食用菌产业是我国第五大种植产业，仅次于粮食、油料、水果和蔬菜[1]。据统计，2016年中国食用菌产量达3 500多万t，约占世界总产量的70%以上[2]。蝉花属虫生性药用真菌，又称蝉花虫草、蝉茸、金蝉花等，是我国一种珍贵的中药材，为麦角菌科真菌大蝉草的无性型蝉拟青霉寄生在山蝉幼虫上的子座及幼虫尸体所形成的虫菌干燥复合体[3-4]。研究表明，蝉花虫草能够增强免疫功能[5]，治疗糖尿病、肾病[6-7]，改善结膜炎[8-9]。肉牛日粮中的麦秆替换为菌糠可以显著改善适口性和育肥效果[10]。徐崇等[11]报道，采用乳酸菌、酵母菌和枯草芽孢杆菌处理的杏鲍菇菌糠替代肉牛日粮中10%~20%的玉米，对肉牛增重效果无不良影响；当替代比例达到30%时，肉牛的平均日增重有所下降。杏鲍菇菌糠及发酵杏鲍菇菌糠在提高山羊、绵羊增重和降低饲料成本方面均有一定效果[12]。试验以蝉花基质为试验材料，探究蝉花基质的一般营养及功能性饲料成分，研究解明蝉花基质的日粮添加对绵羊生理及生产性能的影响，为蝉花基质在绵羊日粮中的广泛应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料蝉花虫草人工培养后的废基质干燥粉末，由浙江泛亚生物医药股份有限公司提供。玉米青贮、苜蓿干草和麦草由库车爬达养殖专业合作社提供。配合精料包括：玉米60%、麸皮10%、豆粕8%、棉粕17%、绵羊专用预混料5%。1.2试验设计1.2.1蝉花基质的养分含量分析蝉花基质粉碎后过40目筛，干燥法测定水分含量；采用常规分析方法测定样品的干物质（DM）、粗蛋白（CP）、粗灰分（Ash）含量；采用分光光度法测定钙（Ca）、磷（P）含量；采用HPLC法测定维生素A（VA）和维生素E（VE）含量；氨基酸分析参照GB 5009.124—2016[13]《食品中氨基酸的测定》方法。1.2.2体外消化试验粗精比80∶20的日粮中，以蝉花基质替换0（对照）、5%、10%、15%和20%精料，进行体外发酵试验。准确称取1 g试样，置于预热至39 ℃的发酵瓶中[14]，加入30 mL培养液，向瓶中通入氧气至饱和，发酵瓶用橡胶塞和铝盖封发酵瓶盖口，置于39 ℃恒温培养箱24 h。每个处理做3个重复，设1个空白对照组。分别从3只羊的瘤胃中采集瘤胃内容物混合均匀，4层纱布过滤，灌入经预热达39 ℃的保温瓶中，瓶盖密封，立即回实验室。按照Menke等[15]方法配置好人工唾液。按1∶2比例与预先准备好的人工唾液混合，持续通入CO2，置于39 ℃的水浴槽中，直至培养液的颜色先变成粉红色，最后变成无色后即可以使用。1.2.3绵羊育肥试验试验选用体重相近、健康的绵羊20只，分为2组，每组10只羊。对照组一绵羊饲喂基础日粮（不含蝉花基质），试验组绵羊饲喂试验组日粮，基础日粮组成与营养水平见表1。分别在8：00和20：00饲料等量饲喂，确保约有10%的剩余物料为准，自由饮水。每日记录日喂量和剩余量。试验结束时，每组屠宰3只羊。收集肌肉组织样本，测定肉品质分析。试验预试期14 d，正式试验期45 d。正式期内每日记录投喂量和剩余量计算采食量；每15 d称重1次，计算增重量。试验结束后，每组绵羊进行屠宰，测定其屠宰性能、组织器官发育和肉品质等指标。屠宰前日必须禁食、禁水16 h，次日7：00屠宰前进行称重。宰后去头、蹄、内脏，剥皮后称取胴体和内脏各器官进行测定重量。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T001表1基础日粮组成与营养水平项目对照组试验组原料组成/%玉米青贮60.0060.00苜蓿干草20.0020.00配合精料20.000蝉花基质020.00合计100.00100.00营养水平消化能/(MJ/kg)12.0811.90粗蛋白/%11.5611.35中性洗涤纤维/%40.1941.57酸性洗涤纤维/%26.8827.06钙/%0.380.32总磷/%0.140.101.3测定指标及方法1.3.1体外消化试验指标分别测定在0、2、4、8、16、24 h体外培育的产气量（GP）。24 h后，将发酵液使用4层纱布过滤，液体供用测定pH值，挥发性脂肪酸（VFA）含量。剩下的残留物用流水冲洗后烘干，供测定体外消化率。产气量的测定：分别在发酵的时间段，观察注射器活塞刻度值并记录。