在减抗、无抗的大背景下，开发抗生素替代品成为当前研究热点。作为微生态制剂的酵母培养物，含有丰富的维生素、小肽、消化酶、氨基酸及促生长因子[1]，可以有效提高动物的生产性能、免疫力、营养物质消化率、缓解应激及抗氧化等功能[2-3]。酵母培养物在生长育肥猪[4]、肉鸡[5]、肉牛[6]等养殖生产中均取得较好的应该效果。近年来，酵母培养物也在奶牛的生产中得到很好的应用效果，主要集中在奶牛的生产性能、乳品质、养分消化率等方面[7-9]，在瘤胃发酵参数的研究上较少。因此，试验研究不同剂量的酵母培养物对荷斯坦奶牛生产性能、养分消化率及瘤胃发酵参数的影响，为酵母培养物在奶牛的养殖生产中的合理应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验所用的酵母培养物由奥特奇生物制品有限公司生产。酿酒酵母浓度大于1×109 CFU/g，粗蛋白含量大于40%。1.2试验动物和试验地点试验选用2~3胎次、泌乳天数和产奶量相近、体况良好的中国荷斯坦奶牛40头，试验选在庆阳市西峰区德宇良种奶牛养殖场进行。试验时间为2020年7月2日至2020年8月7日。1.3试验设计试验将40头中国荷斯坦奶牛按照单因素完全随机试验设计，分为4组，每组10个重复，每个重复1头奶牛。试验奶牛依次饲喂0（对照组）、1%、2%、3%的酵母培养物日粮。试验期30 d。试验基础日粮为全混合日粮。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.07.007.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00苜蓿15.00泌乳净能/（MJ/kg）6.80燕麦草3.50粗蛋白/%15.92玉米青贮28.00粗脂肪/%4.37玉米15.10粗灰分/%7.83豆粕9.50中性洗涤纤维/%28.03DDGS3.00酸性洗涤纤维/%14.91压片玉米10.00钙/%0.85全棉籽6.50磷/%0.41磷酸氢钙0.73大豆皮5.50食盐0.25小苏打0.35糖蜜1.50石粉1.15预混料1.00注：1.每千克预混料含有：VA 150 000 IU、VD 35 000 IU、VE 4 000 IU、Fe 1.0 g、Cu 0.8 g、Zn 2.5 g、Mn 2.0 g、Se 15 mg、I 10 mg、Co 5 mg。2.营养水平中泌乳净能为计算值，其余均为实测值。1.4饲养管理试验期间，试验奶牛每日饲喂3次（5：30、12：30、19：30），自由采食和饮水。每日挤奶3次（5：00、12：00、19：00）。试验奶牛保证一定的自由活动时间。牛舍定期消毒、通风干燥、适宜的温湿度。1.5测定指标及方法1.5.1生产性能试验开始后，每日记录每组奶牛的总饲喂量和剩余料量，记录每组奶牛的产奶量。计算日平均干物质采食量。日平均干物质采食量=(总饲喂量-剩余料量)/(天数×试验牛头数)(1)试验期间，每10 d试验结束采集乳样，早、中、晚按4∶3∶3的比例采集100 mL乳样，混合均匀，用于测定乳脂率、乳蛋白率、乳糖、体细胞等指标。使用MilkoScan TM FT 6000乳成分分析仪[福斯华（北京）科贸有限公司]检测以上乳品质指标。1.5.2养分表观消化率试验结束前3 d，每组选取6头奶牛采集100 g新鲜粪便，加入10%硫酸，固氮，在65 ℃烘箱中烘干过筛。运用内源指示剂法测定干物质、粗蛋白、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、钙和磷的表观消化率。营养物质表观消化率=[1－(Ad×Nf) /(Af×Nd)]×100%(2)式中：Ad和Af分别为饲粮和粪样中的AIA含量（g/kg）；Nd和Nf分别为饲粮和粪样中对应的某种营养物质含量。1.5.3瘤胃发酵参数试验结束时，每组随机选择6头牛通过口腔采集瘤胃液测定pH值、瘤胃微生物蛋白（MCP）、挥发脂肪酸、NH3-N等瘤胃发酵参数。pH值用DENVER UB-7型pH计测定；MCP使用嘌呤法测定；挥发性脂肪酸（VFA）使用气相色谱仪（GC-2010，Shimadzu）测定；NH3-N使用比色法测定。