随着饲料端禁抗的实施，开发替抗产品成为当今的研究热点。马齿苋中富含苹果酸、葡萄糖、Ca、P、Fe以及VE、胡萝卜素、VB、VC等多种营养物质；含有生物碱、α-亚麻酸、蒽醌、ω-3脂肪酸、黄酮、单萜糖苷等生物活性化学成分，可以作为饲料添加剂应用于动物养殖生产中[1]。相关研究表明，马齿苋具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等生物学功能，应用于养殖生产中可提高动物的生产性能和免疫力、改善抗氧化功能和肠道健康[2-5]。马齿苋的粗蛋白含量约是玉米的2倍，具有较高的饲用价值。目前，马齿苋在家禽的应用中，多集中在肉鸡的生长性能、免疫功能、抗菌等方面的研究[6-9]。马齿苋可显著提高蛋鸡的生产性能，增强蛋黄与蛋壳颜色[10-11]。马齿苋在蛋鸡的研究上较少，尤其是在乌鸡养殖生产中的应用更为少见。乌鸡蛋中含有丰富的微量元素、维生素、多糖、DHA等营养物质，乌鸡蛋维生素E含量较高，胆固醇是普通鸡蛋的1/5，食用乌鸡蛋可以降低人体胆固醇含量，促进神经和视觉系统的发育。因此，试验以25周龄乌鸡为研究对象，探讨在其在基础日粮中添加不同剂量的马齿苋粉对其生产性能、蛋品质及免疫性能的影响，为马齿苋在乌鸡的养殖生产中合理的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验所用的马齿苋产自河南信阳，马齿苋经风干后，粉碎过40目筛，密封保存备用。马齿苋的粗蛋白含量23.45%、粗脂肪含量6.03%、粗纤维含量24.60%、粗灰分含量13.40%、干物质含量88.47%。1.2试验设计试验选取25周龄、健康的五黑一绿品种黑羽乌鸡800只，试验按照单因素完全随机分成4组，每组10个重复，每个重复20只乌鸡。对照组乌鸡饲喂基础日粮，试验1~3组分别在基础日粮中添加1%、2%、3%的马齿苋粉。预试期1周，正式试验期8周。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.07.011.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米60.20代谢能/(MJ/kg)12.15豆粕22.00粗蛋白/%17.50棉籽粕8.00钙/%3.11酒糟1.50总磷/%0.68氯化胆碱0.45粗脂肪/%3.59豆油1.20磷酸氢钙0.85食盐0.30石粉4.50预混料1.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 700 IU、VD3 150 IU、VE 30 IU、VB12 0.02 mg、核黄素2.5 mg、生物素0.05 mg、叶酸0.35 mg、烟酸30 mg、泛酸钙20 mg、铜15 mg、碘0.7 mg、铁80 mg、锰40 mg、硒0.45 mg、锌100 mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理试验乌鸡每天饲喂３次，自由饮水。每天观察试验乌鸡的采食、饮水和产蛋等情况。免疫程序按照养殖场的日常管理进行。1.4检测指标及方法1.4.1生产性能在试验周期内，每日8：30人工收蛋，记录各组的产蛋总数量，准确记录各组的总采食量和鸡蛋蛋重。计算日平均采食量、平均蛋重、产蛋率和料蛋比等生产性能指标。平均日采食量=总采食量/试验天数(1)平均蛋重=总蛋重/个数(2)产蛋率=总产蛋数/试验鸡数×试验天数(3)料蛋比=平均日采食量/平均蛋重(4)1.4.2蛋品质试验结束当天，每组随机抽取大小相近的20枚乌鸡鸡蛋，用于蛋品质指标的检测。蛋白高度采用全自动多功能蛋品质检测仪器（EMT5200，ORKA）测定计算哈夫单位；蛋黄颜色采用比色扇检测；蛋壳强度采用全自动蛋壳强度测量仪（EFG0503）测定；蛋壳厚度全自动蛋壳厚度测量仪（ETG1061）测定；采用游标卡尺测定蛋形指数。粗脂肪参照GB/T 5009.5—2016测定；粗蛋白质采用半微量凯氏定氮法测定；水分参照GB/T 5009.6—2010方法检测；钙参照GB/Ｔ 5009.92—2016方法检测；磷参照GB/T 5009.87—2016方法检测；胆固醇参照GB/T 5009.128—2016的方法检测。蛋黄比例=蛋黄重/蛋重(5)1.4.3免疫指标试验结束当天早晨每个重复选择1只健康、精神状态良好的乌鸡空腹翅下静脉采血10 mL，4 000 r/min离心10 min，取上层血清备用，用于测定免疫指标。免疫指标采用酶标仪酶联免疫吸附测定，主要测定血清中免疫球蛋白Ａ（IgA）、免疫球蛋白Ｍ（IgM）、免疫球蛋白Ｇ（IgG）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、γ干扰素（IFN-γ）含量，所用试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 22.0进行单因素方差分析，采用Duncan氏法进行数据的多重比较，结果以平均值和标准误表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同剂量的马齿苋对乌鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，试验2组的平均蛋重显著高于对照组（P0.05）；试验1~3组的产蛋率均显著高于对照组（P0.05）；试验2组的料蛋比显著低于对照组和试验3组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.07.011.T002表2不同剂量的马齿苋对乌鸡生产性能的影响项目平均日采食量/g平均蛋重/g产蛋率/%料蛋比对照组98.6742.63b67.31c2.31a试验1组99.7343.96ab70.19b2.27ab试验2组99.8144.85a74.63a2.23b试验3组99.8243.47ab69.79b2.30aSEM2.041.511.