做3个空白对照做校正用，某一时间段培养管净产气量计算公式：GPT=(400/W)×(Vt-V0)(1)式中：GPT为t时刻的产气量（mL）；Vt为发酵完后培养管刻度读数；V0为开始培养时空白培养管刻度读数；W为试样干物质重（mg）。pH值选用便携式pH计测定；挥发性脂肪酸（VFA）浓度采用高效液相色谱法；铵态氮浓度采用微量扩散法测定；干物质消化率（IVDMD）采用体外消化法测定。1.3.2绵羊育肥试验指标逐日记录每只绵羊采食的饲料量和剩料量。根据每天每只绵羊的采食量分别计算绵羊日平均干物质采食量。胴体重(kg)=宰前活重-头、蹄、皮、尾、生殖器官及周围脂肪、内脏的重量(2)屠宰率=(胴体重/宰前活重)×100%(3)采用pH计测定记录pH值；肌肉颜色采用色差仪测定。嫩度的测定：肉样于80 ℃恒温水浴情况下将肉样中心温煮到70 ℃以上，取出后冷却至肉样中心温度为0~4 ℃，用取样器平行于肌肉纤维方向切取长度不小于2.5 cm的宽厚均匀的肉柱。按仪器使用操作进行测定。1.4数据统计与分析使用Excel进行数据整理，每个试验重复3次取平均值，结果以“平均值±标准差”表示。采用SPSS 17.0进行统计分析，P0.05表示差异著性。2结果与分析2.1蝉花基质的养分含量（见表2）由表2可知，蝉花基质的粗蛋白含量接近于麦麸的粗蛋白水平，但粗灰分、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量均低于麦麸。另外，蝉花基质的维生素A和维生素E含量丰富，属养分含量比较平衡的典型精饲料。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T002表2蝉花基质的养分含量项目含量含水率（原物）/%6.50±0.01养分含量（干物质）粗蛋白/%15.22±0.48粗灰分/%1.33±0.03中性洗涤纤维/%18.28±0.72酸性洗涤纤维/%10.30±0.19钙含量/(mg/100 g)16.90±0.32全磷/(mg/100 g)343.00±0.06维生素A/(mg/100 g)266.59±2.01维生素E/(mg/100 g)62.98±0.512.2蝉花基质氨基酸组成（见表3）由表3可知，蝉花基质试样中氨基酸类别丰富，17种氨基酸总含量达98.50 mg/g，各类氨基酸比例合理，其中丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸为鲜味氨基酸，鲜味氨基酸总量为39.20 mg/g。检测出9种必需氨基酸和8种非必需氨基酸，含量分别为36.60、61.90 mg/g。必需氨基酸与总氨基酸的比值（EAA/TAA）为37.15%，小麦必需氨基酸占总氨基酸的比值28.61%。非必需氨基酸中谷氨酸含量最高为21.90 mg/g，必需氨基酸中精氨酸的含量最高为6.30 mg/g。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T003表3蝉花基质的氨基酸组成项目含量必需氨基酸/(mg/g)精氨酸6.30组氨酸4.40异亮氨酸3.60亮氨酸6.10赖氨酸3.00蛋氨酸1.30苯丙氨酸3.60酪氨酸2.90缬氨酸5.40非必需氨基酸/(mg/g)丙氨酸*5.80天冬氨酸*7.30谷氨酸*21.90甘氨酸*4.20脯氨酸7.90丝氨酸4.40苏氨酸3.80胱氨酸6.60氨基酸总量/(mg/g)98.50必需氨基酸/(mg/g)36.60非必需氨基酸/(mg/g)61.90鲜味氨基酸/(mg/g)39.20必需氨基酸/总氨基酸/%37.152.3日粮中添加蝉花基质对累计产气量、产气参数的影响（见图1、表4）由图1、表4可知，随着蝉花基质添加比例的增加和发酵时间的延长，瘤胃发酵产气量也增加。产气参数方面，粗精比例80∶20日粮中慢速产气量（b）与潜在产气量（a+b）随着蝉花基质添加比列的增加而增加，各处理间差异显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.F001图1蝉花基质的日粮添加对24 h产气量的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T004表4蝉花基质对24 h的累积产气量和产气参数的影响项目05%10%15%20%P值产气量/mL168.50±6.36b167.75±2.47b161.50±13.43b164.00±4.24b207.00a0.01a/mL10.948.227.018.9911.240.12b/mL250.73b251.24b257.04b250.11b317.15a0.01a+b/mL261.67b259.46b264.05b259.12b328.39a0.01c/(%/h)0.050.050.040.050.040.34注：1.a为快速发酵部分的瞬时产气量；b为慢速发酵部分的产气量；c为每小时潜在可消化组分的消失率（%/h）；a+b为潜在产气量。