日粮纤维对家兔的肠道转运、肠道菌群和肠道黏膜完整性具有重要的调节作用。家兔饲料中含有33.5%中性洗涤纤维和17.0%的酸性洗涤纤维,两者可以促进肠道运动和采食量[1]。纤维含量高会导致饲料效率降低;膳食纤维水平降低会导致非特异性肠炎、腹泻、饲料转化率差和食欲下降[2]。Gidenne等[3]研究表明,兔对日粮纤维的消化率可能因低可消化纤维(纤维素和木质素)和高可消化纤维(半纤维素和果胶)的比例不同而不同,其中木质化程度是消化率低的主要因素。挥发性脂肪酸是盲肠发酵的最终产物,是家兔重要的能量来源,被认为在消化紊乱的病因学中有重要作用。随着饲粮纤维含量的增加,盲肠挥发性脂肪酸含量呈线性下降。甘露寡糖源自酵母细胞表面的甘露聚糖,通过提供一个可选择的附着位点促使革兰氏阴性病原体在肠道中移动,从而阻止革兰氏阴性病原体的定植。Mourao等[4]在断奶兔的高纤维(366 g/kg)日粮中添加甘露寡糖,饲喂6周,发现断奶兔日增重显著提高。本研究探讨日粮添加不同水平的甘露寡糖对肉兔生长性能、营养物质表观消化率及血清生化指标的影响,为甘露寡糖在肉兔的养殖生产中的合理应用提供参考。1材料与方法1.1试验设计将35日龄断奶、初重(928.08±1.99)g的200只商品肉兔,随机分为4个组,每组5个重复,每个重复10只肉兔。对照组饲喂基础日粮,处理组分别饲喂添加200、400和800 mg/kg甘露寡糖的基础日粮,正式试验期8周。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.018.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米秸秆10.0总能/(MJ/kg)16.5麸皮22.0干物质/%92.0大豆油2.5粗蛋白/%17.5甜菜粕5.0粗脂肪/%2.2豆粕14.5中性洗涤纤维/%32.5苜蓿草16.0玉米25.9L-赖氨酸0.4DL-蛋氨酸0.1L-苏氨酸0.3石粉1.2盐0.3磷酸氢钙0.8预混料1.0注:预混料为每千克日粮提供:VA 300 IU、VE 20 mg、烟酸50 mg、吡哆醇12 mg、胆碱0.5 mg、钾500 mg、钠1 g、镁60 mg、锰1.8 mg、铜0.6 mg。1.2测定指标及方法1.2.1生长性能在试验开始和8周的饲养结束后,按照重复对肉兔进行称重,每两周统计1次饲料用量。每天观察肉兔的健康状况,记录精神萎靡、采食不佳以及异常的兔数量和死亡数量。试验结束后计算平均日增重、平均日采食和料重比,同时计算发病率、死亡率和健康指数(发病率+死亡率)。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=试验总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.2.2营养物质表观消化率在试验结束的前3 d,采用全收粪法收集连续3 d的粪便,混合,加入1 mol/L的浓盐酸10 mL进行固氮,分析粪中干物质、有机物、粗脂肪和粗蛋白含量。1.2.3肠道形态试验结束后,每个重复随机选择4只兔,耳缘静脉采血。将肉兔屠宰,分离空肠,肠段用于分析绒毛高度和隐窝深度,计算绒毛高度与隐窝深度比值。1.2.4血液指标一部分全血用于分析血细胞比容、血红蛋白浓度、白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、酸性粒细胞和单核细胞数量。另一部分全血分离血清后,使用商品试剂盒(南京建成生物工程研究所)测定白蛋白、球蛋白、总蛋白、尿素氮、甘油三酯、胆固醇和肌酸酐以及谷丙转氨酶、谷草转氨酶等指标。1.3数据统计与分析各组试验数据使用Excel处理后,采用SPSS软件进行单因素方差分析,组间差异用Duncan氏法进行多重比较,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1甘露寡糖对肉兔生长性能的影响(见表2)由表2可知,处理2组和处理3组肉兔的末重显著高于对照组(P0.05),平均日增重显著高于对照组和处理、1组(P0.05)。处理2组和处理3组肉兔的料重比较对照组和处理1组显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.018.T002表2甘露寡糖对肉兔生长性能的影响项目对照组处理1组处理2组处理3组标准误P值初重/g928.60930.12928.25925.361.990.62末重/g2 965.45b2 973.12ab2 984.56a2 982.33a8.800.03日增重/(g/d)36.37b36.48b36.72a36.73a0.180.04采食量/(g/d)124.67125.33124.82125.040.290.48料重比3.43a3.44a3.40b3.40b0.020.04发病率/%12.3812.1213.2812.560.500.67死亡率/%4.805.005.004.700.150.74健康指数/%17.1817.1218.2817.260.550.58注:同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05),不同字母表示显著差异(P0.05);下表同。