西杂鲟(Acipenser baerii ♀×Acipenser schrenckii ♂)是以史氏鲟(Acipenser schrenckii)作为父本、西伯利亚鲟(Acipenser baerii)作为母本的杂交子一代。相较其父母本,西杂鲟具有生长快、病害少、适温性广、耐运输等优良的生物学性状,具有非常广阔的养殖前景[1]。仔鱼的开口摄食期是由内源性营养转化到外源性营养的过渡阶段,这一阶段仔鱼死亡率增高[2]。仔鱼开口期营养一直是研究的热点和难点。21世纪初,我国先后突破了中华鲟(Acipenser sinensis)、史氏鲟、西伯利亚鲟、达乌尔鳇(Huso dauricus)、匙吻鲟(Polyodon spathula)、杂交鲟等鲟鱼的苗种培育技术[3-4],但实现鲟鱼苗种期全人工饲料开口还有待进一步探索[5]。研究采用8种(或组合)开口生物饵料,对比西杂鲟仔鱼的生长和存活情况,以期为西杂鲟乃至鲟鱼规模化苗种培育提供技术参考。1材料和方法1.1鱼苗来源试验用西杂鲟仔鱼为贵州古鲟生物科技有限公司繁育的杂交后代。选择平均体重(0.034 4±0.001 8)g、平均全长(3.66±0.44)cm、出膜9 d、刚开口的西杂鲟仔鱼。1.2试验饵料试验用水:蚯蚓使用流水暂养,投喂前使用盐度6.0‰的食盐水浸泡40~60 min,剁成泥浆状投喂。试验用蚯蚓品种为大平二号,投喂前用清水将蚯蚓洗净后放在0.05%高锰酸钾溶液浸泡10~15 min,再用清水滤洗1遍,剁成泥浆状投喂。试验用蚕蛹粉、水蚯蚓粉、枝角类粉、蚯蚓粉和磷虾粉均采购由市场网购,破碎到0.5 mm以下颗粒,直接投喂。水蚯蚓+蚯蚓粉组为鲜活水蚯蚓和蚯蚓粉各占50%。开口饵料营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.017.T001表1开口饵料营养水平饵料种类水分蛋白质脂肪灰分枝角类干粉7.4255.9220.1815.46磷虾干粉7.7961.3814.4914.92水蚯蚓干粉7.0351.9322.315.30鲜活水蚯蚓88.206.951.121.61蚯蚓干粉7.1159.9011.2012.30鲜活蚯蚓83.059.111.342.15蚕蛹(脱脂)6.8064.399.245.36%1.3试验方法仔鱼饲养在圆形平底的玻璃钢盆中,玻璃钢盆直径1 m,中心有一凹陷的出水口,便于积粪和排污。试验共设8组,分别为水蚯蚓组、蚯蚓组、蚕蛹粉组、水蚯蚓+蚯蚓粉组、水蚯蚓粉组、枝角类粉组、蚯蚓粉组和磷虾粉组。每组设3个平行,每个平行玻璃钢盆中饲养2 500尾西杂鲟仔鱼。上述8种饵料每隔3 h投喂1次,每次投喂前清理残饵、粪便和死鱼。试验期28 d。试验期间保持水温(16.5±1.0)℃、溶氧(7.2±0.5)mg/L,pH值7.0~8.0,盐度1‰。1.4指标测定及方法每3 d随机捞取30尾仔鱼测量并记录鱼体全长和体重(用吸水滤纸擦除体表水分的鱼体重量)。仔鱼的生长情况用初重(IBW)、末重(FBW)、起始全长(ITL)、终末全长(FTL)、增重率(WGR)和特定生长率(SGR)反映,用成活率(FR)反映仔鱼的存活情况。WGR=(W2-W1)/W1×100%(1)SGR=(LnW2-LnW1)/(t2-t1)×100%(2)FR=(终尾数/初尾数)×100%(3)式中:W1、W2为时间t1、t2时的体重(g)。1.5数据统计与分析通过SPSS 13.0统计软件对数据进行统计分析,进行单因素方差分析(One-way ANOVA)和多重比较(LSD),数据结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同开口饵料对西杂鲟仔鱼成活率和死亡率的影响(见表2、图1)由表2可知,以水蚯蚓作为开口饵料28 d后的成活率最高,显著高于其余各组(P0.05)。蚯蚓粉开口饵料组的成活率与其余组差异显著(P0.05)。