700.57P值0.3020.0410.0200.016注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2不同剂量的马齿苋对乌鸡蛋品质的影响（见表3、表4）由表3、表4可知，试验2组的哈夫单位显著高于对照组（P0.05）；试验1~3组的蛋黄色泽均优于对照组（P0.05）；试验2组的蛋黄比例和粗脂肪含量高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.07.011.T003表3不同剂量的马齿苋对乌鸡蛋品质的影响项目哈夫单位蛋黄色泽蛋壳强度/kg·f蛋壳厚度/mm蛋形指数蛋黄比例对照组70.36b6.49c4.100.351.2533.47b试验1组72.50ab7.05b4.140.371.2834.59ab试验2组74.71a7.78ab4.180.381.3135.76a试验3组73.05ab8.14a4.190.361.2934.60abSEM3.600.710.290.060.171.79P值0.0400.0090.4190.1630.4170.04310.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.07.011.T004表4不同剂量的马齿苋对乌鸡蛋营养品质的影响项目粗蛋白/%粗脂肪/%钙/(mg/100 g)磷/(mg/100 g)水分/%胆固醇/(mg/100 g)对照组12.439.45b110.32208.4873.41463.92试验1组12.4010.80ab112.93213.2773.23472.40试验2组12.3811.03a113.47216.3972.30478.93试验3组12.4010.66ab113.32215.7373.28477.41SEM1.030.942.043.753.284.03P值0.4190.0410.6810.5930.5980.8412.3不同剂量的马齿苋对乌鸡免疫功能的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验2、3组乌鸡血清IgA、IgG的含量显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.07.011.T005表5不同剂量的马齿苋对乌鸡免疫功能的影响项目IgA/(g/L)IgM/(g/L)IgG/(g/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)IFN-γ/(ng/L)对照组0.86b0.851.69c85.90160.5243.06试验1组0.98ab0.881.83ab87.25165.9041.64试验2组1.16a0.902.17a88.51168.0541.05试验3组1.06a0.922.12a89.06170.5240.76SEM0.150.120.382.402.861.77P值0.0050.0730.0400.7210.6300.0803讨论3.1不同剂量的马齿苋对乌鸡生产性能的影响马齿苋中富含蛋白质、矿物质、维生素、果酸等营养物质，可以为动物提供生长、生产所必需的营养成分。研究表明，马齿苋及其提取物可以改变动物的肠道菌群结构，改善肠道健康，增强机体的抗病能力，提高蛋鸡的生产性能[12-13]。冯轩彪等[14]研究显示，日粮中添加3%的马齿苋可以增加东乡黑鸡肠道中乳酸菌数量，降低大肠杆菌数量，改善肠道健康，显著提高抗病能力，进而提高产蛋率和饲料转化率。盛东峰等[15]研究2%~8%的马齿苋粉替代部分日粮对海兰褐蛋鸡的影响，结果表明，马齿苋粉能够显著增加蛋重。本试验研究表明，2%马齿苋粉组乌鸡的平均蛋重显著高于对照组，1%组和3%马齿苋组略有提高，但差异不显著（P0.05）；马齿苋粉组的产蛋率均显著高于对照组（P0.05）；2%马齿苋组的料蛋比显著低于对照组和3%马齿苋组（P0.05），说明在乌鸡日粮中添加一定剂量的马齿苋粉能够显著提高乌鸡生产性能。马齿苋提高乌鸡产蛋性能的原因可能是马齿苋含有多糖、黄酮、α-亚麻酸和维生素等活性物质，增强乌鸡的卵巢性能，促使大量的卵泡发育，提高产蛋率，进而提高饲料转化率。3.2不同剂量的马齿苋对乌鸡蛋品质的影响蛋品质指标主要包括蛋壳、蛋黄、蛋白及蛋内容物等。蛋白高度越高，代表着鸡蛋越新鲜、蛋品质越好。蛋形指数、蛋壳厚度越大，蛋壳强度越高，蛋鸡产破软蛋率减少[16]。蛋黄颜色越深，说明饲料中的叶黄素在蛋中沉积的越多，鸡蛋营养价值越高[17]。本试验中，不同剂量的马齿苋粉对鸡蛋的哈夫单位、蛋黄色泽、蛋黄比例和粗脂肪含量产生显著影响，说明添加马齿苋粉可以改善乌鸡的蛋品质。目前，马齿苋在乌鸡蛋品质中的研究甚少。盛东峰等[15]的海兰褐蛋鸡的研究中，马齿苋显著改善蛋黄色泽，说明马齿苋中的类胡萝卜素和其他色素有效地沉积在蛋黄中。3.3不同剂量的马齿苋对乌鸡免疫功能的影响马齿苋具有提高动物机体免疫力的功能。马齿苋提取物可有效降低大鼠血清中炎症因子及肿瘤坏死因子的水平[18]。马齿苋多糖可显著提高雏鸡的脾脏发育，提高T淋巴细胞的数量，达到增强雏鸡机体免疫力的功能[19]。马齿苋多糖能够增加雏鸡的免疫器官指数和细胞增殖指数，提高雏鸡的机体免疫力[20]。本试验研究结果表明，与对照组相比，2%马齿苋粉组和3%马齿苋粉组的乌鸡血清中的IgA、IgG的含量显著提高（P0.05），1%马齿苋粉组的IgA、IgG的含量有提高的趋势，马齿苋粉有改善IL-2、IL-6、IFN-γ水平的趋势。马齿苋粉提高乌鸡机体免疫力的功能可能与马齿苋的抗菌作用有关，马齿苋可以抑制有害菌（大肠杆菌、铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌等）的繁殖，调节乌鸡肠道菌群结构，增强机体抗病力，进而提高免疫力[5]。4结论在本试验条件下，在乌鸡日粮中添加马齿苋粉可以促进乌鸡的生产性能，改善蛋品质，提高机体的免疫力，马齿苋粉的最适添加比例为2%。