目前，酸化剂、酶制剂、微生态制剂、抗菌肽和精油等添加剂的替抗效果均得到试验验证。其中，研究较多的是单一添加剂对抗生素的替代效果[1-3]。不同替抗添加剂组合使用可能是动物饲料中替代抗生素最有潜力的方法[4]。因此，试验比较酶制剂、微生态制剂、酸化剂的组合和抗生素对肉鸡生长性能和免疫功能的影响，为开发综合、高效的肉鸡无抗日粮提供参考。1材料与方法1.1试验材料酶制剂包含淀粉酶、蛋白酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶；微生态制剂包含枯草芽孢杆菌（≥1.2×1010 CFU/g）、地衣芽孢杆菌（≥3.0×109 CFU/g）、屎肠球菌（≥1.0×109 CFU/g）和丁酸梭菌（≥1.0×108 CFU/g）；酸化剂包含乳酸（≥200 g/kg）、富马酸（≥100 g/kg）和苯甲酸（≥200 g/kg）。以上添加剂均由武汉新华扬生物股份有限公司提供。1.2试验设计试验在宁夏纳兴农牧有限公司肉鸡养殖场进行，选取400羽体重接近的42日龄黄羽肉鸡，随机分为2组，每组5个重复，每个重复40只鸡。对照组肉鸡饲喂基础日粮+抗生素（15%金霉素预混剂300 g/t、4%黄霉素预混剂70 g/t），试验组肉鸡饲喂基础日粮＋500 g/t酶联微生态制剂＋1 000 g/t酸化剂。试验期28 d。鸡自由饮水和采食。基础日粮参照NY/T 33—2004配制。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.015.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米65.00代谢能/(MJ/kg)13.20豆粕23.50粗蛋白质/%18.50玉米蛋白粉5.00钙/%0.90磷酸氢钙1.30磷%0.55石粉1.35赖氨酸%1.00大豆油1.85蛋氨酸%0.42预混料2.00注：预混料为每千克日粮提供：Fe 75 mg、Cu 120 mg、Mn 25 mg、Zn 50 mg、VA 400 IU、VD3 520 mg、VE 32 mg、VB12 0.01 mg、烟酸 26 mg、D-泛酸 20 mg。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能分别在试验前1 d和第28 d早上空腹称量肉鸡体重，用于计算平均日增重；试验期每天以重复为单位记录饲粮投喂量，并于次日清晨投喂前称量剩料量。根据饲粮投喂量和剩料量计算平均日采食量。根据平均日增重和平均日采食量计算料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2血清生化指标试验第28 d，每组随机抽取10羽肉鸡翅下静脉采血，3 000 r/min离心10 min，分离血清，-20 ℃保存备用。采用日立7180全自动生化分析仪检测血清中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、葡萄糖（GLU）、总胆固醇（CHO）和甘油三酯（TG）的含量。1.3.3血清免疫功能采用ELISA试剂盒测定血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）的含量。试剂盒由宁夏赛斯聚信生物科技有限责任公司提供。检测方法和结果计算均按说明书进行。1.4数据统计与分析数据采用SPSS 17.0进行方差分析。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1酶联微生态制剂与酸化剂对肉鸡生长产性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验组肉鸡平均末重增加6.5%（P0.05），料重比降低7.59%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.015.T002表2酶联微生态与酸化剂对肉鸡生产性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/(g/d)平均日采食量/(g/d)料重比对照组1.94±0.173.06±0.19b39.73±11.21109.50±7.602.24±0.10a试验组1.96±0.113.26±0.06a46.25±4.18107.28±4.162.07±0.20bP 值0.8100.0200.1720.5640.047注：同列数据肩标小写字母不同表示差异显著（P0.05），小写字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2酶联微生态制剂与酸化剂对肉鸡血清生化指标的影响（见表3）由表3可知，试验组肉鸡血清总蛋白、球蛋白、葡萄糖、总胆固醇和甘油三酯含量略高于对照组，但差异不显著（P0.05）。