2.同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.4日粮中添加蝉花基质对绵羊瘤胃发酵及消化率的影响（见表5）由表5可知，绵羊体外发酵液的pH值6.17~6.25，各处理之间差异不显著（P0.05）。绵羊瘤胃液的乙酸和丙酸含量随着蝉花基质添加比例的增加呈增加趋势，各处理之间差异显著（P0.05）。绵羊瘤胃液总酸含量随着蝉花基质添加比例的增加呈增加趋势，各处理之间差异显著（P0.05）。氨态氮浓度随着蝉花基质添加比例的增加呈增加趋势，粗精比80∶20范围在130.70~177.30 mg/L之间，各处理之间差异显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T005表5日粮中添加蝉花基质对绵羊瘤胃发酵级消化率的影响项目05%10%15%20%P值pH值6.24±0.076.23±0.036.25±0.166.17±0.056.19±0.090.14乙酸/(mmol/L)12.70±0.21d17.48±0.16c18.99±0.23c19.29±0.13b21.44±0.10a0.02丙酸/(mmol/L)2.90±1.22b3.30±0.45b3.60±1.00a3.50±1.42a4.02±0.89a0.01乙丙比4.38±0.17b5.30±0.11b5.28±0.23b5.51±0.09a5.33±0.11a0.03总酸/(mmol/L)15.60±0.02c20.80±0.86b21.90±0.74b22.50±0.17b25.40±0.23a0.01氨态氮/(mg/L)142.00±5.50bc154.20±4.50b168.00±8.50a177.30±3.50a130.70±9.10c0.042.5日粮中添加蝉花基质对绵羊采食量的影响（见表6）由表6可知，在苜蓿和青贮饲料等量饲喂条件下，采食量在绵羊代谢体重占的比例在两组中分别为3.58 %和3.48 %，差异显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T006表6日粮中添加蝉花基质对绵羊采食量的影响（干基）项目投喂量/(kg/d)剩余量/(kg/d)采食量/(kg/d)采食量占体重的百分比/%蝉花基质组1.45±0.020.02±0.01b1.43±0.08a3.58±0.12a对照组1.45±0.020.06±0.01a1.39±0.02b3.48±0.03bP值—0.030.020.01注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同小字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.6日粮中添加蝉花基质对绵羊生长性能的影响（见表7）由表7可知，两组绵羊的生长性能差异不显著（P0.05），绵羊总增重分别达13.11 kg和12.55 kg，平均日增重分别为0.22 kg和0.21 kg。蝉花组绵羊料重比低于对照组，两组间差异显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T007表7日粮中添加蝉花基质对绵羊生长性能的影响项目初重/kg末重/kg总增重/kg平均日增重/kg料重比蝉花基质组32.06±4.3545.17±2.6013.11±1.270.22±0.116.04±0.02b对照组32.78±4.1645.33±2.8612.55±1.530.21±0.036.26±0.07aP值0.120.970.230.180.012.7日粮中添加蝉花基质对绵羊产肉性能的影响（见表8）由表8可知，两组绵羊产肉性能指标均差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T008表8日粮中添加蝉花基质对绵羊产肉性能的影响项目活重