2.2甘露寡糖对肉兔营养物质表观消化率及空肠形态的影响2.2.1甘露寡糖对肉兔营养物质表观消化率的影响(见表3)由表3可知,处理2组和处理2组肉兔干物质表观消化率显著高于对照组和处理1组(P0.05),粗脂肪表观消化率显著高于对照组,分别提高11.85%和10.82%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.018.T003表3甘露寡糖对肉兔营养物质表观消化率的影响项目对照组处理1组处理2组处理3组标准误P值干物质63.24b63.58b67.87a68.23a2.690.03有机物65.6766.8267.1366.560.630.48粗脂肪56.73b60.38ab63.45a62.87a3.060.02粗蛋白84.1286.7887.1286.891.410.23%2.2.2甘露寡糖对肉兔空肠形态的影响(见表4)由表4可知,甘露寡糖组肉兔空肠绒毛高度显著高于对照组,分别提高2.90%、3.62%和3.94%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.018.T004表4甘露寡糖对肉兔养空肠形态的影响项目对照组处理1组处理2组处理3组标准误P值空肠绒毛高度/μm678.67b698.33a703.25a705.43a12.200.03空肠隐窝深度/μm98.76100.1399.13103.452.130.61高度/深度6.876.977.096.820.120.182.3甘露寡糖对肉兔血清生化指标的影响(见表5)由表5可知,甘露寡糖组肉兔血液白细胞数量显著高于对照组(P0.05)。处理2组和处理3组肉兔血清白蛋白浓度显著高于对照组,分别显著提高17.53%和16.71%(P0.05)。甘露寡糖组肉兔血清胆固醇含量显著低于对照组,分别显著降低9.67%、12.11%和11.05%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.018.T005表5甘露寡糖对肉兔血清生化指标的影响项目对照组处理1组处理2组处理3组标准误P值血细胞比容/%43.2443.1240.9845.761.960.33血红蛋白/(g/L)84.6088.7086.5092.303.300.12白细胞/(×109/L)4.08b7.62a8.13a7.87a1.910.03中性粒细胞/%39.7839.8240.1340.450.310.24淋巴细胞/%42.6744.3442.8340.131.750.42嗜酸粒细胞/%7.457.838.227.560.340.27单核细胞/%7.737.988.037.820.140.47总蛋白/(mg/L)52.8055.1055.9057.401.900.17白蛋白/(mg/L)36.50b39.80ab42.90a42.60a3.000.01球蛋白/(mg/L)16.3015.3013.0014.801.400.32谷草转氨酶/(U/L)485.00447.80498.20513.3028.000.21谷丙转氨酶/(U/L)312.00332.00343.00321.0013.400.51尿素氮/(mg/L)481.00379.10379.00412.3048.100.15肌酸酐/(mg/L)10.6010.1010.7011.200.500.62胆固醇/(mg/L)687.80a621.30b604.50b611.80b38.300.03甘油三酯/(mg/L)1 783.401 756.701 802.301 813.3024.800.223讨论在整个试验过程中,动物的死亡率和健康状态都处于正常水平,与对照组相比,日粮中添加400 mg/kg和800 mg/kg甘露寡糖组肉兔的末重和平均日增重显著提高,料重比显著降低。Mourao等[4]报道,在低纤维日粮中添加甘露寡糖对增重、采食量和饲料效率均无显著影响。本研究中,中性洗涤纤维水平为32.5%,符合商品饲料中纤维水平。增重和饲料效率的改善与甘露寡糖能够促进纤维在肠道中发酵产生挥发性脂肪酸有关,而挥发性脂肪酸是家兔重要的能量来源[3]。本试验中,甘露寡糖对死亡率和发病率没有显著影响,可能是良好的饲养条件导致甘露寡糖对疾病的改善作用不显著。日粮中添加400 mg/kg和800 mg/kg甘露寡糖组肉兔的干物质和粗脂肪表观消化显著改善,甘露寡糖组空肠绒毛高度显著高于对照组。Mondal等[5]报道,日粮中补充甘露寡糖能够增加杯状细胞数量,表明甘露寡糖有可能降低这部分肠道的细菌负荷,因为后肠通常比中肠含有更多的微生物群。甘露寡糖对改善纤维消化产生更高水平的挥发性脂肪酸,这对动物肠致病性大肠杆菌感染有保护作用[6]。因此,较高水平的挥发性脂肪酸有助于预防病原菌感染,促进肠道健康。因此干物质和粗脂肪表观消化率的升高与空肠绒毛高度提高有关,但甘露寡糖对养分消化的作用机制还有待更深一步的探讨。血清生化指标结果显示,甘露寡糖组肉兔血液白细胞数量显著高于对照组,其中400 mg/kg和800 mg/kg甘露寡糖组肉兔血清白蛋白浓度较对照组分别显著提高17.53%和16.71%,甘露寡糖组肉兔血清胆固醇含量显著低于对照组。血清白蛋白浓度在一定程度上可以反映蛋白质代谢状况,说明甘露寡糖可能改善了肉兔蛋白质代谢,但与蛋白质表观消化率无显著差异的结果不一致。高密度脂蛋白胆固醇主要在肝脏和小肠中合成,能清除存在于组织细胞中的胆固醇,进而确保胆固醇浓度稳定[7]。日粮添加甘露寡糖显著降低血清胆固醇浓度,由此推测甘露寡糖间接调节了高密度脂蛋白胆固醇的合成,与Tang等[8]的报道结果一致。为了进一步确定甘露寡糖对胆固醇代谢的影响,后续试验需要从生化和分子学方面去探讨脂蛋白胆固醇的变化。4结论日粮添加400~800 mg/kg甘露寡糖可以通过提高肉兔空肠绒毛高度进而提高肉兔的粗脂肪和干物质表观消化率,降低血清胆固醇水平,改善日增重和饲料效率。

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