姬松茸多糖是姬松茸的主要活性成分之一，其主要作用体现在免疫调节、抗疲劳、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、保肝、抗炎等方面[1-4]。研究表明，姬松茸多糖能提升肠道微生物的多样性、增加有益菌的数量[5]；姬松茸多糖可以通过增强免疫细胞活性、促进免疫相关细胞因子分泌的方式来调节免疫功能[6]。目前，姬松茸多糖在畜牧生产中的研究较少，未见有其应用于肉兔生产的相关报道。因此，本试验以姬松茸多糖作为饲料添加剂，探究其对肉兔生长性能、盲肠肠道菌群活性及免疫功能的影响，以期为姬松茸多糖在畜牧生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料姬松茸多糖由西安明朗生物科技有限公司提供，其含量不低于90%。BBL、LBS、VRBDA和SS培养基购自长春汇力生物技术有限公司；白介素1（IL-1）、白介素2（IL-2）、白介素6（IL-6）试剂盒购自上海生工生物技术有限公司。1.2试验设计36只30日龄、健康断奶新西兰白兔（雌、雄各半），随机分为对照组、T1组和T2组，每组4个重复。对照组饲喂基础日粮，基础日粮组成及营养水平见表1。T1组和T2组分别饲喂添加200 mg/kg和400 mg/kg姬松茸多糖的日粮。常规饲养管理。试验周期35 d，其中预试期5 d，正式试验期30 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.08.013.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00苜蓿草粉35.00消化能/(MJ/kg)10.67玉米33.81粗脂肪/%3.39麦麸15.00粗纤维/%12.48豆饼8.00粗蛋白/%16.84玉米蛋白粉5.00钙/%0.85石粉0.74磷/%0.40磷酸氢钙0.20赖氨酸0.13食盐0.06蛋氨酸0.06预混料2.00注：预混料为每千克日粮提供：铁70 mg、铜20 mg、锌70 mg、锰10 mg、钴0.15 mg、碘0.2 mg、硒0.25 mg、VA 10 000 IU、VD 900 IU、VE 50 IU、VK 2 mg、核黄素6 mg、泛酸50 mg、吡哆醇2 mg、VB12 0.02 mg、烟酸50 mg、胆碱1 g、生物素0.2 mg。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验过程中记录肉兔的采食量、体重等相关指标，计算料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)料重比=平均日采食量/平均日增重(2)1.3.2盲肠肠道菌群试验结束时，无菌取盲肠内容物，利用BBL、LBS、VRBDA和SS琼脂培养基，采用平板计数法分别对双歧杆菌、乳酸菌、大肠杆菌、沙门氏菌数量进行测定。1.3.3脾脏淋巴细胞转化率脾脏淋巴细胞转化率采用MTT比色法[7]进行测定。常规制备肉兔脾淋巴细胞，以刀豆蛋白A（ConA）为有丝分裂原，利用酶标仪于570 nm处测OD值。刺激指数(SI)=ConA+孔OD值/ConA-孔OD值(3)1.3.4肉兔血清中IL含量试验结束时，肉兔耳缘静脉采血，静置1 h，离心分离血清；利用ELISA法测定IL-1、IL-2和IL-6含量，按照试剂盒说明书进行操作。1.4数据统计与分析数据采用SPSS 17.0统计软件进行方差分析和LSD多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1姬松茸多糖对肉兔生长性能的影响（见表2）由表2可知，对照组、T1组和T2组肉兔的初重、末重、平均日采食量和平均日增重均无显著差异（P0.05）；T1组和T2组肉兔的料重比均显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.08.013.T002表2姬松茸多糖对肉兔生长性能的影响组别初重/g末重/g平均日增重/g平均日采食量/g料重比对照组654.36±54.421 698.92±82.5829.82±1.76112.86±5.853.82±0.21aT1组686.14±63.981 804.81±87.7231.96±2.02106.20±4.163.34±0.14bT2组641.55±49.671 