磷虾粉开口饵料组的成活率最低,显著低于其余各组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.017.T002表2不同开口饵料对西杂鲟仔鱼成活率的影响时期/d水蚯蚓蚯蚓水蚯蚓+蚯蚓粉蚕蛹粉水蚯蚓粉枝角类粉蚯蚓粉磷虾粉199.8±2.199.8±2.299.7±1.999.6±2.299.5±2.399.6±2.199.4±2.299.6±2.4498.7±2.098.4±1.998.3±2.097.9±2.197.6±2.197.7±2.097.4±2.097.3±1.7797.5±1.996.9±1.896.6±2.195.8±2.195.5±1.995.4±1.895.0±1.994.5±1.61094.9±1.993.6±2.093.1±2.391.7±2.091.2±2.290.7±1.990.3±2.089.0±2.01391.8±2.289.6±1.988.7±2.286.5±1.985.9±2.385.1±2.484.3±2.282.1±2.31689.3±2.086.3±2.185.1±2.082.4±2.281.7±2.080.6±2.279.5±2.176.6±2.21987.4±2.183.9±2.482.5±1.979.3±2.078.5±2.177.2±2.175.9±2.072.4±2.12285.9±2.282.1±1.980.4±1.976.9±1.876.0±1.974.6±1.873.2±1.869.2±1.92584.6±1.980.5±1.878.7±1.874.8±1.973.9±1.872.3±1.870.8±1.666.4±1.82883.2±2.4a78.3±2.1b76.5±2.0b72.4±1.9c71.6±1.8cd70.1±1.8d68.3±1.6e63.2±1.9f注:同行数据肩标相同小写字母或无字母表示差异不显著(P0.05),不同小写字母表示差异显著(P0.05);下表同。%由图1可知,所有饵料对比组仔鱼的成活率在开口10~19 d后迎来仔鱼死亡高峰期。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.017.F001图1西杂鲟仔鱼在不同开口饵料下的死亡率2.2不同开口饵料对西杂鲟仔鱼生长性能的影响(见图2、图3、表3)由图2、图3可知,西杂鲟仔鱼在整个试验期各开口饵料组的体重和全长均有增长。体重和全长的增长趋势相同,水蚯蚓组西杂鲟仔鱼的体重和全长增长最高,往后依次为蚯蚓、蚕蛹粉、水蚯蚓+蚯蚓、水蚯蚓粉、枝角类粉、蚯蚓粉和磷虾粉组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.017.F002图2不同开口饵料对西杂鲟仔鱼体重的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.017.F003图3不同开口饵料对西杂鲟仔鱼全长的影响由表3可知,水蚯蚓组西杂鲟仔鱼的末重、终末全长、增重率和特定生长率均显著高于其余7组(P0.05)。除蚯蚓粉和磷虾粉组外,终末体重和终末全长在其余各组存在显著差异(P0.05)。从增重率的数据看,开口饵料的优劣顺序依次为:水蚯蚓蚯蚓(蚕蛹粉、水蚯蚓+蚯蚓)水蚯蚓粉(枝角类粉、蚯蚓粉、磷虾粉)。水蚯蚓组西杂鲟仔鱼特定生长率最高,其次是蚯蚓、蚕蛹粉、水蚯蚓+蚯蚓,最差的是蚯蚓粉和磷虾粉组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.017.T003表3不同开口饵料对西杂鲟仔鱼生长的影响组别初重/g初始全长/cm末重/g终末全长/cm增重率/%特定生长率/(%/d)水蚯蚓0.036±0.0031.450±0.0120.312±0.005a4.300±0.031a7.78±0.31a8.31±0.14a蚯蚓0.035±0.0021.450±0.0210.280±0.006b4.120±0.008b7.05±0.47b8.02±0.23b蚕蛹粉0.035±0.0021.440±0.0250.258±0.002c4.000±0.033c6.39±0.37c7.69±0.19b水蚯蚓+蚯蚓粉0.033±0.0011.430±0.0180.238±0.003d3.850±0.038d6.22±0.30c7.60±0.16b水蚯蚓粉0.034±0.0021.420±0.0150.199±0.004e3.450±0.038e4.87±0.33d6.81±0.22c枝角类粉0.034±0.0011.410±0.0230.173±0.004f3.220±0.021f4.10±0.33e6.26±0.25d蚯蚓粉0.033±0.0011.450±0.0230.166±0.004g3.160±0.021g4.03±0.29e6.21±0.27de磷虾粉0.035±0.0021.430±0.0220.162±0.003g3.150±0.021g3.64±0.29e5.90±0.24e3讨论3.1活体生物饵料对西杂鲟仔鱼生长和存活率的影响仔鱼的开口饵料主要有生物饵料和人工配合饲料两大类[6]。