在肉鸡饲料中添加中药可以提高机体免疫力，增强代谢，减少肉鸡应激[1]，显著提高肉鸡生长速度和鸡肉品质[2]。中药在肉鸡养殖中替代抗生素是肉鸡养殖的重点研究方向。传统中药需要通过煎煮等方式实现其功能，在动物养殖中很难通过这种方式发挥其最大功效。因此，本研究使用厚朴、佛手等可饲用天然植物，按一定比例配伍，进行发酵处理，在肉鸡日粮中按照不同比例添加，观察其对肉鸡生长性能、抗氧化性能和免疫性能的影响。1材料与方法1.1试验材料与试验动物试验使用的天然可饲用植物均通过中药材天地网（httPs://www.zyctd.com/）采购，复合中药的组成有厚朴、山楂、淫羊藿、女贞子（组成比例为5∶1∶2∶2）。复合中药发酵工艺参考陈富文等[3]研究，以苏州蜜蜂牌甜酒曲（苏州粮油食品有限公司生产）为发酵菌种，发酵温度33 ℃、接种量为4.0%、发酵时长84 h。AA肉鸡由河南省中牟县养鸡专业合作社提供。1.2试验设计试验将400羽22日龄、体重接近的AA肉鸡随机分为4组（A、B、C、D组），每组10个重复，每个重复10羽肉鸡。A组（对照组）肉鸡饲喂基础日粮，B、C、D组肉鸡饲喂添加0.1%、0.2%、0.4%中药发酵产物的基础日粮（以干物质计）。1.3试验日粮及饲养管理肉鸡基础日粮参考郭宝珠[4]的研究和《鸡的饲养标准》（NY/T 33—2004）制定，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.08.011.T001表1基础日粮组成及营养水平（干物质基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米58.00代谢能/（MJ/kg）12.90豆粕（43%CP）32.90粗蛋白/%19.55豆油5.10钙/%0.90磷酸氢钙1.82总磷/%0.65L-赖氨酸0.02有效磷/%0.41DL-蛋氨酸0.11赖氨酸/%1.10食盐0.30蛋氨酸/%0.4石粉1.15氯化胆碱0.04沸石粉0.06预混料0.50注:预混料为每千克日粮提供：VA 8 000 IU、VD3 2 000 IU、VK3 2.1 mg、VE 40 IU、VB1 2.1 mg、VB2 4.8 mg、VB6 5.0 mg、VB12 0.03 mg、泛酸13 mg、烟酸33 mg、叶酸0.8 mg、生物素0.1 mg、Fe 80 mg、Zn 65 mg、Cu 8 mg、Mn 70 mg、I 0.5 mg、Se 0.15 mg。试验前对鸡舍熏蒸消毒，肉鸡在全封闭式鸡舍中重叠式笼养，每笼饲养10羽肉鸡。试验预试期7 d，正式试验期20 d，全天供应光照。保证试验鸡自由采食和饮水，每天7：00统计每笼肉鸡采食量。鸡舍内温度24~26 ℃、空气湿度50%~60%。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能以重复为单位，记录肉鸡初重与末重。称量、记录肉鸡每日采食量，计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。ADG=(末重-初重)/试验时间(1)ADFI=总采食量/试验时间(2)F/G=总采食量/总增重(3)1.4.2血清生化指标试验结束后，以重复为单位随机选择1羽肉鸡采血10 mL，室温下静置0.5 h，3 500 r/min离心10 min，取上清液，贮存于-20 ℃冰箱待测。超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、总抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）含量使用免疫比浊法测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）含量利用ELISA试剂盒（Elabscience®）检测。溶菌酶（LSZ）活性试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.5数据统计与分析使用统计学软件MATLAB 2018a利用单因素方差分析，邓肯氏法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1不同添加量的复合中药发酵产物对肉鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，C、D组肉鸡末重极显著增加（P0.01），平均日增重显著增加（P0.05），料重比显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.08.011.T002表2不同添加量的复合中药发酵产物对肉鸡生长性能的影响组别初重/g末重/gADG/（g/d）ADFI/（g/d）F/GA组806.73±6.562 174.13±5.75C68.37±1.31c131.27±3.311.92±0.05aB组805.08±4.882 182.48±8.45C68.87±2.44c130.16±2.781.89±0.08abC组803.99±5.732 236.59±11.24B71.63±1.83b132.52±3.491.85±0.06bcD组805.72±8.232 280.72±9.20A73.75±1.09a134.96±3.271.83±0.03c注：同列数据肩标字母相同或者无字母表示差异不显著（P0.05），不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01）;下表同。