1.6数据统计与分析试验所得数据使用SPSS 20.0进行单因素方差分析，使用Duncan氏法进行组间的多重比较，数据统计结果以平均值和标准误表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1酵母培养物对奶牛生产性能的影响（见表2）由表2可知，添加2%和3%酵母培养物组的奶牛平均日干物质采食量和产奶量显著高于对照组（P0.05）。2%和3%酵母培养物组的乳脂率显著高出对照组5.16%（P0.05）。奶牛日粮添加酵母培养物对乳蛋白率、乳糖、体细胞数、乳尿素氮等其他指标无显著性影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.07.007.T002表2酵母培养物对奶牛生产性能的影响项目对照组1%酵母培养物组2%酵母培养物组3%酵母培养物组SEMP值平均日干物质采食量/kg21.64b22.13ab22.87a22.90a0.680.030产奶量/kg33.17b33.64ab34.98a35.16a0.800.023乳脂率/%3.68b3.72ab3.87a3.75ab0.090.049乳蛋白率/%3.373.403.423.390.130.140乳糖/%5.145.175.085.120.060.307体细胞数/（×103/mL）136.21127.05130.63126.947.200.917乳尿素氮/%12.6112.1911.8312.200.310.608非脂乳固体/%9.269.259.309.280.190.731总固形物/%13.9713.8814.0513.960.310.529注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2酵母培养物对奶牛养分消化率的影响（见表3）由表3可知，与对照组比，添加2%和3%的酵母培养物可显著提高干物质和粗蛋白的表观消化率（P0.05）。添加2%的酵母培养物的酸性洗涤纤维比对照组提高6.13%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.07.007.T003表3酵母培养物对奶牛养分消化率的影响项目对照组1%酵母培养物组2%酵母培养物组3%酵母培养物组SEMP值干物质67.02b69.31ab70.82a71.20a2.920.020粗蛋白70.27b71.08b72.96a73.17a2.050.017粗脂肪73.0473.3873.8173.713.170.884中性洗涤纤维62.0463.2765.8266.043.050.042酸性洗涤纤维55.83b57.06ab59.25a58.17ab2.710.033钙45.6144.8545.7946.161.930.915磷52.7253.1553.3553.102.830.770%2.3酵母培养物对对奶血液牛瘤胃发酵参数的影响（见表4）由表4可知，与对照组比较，添加2%和3%的酵母培养物可显著提高乙酸和总挥发性脂肪酸的浓度（P0.05）。随着酵母培养物含量的增加，MCP的含量逐渐升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.07.007.T004表4酵母培养物对对奶血液牛瘤胃发酵参数的影响项目对照组1%酵母培养物组2%酵母培养物组3%酵母培养物组SEMP值pH值6.286.306.356.270.170.541乙酸/（mmol/L）60.25b61.04b62.71a63.13a5.050.038丙酸/（mmol/L）15.3616.2716.7316.600.730.270丁酸/（mmol/L）12.5912.4813.1713.600.700.391乙酸/丙酸3.923.753.753.800.150.210总挥发性脂肪酸/（mmol/L）89.17b90.06ab93.08a94.36a7.160.039NH3-N/（mg/dL）8.838.237.527.770.700.742MCP/（g/L）1.28c1.49b1.60a1.63a0.070.0293讨论3.1酵母培养物对奶牛生产性能和乳品质的影响奶牛的干物质采食量和产奶量直接反映奶牛的生产性能。