在畜牧生产中，饲料添加剂的应用能够防止饲料霉变，提高饲料利用率，减缓应激反应，提高畜禽的生产性能，增强机体的抗病力。化学性添加剂易造成药物残留，影响畜产品的品质，影响人类健康。近年来，绿色环保的中药饲料添加剂已成为研究的热点。洋葱槲皮素（onion quercetin, OQE）是洋葱的主要生物活性成分黄酮类化合物，具有保护大脑[1]、保护心血管[2]、抗炎[3]、抗氧化[4]和降低胆固醇[5]等药理作用。对洋葱槲皮素在免疫调节方面的研究甚少，在饲料添加剂方面的研究鲜有报道。我国洋葱资源丰富，因此洋葱槲皮素的开发和利用有着广阔的应用前景。杨阔[6]研究发现，在海兰褐公鸡雏基础日粮中添加1、2、4和8 g/kg OQE，在试验第7、14、21、28、35、42和49 d，OQE各浓度组平均体重极显著提高（P0.01）。本研究在肉鸡饲料中添加OQE，对肉品质、血液生化指标和免疫功能指标进行检测，旨在为OQE在饲料添加剂中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1试验动物1日龄艾维茵肉鸡雏由锦州鸿强牧业有限公司提供。1.1.2试验日粮基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.011.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成/%0~3周龄4~6周龄营养水平0~3周龄4~6周龄合计100.0玉米56.058.4代谢能/（MJ/kg）12.5612.98豆粕33.028.0粗蛋白/%21.1019.90麦麸3.00钙/%1.100.90鱼粉3.05.0总磷/%0.500.50豆油1.05.0赖氨酸/%1.201.20碳酸氢钙1.40.9蛋氨酸+胱氨酸/%1.000.90石粉1.01.1预混料1.01.0食盐0.20.3赖氨酸盐0.10.1蛋氨酸0.10.2苏氨酸0.2注：预混料为每千克日粮提供：VA 9 000 IU、VB1 1.0 mg、VB6 3.0 mg、VB12 0.01 mg、VD3 1850 IU、VE 18 IU、核黄素7.0 mg、泛酸15.0 mg、烟酸36.0 mg、叶酸0.6 mg、生物素0.1 mg、氯化胆碱300 mg、铜4.0 mg、铁75.0 mg、锌60.0 mg、锰80.0 mg、硒0.3 mg和碘0.4 mg。1.1.3药品及试剂洋葱槲皮素标准品购自西安天瑞生物技术（MUST-12062610）纯度≥98%；鸡新城疫病毒（NDV）血凝抑制试验抗原购自中国兽药监察所；二甲基亚砜（DMSO）购自上海展云化工有限公司；RPMI-1640培养液购自南京安培化工有限公司；胎牛血清（FBS）购自郑州九龙生物有限公司；台盼蓝购自北京生东科技有限公司；鸡新城疫弱毒疫苗购自辽宁省益康生物有限公司；血液生化十项试剂盒购自成都普利泰生物科技有限公司。1.2试验设计1日龄肉鸡雏240只，分成4组，每组3个重复，每个重复20只。KB组肉鸡饲喂基础日粮，YH2组、YH4组和YH8组分别在基础日粮中添加2、4和8 g/kg OQE。1.3测定指标及方法1.3.1肉品质参考An等[7]、Kaur 等[8]方法检测，在42日龄每组随机抽取10只鸡，屠宰检测胸肌和腿肌的pH值、肉色亮度（L*）、肉色红度（a*）、肉色黄度（b*）滴水损失、失水率、剪切力和蒸煮损失。1.3.2血液生化指标在42日龄，每组随机抽取10只鸡，采用肝素抗凝管翅下静脉采血10 mL/只，37 ℃静置 1 h 后，3500 r/min 离心10 min，制备血清，采用成都斯玛特科技有限责任公司全自动生化仪检测白蛋白、球蛋白、总蛋白、白球比、尿素、肌酐、碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和血糖的含量。1.3.3免疫指标1.3.3.1NDV抗体42日龄，每组随机抽取10只鸡，每只翅下静脉采血1 mL分离血清， 血凝抑制试验（HI）检测NDV抗体效价，参考张彩云[9]方法操作。1.3.3.2淋巴细胞增殖参考董雯雯等[10]、Rashidi等[11]试验方法，每组随机抽取10只肉鸡，翅下静脉血3 mL，分离淋巴细胞，制成淋巴细胞悬液备用。参照王一伦等[12]试验方法，使用96孔板，每孔加入100 μL淋巴细胞悬液，每组5个重复，检测淋巴细胞增殖指数。