2.2不同添加量的复合中药发酵产物对肉鸡抗氧化性能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，中药发酵产物组肉鸡血清SOD活性显著提高（P0.05）；C、D组肉鸡血清GSH-Px活性极显著提高（P0.01），MDA含量显著下降（P0.05），T-AOC提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.08.011.T003表3不同添加量的复合中药发酵产物对肉鸡抗氧化性能的影响组别SOD/（U/mL）GSH-Px/（U/mL）T-AOC/（U/mL）MDA/（μmol/L）A组142.32±6.22d1 403.45±65.78B15.81±1.02c1.53±0.12aB组148.55±5.13c1 481.29±52.10B16.37±0.76bc1.33±0.23abC组153.91±7.64b1 588.37±62.46A17.76±0.87ab1.14±0.14bD组159.80±6.43a1 643.12±49.85A18.05±0.94a1.08±0.27b2.3不同添加量的复合中药发酵产物对肉鸡免疫性能的影响（见表4）由表4可知，添加中药发酵产物可以显著提高肉鸡血清中IgA的含量（P0.01）；肉鸡血清中IgG的含量随着中药发酵产物添加量的提高极显著上升（P0.01）；当中药发酵产物添加量达到0.2%时，肉鸡血清中LSZ活性极显著提高（P0.01），随着添加量的升高有上升趋势。肉鸡血清中IgM的含量与中药发酵产物的添加无显著相关（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.08.011.T004表4不同添加量的复合中药发酵产物对肉鸡免疫性能的影响组别IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)LSZ/(mg/L)A组1.88±0.12B1.31±0.18C1.38±0.3123.12±2.13CB组2.74±0.20A1.67±0.22B1.39±0.4825.13±1.58BCC组2.86±0.15A1.72±0.17AB1.30±0.2325.78±2.37BD组2.82±0.10A1.92±0.13A1.44±0.4033.12±3.07A3讨论3.1复合中药发酵产物对肉鸡生长性能的影响中药厚朴为木兰科植物厚朴的干燥干皮、根皮或枝皮，其主要的活性物质为厚朴酚、和厚朴酚[5]。研究认为厚朴中的活性成分可以抗腹泻[6]。Zhang等[7]研究认为，厚朴中的厚朴酚可以抑制Ach诱导的无Ca2+回肠收缩和Ach诱导的细胞外Ca2+依赖性收缩，增强胃肠道的蠕动，加快食物排空速度。山楂以健胃消食的功能在药品和保健品中应用[8]。研究认为，山楂具有提高机体抗氧化和免疫功能的作用[9]。淫羊藿属药用植物，源自小檗科，为多年生草本植物，主要活性成分为淫羊藿苷。淫羊藿及其主要活性成分可以增强心血管系统、生殖系统、免疫系统、内分泌系统的功能[10]。女贞子系木樨科女贞属植物，女贞的干燥成熟果实主要成分为齐墩果酸及其同分异构体熊果酸、红景天苷及其苷元酪醇。女贞子具有保护肝脏等代谢系统的作用[11]。在动物养殖中应用较为广泛。程迪等[12]在肉仔鸡日粮中分别添加0、50、100和200 mg/kg的厚朴总酚，发现试验各组肉仔鸡平均日增重和饲料转化率显著提高，试验组肉仔鸡成活率显著高于空白组。朱晓萍等[13]在肉鸡日粮中分别添加0、0.5%、1.0%和2.0%的山楂粉，发现各试验组肉鸡的生长性能均得到不同程度的改善，且试验组粗蛋白和粗脂肪表观消化率显著提高。李杰等[14]研究女贞子对AA肉鸡生产性能的影响，发现饲料中添加女贞子原粉及酒蒸女贞子原粉，均可显著提高肉鸡生长后期日增重、降低料重比，且酒蒸女贞子原粉在提高免疫性能方面优于女贞子原粉。淫羊藿在肉鸡饲养中也有较多研究成果，但对改善肉鸡生长性能影响的报道不多。本研究将4种可饲用中药复配后发酵添加于肉鸡日粮，发现添加量超过0.2%时，才能改善肉鸡的生长性能，说明中药应用于肉鸡养殖中存在一定的剂量效应。3.2复合中药发酵产物对肉鸡血清抗氧化指标和免疫指标的影响将多味中药复合加入动物日粮中以改善动物体内抗氧化和免疫性能。李云鑫[15]研究肉鸡饲料替抗产品，使用板蓝根、蛇床子、黄芪、独活、党参、当归按3∶1∶3∶1∶2∶2比例进行配伍，加入肉鸡日粮中，发现该复合中药可以有效改善肉鸡生长性能，提高免疫相关基因的表达和肉鸡抗氧化能力，但该研究中使用的部分原料并不属于《饲料原料目录》中，与本研究的复方有一定区别。于红梅[16]研究发现，将淫羊藿多糖加入肉鸡日粮中，可以改善肉鸡的生长性能，显著提高免疫器官指数、免疫球蛋白、细胞因子等含量。该研究还发现，添加淫羊藿多糖肉鸡的肠道绒毛长度显著增加，促进肠道内乳酸杆菌等有益菌的增殖，且抑制有害菌繁殖；不同剂量的淫羊藿多糖可不同程度地增强抗氧化物质SOD、GSH-Px、CAT的活性，降低MDA的含量。曹蓉[17]研究厚朴总酚对黄羽肉鸡的影响，发现150 mg/kg厚朴总酚组肉鸡血清中T-SOD和CAT活性与抗生素组相当，且T-SOD活性显著高于其他试验组，CAT活性显著高于0 mg/kg厚朴总酚组，说明厚朴总酚可以显著提高肉鸡抗氧化功能。李杰等[14]研究认为，女贞子原粉能显著提高肉鸡生长前期的胸腺指数，血清C3、C4含量；生长后期法氏囊指数、血清溶菌酶活性，对于肉鸡免疫能力提高有显著作用。陈志辉等[18]研究发现，AA肉鸡日粮添加女贞子能够有效提高肉鸡肌肉的抗氧化酶活性和总抗氧化能力，抑制MDA产生；肉鸡日粮中添加1%女贞子可显著提高肉鸡T-SOD、GSH-Px活性。山楂对于改善肉鸡血清抗氧化指标和免疫指标的报道较少。4结论厚朴、山楂、淫羊藿、女贞子4种药用植物复配发酵后添加于肉鸡日粮可以显著提高其生长性能、免疫性能和抗氧化性能，但添加量不能低于0.2%，并且性能的提升与复合中药发酵产物的使用量有正相关关系。厚朴、山楂、淫羊藿、女贞子复合发酵产物在肉鸡日粮中添加0.4%可以使肉鸡生长性能、免疫性能和抗氧化性能达到最优状态。