贮存时间过长会导致菌糠、白酒糟中霉菌毒素含量超标,对动物机体造成伤害。因此,菌糠、白酒糟应尽早饲用或在贮藏过程中添加防霉剂。
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