使用活体生物饵料作为鲟鱼苗的开口饵料时,仔鱼的生长效率和成活率都要优于人工配合饲料,如达氏鲟(Acipenser dabryanus)[7]、西伯利亚鲟 [8]、中华鲟 [9]。对四川裂腹鱼(Schizothorax kozlovi nikolsky)[10]、大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)[11]、祁连山裸鲤(Cymnocypris chilianensis)[12]、清水江鲤鱼(Cyprinus carpio)[13]的开口饵料研究也得到类似的结果。在本研究中,活体水蚯蚓作为开口饵料的西杂鲟仔鱼的生长效率和成活率最好,其次是鲜活蚯蚓,这可能与鲜活饵料的适口性、诱食性、易消化吸收有关。在对鲟鱼仔鱼开口饵料的对比研究中可以发现,相比其他动物性饵料,水蚯蚓对于达氏鲟鱼苗[7]、史氏鲟♀×西伯利亚鲟♂杂交鲟仔鱼[14]、西伯利亚鲟仔鱼[8]及中华鲟仔鱼[9]的生长都具有较高的促进作用。蚯蚓作为不可多得的优质天然蛋白质,可替代鱼粉作为特种水产品的优质天然饵料。蚯蚓作为开口饵料和转食阶段的添加料对于鲟鱼鱼苗的生长有促进作用[15-16],且对于提高鱼类的生长性能、降低饵料系数有促进作用[17-18]。在西杂鲟仔鱼开口阶段,投喂鲜活生物饵料水蚯蚓或蚯蚓既能保证仔鱼的成活率,也能满足仔鱼生长的需要。3.2干粉生物饵料对西杂鲟仔鱼生长和存活率的影响本研究显示,在6种干粉、半干粉生物饵料的比较中,水蚯蚓+蚯蚓粉组(半干粉)的西杂鲟仔鱼成活率最高,其次是蚕蛹粉、水蚯蚓粉组,效果最差的是枝角类粉、蚯蚓粉和磷虾粉组。蚕蛹粉组的西杂鲟仔鱼生长速度最快,其次是水蚯蚓+蚯蚓粉(半干粉)、水蚯蚓粉组,效果最差的是枝角类粉、蚯蚓粉和磷虾粉组。蚕蛹粉组西杂鲟仔鱼的生长比半干粉水蚯蚓+蚯蚓粉组好,仅次于活体水蚯蚓和蚯蚓,说明蚕蛹粉作为西杂鲟仔鱼干粉开口饵料在活体生物饵料不足的情况下是可替代的。蚕蛹粉可替代鱼粉,采用蚕蛹粉替代鱼粉对凡纳滨对虾的生长以及体组成没有不良影响,建议对虾饲料中蚕蛹粉替代鱼粉比例不超过75%,且需另外补充钙源[19]。在保证生长性能、体成分和健康状况的条件下,蚕蛹粉能够替代建鲤饲料中50%以下的鱼粉[20]。蚕蛹替代50%鱼粉后可提高吉富罗非鱼的生长性能,促进鱼体蛋白沉积,调高血清溶菌酶活性,同时还有降血脂、血糖、肝脂的作用[21]。蚕蛹粉作为饲料蛋白源添加到鲟鱼开口料中值得进一步研究开发和关注。蚕蛹是一种高蛋白高脂的优质昆虫蛋白源,极易氧化酸败[22]。因此,要对蚕蛹粉进行脱脂处理。3.3仔鱼开口与饥饿不可逆点鱼类胚胎脱离母体孵化成仔鱼先要经历一个内源营养阶段,在这一阶段仔鱼利用自身卵黄作为营养。仔鱼卵黄快要消失时,胎粪开始排出体外,意味着鲟鱼仔鱼开始进入外源营养阶段。这一阶段仔鱼是否能及时获得营养、适口的开口饵料关系着仔鱼的生长与成活[23-24]。仔鱼期是鱼类生活史中最脆弱、对环境条件最敏感的时期,饵料颗粒的大小、消化难易程度、适口性等因素是仔鱼开口饵料的重要参考指标[25],饥饿是导致此阶段仔鱼死亡的主要原因之一[26]。中华鲟[27]、史氏鲟[28]、俄罗斯鲟[29]、杂交鲟[30]的研究表明,鲟鱼开口仔鱼的饥饿不可逆点为开口后8~16 d,即鲟鱼仔鱼持续饥饿8~16 d,即使再给予适口饵料也会死亡。因此,反映在生产上的一大现象是仔鱼在开口后8~16 d迎来死亡高峰[31]。本试验中,各种饵料的死亡率高峰在开口后10~19 d,表明各种开口鲟鱼仔鱼在饥饿不可逆点上具有普适性。4结论西杂鲟开口仔鱼投喂鲜活水蚯蚓组、鲜活蚯蚓组优于干粉生物饵料,在生物饵料缺乏情况下,投喂蚕蛹粉可一定程度上替代生物饵料,促进西杂鲟仔鱼的生长和成活。在开口仔鱼培育阶段,水体中是否存在丰富的适口饵料,是决定鱼苗存活的关键,西杂鲟仔鱼容易在开口10~19 d后迎来饥饿不可逆点。
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