增殖指数=试验组的OD值/对照组的OD值(1)1.4数据统计与分析数据采用SPSS 13.0软件进行一维方差分析。结果以“平均数±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1洋葱槲皮素对肉鸡肉品质的影响（见表2）由表2可知，YH2组、YH4组和YH8组胸肌pH值均显著高于KB组（P0.05）；YH2组、YH4组和YH8组腿肌pH值均极显著高于KB组（P0.01）；YH4组腿肌pH值极显著高于YH2组和YH8组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.011.T002表2洋葱槲皮素对肉鸡肉品质的影响项目KB组YH2组YH4组YH8组胸肌pH值6.56±0.04b6.65±0.04a6.70±0.10a6.65±0.04a亮度28.43±0.12b29.85±1.72a31.65±1.77a29.85±1.47a红度2.33±0.10Cc4.50±0.12Bb7.28±0.86Aa4.89±0.26Bb黄度24.2±0.49Aa22.08±0.63Aa16.85±3.00Bb19.83±2.56Aa滴水损失/%2.78±0.202.59±0.682.31±0.882.40±0.42失水率/%11.21±0.58Aa10.95±0.83Aa7.94±0.87Bb10.53±0.57Aa剪切力/N3.63±0.013.62±0.013.60±0.083.60±0.01蒸煮损失/%34.79±2.02Aa32.52±1.86Aa27.05±1.11Bb29.67±2.03Ab腿肌pH值6.42±0.02Cc6.63±0.02Bb6.75±0.03Aa6.65±0.01Bb亮度29.32±0.88b32.08±2.56a34.32±0.90a32.10±2.29a红度6.97±0.13b7.25±0.50b8.89±0.65a7.50±0.91a黄度23.28±2.4122.60±0.7821.20±0.2321.75±0.12滴水损失/%2.90±0.49Aa2.64±0.20Aa1.73±0.43Bb2.29±0.34Aa失水率/%10.73±0.50a8.67±1.07b8.14±0.57b8.43±0.82b剪切力/N3.72±0.07a3.69±0.00a3.60±0.03b3.61±0.02b蒸煮损失/%32.94±0.55Aa32.15±2.23Aa20.71±0.98Cc27.61±0.85Bb注：同行数据肩标小写字母不同表示差异显著（P0.05），大写字母不同表示差异极显著（P0.01）；下表同。YH2组、YH4组和YH8组胸肌和腿肌肉色亮度均显著高于KB组（P0.05）。YH2组、YH4组和YH8组胸肌肉色红度均显著高于KB组（P0.05）；YH2组、YH4组和YH8组腿肌肉色红度均极显著高于KB组（P0.01）；YH4组腿肌肉色红度极显著高于YH2组和YH8组（P0.01）。YH4组胸肌肉色黄度显著低于KB组（P0.05）；YH4组胸肌肉色黄度显著低于YH2组和YH8组（P0.05）。YH4组腿肌滴水损失显著低于KB组（P0.05）；YH4组腿肌滴水损失极显著低于YH2组和YH8组（P0.01）。YH4组胸肌失水率显著低于KB组（P0.05）；腿肌YH2组、YH4组和YH8组均显著低于KB组（P0.05）。胸肌YH4组极显著低于YH2组和YH8组（P0.01）。YH4组和YH8组腿肌剪切力显著低于KB组（P0.05）；YH2组和YH8组腿肌剪切力显著低于YH2组（P0.05）。YH4组胸肌蒸煮损失显著低于KB组（P0.05）；YH4组和YH8组腿肌蒸煮损失均极显著低于KB组（P0.01）。YH4组胸肌和腿肌均极显著低于YH2组和YH8组（P0.01）。