/kg胴体重/kg屠宰率/%GR值眼肌面积/cm2蝉花基质组45.17±2.6022.67±2.1250.11±3.311.37±0.2413.08±1.51对照组45.33±2.8621.80±1.5848.05±1.251.41±0.0813.17±2.75P值0.970.760.590.640.972.8日粮中添加蝉花基质对绵羊各器官的影响（见表9）由表9可知，蝉花组和对照组绵羊的心、肺、肾和肝脏重量差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T009表9日粮中添加蝉花基质对绵羊各器官的影响项目心重肺重肾重肝重蝉花基质组0.25±0.030.56±0.060.10±0.010.67±0.09对照组0.23±0.020.46±0.060.11±0.010.63±0.08P值0.260.120.520.59kg2.9日粮中添加蝉花基质对绵羊肉品质的影响（见表10）由表10可知，两组绵羊肌肉各项指标差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.002.T010表10日粮中添加蝉花基质对绵羊肉品质的影响项目pH值嫩度ΔL*Δa*Δb*ΔC*ΔH*ΔE*蝉花基质组6.49±0.085.00±0.7524.39±1.589.47±0.864.77±0.7310.53±1.041.32±0.3426.10±1.68对照组6.40±0.015.75±1.5123.75±0.839.37±1.294.95±0.3510.50±1.311.45±0.1926.04±0.70P值0.120.230.410.880.590.970.410.94注：ΔL*=白，Δa*=红，Δb*=黄，ΔC*=彩度，ΔH*=色调角，ΔE*=色差。3讨论蝉花基质蛋白质含量高，粗灰分、酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维含量较低，含有维生素A和维生素E等功能性饲料成分，其饲料价值略高于麸皮、次粉等常规饲料。有研究报道，产气参数与瘤胃尼龙袋技术和体外干物质消化率法测得的消化率高度相关[16]。本试验中，各试验组在发酵24 h后产气有所不同，随着以蝉花基质替代精饲料比例的增加，产气量呈增加趋势。随着以蝉花基质替代精饲料比例的增加干物质消化率也增加趋势，说明蝉花基质对绵羊瘤胃发酵及提高消化率起到促进和提高作用。本试验结果显示，日粮中添加不同比列的蝉花基质抑制产气量的升高，影响干物质消化率。可能是蝉花有效成分能够抑制微生物的生长，影响到发酵底物的消化，从而导致产气量降低。试验结果显示，产气量高的组，消化率也高，说明饲料体外发酵产气量与消化率存在高度的正相关。本试验中，20%替代组的产气量（a+b）高于其他试验组，说明蝉花基质具有较高的营养价值。反刍动物瘤胃液pH值的正常范围在5.5~7.5之间，最适宜范围是6.6~7.0[17]。本试验中，各组发酵液pH值维持在6.17~6.25，均在正常范围之内，瘤胃发酵液的pH值未受到蝉花基质添加比例的影响。胡伟莲等[18]报道，纤维素和半纤维素是反刍动物的重要能量来源，通过瘤胃中挥发性脂肪酸的代谢而降解为VFA，占反刍动物吸收能量的70%~80%，其中最多为乙酸，表明VFA在反刍动物的能量代谢中起重要作用。氨态氮浓度是特定饲粮组成下蛋白质降解与合成的指标，反映瘤胃微生物分解含氮物质产NH3的速度及其对NH3的摄取状况。本试验结果显示，瘤胃液的乙酸和丙酸含量随着蝉花基质添加比例的增加呈增长，说明蝉花基质能有效改善瘤胃微生物的菌体蛋白合成效率。肉羊采食量直接影响动物的生长性能，料重比是羊的饲料转换率的体现[19]。本试验结果表明，日粮中添加蝉花基质能增加绵羊采食量，采食量与对照组相比具有提高作用。有研究报道，食用菌菌糠能替代一部分粗饲料和精饲料一定程度上会提高反刍动物的生产性能[20-22]。本试验结果表明，蝉花基质能提高绵羊增重量，减少料重比，效益高于对照组绵羊。蝉花基质在日粮中的添加对绵羊屠宰率、肉品质均没有负面影响。4结论蝉花基质属于蛋白质和维生素含量较高的能量饲料。绵羊日粮中以5%~20%的比例添加蝉花基质，对绵羊的瘤胃发酵以及消化率无负面影响。随着蝉花基质替代比例的增加，挥发性脂肪酸（VFA）总量和干物质消化率呈增长。日粮中添加蝉花基质对绵羊增重有影响，能提高增重量，降低增重成本，对肉品质没有负面影响。