792.28±96.1532.88±2.25104.76±4.573.22±0.23b注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同小写字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2姬松茸多糖对肉兔肠道菌群的影响（见表3）由表3可知，T2组肉兔盲肠大肠杆菌和沙门氏菌数量均显著低于对照组（P0.05），T1组肉兔盲肠沙门氏菌数量显著低于对照组（P0.05）；T2组肉兔盲肠乳酸菌和双歧杆菌数量均显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.08.013.T003表3姬松茸多糖对肉兔肠道菌群的影响组别大肠杆菌沙门氏菌双歧杆菌乳酸菌对照组5.42±0.09a4.93±0.07a6.16±0.07b6.75±0.08bT1组5.25±0.09ab4.65±0.14b6.25±0.06ab6.91±0.10abT2组5.18±0.05b4.66±0.13b6.40±0.06a7.00±0.12alg CFU/g2.3姬松茸多糖对肉兔脾脏淋巴细胞转化率的影响（见表4）由表4可知，T2组肉兔脾脏淋巴细胞转化率显著高于对照组（P0.05），T1组肉兔脾脏淋巴细胞转化率也高于对照组，但未达显著水平（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.08.013.T004表4姬松茸多糖对肉兔脾脏淋巴细胞转化率的影响组别ConA（-）ConA（+）SI对照组0.39±0.040.74±0.08b1.92±0.10bT1组0.45±0.050.95±0.10a2.13±0.13abT2组0.49±0.081.10±0.14a2.27±0.18a2.4姬松茸多糖对肉兔IL含量的影响（见表5）由表5可知，T2组肉兔IL-1、IL-2和IL-6含量显著高于对照组（P0.05）；T1组肉兔IL-6含量显著高于对照组（P0.05）；T1组肉兔IL-1、IL-2含量与对照组和T2组差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.08.013.T005表5姬松茸多糖对肉兔血液IL含量的影响组别IL-1IL-2IL-6对照组32.27±3.49b3.57±0.73b40.89±3.24bT1组38.85±4.38ab4.64±0.51ab49.54±4.55aT2组41.34±4.13a5.02±0.53a53.29±4.84ang/L3讨论3.1姬松茸多糖对肉兔生长性能的影响本试验结果表明，姬松茸多糖能够降低肉兔的料重比。张龙涛等[8]试验表明，姬松茸添加组仔猪平均日增重比对照组有提高的趋势，而料重比较对照组明显降低。卢春香[9]发现，在饮水中添加姬松茸提取物活性多糖能够有效地改善肉仔鸡生长性能。葛红霞等[10]研究发现，姬松茸多糖能够提高肉鸡生长初期的日增重。姬松茸多糖对动物生长的促进作用可能与其加强动物肠道的蠕动、改善动物小肠的组织结构和发育，进而增强营养物质的吸收有关[11-12]，具体机理有待深入研究。3.2姬松茸多糖对肉兔盲肠肠道菌群的影响机体健康有赖于肠道的微生态平衡，若肠道菌群失调则可引起诸多疾病[13]。本试验结果表明，姬松茸多糖能够降低肉兔盲肠大肠杆菌和沙门氏菌数量，提高乳酸菌和双歧杆菌数量。李雨鑫[14]发现，姬松茸多糖能明显增加高脂血症大鼠肠道菌群的丰度。申秀娟等[5]发现，姬松茸多糖能降低盲肠肠杆菌和肠球菌量、增加乳杆菌和双歧杆菌数。以上研究结果说明，姬松茸多糖能够调节动物肠道菌群。本研究中，姬松茸多糖降低肉兔料重比的作用效果，其原因可能与其调节肠道菌群，进而增强营养物质的吸收有关。3.3姬松茸多糖对肉兔免疫功能的影响申秀娟等[5]研究发现，姬松茸多糖能够提高小鼠免疫器官指数、增强其免疫调节能力。李雨鑫等[15]研究表明，姬松茸多糖能够通过独立活化衰老小鼠脾淋巴细胞、协调ConA促进脾细胞增殖、促进TNF-α、IL-6等细胞因子的分泌来调节免疫功能。李晨光等[16]发现，姬松茸多糖可以促进巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α和IFN-β。蒋丽艳等[17]发现，姬松茸水溶性多糖能促进免疫低下小鼠脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖。路垚等[18]发现，姬松茸多糖能够提高脾脏中IL-2、IL-4以及INF-γ的表达量。以上研究结果均证明，姬松茸多糖能够通过活化淋巴细胞和分泌细胞因子来调节动物免疫机能。本试验结果表明，姬松茸多糖能够通过提高肉兔脾淋巴细胞转化率和调节IL-1、IL-2和IL-6的分泌来调节肉兔的免疫功能。4结论姬松茸多糖能够提高肉兔生产性能，增加盲肠乳酸菌和双歧杆菌数量，减少大肠杆菌和沙门氏菌数量，提高肉兔脾淋巴细胞转化率和血清IL-1、IL-2和IL-6含量，在肉兔饲料中的添加量以400 mg/kg为宜。