2.2洋葱槲皮素对肉鸡血液生化指标的影响（见表3）由表3可知，YH2组、YH4组和YH8组肉鸡血清白蛋白含量均极显著高于KB组（P0.01）；YH4组肉鸡血清白蛋白含量极显著高于YH2组和YH8组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.011.T003表3洋葱槲皮素对肉鸡血液生化指标的影响项目KB组YH2组YH4组YH8组白蛋白/（g/L）12.40±0.42Cc13.20±0.52Bb15.60±0.49Aa13.40±0.43Bb球蛋白/（g/L）15.71±0.02Dd17.16±0.02Cc22.55±0.09Aa18.86±0.07Bb总蛋白/（g/L）28.10±0.18Cd30.30±0.76Cc38.20±0.77Aa32.20±0.83Bb白球比0.79±0.02Aa0.78±0.02Aa0.69±0.01Bb0.71±0.02Bb谷丙转氨酶/(U/L)1 224.50±11.811 219.62±31.511 205.89±23.211 211.43±10.81碱性磷酸酶/(U/L)1 202.77±10.24Aa1 197.08±58.08Aa932.42±28.66Bb1 038.43±53.88Bb肌酐/(μmol/L)10.50±0.51Aa7.20±0.50Bb6.50±0.30Bb6.80±0.31Bb尿素/(μmol/L)1.53±0.07Aa1.20±0.04Bb0.56±0.09Cd0.72±0.06Cc血糖/(μmol/L)12.83±0.4712.93±0.4512.90±0.3812.77±0.72YH2组、YH4组和YH8组肉鸡血清球蛋白含量均极显著高于KB组（P0.01）；YH4组肉鸡血清球蛋白含量极显著高于YH2组和YH8组（P0.01）。YH4组和YH8组肉鸡血清总蛋白含量均极显著高于KB组（P0.01）；YH2组肉鸡血清总蛋白含量显著高于KB组（P0.05）；YH4组肉鸡血清总蛋白含量极显著高于YH2组和YH8组（P0.01）。YH4组和YH8组肉鸡血清白球比均极显著低于KB组（P0.01）；YH4组肉鸡血清白球比极显著高于YH2组和YH8组（P0.01）。YH4组和YH8组肉鸡血清中碱性磷酸酶活力均极显著低于KB组（P0.01）；YH4组和YH8组肉鸡血清中碱性磷酸酶活力均极显著低于YH2组（P0.01）。YH2组、YH4组和YH8组肉鸡血清中肌酐含量均极显著低于KB组（P0.01）。YH2组、YH4组和YH8组肉鸡血清中尿素含量均极显著低于KB组（P0.01）；YH4组肉鸡血清中尿素含量极显著低于YH2组（P0.01），显著低于YH8组（P0.05）。KB组、YH2组、YH4组和YH8组肉鸡血清中谷丙转氨酶活力和血糖差异均不显著（P0.05）。2.3洋葱槲皮素对肉鸡免疫指标的影响2.3.1洋葱槲皮素对肉鸡NDV抗体的影响（见表4）由表4可知，YH2组、YH4组和YH8组肉鸡21、28、35、42日龄NDV抗体水平均极显著高于KB组（P0.01）。YH4组和YH8组肉鸡21和35日龄NDV抗体水平均极显著高于YH2组（P0.01）；YH4组肉鸡21和42日龄NDV抗体水平极显著高于YH2组（P0.01），YH8组肉鸡28和42日龄NDV抗体水平显著高于YH2组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.011.T004表4洋葱槲皮素对肉鸡NDV抗体的影响日龄KB组YH2组YH4组YH8组21日龄5.40±0.54Cc6.10±0.46Bb6.55±0.58Aa6.40±0.51Aa28日龄5.70±0.57Cc6.55±1.13Bb7.40±0.77Aa6.75±0.53Ba35日龄5.15±0.77Cc6.60±0.53Bb7.35±0.65Aa6.85±0.56Aa42日龄4.25±0.68Cc6.40±0.53Bb6.85±0.60Aa6.70±0.36Ba2.3.2洋葱槲皮素对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响（见表5）由表5可知，YH2组、YH4组和YH8组肉鸡淋巴细胞增殖指数均极显著高于KB组（P0.01），YH4组肉鸡淋巴细胞增殖指数显著高于YH2组和YH8组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.06.011.T005表5洋葱槲皮素对肉鸡外周血淋巴细胞增殖的影响项目KB组YH2组YH4组YH8组增殖指数1.00±0.00Bc1.41±0.15Ab1.76±0.08Aa1.41±0.07Ab3讨论3.1洋葱槲皮素对鸡肉品质的影响肌肉的pH值直接反映肉中乳酸的含量。乳酸过高或者过低都会影响肉的品质[13]。肌肉中肌红蛋白的含量决定肌肉的肉色，是影响肌肉外观的指标[14]。