试验组肉鸡血清白蛋白含量显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.015.T003表3酶联微生态与酸化剂对肉鸡血清生化指标的影响项目总蛋白/(g/L)白蛋白/(g/L)球蛋白/(g/L)葡萄糖/(mmol/L)总胆固醇/(mmol/L)甘油三酯/(mmol/L)对照组31.78±5.3610.45±1.80b21.33±4.2411.54±1.052.61±0.430.50±0.28试验组35.50±2.7012.53±0.85a22.97±2.5113.08±2.153.24±0.730.57±0.35P值0.1230.0150.3940.1110.0670.7102.3酶联微生态制剂与酸化剂对肉鸡免疫功能的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验组肉鸡血清中IgA、IgG和IgM含量分别提高57.14%、37.69%和57.14%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.015.T004表4酶联微生态与酸化剂对肉鸡免疫功能的影响项目IgAIgGIgM对照组0.140±0.023b1.300±0.176b0.350±0.046b试验组0.220±0.029a1.790±0.237a0.550±0.091aP值0.0000.0010.000g/L3讨论3.1酶联微生态制剂与酸化剂对肉鸡生产性能的影响复合酶可以降解饲料中难以消化的物质，提高饲料的消化和吸收率，提高肉鸡生长性能[5]。酸化剂可以维护肠道菌群平衡，提高胃肠道消化酶活性[6]。微生态制剂可以维持肠道菌群平衡，调节机体免疫力和抑制肠道病原菌增殖[7]。本试验结果表明，相比抗生素组，饲粮中添加酶联微生态制剂与酸化剂，肉鸡平均末重显著增加6.5%、料重比显著降低7.59%。范秋丽等[8]研究表明，在饲粮中同时添加低聚壳聚糖、酸化剂和复合酶可以提高1~42日龄黄羽肉鸡生长性能，原因可能是添加酸化剂可以促进低聚壳聚糖和复合酶功能的发挥进而起到协同效应。吴宁等[9]研究表明，中草药、益生菌、酸化剂联合添加替代抗生素后，仔猪生长性能得到不同程度的改善，仔猪腹泻率降低。以上研究与本试验结果相似，饲粮中添加酶联微生态与酸化剂可以提高肉鸡的生长性能。3.2酶联微生态制剂与酸化剂对肉鸡血清生化的影响血清生化指标可以反映动物机体的健康状况。研究表明，血清总蛋白、球蛋白和白蛋白浓度可以综合反映动物机体对蛋白质的利用情况以及免疫水平[10]。林谦等[11]发现，血清白蛋白可以补充体内营养，提高机体抗体水平和免疫力，防止白细胞减少及贫血。本试验结果发现，与抗生素组相比，试验组肉鸡血清中白蛋白含量显著提高19.9%，总蛋白、球蛋白、葡萄糖、总胆固醇和甘油三酯的含量有提高的趋势（P0.05）。海存秀等[12]研究结果表明，复合酶制剂能够显著提高蛋鸡血清中白蛋白含量，总蛋白和球蛋白含量也有一定提高，说明饲粮中添加复合酶制剂可以增加蛋白质在蛋鸡体内的沉积，提高蛋鸡生产性能。汪晶晶等[13]在日粮中添加200 mL的微生态制剂和0.5%的酸化剂，发现各处理组哺乳母猪血清中总蛋白含量有上升的趋势；相比较对照组，混合组哺乳母猪血清中白蛋白的含量显著提高。以上研究与本试验结果相似，说明饲粮中添加酶联微生态与酸化剂能提高肉鸡血清中白蛋白含量，推测可以提高肉鸡机体的免疫功能。3.3酶联微生态制剂与酸化剂对肉鸡免疫功能的影响诱导动物机体产生体液免疫应答的主要物质是免疫球蛋白，主要包括IgA、IgG和IgM。免疫球蛋白在动物体液免疫中发挥重要作用[14]。本试验结果表明，与对照组相比，试验组肉鸡血清中的IgA、IgG和IgM含量分别显著提高57.14%、37.69%和57.14%，说明日粮中添加酶联微生态制剂和酸化剂可以增强肉鸡的免疫功能。陈代文等[15]报道，益生素和酸化剂联合添加较单独添加能够显著提高断奶仔猪血清中免疫球蛋白A、免疫球蛋白G的含量。姜豇等[16]发现，微生态制剂可以明显提高断奶仔猪血清中IgG、IgA和IgM的含量。孔路军等[17]报道，EM和酸化剂的配合添加可以提高肉仔鸡血液中的γ-球蛋白含量，提高胸腺、脾脏和法氏囊相对的重量，增强机体的免疫机能。以上结果与本试验结果相似，说明饲粮中添加酶联微生态制剂与酸化剂可以提高肉鸡机体的免疫功能。4结论与抗生素相比，饲粮中添加酶联微生态制剂和酸化剂对肉鸡生产性能、血液生化指标及免疫功能均有不同程度的改善作用，表明酶联微生态制剂和酸化剂组合具有替代抗生素的潜能。