本试验研究表明，一定剂量的酵母培养物可提高奶牛的干物质采食量和产奶量。白永平等[8]研究表明，奶牛的干物质采食量和产奶量与酵母培养物成剂量关系，随着酵母培养物添加量的增加而提高。周东年等[10]试验发现，奶牛日粮添加2%的酿酒酵母培养物可以显著提高其产奶量，有提高干物质采食量的趋势。在泌乳早期的奶牛日粮中添加400 g的酵母培养物可显著提高奶牛的干物质采食量[11]。以上研究结果与本试验研究结果一致或类似。酵母培养物中的氨基酸、小肽、糖类物质可以直接被动物机体吸收利用，增强反刍动物机体对纤维素的分解利用，提高奶牛对氨的利用率，合成更多的蛋白质[12]。日粮中添加小肽可以提高奶牛的产奶量[13]。酵母培养物中的糖类物质可以提高奶牛的免疫功能[14]。酵母培养物提高奶牛生产性能与其富含的营养物质有关。柴鸿勋等[9]在奶牛日粮中添加酵母培养物，发现牛奶乳脂和干物质显著升高，其他乳成分（乳糖、体细胞和乳蛋白）有降低趋势。白永平等[8]试验表明，在早期泌乳奶牛日粮中添加300 g/d的酵母培养物可以显著提高乳脂率和乳蛋白率。而Hristov等[15]研究表明，酵母培养物对奶牛乳脂率、乳蛋白率无显著影响。本试验结果显示，2%酵母培养物组的乳脂率显著高出对照组5.16%，其他酵母培养物组的乳脂率略高对照组，但差异不显著；酵母培养物对乳蛋白率、乳糖、体细胞数、乳尿素氮等无显著影响。本研究与上述研究结果不同可能与酵母培养物的添加剂量、奶牛泌乳阶段、饲养环境管理等因素有关。酵母培养物改善乳品质可能因为其富含的小肽、氨基酸、未知营养因子等为奶牛瘤胃提供了丰富的发酵底物，有助于为生成乳脂和乳蛋白提供了前体物质，从而改善乳品质。3.2酵母培养物对奶牛营养物质表观消化率的影响有益菌可以提高反刍动物瘤胃纤维素分解菌和乳酸利用菌的活性和生长，可以很好地帮助动物消化吸收饲料中的营养物质[16]。酵母作为有益微生物的一种，可促进幼龄动物肠道黏膜的发育，调节肠道菌群结构，进而提高动物对饲料中营养物质的消化吸收[17]。本试验研究表明，在奶牛日粮中添加适量的酵母培养物可提高干物质、粗蛋白和酸性洗涤纤维的表观消化率。酵母培养物对营养物质消化率的研究结果各不相同，在绵羊的研究中，1.5%和3%的酵母培养物对绵羊干物质、粗蛋白、粗纤维等的表观消化率胃产生显著影响[18]。在奶牛的研究中，也得到不同的研究结果。白永平等[8]研究表明，一定剂量的酵母培养物可显著提高奶牛干物质、粗蛋白、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的消化率；Hristov等[15]表明，酿酒酵母培养物对各种营养物质的表观消化率未产生显著影响；闫碧川等[7]研究表明，不同的酵母培养物对干物质、中性洗涤纤维表现出不同的效果。以上研究结果不同，可能与酵母培养物的种类不同、动物类别不同、饲料组成不同等因素有关。酵母培养物对营养物质表观消化率的影响还有待进一步研究。3.3酵母培养物对奶牛瘤胃发酵参数的影响瘤胃pH值、挥发性脂肪酸、NH3-N、MCP含量是反刍动物瘤胃重要的发酵参数指标。pH值对瘤胃内环境具有重要的作用，本试验结果显示，pH值为6.27~6.35，符合正常的瘤胃pH范围（6~7）[19]。奶牛日粮中，精料占比较大，过多的精料在消化过程中会产生大量的有机酸，导致瘤胃内pH值的降低，降低对营养的消化吸收，本试验结果说明酵母培养物可以稳定奶牛瘤胃pH值，避免瘤胃酸性过低，产生酸中毒。本研究结果显示，酵母培养物可显著提高乙酸、总挥发性脂肪酸浓度及MCP的含量，与牛建康等使用活性干酵母在奶牛的研究中产生的结果一致[20]。乙酸可以促进乳脂的形成，提高产奶量，本试验中，各水平酵母培养物均提高奶牛产奶量和牛奶乳脂率，与乙酸含量的增加相呼应。酵母培养物提高MCP的含量，可能与NH3-N的降低有关，酵母培养物可以促进氨氮的利用率，进而合成更多的MCP。酵母培养物可以通过调整奶牛瘤胃内微生物的结构起到营养调控的作用，改善瘤胃发酵指标。4结论本试验结果表明，奶牛饲喂一定剂量的酵母培养物可提高生产性能和营养物质的养分消化率，改善乳品质和瘤胃发酵参数，酵母培养物最适添加量为2%。