亮度值表明肌红蛋白被氧化成为高铁肌红蛋白的含量。亮度值越大，肌肉中高铁肌红蛋白含量越高。红度值表明肌肉中脱氧肌红蛋白含量的高低和存在的状态。红度值越大，肌肉中脱氧肌红蛋白含量越高。黄度值反映肌肉的脂肪氧化程度与细菌污染程度。滴水损失率与失水率是评判肌肉系水力的重要指标。系水力越强，肌肉的主要营养成分就不易流失，并且会保持肌肉的弹性与风味物质[15]。剪切力是评判肌肉嫩度的重要指标。剪切力越小，肌肉的嫩度越好。蒸煮损失是评判肌肉保水性的重要指标。蒸煮损失越小，肌肉的保水性越好。贮藏肉pH值的增加导致贮藏肉表面微生物生长，刺激脂肪和氨基酸分解[16]。肉鸡日粮内添加类黄酮可以通过降低胆固醇和甘油三酯的含量来积极改变肉和蛋的脂肪酸结构，肉色也会提高。李垚等[17]在肉鸡日粮内添加沙棘黄酮，发现沙棘黄酮能够显著提高胸肌和腿肌的肉色，显著降低胸肌和腿肌的滴水损失。林厦菁等[18]在文昌鸡日粮内添加大豆异黄酮，发现大豆异黄酮对鸡肉pH值、L*、b*和a*均无显著影响，与本研究结果不一致，原因可能与鸡品种不同和用药浓度不同有关。本研究结果表明，OQE能够提高胸肌pH值、L*和a*，降低b*、失水率和蒸煮损失，提高腿肌pH值、L*和a*，降低滴水损失、失水率、剪切力和蒸煮损失。该结果表明，OQE能够提高肌肉中高铁肌红蛋白和脱氧肌红蛋白的含量，增强肌肉中脂肪抗氧化和抗细菌污染程度，提高肌肉的系水力和保水性能，提高肌肉的弹性、嫩度和风味。3.2洋葱槲皮素对鸡血液生化指标的影响血浆蛋白包括白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原，占血浆干物质的6%~8%，纤维蛋白原含量不超过血浆蛋白总量的10%。白蛋白形成血浆胶体渗透压，调节血管内外水分平衡；形成血浆蛋白和血浆蛋白盐缓冲对，调节血液酸碱度；与某些物质结合，对这些物质起运输作用。球蛋白参与机体的体液免疫功能。尿素氮是机体蛋白质代谢的主要分解产物，尿素氮的含量直接反映机体对于蛋白质的代谢能力。尿素氮含量越低，机体对蛋白质利用率越高。肌酐是肌肉的代谢产物，不受饮食和尿量的影响，是评价动物肾脏功能的重要指标。肾脏功能降低时，血清肌酐含量显著升高。碱性磷酸酶是反映骨骼代谢的重要生化指标。当骨代谢旺盛时，成骨细胞活跃，造成机体骨骼代谢紊乱，导致骨骼异常疾病的发生。Adegoke等[19]研究发现，在肉鸡日常饲粮中添加姜黄酮可以显著降低肉鸡血清谷丙转氨酶和低密度脂蛋白含量，提高高密度脂蛋白含量。Yang等[20]研究发现，在肉鸡日粮中添加竹叶黄酮可以显著提高血清中免疫球蛋白M的含量，显著降低肝丙二醛含量。本研究中，OQE能够提高血清中白蛋白、球蛋白和总蛋白，降低血清中白球比。其机制可能是OQE激活淋巴细胞，通过淋巴细胞分裂增殖、促进抗体的产生，促进蛋白的表达；白球比降低，球蛋白含量升高，提高机体体液免疫功能。尿素含量降低，表明OQE能够提高肉鸡对蛋白质的利用率，增强血液蛋白合成代谢的同时降低了分解代谢。肌酐含量降低，表明OQE能够有效提高肉鸡的肾脏功能。其机制可能是通过提高肉鸡肾脏的抗氧化能力，维持了肾脏的正常代谢。碱性磷酸酶含量降低，表明OQE能够有效稳定骨骼代谢，从而促进肉鸡生长发育。3.3洋葱槲皮素对鸡免疫功能的影响体液免疫机制在抵御病原体时起到至关重要的作用，也是大多数疫苗免疫成功的基本保护机制[21]。淋巴细胞的分裂增殖是淋巴细胞活化的主要表现，同时也是体液免疫的重要组成部分。淋巴细胞通过血液循环等方式连接机体各处的免疫组织与器官，构建起体液免疫机制[22]。新城疫是由新城疫强毒感染引起的家禽最重要的传染病之一。新城疫带来的高死亡率给肉鸡养殖业造成巨大的经济损失[23]。仇真毓等[24]研究发现，在海兰褐鸡雏饲料中添加OQE能够提高NDV抗体的效价，促进脾淋巴细胞增殖，促进脾淋巴细胞TNF-α分泌，抑制IL-6分泌。李贤等[25]研究发现，在海兰褐鸡雏饲料中添加OQE能够提高鸡免疫器官指数、提高巨噬细胞吞噬功能及巨噬细胞IL-4和IL-12的分泌。本研究中，OQE能够促进肉鸡外周血淋巴细胞的增殖，提高NDV抗体的效价，激活外周血淋巴细胞。激活的淋巴细胞通过增殖、产生抗体和细胞因子分泌，从而提高机体的体液免疫和细胞免疫功能。4结论OQE能够提高肉鸡肉品质，改善肉鸡血液生化指标，提高机体免疫功能。本试验条件下，OQE含量为4 g/kg效果优于2 g/kg和8 g/kg。